ATPB超分散剂的合成及其在ABS/炭黑复合体系中的应用

以端羟基聚丁二烯和N,N-二甲基氨基丙胺为原料,采用两步亲核取代反应制备了含有聚丁二烯骨架和胺基末端结构的端胺基聚丁二烯(ATPB),利用傅里叶变换红外光谱仪、核磁共振氢谱仪表征其分子结构,结果表明,ATPB成功合成并达到预期分子结构。以ATPB为超分散剂,制备了丙烯腈-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物(ABS)和炭黑的复合材料,测试炭黑分散度、分散稳定性和复合材料力学性能。结果表明,合成的ATPB超分散剂对炭黑具有明显的分散效果和较好的分散稳定性,与未经分散的炭黑相比,体系分散度提高了65.8%。复合材料力学性能得到增强,拉伸、弯曲强度分别提升至45.56、78.31 MPa,冲击强度提高了15.7%,其值为7.50 kJ/m^(2)。

T细胞活化与粘附分子

T细胞活化后分化增殖直至出现功能,不仅靠淋巴因子、单核细胞因子等的调节,还必须有T细胞间、T细胞与巨噬细胞之间、T细胞与靶细胞之间的直接接触。 抗原特异性结合主要靠T3/TcR,但还必须有抗原非特异性结合予以辅助T细胞才能活化。辅助T3/TcR的分子群目前得知有:

补体缺损的分子生物学

最近补体学的进展迅速。由于补体各分子的cDNA克隆成功,补体活化机制得到了分子水平的解释;同时发现了补体蛋白与其它蛋白在结构上的共通性。

AIDS的免疫学

AIDS是受人类免疫缺损病毒(HumanImmune deficiency virus,HIy)感染而引起的免疫缺损综合症。HlV感染CD4^+T细胞,由于该感染细胞的破坏致使CD4^+T细胞数显著减少,造成机体内免疫网络的紊乱。 由于HIV感染而引起的免疫异常,只能说是AIDS的免疫缺损现象的主要原因之一。AIDS决不是单纯的原因所惹起的病理表现,它是由于多样化的原因所诱导的免疫异常所交织成的复杂交错的病理表现。总之,只根据CD4^+T细胞受HIV感染不能全部说明AIDS的免疫缺损。血友病患者。

人工合成HLA衍生肽对CTL和NK细胞毒功能的影响

目的 :探讨合成HLA衍生肽对CTL和NK细胞毒功能的影响。方法 :人工固相合成 2种HLA衍生肽 (P1:HLA B 0 70 1 75 84和P2 :HLA B 2 70 2 75 84) ,分别用MTT法和LDH释放法 ,在体外观察HLA衍生肽对CTL和NK细胞毒功能的影响及其等位基因特异性。结果 :P2可显著抑制CTL的细胞毒效应 (P <0 0 1) ,这种抑制作用不具有等位基因特异性 ,而对NK的细胞毒功能则没有明显影响。结论 :合成HLA肽对CTL和NK细胞毒功能的影响只与HLA肽的序列有关 ,P2即HLA B 2 70 2 75 84,可抑制CTL的细胞毒功能。

乙肝病毒新型免疫原性多肽的设计、合成

在乙肝病毒高分辨率免疫识别的基础上，以Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白的优势Ｂ细胞表位Ｂ１、Ｂ２为基础，引入不同的Ｔｈ细胞表位Ｔｈ１、Ｔｈ２，结构参照ＭＡＰ设计，采用固相合成法，合成了ＭＡＰ１和ＭＡＰ２。产物经毛细管电泳分析和氨基酸组分鉴定。

中国人MBLc DNA的克隆与序列分析

从中国汉族人胎肝组织提取总ＲＮＡ，以ＲＴ－ＰＣＲ方法获取了编码含信号顺序的全长甘露聚糖结合凝集素（ＭＢＬ）肽链的ｃＤＮＡ片段，将其与ｐＧＥＭ－Ｔ载体连接，转化大肠杆菌ＴＧ１，建立了ＭＢＬ的ｃＤＮＡ克隆。序列分析表明：与文献报道的人ＭＢＬｃＤＮＡ序列比较，差异颇大，但与ＧｅｎＢａｎｋ中的人ＭＢＬｍＲＮＡ比较，仅２个位置的核苷酸不同；其编码产物是２０个残基的信号顺序和２２８个残基的成熟ＭＢＬ多肽。

