全三七片对血管内皮细胞损伤的保护作用研究

目的观察全三七片(PSQ)对炎症和脂质过氧化引起的血管内皮损伤的保护作用。方法以人脐静脉内皮细胞(ECV304)为研究对象,分别采用炎症介质肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导ECV304血管内皮细胞建立损伤模型,设正常对照组、模型对照组、阳性药组和PSQ不同浓度组,检测血管内皮功能指标一氧化氮(nitric oxide,NO)、总一氧化氮合成酶(total nitric oxide synthase,T-NOS)和内皮素(endothelin,ET)-1,氧化应激相关指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和炎症相关指标白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和TNF-α。结果TNF-α造模24 h后,与正常对照组比较,模型对照组细胞上清中的ET-1、NO、MDA、IL-1β和IL-6水平显著升高(P<0.05或P<0.01),SOD水平显著降低(P<0.05);与模型对照组比较,PSQ不同浓度组细胞上清中的ET-1、NO、MDA、IL-1β和IL-6水平显著降低(P<0.05或P<0.01),SOD水平显著升高(P<0.01)。ox-LDL造模24 h后,与正常对照组比较,模型对照组细胞上清中的ET-1、MDA、IL-1β和TNF-α水平显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,PSQ不同浓度组细胞上清中的NO、MDA、T-NOS、ET-1、IL-1β和TNF-α水平显著降低(P<0.05或P<0.01),SOD水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论全三七片可能通过改善氧化应激反应、保护血管内皮功能以及减少炎症因子的分泌进而保护炎症和脂质过氧化诱导的血管内皮损伤。

戊己丸现代研究进展

戊己丸是治疗肠道疾病的中医经典方,由黄连、白芍、吴茱萸3味药组成,具有疏肝和胃、降逆止呕之功效。现代研究表明,戊己丸对多种消化道疾病动物模型有效,可减轻病理损伤、延缓疾病发展进程,具有镇痛、抗炎、止泻、抗溃疡等多种药理作用。课题组一直致力于戊己丸的现代科学研究,包括戊己丸复方配伍机理研究和药代动力学等的研究,从戊己丸的处方来源、化学成分、剂型、现代药理研究以及临床研究等方面结合课题组的研究成果对戊己丸的现代研究进展作总结归纳,探讨其药效物质基础及重点研究方向,以期为戊己丸的现代开发研究及临床优化应用提供理论参考和科学依据,发挥戊己丸经典复方的更大作用。

青蒿素对高果糖诱导的小鼠脂质代谢紊乱血清代谢组学研究

目的:分析高果糖饮食诱导的小鼠血清代谢物变化,探讨青蒿素改善高果糖饮食诱导的小鼠代谢紊乱的机制。方法:检测正常组、高果糖饮食组、青蒿素组及阳性药组小鼠血清葡萄糖、三酰甘油、胆固醇含量;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF MS)对各组小鼠血清进行代谢轮廓分析,进一步根据单变量统计分析筛选差异代谢物,对差异代谢物进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:青蒿素显著降低了高果糖饮食诱导的小鼠血清三酰甘油上升。各组代谢轮廓出现改变。筛选出正离子模式下差异代谢物42个,负离子模式下差异代谢物45个。亚油酸代谢,逆行内源性大麻素信号转导,不饱和脂肪酸的生物合成等重要通路发生了显著改变。结论:青蒿素可以使高果糖饮食导致的代谢紊乱有所恢复,主要涉及脂质代谢。

牡荆素鼠李糖甙对缺氧再给氧损伤心肌细胞的保护作用研究

目的:观察牡荆素鼠李糖甙对缺氧再给氧损伤心肌细胞的保护作用。方法:采用心肌细胞培养的方法,以缺氧再给氧造成心肌细胞损伤,分别以组织化学法、TAB反应比色法、荧光染色法测定细胞内乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、游离Ca2+,酶动力法、RIA法测定细胞培养中IDH、6-酮.前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2),膜片钳法测定细胞膜钙离子通道,及心肌细胞搏动情况等。结果:不同浓度的牡荆素鼠李糖甙均可减少细胞内Ca2+浓度和MDA含量;使细胞内和培养上清中的LDH活性明显降低;对心肌细胞搏动频率有一定的降低作用;全细胞方式下可记录到细胞的原始电流和内向钙电流(ICa),并呈电压依赖性,10-3 mol/L的牡荆素鼠李糖甙对豚鼠心肌细胞Ica有增强作用;提高PGI2的含量及PGI2/TXA2比值,降低TXA2的含量。结论:牡荆素鼠李糖甙可通过稳定心肌细胞膜,减轻其损伤,调节PGs的表达,降低心肌细胞搏动频率等机制保护心肌细胞缺氧再给氧性损伤。

