饲粮粗蛋白质水平对妊娠期云南半细毛羊养分表观消化率的影响

为研究饲粮粗蛋白质(CP)水平对妊娠期云南半细毛羊养分表观消化率的影响,试验选取50只体况良好、年龄一致、配种日期相同、体重为(46.52±4.58)kg的经产2胎妊娠期云南半细毛羊,随机分为5组,每组10个重复,每个重复1只羊。从妊娠第46天开始,进行预试期14 d和正试期90 d的饲养试验。在妊娠前期(正试期第1~30天)和中期(正试期第31~60天)对应的饲粮CP水平为6.65%(1组)、9.02%(2组)、10.97%(3组)、12.43%(4组)和13.95%(5组),妊娠后期(正试期第61~90天)对应的饲粮CP水平为6.31%(1组)、7.77%(2组)、10.47%(3组)、12.69%(4组)和15.25%(5组),在正试期第11~15天、第41~45天、第71~75天,分别从各组选5只试验羊开展为期5 d的消化代谢试验。结果表明:(1)在妊娠前期和中期,除第1组外,其余4个组干物质(DM)表观消化率无显著差异(P>0.05),在妊娠后期,第3组、第5组DM表观消化率较第1组分别提高了9.15%和7.25%(P<0.05)。(2)在妊娠前期,后3组氮(N)表观消化率较前2组至少提高34.25%以上(P<0.01),妊娠中期,第4组、第5组N表观消化率较前2组至少提高了43.66%以上(P<0.01),妊娠后期,第5组N表观消化率较第1组、第2组和第3组分别提高了61.88%、45.02%和19.07%(P<0.01)。(3)中性洗涤纤维(NDF)消化率随饲粮CP水平的升高而升高,妊娠前期,第4组、第5组NDF表观消化率较第1组分别提高了22.25%和21.06%(P<0.05),妊娠中期,后3组NDF表观消化率较第1组、第2组至少提高26.67%以上(P<0.01),妊娠后期,第4组、第5组NDF表观消化率较第1组、第2组至少提高30.67%以上(P<0.01)。(4)在妊娠前期,后4组酸性洗涤纤维(ADF)消化率较第1组至少提高31.26%(P<0.01),在妊娠中期,第5组ADF表观消化率较第1组提高了60.98%(P<0.01),在妊娠后期,第3组ADF表观消化率较第1组和第2组分别提高了50.20%和38.90%(P<0.01)。(5)整个妊娠期各组间的钙(Ca)和磷(P)消化率无显著差异(P>0.05)。(6)在妊娠前期,第2、3、4组的总能(GE)表观消化率较第5组分别提高了3.35%、2.90%和2.10%(P<0.05),而较第1组则分别提高了13.60%、12.41%和11.50%(P<0.01),妊娠中期和后期各组间GE表观消化率无显著差异(P>0.05)。综上所述,妊娠前、中、后三个时期,云南半细毛羊饲粮CP水平分别为10.97%、12.43%和15.25%时,饲粮N表观消化率最高,饲粮CP水平对Ca、P表观消化率无影响。

云南半细毛羊品种选育及产业化推广

云南半细毛羊具有体质结实、毛丛丰满、适应性强、产毛和产肉性能优良等特性,是我国内陆亚高山和南方高寒冷凉地区的优势畜种。该文围绕云南半细毛羊培育和产业发展现状,从培育历程、资源概况、选育技术、饲养管理、生产性能鉴定、成果转化和产业化示范等方面,重点分析了云南半细毛羊保种选育成效和推广应用情况,以期为该品种的选育提高、保护和利用提供参考。