AP-1与NF-κB的活化表达与T细胞的无能

目的 :探讨无能T细胞IL 2产生的缺乏与转录因子AP 1和NF kappaB的关系。方法 :通过提取活化组和无能组T细胞的核蛋白 ,进行凝胶电泳迁移率变动分析实验 (EMSA) ,检测了转录因子AP 1和NF kappaB的表达情况。结果 :与活化组相比 ,无能T细胞中AP 1不但表达水平下降 ,且出现组份缺失现象 ;转录因子NF kappaB在无能T细胞中的表达则高于活化组 ,但均有三种复合物存在。结论 :无能T细胞IL 2产生减少或缺乏可能与转录因子AP 1和NF kappaB表达紊乱 (减弱或增强 )以及组份的缺失有关。

人Fas抗原表位预测

采用可及性和可塑性方案，结合抗原性方案、二级结构方案及综合位点预测方案对人Ｆａｓ抗原的Ｂ细胞表位进行预测，结果显示：人Ｆａｓ抗原Ｂ细胞表位可能位于Ｎ－末端残基５１－７８，１０２－１１０，１４５－１５７等区域内或附近。由于残基１０２、１２０位有２个潜在的Ｎ－糖基化位点（Ａｓｎ－Ｘ－Ｓｅｒ／Ｔｈｒ），对表位的形成有一定影响，人Ｆａｓ抗原的Ｂ细胞表位可能位于５１－７８，１００－１５７区域内。

真核mRNA3′非翻译区在基因表达中的作用

真核生物ｍＲＮＡ的３′非翻译区（３′ＵＴＲ）在基因表达调控中发挥重要作用．它不仅调控ｍＲＮＡ在体内的稳定性和降解速率，控制着ｍＲＮＡ的利用效率，还参与ｍＲＮＡ翻译过程的调控．

补体膜攻击复合物刺激血管内皮细胞胞浆游离钙离子浓度的变化

目的 在单个细胞水平 ,观测亚溶破补体膜攻击复合物 (MAC)诱导的血管内皮细胞 [Ca2 + ]i的动态变化。方法将原代培养的人脐静脉内皮细胞 ,以Fluo 4 /AM(1～ 6 μmol/L)和 0 .0 2 %PluronicF 12 7进行细胞钙荧光指示剂负载后 ,于 0℃组装亚溶破剂量的MAC。在 37℃条件下 ,以LSCM实时监测MAC沉积引起的胞浆钙荧光强度的变化。结果 MAC沉积后 ,多数细胞的钙荧光强度迅速增强 ,以后随时间的推移 ,升高的钙荧光逐渐下降 ,直至恢复至静息水平。定量分析选定的胞浆区域钙荧光强度的变化发现 ,不同细胞在 [Ca2 + ]i 的变化高度、持续时间和胞内钙振荡的特征等方面存在异质性。结论 MAC沉积到内皮细胞表面后 ,可诱导胞浆游离钙离子的浓度增高 ,且不同细胞 [Ca2 + ]i

超抗原SED在大肠杆菌中的表达

目的构建稳定的SED原核表达系统。方法采用PC R技术扩增葡萄球 菌D型肠毒素（SED）超抗原的成熟蛋白编码区DNA序列，构建SED DNA与6个组氨酸基因融合的表达载体pTrcHis-SED，转入E.coli DH5α，IPTG诱导后，用SDS-PAGE和免疫印迹 检测融合蛋白的表达情况。目的蛋白用Ni-NTA金属亲和层析法进行纯化，SDS-PAGE和毛细管电泳检测蛋白纯度。结果成功构建了原核表达载体pTrcHis-SED。分子量 约 为28 000 u的6His-SED融合蛋白可在E.coli DH5α中稳定表达。Ni-NTA金属亲和层析 后得到 纯度较高（>95%）的SED融合蛋白，且具有免疫学活性。结论本研究为SE D免疫识别研究奠定了实验基础。

人C5aR(CD88)序列结构分析及其B细胞表位预测

采用ＫｙｔｅＤｏｏｌｉｔｔｌｅ氨基酸亲水性标准及Ｂａｉｒｏｃｈ的ＧＧＢＳＭ方案对人Ｃ５ａＲ分子的亲水性基序、Ｂ细胞表位及二级结构进行了预测，并用吴氏建立的Ｂ细胞表位预测方法进行评述。结果显示，不同的预测方案所得结果一致，人Ｃ５ａＲ分子中，构成螺旋结构，伸展构象及无规卷曲的氨基酸残基数比例分别为３３．７％，３４．６％，３１．７％。三个高亲水性区域为第１５～１８位的ＤＤＫＤ，第１９５～２００位的ＤＫＲＲＥＲ和第３３０～３３３位的ＲＥＳＫ，其Ａｈ值分别为３．０、３．０、２．３２。其平均抗原性指数ＡＩ值分别为０．０６４、０．０９１、０．０７０。Ｎ－端第９～３０氨基酸序列的ＡＩ＝０．０４２，是Ｂ细胞优势表位区，以此制作短肽单克隆抗体是可行的。