牡荆素鼠李糖苷对内皮细胞血管舒缩因子表达影响的实验研究

目的:观察牡荆素鼠李糖苷对缺氧-再给氧损伤内皮细胞产生血管舒缩因子表达的影响。方法:采用脐静脉内皮细胞培养的方法,以缺氧再给氧造成内皮细胞损伤,分别以放射免疫、Griess法、免疫组化法测定细胞培养上清中内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、细胞内一氧化氮合酶(NOS)活性;RT-PCR方法测定细胞内ET-1,NOS mR-NA的转录。结果:不同浓度的牡荆素鼠李糖苷均可明显提高内皮细胞NOS mRNA的表达和NOS的活性;使内皮细胞血管舒张因子NO产量明显增加;缩血管因子ET-1 mRNA表达及ET-1明显减少。结论:牡荆素鼠李糖苷能通过蛋白及基因水平有效地调节缺氧再给氧损伤血管内皮细胞产生的血管活性物质的表达。

牡荆素鼠李糖苷对血管内皮细胞血管活性物质的影响

目的:观察牡荆素鼠李糖苷对缺氧再给氧损伤内皮细胞产生血管活性物质的影响。方法:采用脐静脉内皮细胞培养的方法,以缺氧再给氧造成内皮细胞损伤,分别以放射免疫、Griess法测定细胞培养上清中6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量。结果:不同浓度的牡荆素鼠李糖苷均可使血管舒张因子NO、6-Keto-PGF1α产量明显增加;缩血管因子ET-1、TXB2明显减少。结论:牡荆素鼠李糖甙对缺氧再给氧损伤血管内皮细胞产生的血管活性物质具有一定的调节作用。

牡荆素鼠李糖苷对脐静脉内皮细胞缺氧再给氧损伤的影响

目的:观察牡荆素鼠李糖苷对缺氧再给氧损伤内皮细胞的保护作用。方法:采用脐静脉内皮细胞培养的方法,以缺氧再给氧造成内皮细胞损伤,分别以组织化学法、发光法、荧光染色法测定细胞内乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、游离Ca2+,酶动力法测定细胞培养液中LDH等。结果:不同浓度的牡荆素鼠李糖苷均可减少细胞内Ca2+浓度和MDA含量;使细胞内和培养上清中的LDH活性明显降低。结论:牡荆素鼠李糖苷可通过稳定内皮细胞膜,减轻其损伤等机制保护内皮细胞缺氧再给氧性损伤,对实验细胞显示有保护作用。

龟芪散及其拆方对免疫抑制小鼠IL-2产生及其基因转录的影响

龟芪散及其拆方可明显增强Ｃｙ所致免疫受损小鼠Ｔ淋巴细胞的增殖；提高Ｌ３Ｔ＋４细胞数量及Ｌ３Ｔ＋４／Ｌｙｔ＋２细胞比率；促进脾细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ转录和ＩＬ－２产生。以全方效果最佳，亦好于ＰＳＰ。但对正常小鼠无明显影响。

龟芪散对小鼠免疫调节作用的拆方分析

目的观察龟芪散及其拆方对小鼠免疫功能的调节作用。方法用环磷酰胺损伤小鼠的免疫功能 ,分析龟芪散及其拆方对淋巴细胞的影响。结果该方可明显对抗环磷酰胺引起的小鼠脾脏的退化或提高其内在质量 ;促进免疫受损小鼠T、B淋巴细胞增殖 ;促进NK活性 ;通过增加CD4 + 细胞数量而提高CD4 + /CD8 + 细胞比率 ;降低免疫受损小鼠脾细胞内cAMP水平。全方效果好于拆方 ,亦好于云芝多糖(PSP)。但对正常小鼠的免疫功能无明显影响。结论龟芪散具有免疫调节效应。

