几种外部因子对春石斛组培生根的影响

[目的]为春石斛种苗的规模化生产提供理论依据。[方法]以春石斛组培增殖的不定芽为外植体,研究MS培养基浓度、IBA浓度、活性炭浓度及天然物质等外部因子对春石斛试管苗生根的影响。[结果]MS培养基浓度对试管苗生根影响较大,试管苗在1/2 MS培养基中生根效果较好,生根率达95%,根多且长。在1/2 MS培养基中加入0.5 mg/LIBA和0.5 mg/L活性炭对试管苗生根及生长有明显促进作用。在培养基中添加天然物质对试管苗生根有促进作用,其中添加100 g/L椰子汁时生根效果最佳,生根率可达97%。[结论]当培养基配方为1/2 MS+0.5 mg/LIBA+0.5 mg/L活性炭+100 g/L椰子汁时,春石斛试管苗生根及生长效果较好。

培养基种类、BA浓度和蔗糖浓度对春石斛组培苗增殖的影响

以春石斛(Dendrobium casiflake)的组培苗为试材,研究培养基的种类、BA浓度、蔗糖浓度等因素对不定芽增殖生长的影响,为春石斛种苗的规模化生产提供理论依据。结果表明:在MS培养基中不定芽分化及生长能力明显好于White、VW、SH、B_5及KC培养基,培养30 d后每个外植体平均分化出3.7个健壮的苗;在MS培养基中加入BA 3.0 mg/L以及蔗糖30 g/L时,春石斛不定芽增殖数多,且生长良好。

春石斛根端染色体制片技术的优化

为优化春石斛染色体制片技术体系,以春石斛组培苗根为材料,研究根端长度、预处理方法和酸解时间对制片的影响,结果表明,春石斛根端染色体制片时取根尖长度为1.0cm,在8-羟基喹啉和饱和对二氯苯的混合液中预处理4h,用1mol/L的盐酸在常温(25℃)下解离18min时制片效果佳,染色体形态清楚,易于观察。

培养基种类及IBA浓度对隔山消不定根生长及生物活性物质积累的影响

为了筛选出隔山消不定根培养的适宜培养基种类和吲哚丁酸(IBA)浓度,该研究探究了五种基本培养基种类(MS、SH、WPM、White、B_(5))和不同IBA浓度(0.5、1、1.5、2、2.5mg·L^(-1))对隔山消不定根生长和C_(21)甾苷、多糖和多肽积累的影响。结果表明:在五种培养基种类中,隔山消不定根生物量、三种生物活性物质(C21甾苷、多糖和多肽)含量及其生产量在MS培养基中均最高。在IBA浓度筛选试验中发现,添加IBA浓度为1.5mg·L^(-1)时隔山消不定根的生物量鲜重(22.2g)和生物量干重(1.7g)均达到最高,多糖及多肽含量也达到均最高,分别为168.0mg·g^(-1)DW和80.4mg·L^(-1)DW,此浓度下多糖和多肽生产量分别达到2889.2mg·L^(-1)和1383.1mg·L^(-1);然而C_(21)甾苷积累在IBA2mg·L^(-1)时最佳,其含量为145.6mg·L^(-1),生产量达到2460.8mg·L^(-1)。综合考虑下,培养隔山消不定根的培养基选为MS并加入1.5mg·L^(-1)IBA较适宜。

利用生物反应器大量生产人参不定根

在5 L气球型生物反应器中,采用完全浸没式培养方式,人参不定根鲜重和干重明显优于间歇浸没式培养;在培养开始时一次性注入含50 g/L蔗糖的培养基,可促进人参不定根鲜重和干重的增加;接种时,将不定根切成1 cm长、接种量为20 g时接种较适宜;增殖培养周期以30天为宜。

光通量和温差对马铃薯试管苗生长的影响

试验研究了光通量和昼夜温差对自养培养马铃薯试管苗生长的影响。结果表明:光通量为 200μmol/(m2·s)时,自养培养苗的生长、幼苗的净光合速率显著优于光通量50,100μmol/(m2·s)处理,且总气 孔数和张开的气孔数量也最多,分别为318.0和277.7个。7℃的昼夜温差有利于自养培养马铃薯试管苗的光 合作用,从而促进幼苗生长,获得健壮的植株。

东北刺人参组培快繁的可行性研究

在MS培养基中加入BA 1.0 mg/L时可产生3个健壮的丛生苗,采用组织培养技术快速繁殖刺人参幼苗具有可行性,这对保护和开发濒危的刺人参资源具有极其重要的意义.

