纳米孔测序技术在实蝇类害虫检疫鉴定中的应用

【目的】纳米孔测序技术是单分子实时测序技术的一种,正在被广泛应用于临床快速诊断及微生物检测等领域。本研究以实蝇这一类重要的检疫性有害生物为例,探究该技术在昆虫检疫鉴定中应用的可行性,为昆虫检疫鉴定提供新方法。【方法】分别采用一代测序技术和纳米孔测序技术,对14种经形态学鉴定的实蝇成虫进行DNA条形码测序,通过BOLD和NCBI数据库对测序结果进行比对分析,并比较2种测序技术所得序列结果准确性的差异。【结果】通过纳米孔测序,14个实蝇样品在44 min内获得181Mb bases,每个样品平均得到11280条reads,单个reads的准确度为92.10%~94.53%;经一致性序列校正,所有实蝇样品均可得到与一代测序结果完全一致的序列,序列分析结果与形态学鉴定结果完全一致。【结论】采用本研究的实验流程和数据分析方法,纳米孔测序技术可以应用于实蝇类害虫的检疫鉴定,测序结果准确、高效;本研究提供的实验方案同样适用于基于扩增子测序的物种鉴定,满足大规模样品的高通量精准鉴定需求。

黄瓜花叶病毒外壳蛋白质进入叶绿体与症状发生的关系

由感染黄瓜花叶病毒(CMV)、健康和转外壳蛋白(CP)基因的烟叶以原生质体法制备纯化的叶绿体。经SDS—PAGE电泳,银染色,比较其蛋白质图谱。用CMV外壳蛋白游离亚基制备的抗血清进行Western blotting。结果发现:1.CP存在于CMV侵染的烟叶绿体中。2.叶绿体中CP的浓度和花叶症状严重程度呈正相关;3.表达CP的转基因烟草叶绿体中未测出CP存在。根据以上结果,认为CMV侵染的烟花叶症状产生与CP进入叶绿体有直接相关性。

PCR和Dig—cRNA探针检测番茄环斑病毒

利用根据ToRSV加拿大悬钩子株系核酸序列设计、合成的寡核苷酸引物进行PCR扩增试验,能成功地扩增ToRSV悬钩子株系的目标片段,但不能扩增苹果、樱桃株系的目标片段。 而ToRSV苹果株系的克隆pS_(64),经EcoRI酶切,再分别用^(32)P—UTP、Dig—11—UTP和SP_6RNA多聚酶转录出^(32)P标记、Dig标记的cRNA探针后,不仅能有效地检测出ToRSV的苹果株系,而且能有效地检测樱桃株系和悬钩子株系。^(32)P与Dig—标记的探针灵敏度基本相同,而Dig标记的探针无放射性,可以长期保存,多次使用,灵敏、准确、安全、经济,是值得推广应用的检疫新方法。

浅谈医疗设备档案的管理

为了提高医疗质量，推进医学发展，近年来，各大医院购置大批高效率、高精密度、价格昂贵的医疗设备。医疗设备管理的优劣，直接关系到医院社会效益、经济效益的实现，而做好医疗设备档案的管理工作，是医疗设备管理的重要环节，是实现医疗设备价值，获得最大效益的重要条件，所以现代化的医院，必须高度重视医疗设备档案的管理工作。

植原体病害研究进展及其检疫重要性

植原体病害研究进展及其检疫重要性朱水芳，赵宝庆，胡加彬，张祥林，张成良（农业部植物检疫实验所北京１０００２９国家动植物检疫局郑州动植物检疫局乌鲁木齐动植物检疫局）１９６７年日本学者Ｄｏｉ首次发现了植原体（Ｐｈｙｔｏｐｌａｓｍａ）。因这类微生物类似于动...

