也木勒白羊的起源进化及遗传多样性分析

也木勒白羊作为新疆特色的肉毛兼用地方品种,具有适应性强、生长快、抗病力强等优势,但缺少系统性起源进化分析。本研究通过全基因组和线粒体序列分析,将也木勒白羊与其他21个绵羊品种进行比较,首次提取并组装了也木勒白羊线粒体全序列,经过主成分、进化树、群体遗传结构和群体间遗传分化指数分析,揭示也木勒白羊与哈萨克羊具有较近的亲缘关系,并发现也木勒白羊与巴音布鲁克羊存在密切的基因交流。该研究为后续深入了解也木勒白羊的遗传特征和亲缘关系提供了有力的依据,有助于该绵羊种质资源的保护和应用,为关键经济性状的基因定位以及分子育种的进一步研究提供基础信息。

也迷离鸡线粒体全基因组序列特征及系统发育分析

为揭示也迷离鸡线粒体全基因组特征,并探讨也迷离鸡起源驯化,研究利用Illu‐mina Nova Seq 6000二代测序技术,获得完整的也迷离鸡全基因组测序信息,将原始数据进行质控过滤,并经MitoZ v3.4软件组装注释成完整的线粒体基因组。从EBI数据库下载37个国内外不同品种鸡及鹌鹑的线粒体全基因组DNA序列,基于Mega-X软件邻接法(Neighbor-Joining,NJ)构建系统发育树。结果显示:也迷离鸡线粒体基因组全序列长度为16790 bp,包括13个蛋白编码基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和1个非编码控制区(D-loop区)。线粒体基因组中核苷酸比例为T(23.70%)、C(32.50%)、A(30.30%)、G(13.50%),AT-skew>0,GC-skew<0。系统发育分析显示,也迷离鸡与红原鸡及来航鸡的亲缘关系较近。结果表明,也迷离鸡在驯化过程中可能导入原鸡血液,存在来航鸡等商业鸡的基因渗入。

CSDC2蛋白免疫优势肽段分析及其多克隆抗体的制备

目的为制备含有C2的冷休克结构域(cold shock domain containing C2,CSDC2)的特异性抗体,本试验预测了CSDC2蛋白的免疫优势肽段并制备多克隆抗体,可为进一步探究其功能奠定基础。方法本研究以绒山羊CSDC2蛋白全长氨基酸序列为基础,应用在线分析工具Expasy分析亲疏水性;SOPMA和Predictprotein共同分析二级结构;DNAstar分析抗原指数、表面可及性、柔韧性;TMHHM 2.0预测跨膜结构;SWISS-MODEL预测三级结构;SignalP 5.0预测信号肽;NetPhos 3.1预测磷酸化位点;SVMTriP在线分析软件预测抗原表位,综上分析获得CSDC2免疫优势肽段,制备多克隆抗体;ELISA检测多克隆抗体效价,Western blot验证抗体特异性。结果CSDC2为不稳定亲水蛋白,无跨膜结构和信号肽区域,具有22个磷酸化位点,二级结构主要由无规则卷曲、α-螺旋和延伸链构成。最终选取绒山羊CSDC2蛋白N-端15-33氨基酸序列(HSPKSPVWPTFPFHREGSR)为特异免疫肽段,诱导兔产生CSDC2蛋白特异性IgG抗体,Western blot结果表明该抗体可以与绒山羊CSDC2蛋白进行特异性结合。结论本研究得出绒山羊CSDC2的免疫优势肽段为15~33 aa(HSPKSPVWPTFPFHREGSR)并免疫试验兔制备了多克隆抗体,进一步实验证明该抗体具有较好生物学效价,为后续深入研究CSDC2在绒山羊绒毛周期性生长调控的作用奠定了理论基础。

褪黑素对绒山羊绒毛周期性生长相关基因CSDC2、FGF21、RORα表达的影响

绒山羊的绒毛生长具有周期性生长规律,埋置褪黑素可显著增加产绒量。以体外培养的绒山羊皮肤成纤维细胞为研究对象,探索褪黑素调控绒毛周期性生长的分子作用机制。采用组织块培养法培养绒山羊皮肤成纤维细胞,添加浓度为0 ng/L和500 ng/L的褪黑素处理72 h后经实时荧光定量PCR检测CSDC2、FGF21、RORα基因的表达量。结果表明,胎羊组织块自培养1 d后细胞沿边缘爬出,5 d后汇合度达80%;成年羊组织块于培养5~7 d后细胞爬出,14 d后细胞汇合度达70%,经鉴定为成纤维细胞,且胎羊成纤维细胞增殖能力更强,更适合后续功能实验的验证。经褪黑素处理后,CSDC2、FGF21表达水平显著高于对照组(P<0.05);RORα的表达量低于对照组但差异不显著(P>0.05)。说明褪黑素对绒毛周期性生长相关基因CSDC2、FGF21和RORα具有调控作用。

研究案例教学法在妇科临床护理带教中的应用

目的:本次实验将采用案例教学法对妇科护生进行临床带教指导,分析应用价值。方法:选取本院妇科进行实习的护理人员为研究对象,以上半年和下半年作为教学策略的分组方式。对照组护生为传统护理策略,观察组则为案例教学法,分析护生的学习成果。结果:从带教质量上看,观察组护生的理论知识评分为(95.2±3.9)分,对照组为(93.5±2.2)分,操作技能考核中,观察组为(85.3±5.6)分,对照组则为(80.5±6.1)分,组间对比差异较为显著,具有统计学意义(P<0.05)。与此同时,我们针对教学的满意度实施调查,护生对不同带教策略的评价存在差异,即观察组评分为(90.6±3.7)分,对照组则为(83.5±2.9)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:采用案例教学法有利于护生更为直观、清楚的了解妇科护理内容,能够提升操作技能和综合应对能力,更好地吸取工作经验,有助于护生的学习成长。