保护液的玻璃化状态对红细胞冷冻干燥保存后回收率的影响

为了研究保护液的玻璃化状态对红细胞冷冻干燥 (简称冻干 )保存后回收率的影响 ,采用含有 7%二甲亚砜 (v/v)和 2 0 %、30 %、4 0 %或 5 0 %聚乙烯吡咯烷酮 (PVP) (w/v)的缓冲液作为保护液进行保护液的玻璃化测试和红细胞的冻干保存实验。首先检测溶液的玻璃化状态 ,如果冷冻和解冻过程中任一过程出现白色冰晶即为非玻璃化溶液 ;再将浓集红细胞和不同的保护液按比例混匀 ,预冻后移入冻干机内进行冻干处理 ;冻干完毕后 ,快速水化样品 ,测定红细胞回收率、血红蛋白回收率和上清游离血红蛋白浓度 ,然后对冻干后红细胞形态进行电镜观察。结果表明 :2 0 %PVP +7%DMSO和 30 %PVP +7%DMSO在冷冻和解冻过程中都出现白色冰晶 ;4 0 %PVP +7%DMSO在冷冻过程中无冰晶出现 ,但在解冻过程中出现冰晶 ;而 5 0 %PVP +7%DMSO在冷冻和解冻过程中均无冰晶出现。冻干红细胞再水化后 ,4 0 %PVP +7%DMSO的细胞回收率和血红蛋白回收率分别为 (81.36±14 94 ) %和 (77.5 4± 12 .86 ) % ,显著高于其它 3组 (P <0 .0 1) ;另外 4 0 %PVP +7%DMSO的上清游离血红蛋白浓度也显著低于其它 3组 (P <0 .0 1)。研究表明 :随着溶液中PVP浓度的升高 ,溶液的玻璃化程度也随之增加 ,同时冻干 再水化后红细胞的各项指标也随之改善 。

聚乙烯吡咯烷酮和葡萄糖在冰冻干燥保存人红细胞中的效果研究

冰冻干燥(冻干)保存人红细胞在临床输血和战伤救治方面具有重要意义。一些研究表明糖类能提高细胞膜的耐干燥性。试验采用葡萄糖和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为主要保护剂进行红细胞的冻干保存研究。首先对影响红细胞葡萄糖吸收率的因素,如浓度、孵育温度和时间进行了优化筛选,而后将负载葡萄糖的红细胞与保护液混合并进行冻干保存。结果表明;红细胞对葡萄糖的吸收率依赖于外源葡萄糖浓度、孵育温度以及时间的变化。另外,随着PVP浓度的上升,保护液的结晶起始温度也随之下降,但过度的玻璃化不利于红细胞的冰冻干燥。试验冻干保存的红细胞再水化后的游离血红蛋白浓度低于1g/L。总之,采用PVP和葡萄糖冻干保存红细胞是可行的,但是如何降低PVP对细胞的渗透压伤害是今后研究的重点。

人红细胞对糖类摄取的规律性研究

人红细胞冰冻干燥保存在临床应用中具有重要意义。一些糖类,特别是海藻糖,能提高一些低等生物或细胞对干燥环境的耐受性,但如何将糖类导入细胞内又是一个挑战。本研究探讨人红细胞对糖类摄取的规律性。于不同温度(4、25和37℃)、不同浓度(0、0.2、0.4、0.6、0.8、1mol/L)及不同培育时间(1、3、5、7、9小时)条件下检测了红细胞对海藻糖和葡萄糖的吸收率及游离血红蛋白量,并测定了红细胞变性指数。结果表明:随着温度的上升和细胞外糖浓度的增加,红细胞的糖吸收率也随之上升,细胞内的海藻糖和葡萄糖浓度分别可以达到30mmol/L和40mmol/L以上。但孵育时间对海藻糖和葡萄糖的吸收率影响不同,随着时间的延长,细胞内海藻糖浓度呈先升高而后降低的趋势,而葡萄糖吸收率则呈稳定上升的趋势。但是糖吸收过程对红细胞的游离血红蛋白和变形性产生不利的影响,尤其是海藻糖,这主要来源于渗透压伤害。结论:红细胞的糖吸收率与孵育温度、外源糖浓度和孵育时间的关系密切,而且在一定条件下的糖吸收效率也较高,但此过程对红细胞有一定的伤害,这可能会影响糖类在红细胞冰冻干燥保存研究中的应用前景。今后的研究工作应集中于如何处理细胞伤害和糖吸收效率的关系。