青蒿素及其衍生物抗疟机制研究概况

WHO的疟疾报告,2017年,估计在87个国家中存在2.19亿疟疾病例;死亡人数估计为43.5万例。每2分钟就有1名儿童死于疟疾。中国自2016年8月以来,未发生1例本土疟疾病例。青蒿素类药物对全球疟疾的控制起到了重要作用,现有的最佳治疗方法,特别是恶性疟治疗方法,仍是以青蒿素为基础的联合疗法。青蒿素全新的化学结构,改写了只有含N杂环的生物碱成分抗疟的历史。但青蒿素类药物的抗疟机制目前仍是久而未决的问题,大湄公河次区域的一些地区也出现了青蒿素耐药性现象,WHO因此发起了“紧急应对青蒿素耐药性”行动。深入探讨青蒿素类药物抗疟机制,不仅可以加深对药物的认识,而且对于指导合理用药、提高临床疗效、防止抗药株的产生、发现新的青蒿素抗疟组合以及拓宽其应用范围都有重要意义。青蒿素抗疟机理解释的难点可能在于青蒿素是原药(本身活性不强),激活和靶标都不确定。目前有关青蒿素类药物抗疟机制主要有以下假说:碳自由基假说、血红素靶标假说、肌内质网Ca2+-ATP酶(钙泵)假说、线粒体靶标假说和血红素激活的多靶标假说。另外也有研究证明疟原虫的膜系结构、血红素聚合产物、一些特定蛋白、诱导疟原虫环状体休眠/沉默、自噬相关蛋白18(ATG18)都可能是青蒿素类药物的作用靶标。但这些假说尚不能单独、完全解释青蒿素的抗疟机制。由于疟原虫的主要致病阶段是红细胞内期的裂体增殖期。下一步的研究工作,除进一步证实上述假说外,可以根据青蒿素选择性杀灭处于红内期的疟原虫、针对疟原虫的膜系结构(表膜-线粒体功能)、疟原虫顶质体内的“蓝藻型”铁代谢通路、染虫红细胞表面膜蛋白、染虫红细胞表面膜离子通道和染虫红细胞改生物力学特征等方面开展研究工作。

龟芪散及其拆方对IL-2R表达及其基因转录的影响

龟芪散是吴敦序教授创制的方剂。全方由补肾填精和健脾益气两组药物组成。多年的临床应用表明,该方对反复呼吸道感染,老人或儿童体虚易感,支气管哮喘缓解期及放、化疗后的肿瘤患者具有明显的免疫调节作用,并能改善患者的全身状况。实验表明,该方对小鼠免疫器官、细胞、IL-2等都有不同程度的影响。本研究报道龟芪散及其拆方对免疫抑制小鼠 IL-2R。表达及基因转录影响的研究结果。材料与方法1 动物清洁级 BALB/C 纯系小鼠,雌雄各半,4～5周龄,体重(20±2)g,由上海市计划生育研究所动物房提供。2 药物龟芪散全方由龟版、熟地、鹿角片、山萸肉。

黄连提取物在大鼠肠外翻实验中的吸收研究

目的:用肠外翻模型研究黄连提取物不同剂量在大鼠不同肠段的体外肠吸收特征。方法:采用大鼠肠外翻模型,以小檗碱(berberine,BER)和巴马汀(palmatine,PAL)为黄连提取物中代表成分,用HPLC对其进行检测,计算BER和PAL的吸收参数来分析其在肠道的吸收特征。结果:不同剂量时黄连提取物中BER和PAL在各肠段均为线性吸收,R2均大于0.9,符合零级吸收速率;BER和PAL的吸收速率常数(Ka)均随黄连提取物给药剂量的增加而增加(P<0.05),表明其为被动吸收。肠道不同部位的吸收实验表明,空肠对BER和PAL吸收有较为明显的优势,其次为回肠和结肠。结论:不同剂量黄连提取物中的BER和PAL在肠道不同部位吸收均符合零级吸收速率,其吸收形式可能为被动吸收。