利用生物反应器接触培养法增殖笃斯越橘丛生苗

笃斯越橘（Vaccinium uliginosum）又称蓝浆果,属杜鹃花科（Ericaceae）越橘属（Vaccinium）（李亚东,2001）,广泛分布于北半球。中国野生笃斯越橘资源主要分布在大兴安岭、小兴安岭地区（李亚东等,2001）。笃斯越橘果实具有营养保健作用（李亚东等,2004）,包括消除眼睛疲劳、软化血管、

栀子组培苗的瓶外生根

为了降低栀子组培苗生产成本,利用无土栽培技术进行了组培苗的瓶外生根培养。结果表明:以薄泡沫板做为支持物,营养液pH值为5.0、电导率为1.5×10-3S.cm-1时有利于幼苗生根及生长。对瓶外生根苗与组培苗和温室植株叶片的气孔数及气孔形态进行观察比较的结果表明,瓶外生根培养7 d苗的叶片气孔与组培苗相似,数量多且较大;而瓶外生根培养14 d苗的叶片气孔与温室1年生苗相似,几乎所有气孔都恢复开闭功能。瓶外生根苗移植于河沙和有机肥混合基质时,成活率达到100%,且长势强,新叶生长情况良好。

间歇浸没式生物反应器在辰星草培养苗扩繁中的应用

以茎尖培养得到的辰星草(Limonium hybrid'Misty Blue')培养苗(带2叶片)为试材.培养基为MS+BA1.0mg/L+蔗糖30g/L,pH调节为5.8.固体培养和振荡培养使用250 mL三角瓶,每瓶100 mL培养基.生物反应器培养使用5L气球型反应器,2L培养基.完全浸没式生物反应器培养时,无'载桥',培养苗在培养基中始终处于浸泡状态；间歇浸没式生物反应器培养时,离反应器底部15 cm处架有'载桥',培养基定时与'载桥'上的苗接触,设为每天4次(每隔5h,供给1h)、8次(每隔2h,供给1h)和12次(每隔1h,供给1h).生物反应器培养的空气注入量均为0.1 vvm (air volume/culture volume/min).温度(24±2)℃、光照1600 lx , 16 h/d,培养4周.每个处理重复3次.

IBA、NAA和蔗糖浓度对东北刺人参不定根增殖生长的影响

【研究目的】为大量扩繁东北刺人参不定根提供可靠的理论依据。【方法】以东北刺人参不定根为外植体,研究在液体振荡培养中,NAA、IBA以及蔗糖浓度对东北刺人参不定根生长的影响。【结果】不同生长素及浓度对东北刺人参不定根的影响中,IBA对促进东北刺人参不定根的生长效果优于NAA,当IBA浓度为3~4mg/L时,适合不定根生长,培养不定根的IBA浓度为3mg/L;在培养基MS＋IBA3mg/L中提高蔗糖浓度到50g/L时,可明显促进东北刺人参不定根的鲜物重和干物重的增加,分别为5.3、0.49g。【结论】培养基配方为MS＋IBA3mg/L＋50g/L蔗糖且振荡培养时,东北刺人参不定根的生长效果最好。