海藻糖抑制高浓度葡萄糖诱导的红细胞磷脂酰丝氨酸暴露、渗透脆性增高和膜脂质过氧化损伤的研究

尽管高浓度葡萄糖孵育有利于深低温或冰冻干燥保存人红细胞的存活,但是高浓度葡萄糖仍然对红细胞造成一定损伤。本研究探讨海藻糖对高浓度葡萄糖导致的红细胞损伤的影响。将红细胞于含有一定浓度海藻糖的葡萄糖缓冲液中孵育3小时后,用流式细胞术分析红细胞磷脂酰丝氨酸(PS)分布和细胞渗透脆性,用TBA法检测膜脂质过氧化损伤。结果表明:葡萄糖可以导致红细胞PS暴露、脂质过氧化损伤和细胞渗透脆性增高,而且其效率和葡萄糖浓度和温度密切相关。然而,海藻糖却可以很好地抑制高浓度葡萄糖诱导的红细胞PS暴露、渗透脆性增高和过氧化损伤。随着海藻糖浓度的增加,红细胞PS标记率、丙二醛(MDA)浓度和细胞碎片率呈逐步下降的趋势。结论:高浓度葡萄糖可以导致细胞PS暴露、脂质过氧化损伤和渗透脆性增高,而且这3种损伤之间存在一定关系;海藻糖可以有效地抑制高浓度葡萄糖导致的红细胞PS暴露、渗透脆性增高以及过氧化损伤,这对于应用小分子糖类保存红细胞研究具有重要意义。

海藻糖和蔗糖在人红细胞冰冻干燥保存中的效果比较

目的 比较海藻糖和蔗糖在人红细胞冰冻干燥保存过程中对细胞的保护效果。方法 将浓缩红细胞、含有不同浓度海藻糖或蔗糖的30％聚乙烯吡咯烷酮(PVP)按照1:3(V/V)的比例混合,-80℃冰箱中预冻1h,入冻干机内冻千处理后,用37℃等渗缓冲液快速水化洗涤样品,然后将其分为3个处理组:组1为30％PVP组(简称PVP组),组2、3为含有5％、10％和15％海藻糖或蔗糖的30％PVP组(简称海藻糖组或蔗糖组),测定各项指标。结果 冻干红细胞再水化后,海藻糖组的细胞回收率[(18.86±4.63)％、(21.73±7.32)％和(18.01±4.53)％]显著低于PVP组[(45.97±11.77)％](P<0.01);蔗糖组,蔗糖浓度为5％、10％时,细胞回收率分别为(37.40±2.90)％和(37.77±4.78)％,二者显著低于PVP组(P<0.05),但当蔗糖浓度升至15％时,细胞回收率[(42.54±10.25)％]和PVP组无显著差异;血红蛋白回收率,海藻糖组[(50.00±3.47)％、(40.91±9.09)％和(52.09±7.01)％]显著低于PVP组[(77.27±3.63)％](P<0.05),而蔗糖组和PVP组无显著差异,且显著高于海藻糖组(P<0.05)。洗涤后3组的游离血红蛋白浓度均<1g/L,其余各项指标的对比关系类似于水化后指标。结论 在冻干保护液中添加不同浓度的海藻糖或蔗糖对于提高冰冻干燥保存后红细胞的回收率和血红蛋白浓度作用不明显;

人红细胞冰冻干燥保存研究的进展

目前红细胞临床保存方法主要有低温(4℃)和深低温(-80℃或-196℃)保存。4℃保存时间短,而且容易受到细菌污染;深低温保存大大延长了红细胞保存时间,但需要笨重的低温设备,而且由于保护液中含有甘油等渗透性保护剂,解冻后需要反复洗涤。这些缺陷限制了常规红细胞保存方法在一些特殊情况,例如在战争和自然灾害条件下的应用。相对于常规保存方法而言,冰冻干燥具有以下优势:重量大大减轻,便于运输,适合室温保存,易于再水化。本文就冰冻干燥保存红细胞研究的进展和所面临的挑战,尤其是最近海藻糖在冰冻干燥保存过程中的应用以及其作用机制进行了综合讨论,从而为发展一种安全、简单和有效的红细胞冰冻干燥保存方法提出理论指导。