典型小额信贷模式分析及对我国小额信贷实践的启示

小额信贷作为一种新型的金融方式,在一些发展中国家所取得的成效是举世公认的。但小额信贷自上世纪90年代初至今在中国二十多年的发展,一直不尽如人意。本文希望通过对两种典型小额信贷模式的分析,与我国小额信贷实践相比较,探讨对我国小额信贷实践发展的启示。

我国商业银行资产负债管理现状与对策

资产负债管理是重要的现代商业银行经营管理方式,其效率的高低直接影响着银行的竞争实力。我国商业银行的资产负债管理不仅起步晚,发展也还不完善,这在很大程度上影响了我国银行业的竞争力。现在,我国银行业的对外开放日益深化,银行竞争日益激烈,分析我国商业银行的资产负债管理的现状并找出问题和差距,有的放矢地改善我国商业银行的资产负债管理尤为重要。

我国应尽快建立遗传工程改造的有害生物进口及其使用的检疫法规

1 建立有关法规的重要性遗传工程自本世纪70年代出现以来,发展非常迅速,特别是最近10年,遗传工程技术已不再单纯应用于科学研究,并已直接为人类服务,如将人体干扰素范围转移到细菌中,细菌发酵就能大量生产干扰素;用遗传工程方法改造脓杆菌,使其失去产生肿癌能力,用于植物根癌病害的防治等。

完善市场生物安全防控和治理体系的几点思考

加强国家生物安全风险防控和治理体系建设,提高国家生物安全治理能力是党中央、国务院作出的重大决策部署。市场流通环节是国家生物安全风险防控不可或缺的重要环节。然而,市场流通领域生物安全风险多样且来源复杂,现有的防控机制及技术能力存在不足,市场中的生物安全风险需引起足够重视。为补齐短板,打造全链条生物安全风险防控和治理体系,本文建议从推动形成市场总体生物安全观、明确市场生物安全内涵、强化多部委联防联控机制几个方面着力突破。

新时期检验检疫科技工作理论与实际问题初探

1历史发展新阶段面临的机遇和挑战 站在＂十二五＂开启的历史新起点,全面分析国际国内经济社会发展的新情况和新挑战,系统领会和掌握党和国家重大战略步驟,找准质检部门阶段特征,明确发展战略定位,把握机遇,应对挑战,意义重大。党中央针对我国经济社会发展新情况和新挑战,

生物安全:发展趋势及策略

全球化新趋势与新问题 全球化，对世界各国政治、经济、文化等各方面发生广泛而深刻影响．成为世界发生重大变革主要动力。随着经济球化．外来生物灾害日趋严重，威胁人身健康、工农业生产和生态环境安全，如何促进经济全球化又防止外来生物灾害跨境传播，是摆在我国政府和人民面前的现实而紧迫的历史任务和挑战。

生物资源知识产权给出入境检验检疫提出的新挑战

1前言 生物资源已逐步被世界各国列为战略资源。随着经济全球化的发展、生物资源的匮乏、生物科技的进步，生物资源对国家经济的基础性作用将越发重要。对生物资源进行有效保护，已成为国际重点关注的领域。生物资源进行知识产权保护，已成为各国发展经济和参与国际竞争的关键角力点，对国际贸易将会产生重大而深刻的影响。

试论国家意志与创新文化和科研团队建设

改革开放以来,国家实行科教兴国、人才强国、建设创新型国家战略,特别是“国家中长期科学和技术发展规划纲要”的出台及十六个重大科技专项计划的实施,重点解决经济社会发展与国家安全等领域中重大科技问题的战略意图和国家意志非常明显,体现了中华民族科技领域的自信,杰出人才和重要成果涌现速度明显加快。

松材线虫rDNA-ITS2的Taq Man探针实时荧光PCR检测

以松材线虫rDNA -ITS2为靶区 ,建立松材线虫的TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。对松材线虫大量DNA和单条线虫的检测结果表明 ,探针检测松材线虫和拟松材线虫时 ,前者产生明显的荧光信号 ,后者无荧光信号 ,表明探针具有高度的特异性 ;探针检测到最低模板浓度为 1pg·μL- 1 。