活血、解毒——中药干预AS炎症反应的探索与尝试

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是缺血性心脑血管疾病共同的病理基础。目前炎症-损伤-反应学说为其主流学说。以抗炎为着眼点,干预炎性反应网络中的一些关键因素,对AS治疗具有重要意义。我们认为中医AS"痰瘀互结,毒邪内生"病机与"炎症-损伤-反应学说"有着本质的联系,是中西医两种理论体系关于AS病机的良好契合点。以干预AS"内生毒邪"或称之为"炎症反应"为切入点,立活血化瘀、清热解毒为法,探讨中医药通过干预炎症反应预防治疗AS疾病的作用,将是具有一定理论价值和实践意义的有益尝试。该文以AS炎症为主线,结合本课题组工作,对中药干预AS炎症反应进行研究思路的分析与探讨。

清开灵和生脉注射液联合用药对油酸型急性肺损伤家兔的治疗作用

目的:观察静脉注射清开灵、生脉注射液(生脉)及其联合用药对油酸型急性肺损伤(ALI)家兔的影响。方法:家兔随机分为11组:对照组,油酸组,治疗组分别包括清开灵和生脉以及清开灵+生脉小、中、大剂量组。iv油酸(0.05mL·kg-1)复制家兔ALI模型后,立即iv上述药液,观察给予油酸前及以后30,60,120min时的呼吸频率和幅度,于各时间点测定动脉血气含量;实验后处死家兔取肺组织,测定肺组织LDH,CAT,MDA的含量及观察病理变化。结果:与油酸组比较,清开灵、生脉及清开灵+生脉的小、大剂量组的呼吸幅度均显著升高;清开灵+生脉小剂量组PaO2显著升高(P<0.05),清开灵、生脉及清开灵+生脉小剂量组的PaCO2均显著降低(P<0.05);清开灵、生脉各剂量组的MDA均显著降低,清开灵+生脉小剂量组的MDA显著降低、CAT显著增加;清开灵、生脉及清开灵+生脉小剂量组可以减轻油酸引起的病理改变。结论:清开灵+生脉小剂量对油酸型肺损伤家兔的疗效优于同剂量下的单独用药。

戊己丸提取物不同配伍的肠外翻吸收研究

目的研究戊己丸不同配伍比例时在肠道中的吸收动力学的变化,说明方剂配伍的规律性。方法利用L9(34)正交设计,将黄连、制吴茱萸、土炒白芍组成不同配伍的9个组方,通过体外肠外翻模型和LC-MS分析手段,观察方中代表成分小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、芍药苷的吸收变化情况。结果以各代表成分的Ka为指标,通过正交分析,得出同一成分在肠道不同部位的吸收趋势大致相同,但不同成分之间的吸收趋势变化较大。多指标归一加权综合评分法分析表明,黄连在各肠段吸收贡献度最大,确定了其君药地位,制吴茱萸和土炒白芍次之,为臣药。在各个肠段的最优配比组合(黄连∶制吴茱萸∶土炒白芍)为:空肠12∶6∶12,回肠12∶6∶6与12∶6∶12,结肠12∶6∶12。结论戊己丸各代表成分在肠道中吸收动力学过程,随方剂的配伍比例不同而变化,其在肠道吸收的最优配伍组合为黄连∶制吴茱萸∶土炒白芍=6∶3∶6。

芪芍五味子复方制剂对病毒性心肌炎小鼠免疫调节机制的研究

目的研究黄芪、赤芍、五味子组成的芪芍五味子复方制剂调节病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠外周血T淋巴细胞亚群和细胞因子表达的机制。方法 Balb/c小鼠随机分为正常对照组、病毒对照组、中药高、中、低剂量组及VitC和病毒唑联用组。小鼠接种柯萨奇病毒B3(CVB3)建立VMC模型,流式细胞仪检测外周血CD4(+Th)和CD8(+Ts)淋巴细胞亚群数目及比值,ELISA检测IFN-γ、IL-4水平,心肌作组织病理学检查。结果与正常小鼠比较,病毒对照组小鼠外周血CD4+和CD8+淋巴细胞亚群数目下降,CD4+/CD8+下降,血清IFN-γ水平升高,IL-4水平降低(P<0.05),中药治疗组小鼠淋巴细胞亚群数目及CD4+/CD8+均高于病毒对照组(P<0.05),IFN-γ水平高于病毒对照组及VitC和病毒唑联用组(P<0.05),同时小鼠心肌炎症性病理变化明显减轻。结论芪芍五味子复方制剂能调节外周血T淋巴细胞数目及比值,诱生Th1型细胞因子IFN-γ减轻CVB3感染小鼠心肌损伤,起到保护作用。