高浓度葡萄糖诱导红细胞磷脂酰丝氨酸暴露的机制研究

本研究探讨高浓度葡萄糖诱导红细胞磷脂酰丝氨酸(PS)暴露的机制。将红细胞于葡萄糖缓冲液中孵育后用流式细胞术分析PS标记率和前向角值;检测caspase-3和caspase-8的活化情况;用流式细胞术和荧光显微镜观察亮抑酶肽对葡萄糖引起的红细胞PS暴露的抑制效果。结果表明:葡萄糖可以诱导红细胞PS暴露,而且其效率和葡萄糖浓度密切相关。随着葡萄糖浓度的增加,红细胞的PS标记率呈逐步增加的趋势,当葡萄糖浓度为0.8mol/L时,红细胞的PS标记率在80%以上。然而,在葡萄糖引起的红细胞PS暴露过程中,caspase-3和caspase-8没有活化,而亮抑酶肽却可以很好地抑制红细胞PS暴露和使其体积缩小。随着亮抑酶肽浓度的增加,红细胞PS标记率呈逐步下降的趋势,而细胞体积却呈逐步增加的趋势。结论:高浓度葡萄糖可以导致严重的红细胞PS暴露,而且这种PS暴露和caspase无关,推测葡萄糖诱导的红细胞PS暴露是受一条对亮抑酶肽高度敏感的、未知的通路调控的。

小鼠原核胚OPS法冷冻保存技术

在 2 0、2 5℃室温条件下 ,采用 OPS(open pulled straw)法对小鼠原核胚进行玻璃化冷冻保存。结果表明 ,EFS和EDFS各冷冻组的原核形态正常率 (95 %～ 10 0 % )、体外发育率 (76 %～ 82 % )和对照组 (10 0 %、88% )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。采用 EPFS4 0冷冻后的原核胚形态正常率 (70 %～ 76 % )与对照组相比差异极显著 (P<0 .0 1)。而 EPFS30和EPFS4 0冷冻后的胚胎发育率 (34%～ 5 7% )均极显著低于对照组 (P<0 .0 1)。另外 ,在 2 5℃室温条件下冷冻保存的原核胚 ,解冻后其囊胚发育率 (76 %～ 80 % )与对照组 (86 % )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。冷冻保存的原核胚移植后的妊娠率和产仔率达 4 5 %和 4 4 % ,与新鲜原核胚移植的对照组 (5 6 %和 4 6 % )相比均无显著性差异 (P>0 .0 5 )

冰冻干燥红细胞超微结构的分析

本研究的目的是探讨冰冻干燥红细胞在电镜下的形态变化。全血采自健康献血者 ,实验分为 3组。组 1:新鲜红细胞 ,4℃保存不超过 2 4小时 ;组 2 :红细胞中加入终浓度为 35 %的甘油 ,- 80℃保存 2 4小时 ;组 3:红细胞经过预处理 ,冰冻干燥 16小时。对解冻红细胞或水化重悬冰冻干燥的红细胞进行计数 ,电镜下观察 3组红细胞超微结构 ,并对电镜下红细胞平均直径、平均光密度及积分光密度进行图像分析。平均光密度及积分光密度代表细胞内血红蛋白的相对含量。结果表明 ,冰冻干燥后红细胞回收率为 5 3% ,红细胞具有圆盘状的结构。组 1红细胞平均直径(μm)、平均光密度及积分光密度分别为 4 .7± 0 .4 ,0 .14± 0 .0 2 ,1.5 8± 0 .4 6 ;组 2红细胞平均直径 (μm)、平均光密度及积分光密度分别为 4 .6± 0 .7,0 .14± 0 .0 2 ,2 .35± 0 .6 4 ;组 3红细胞平均直径 (μm)、平均光密度及积分光密度分别为 4 .4± 0 .4 ,0 .17± 0 .0 5和 2 .35± 0 .4 6。对电镜下红细胞平均直径、平均光密度及积分光密度数据进行统计学处理 ,三元方差分析的Wilks′Lambda检验显示 ,组 3与组 2之间无显著差异 ,组 3与组 1相比较差异显著。结论 :冰冻干燥红细胞具有相对完整的超微结构 ,平均直径及血红蛋白的含量与冰冻保存红细胞相?