利用生物反应器大量生产东北刺人参不定根的研究

为了大量生产东北刺人参不定根,研究了培养方式和反应器内培养基中IBA浓度、糖种类以及白糖浓度对其不定根增殖生长的影响,结果表明生物反应器可大量生产东北刺人参不定根;在反应器培养时,MS培养基中添加3 mg/L的IBA时不定根长势较好,其鲜物重、干物重最大,分别达到378.3、34.8 g;而白糖和蔗糖对不定根的增殖效果显著好于葡萄糖和果糖,因此,选用低价的白糖作为碳源,白糖浓度为50 g/L时其鲜物重、干物重以及增殖系数达到最大,分别为551.9 g、57.2 g和26.6。

接种密度、培养基中蔗糖和活性炭浓度对生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖的影响

为了探明生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素,为大花蕙兰种苗生产中大量培养繁殖材料提供理论依据,以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了接种量、蔗糖浓度、活性碳浓度对5 L气升式反应器内原球茎增殖和生长的影响。结果表明,大花蕙兰原球茎在5 L反应器内增殖时,接种量为20 g的处理原球茎鲜重显著优于10 g和30 g接种量处理;添加蔗糖30 g/L处理对大花蕙兰增殖生长有促进作用;活性炭浓度0.25 g/L处理原球茎的生长良好,高于0.25 g/L抑制原球茎的生长,增殖系数为7.5。利用5 L气升式生物反应器培养原球茎,接种量为20 g、蔗糖浓度为30 g/L、活性炭浓度为0.25 g/L时,大花蕙兰原球茎增殖较快,生长较好。

促进铁皮石斛原球茎中多糖和生物碱积累研究

以铁皮石斛原球茎为试材,为优化原球茎培养和提高有效物质的积累,研究了培养液中不同pH对原球茎生物量及有效物质含量的影响。同时,在培养初期向培养液中分别添加不同浓度的诱导子(壳聚糖、普鲁兰多糖)以及2种诱导子的混合液,以未加入诱导子的培养基作为对照,对原球茎生物量及有效物质含量进行了测定。结果表明:当培养液pH为5.8时,原球茎生长最好,且多糖(4.93g·L^(-1))和生物碱(3.15mg·L^(-1))生产量达到最高。30mg·L^(-1)壳聚糖和200mg·L^(-1)普鲁兰多糖单独处理,有利于原球茎中多糖和生物碱的积累。但当壳聚糖浓度为15mg·L^(-1),普鲁兰多糖浓度为100mg·L^(-1)混合处理后,发现原球茎中多糖和生物碱的积累量明显提高,多糖含量达到322.8mg·g-1 DW,生产量达到6.75g·L^(-1),而生物碱含量达到242.7μg·g-1 DW,生产量达到5.07mg·L^(-1)。因此,通过调节培养条件可有效地促进铁皮石斛原球茎中多糖和生物碱积累,为铁皮石斛产品生产提供了一种新的材料。

膜荚黄芪不定根组织培养的研究

[目的]建立黄芪不定根培养的无性繁殖体系。[方法]以膜荚黄芪无菌苗的胚根为外植体,诱导了不定根。将长约1 cm的不定根切段接种于4种培养基（B5、MS、LS和White）以筛选培养基。然后以B5为基本培养基附加不同浓度IBA（1-6 mg/L）、不同种类糖（蔗糖、葡萄糖、果糖和食用白糖）和不同浓度白糖（20-50 g）,研究IBA浓度和糖的种类及浓度对黄芪不定根组织培养的影响。[结果]4种培养基中,B5培养基效果最好,切段可分化大量不定根,且生长良好。IBA浓度为2 mg/L时,黄芪不定根生长旺盛。在B5＋IBA 2.0 mg/L培养基上,附加30 g/L蔗糖或白糖时不定根生长良好,白糖与蔗糖的效果差异不明显。[结论]在黄芪不定根规模化生产中可用白糖代替培养基中蔗糖,降低培养基成本。