动脉粥样硬化炎症信号转导通路研究进展

炎症是动脉粥样硬化(atheroscle rosis,AS)疾病关键的病理环节之一。AS发病相关的多个危险因素均与炎症信号调节密切相关。深入研究AS炎症信号通路,并研制有效的干预药物,可能成为影响AS炎症反应乃至AS病变过程的有效途径。

CYP450酶与中药代谢相互作用关系研究概况

作为外源性化合物的主要代谢酶，细胞色素P450（CYP450）是重要的药物I相代谢酶，可以催化多种外源性化合物的氧化和还原代谢，人体内约有75％的药物代谢通过CYP450酶进行，这对解释药物在机体内的清除过程有非常重要的意义。CYP450酶在药物的消除过程中起着非常重要的作用，同时也是引起联合用药时药物相互作用产生的主要因素。

中药芪芍五味合剂对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡和坏死的影响

取 2 4 0只 4周龄 Balb/ c雄性小鼠 ,随机等分为 6组 (每组 4 0只 ) ,即 :正常对照组 (A组 )、中药对照组 (B组 )、病毒对照组 (C组 )、中药治疗组 (D组 )、维生素 C治疗组 (E组 )、病毒唑治疗组 (F组 )。 A、B两组每只小鼠均腹腔接种 0 .1ml不含病毒的 Eagle's液 ,C～F组每只小鼠服腔接种 0 .1ml10 7.5TCID/ ml的柯萨奇 B3(CVB3)病毒液。根据分组分别给予不同的药物治疗。结果 :病毒性心肌炎时心肌细胞的凋亡率和坏死率均显著增加。心肌细胞凋亡高峰在CVB感染后 7～ 10天 ,而心肌坏死高峰出现在 CVB3感染后 14天 ,并且与组织形态学观察一致。应用中药黄芪、赤芍治疗后 ,心肌细胞凋亡率和坏死率均显著降低 (P <0 .0 5 ) ,维生素 C和病毒唑均可降低心肌细胞坏死率 ,但对心肌细胞凋亡影响不大。 CVB感染 3～ 7天内 ,各感染组心肌细胞凋亡率和坏死率均与心肌内病毒滴度呈正相关 (r =0 .76、P <0 .0 1,r=0 .5 4、 P <0 .0 5 ) ;而感染 10～ 30天 ,凋亡率及坏死率与病毒含量无相关性。各感染组心肌细胞凋亡率与坏死率均与心肌病理积分呈正相关 (r=0 .5 5、P <0 .0 5 ,r=0 .76、P<0 .0 1)。中药黄芪、赤芍、五味子可明显减轻病毒性心肌炎小鼠的病理损害程度 ,显著降低病毒性心肌炎心肌细胞凋亡率和坏死率 ,对?

清开灵和甲基强的松龙注射液联合用药对油酸型急性肺损伤家兔的治疗作用

目的:观察静脉注射清开灵、甲基强的松龙(MP)注射液及其联合用药对油酸型急性肺损伤(ALI)家兔的影响。方法:家兔随机分为11组:对照组,油酸组,治疗组分别包括清开灵和MP注射液以及清开灵+MP注射液小、中、大剂量组。iv油酸(0.05mL·kg-1)复制家兔ALI模型后,立即iv上述药液,观察给予油酸前及以后30,60,120min时的呼吸频率和幅度,于各时间点测定动脉血气含量;实验后处死家兔取肺组织,测定肺组织LDH,CAT和MDA的含量,及观察病理变化。结果:与油酸组比较,清开灵和MP注射液小、中、大剂量组的呼吸幅度显著升高、呼吸频率显著降低(P<0.05);治疗30min时,清开灵+MP注射液小、大剂量组的PaO2显著升高(P<0.05),120min时,清开灵、MP及清开灵+MP注射液小、中和大剂量组的PaCO2显著降低(P<0.05);清开灵、MP注射液中、大剂量组的LDH显著升高、CAT和MDA显著降低(P<0.05);清开灵+MP小、中剂量组可以减轻由油酸引起的病理改变。结论:清开灵+MP小剂量对油酸型肺损伤家兔的疗效优于同剂量下的单独用药;而清开灵或MP大剂量单独给药的疗效优于同剂量下的联合用药。