新型冰冻红细胞洗涤机洗涤效果的研究

目的研制一种全自动、封闭式,体积小、重量轻,洗涤程序设计简单的新型冰冻红细胞洗涤机。方法全血采自健康献血者,ACD抗凝,离心获浓缩红细胞,加入甘油到终浓度为40%,-80℃保存。42℃条件下冻融红细胞,利用自行设计的透析式新型冰冻红细胞洗涤机,使用3种自动化洗涤程序洗涤红细胞,直至可输注。结果洗涤后红细胞形态正常,3种程序洗涤后红细胞的回收率(%)分别为69.73±8.36,85.09±6.03和88.43±4.72;红细胞血红蛋白的回收率(%)分别为45.30±2.66,70.80±3.76和81.26±5.55;洗后上清液中游离血红蛋白的含量(g/L)为0.20±0.08,0.14±0.03和0.25±0.13,采用单因素k水平方法对数据进行统计学分析,得出了最佳洗涤程序。结论该新型冰冻红细胞洗涤机采用优化的洗涤程序,洗涤后的冰冻红细胞达到了国家的质量标准。

负载表没食子儿茶素没食子酸酯对血小板功能与凋亡等影响

本研究探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)负载后对血小板生理生化功能的影响。将血小板用不同浓度EGCG(浓度分别为:0、2.5、5、7.5、10、12.5、15、20、30mmol/L)的负载液处理,通过比对回收率和聚集活性,将实验分为2.5、5、10mmol/L负载液处理组和空白对照组,观察保存期内血小板生理生化功能的改变;血小板的回收率通过血细胞计数技术仪进行检测;血小板聚集活性通过比浊法测定;流式细胞术检测血小板的凋亡。结果表明,负载液中EGCG浓度为2.5、5、10mmol/L时负载入血小板的EGCG量分别为0.4006±0.12、1.0527±0.1503、1.6902±0.1112mmol/L。当负载液中EGCG浓度较低时(<15mmol/L),负载液中EGCG的浓度与血小板对EGCG的吸收量呈正相关。检测血小板回收率时发现,2.5mmol/L的负载液处理组回收率为(82.45±0.360)%,空白组为(90.33±1.115)%,负载EGCG血小板回收率下降(p<0.05);比较而言,回收率在5mmol/L组和10mmol/L组分别为(57.51±2.468)%和(47.45±2.030)%,下降更为明显(p<0.01)。当使用ADP作为诱聚剂时,空白对照组中血小板的最大聚集率(MAR)为(63.6±4.037)%,高于其它组(p<0.01),血小板的聚集活性与负载液的EGCG浓度呈明显的负相关。当使用THR作为诱聚剂时,对照组的MAR为(89.3±6.533)%,高于EGCG负载的实验组(p<0.05),其中10mmol/L EGCG负载液的血小板聚集活性为(70.1±5.400)%,受到的影响较为显著(p<0.01)。在细胞凋亡检测实验中发现,负载EGCG后的血小板容易呈现早期凋亡状态,说明EGCG对于血小板的程序性死亡有一定的促进作用。结论 :负载入血小板中的EGCG对血小板各种生理功能有着明显的影响,负载EGCG后的血小板更易发生细胞程序性死亡。