盐浓度、碳源和磷酸盐浓度对东北刺人参不定根悬浮培养的影响

[目的]探讨东北刺人参不定根悬浮培养的最适条件,为大量培养提供依据。[方法]以东北刺人参不定根为材料,研究在悬浮培养中盐、碳源以及氮源对其增殖生长的影响。[结果]当盐浓度为正常MS时,不定根增殖系数最高,浓度高抑制了生长,不定根在蔗糖和白糖长势较好,最适合的磷源浓度为正常MS培养基中固有的浓度。[结论]在正常的MS培养基中添加蔗糖或白糖以及正常MS培养基中的磷酸盐最适合东北刺人参不定根的增殖生长。

组培平贝母不同阶段培养体淀粉酶同工酶电泳及其活力的研究

以平贝母为供试材料,研究了组培平贝母培养过程中不同发育时期培养体的淀粉酶同工酶及其活力的变化,可为进一步深入研究贝母器官发生机理和以后的分子研究提供参考。结果表明:在发育过程中各培养体的淀粉酶同工酶在Rf=0.167处产生了平贝母α-淀粉酶的特征性酶带,在Rf=0.250时,4个时期都有浅蓝色的R-淀粉酶的表达;而β-淀粉酶酶带在小鳞茎膨大阶段进行表达,而在其他3个时期没有该酶的表达。在淀粉酶活力方面,培养体内总淀粉酶活力整体呈下降-上升-下降的趋势,不同发育时期的α-淀粉酶变化趋势与总淀粉酶变化趋势相似,其活力始终高于β-淀粉酶,推测α-淀粉酶在组培平贝母不同发育时期培养体的淀粉代谢中作用比较重要。

几种因素对悬浮培养白色紫锥菊不定根生物量和有效物质积累的影响

为优化白色紫锥菊不定根悬浮培养体系,从而获得较多有效物质的积累,以白色紫锥菊不定根为试验材料,探究培养基中PO_4^(3-)浓度、总氮浓度、NO_3^--NH_4^+对白色紫锥菊不定根生物量及有效物质积累的影响。结果表明:当培养基中PO_4^(3-)浓度为0.94 mmol/L、总氮浓度为45 mmol/L、NO_3^--NH_4^+为37.5-7.5 mmol/L时,悬浮培养白色紫锥菊不定根生物量及有效物质均达到最大值,其中酚、黄酮生产量分别为253.78、178.08 mg/L。因此,通过调节培养基成分配比,可提供生物量及有效物质含量高的不定根为原材料,为进一步大规模培养白色紫锥菊不定根奠定了理论基础。

贯叶连翘的组织培养和金丝桃素的生产

以贯叶连翘种子为材料,对贯叶连翘组培苗进行生根培养,筛选和优化生根培养基,进一步在生物反应器内诱导培养不定根,并研究了蔗糖浓度、铵态氮/硝态氮配比以及MS培养基浓度对不定根中金丝桃素含量积累的影响。结果表明:贯叶连翘在3/4MS+IBA 2.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L(pH 5.8)培养基上的生根效果最佳;40 g/L的蔗糖有利于金丝桃素的积累,此时不定根中金丝桃素的含量最高、达0.94 mg/g;当铵态氮/硝态氮配比为30/30时,金丝桃素的含量和生产量达到最大,分别为0.98 mg/g和12.41 mg/L;不定根在不同浓度范围的MS培养基中均可生长,金丝桃素在2MS培养基上的生产量最大、为15.70 mg/L。

膜荚黄芪和蒙古黄芪的RAPD指纹图谱分析研究

利用RAPD标记对膜荚黄芪和蒙古黄芪进行了指纹图谱的研究。采用BSA法从100个10碱基随机引物筛选出7个在膜荚黄芪基因池和蒙古黄芪基因池中表现多态性的引物。单株检测表明,引物OPC06具有膜荚黄芪特异性,在检测的膜荚黄芪个体中均能扩增出1条710 bp左右的特异带,而在蒙古黄芪的单株中未见扩增特异带,因此,将该膜荚黄芪扩增特异性条带命名为OPC06-710。试验表明,利用RAPD标记可在分子水平上达到快速、准确、可靠地鉴定膜荚黄芪和蒙古黄芪的目的。