桔小实蝇在中国的适生性研究

对桔小实蝇Bactrocera dorsalis Hendel在中国的适生性进行了研究，结果表明，该虫的世代发育起点温度和有效积温分别为10．6757℃、501．7240日度．根据桔小实蝇的致死温度、有效积温和生物气候相似距，构建了桔小实蝇适生性分析计算机模型．用中国670个气象站30年的气候资料运行该模型，将桔小实蝇在中国的定殖风险区划分为高度危险区、危险区、轻度危险区和安全区，分布北界为（30±2）°N，适生区面积占全国的31．64％，1年发生3～11代，以4～8代为主．

植原体TaqMan探针实时荧光PCR检测鉴定方法的建立

本研究成功建立了植原体分类鉴定和检测的 Taq Man探针实时荧光 PCR方法 ,该方法根据植原体 16S r DNA保守区设计了 1个 Taq Man广谱探针和 3个植原体组间点突变特异性探针 ,并对 9种植原体和 5种细菌以及 3个植物样本进行实时荧光 PCR。结果表明 ,用广谱探针可检测到所有植原体产生荧光信号 ,而细菌不产生荧光信号。当用植原体组间特异性探针检测时 ,仅能检测到该组植原体产生荧光信号 ,检测的敏感性比常规的 PCR-电泳检测高约 10 0倍、检测速度有较大提高。由于PCR产物是荧光探针检测 ,本方法特异性强 ,并可以用组特异探针直接确定植原体种类。实验采用完全闭管检测 ,降低了污染机会。本研究为其它原核生物、特别是不能培养菌。

国际生物安全发展趋势与对策初探

近年来,世界各国生物安全事件频发,对经济社会造成的损失越来越大,具有全球性破坏力。新型冠状病毒肺炎及非洲猪瘟全球流行,预示着生物恐怖因子对人类、动植物都可能构成毁灭性打击,世界生物安全形势日趋严峻。由于基因工程特别是合成生物学的出现,随之可能产生的超级恐怖生物或超级生物武器,将使人类面临空前的灾难。2001年美国炭疽白粉事件以来,世界各国及国际组织推进生物安全立法、重组执法部门、加大生物安全防控投入和能力建设,但未从根本上改变世界生物安全严峻形势。我国与美国等发达国家相比,国家生物安全防控能力建设尚存在不足,要制订我国需要重点防控的生物恐怖因子名单、全面建设针对重点生物恐怖因子的防控能力、建立科学预测感知超级生物恐怖因子能力、补强防范应对农业生物恐怖的薄弱环节、开展生物恐怖法医学研究。防止世界被生物恐怖毁灭的关键是:世界各国真正履行“禁止生物武器公约”。

水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的实时荧光PCR快速检测鉴定

成功建立了水稻白叶枯菌与水稻细菌性条斑病菌快速检测鉴定的实时荧光PCR方法。根据含铁细胞接受子基因设计两菌的通用引物PSRGF PSRGR(扩增一个 1 5 2bpDNA片段 )和特异性探针 (Baiprobe和Tiaoprobe) ,并对 1 3种细菌和 1种植原体进行实时荧光PCR。结果表明 ,两个特异性探针能分别特异性检测到目标病原菌产生荧光信号而其它参考菌不产生荧光信号。检测的绝对灵敏度是 3 0 .6fg μL质粒DNA和 1 0 3CFU mL的菌悬浮液 ,相当于 1个细菌细胞的基因 ,比常规PCR电泳检测高约 1 0 0倍 ,相对灵敏度为 1 0 5CFU mL。整个检测过程只需 2h ,完全闭管 ,降低了污染的机会 ,无需PCR后处理。用这两个特异性探针分别对自然感染白叶枯菌和条斑菌的叶片DNA提取液和种子浸泡液进行实时荧光PCR ,结果均可特异性检测到目标菌的存在并完全可将两种病原细菌区分开来 ,且只需 0 3g叶片和 1