超抗原SEA对外周血T细胞的活化作用

目的研究超抗原 SEA对外周血 T淋巴细胞的活化作用。方法用 SEA刺激人外周血 T淋巴细胞 ,观察细胞的 DNA合成、形态、IL - 2的产生、细胞表型以及凋亡情况。结果 SEA对 T淋巴细胞的促增殖作用在浓度为 10 0 ng/m L最强 ,在第 2、3d达高峰 ;首次或多次刺激不改变 T淋巴细胞的 CD4+ CD8+ 表型 ;首次刺激 2 4h内未见明显凋亡 ;但再次刺激 2 4h内即有明显凋亡 ;加入 rh IL - 2 2 d凋亡现象消失。结论超抗原 SEA对 T淋巴细胞的促增殖作用与其浓度、作用时间有关 ,并且SEA首次或多次刺激对 CD4+ T淋巴细胞和 CD8+

超抗原SEA诱导T细胞无能的作用机制探讨

目的 探讨超抗原诱导T细胞无能的分子机制。方法 采用ELISA和FACS ,分别检测超抗原对诱导T细胞无能的过程中 ,IL 2、IL 10的产生和IL 2Rα链 (CD2 5 )的表达 ,并以3 H TdR掺入法 ,测定无能T细胞对rhIL 2、PMA及iono mycin的应答能力。 结果 在诱导T细胞无能的过程中 ,IL 2的产生显著降低 ,而IL 10的产生则逐渐升高 ;CD2 5的表达与活化组相比较无显著差异。rhIL 2的加入可恢复T细胞增殖 ;PMA单独作用能诱导无能T细胞的部分增殖能力 ,但PMA +ionomycin则能更大程度地恢复T细胞的增殖。结论 超抗原SEA对T细胞无能的诱导 ,可能与降低IL 2的水平和升高IL 10的水平有关。超抗原SEA的反复刺激对T细胞无能的诱导 ,可能是干扰了TCR信号途径的近端事件 ,导致Ras/MAPK途径和Ca/calcineurin途径受阻 ,而使IL

Caspase激活与调控的分子机制

Caspases是一类天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白酶(IL1β转化酶相关蛋白酶).迄今,在哺乳动物至少已发现13种caspase成员.Caspases在胞内通常以无活性的酶原形式存在,在其内部特定的天冬氨酸残基部位蛋白质裂解加工后可导致酶原激活,引发细胞凋亡.作为效应子的caspase在绝大多数细胞的凋亡过程中具有十分重要的作用.随着线虫死亡程序及某些死亡受体介导敏感细胞凋亡的信号机制的阐明,人们对caspase激活与调控在细胞凋亡中的机制研究已获得重大进展.

Pre－S_（2）蛋白B细胞表位的精细特异性

采用我室建立的短肽点免疫结合试验确定Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白Ｂ细胞表位的精细特异性。结果发现Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白的Ｂ细胞识别部位（１４～２４）可进一步区分为两个部分交叠的表位：１４～２１和１８～２４，从而绘出了Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白Ｂ细胞表位图谱。这对设计新一代疫苗及诊断试剂有指导意义。

一种快速分离细胞凋亡片段化DNA的简单方法——NP-40法

目的鉴定细胞凋亡的一个重要生化指标是凋亡细胞的核 DNA通过琼脂糖凝胶电泳呈现典现的 DNA“梯状”图谱。传统分离凋亡细胞片段化 DNA的方法多采用酚 /氯仿抽提。因此 ,有必要探寻一种更为灵敏、简单的分离凋亡片段化 DNA的新方法。方法通过比较传统分离凋亡片段化 DNA的方法 ,并对 HERRMANN等 [1 ]报道的方法加以改进。结果本文介绍一种快速分离凋亡 DNA片段化的新方法 ( NP- 40法 )。结论这种简单、快速的分离方法无需酚 /氯仿反复抽提 ,无需大量的细胞样品 ,并且凋亡 DNA片段化梯状图谱清晰 ,适用于大多数凋亡细胞片段化