再水化液因素对冰冻干燥保存后红细胞回收率的影响

目的 寻求一种能有效提高冰冻干燥 (简称冻干 )保存后人红细胞回收率的再水化体系。方法 测定1 0 %聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)、6 %羟乙淀粉 (HES)、5 %羧甲基淀粉钠 (CMS)、生理盐水、0 75mol/L葡萄糖、等渗缓冲液及高渗缓冲液 (5×Buffer)的晶体渗透压和胶体渗透压 ;将浓缩红细胞和保护液混匀 ,预冻后移入冻干机内作冻干处理 ,冻干完毕后 ,用不同种类或不同温度的再水化液快速水化洗涤样本。结果 人红细胞冻干再水化后 ,6 %HES组、1 0 %PVP组和 5 %CMS组的红细胞回收率分别为 (93.6 5± 6 .1 8) %、(88.80± 9.4 9) %和 (91 .34± 8.1 3) % ,血红蛋白回收率分别为 (93.4 8± 4 .6 7) %、(89.0 2± 4 .6 7) %和 (88.79± 5 .35 ) % ,均极显著高于其他 4组[(1 5 .5 6± 1 2 .0 2 ) %～ (2 7.77± 6 .4 8) % ,(1 7.78± 1 0 .80 ) %～ (4 1 .5 0± 6 .4 3) % ) ](P <0 .0 1 ) ;不同温度的 6 %HES的再水化效果表明 ,再水化后 3个温度组的红细胞回收率无显著差异 ,但 37℃和 2 5℃组的血红蛋白回收率分别为(87.4 8± 5 .84 ) %和 (91 .37± 3.94 ) % ,均极显著高于 4℃组 (73.1 0± 5 .90 ) % (P <0 .0 1 )而且上清游离血红蛋白浓度也显著低于 4℃组。

冰冻红细胞洗涤方法的比较研究

目的比较传统的大型离心机方法与新型透析式洗涤机方法洗涤冰冻犬红细胞的输注效果,评价新型透析式洗涤机的应用价值。方法采用动物实验的方法,观察犬红细胞冰冻保存洗涤后回输体内24h回收率及安全性。取犬全血200ml,分离红细胞进行甘油化保存,1周后解冻犬红细胞,分别经两种方法洗涤后自体回输,取脏器进行组织切片和HE染色。结果两种方法洗涤效果的差异无显著性,两种洗涤方法处理的冰冻红细胞回输犬体内后24h回收率均>90%;回输72h后解剖脏器观察,两组动物脏器均未见异常。结论洗涤的冰冻犬红细胞回输实验动物体内后代谢稳定,对犬脏器无副作用,同时新型透析式洗涤机具有缩短洗涤时间、自动化全封闭式的特点,适宜于临床应用。

小分子糖负载血小板+冻干保护剂混合悬液的相变点测定与屏蔽实验研究

目的测定冻干血小板长期保存预冻程序和所依据的制品相变点温度并摸索相应屏蔽相变点的最佳冷冻曲线。方法研制出小分子糖负载血小板+冻干保护剂混合悬液,使用速率程序降温仪分析测定该混合悬液样品的相变点温度;根据测得的相变点温度,设计屏蔽相变点的预冻程序,根据温度变化曲线,判断相变点屏蔽结果。结论该混合悬液样品的相变点温度为(-13.56±2.05)℃;据此相变点温度所设计的3种相应的屏蔽相变点的预冻程序中,程序3为最佳冷冻曲线。结果获得了小分子糖负载血小板+冻干保护剂混合悬液的相变点温度及相应的屏蔽相变点的最佳预冻程序。

冻干血小板对大鼠难愈合创伤模型的实验治疗

血小板含有20多种生长因子,对于创伤尤其是难愈性创伤具有治疗作用。本研究以糖尿病SD大鼠为基础,建立了一种难愈合创口模型,用于评价冻干血小板对难愈性创伤修复的治疗作用。采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)65mg/kg对大鼠腹腔注射制备糖尿病模型。取正常大鼠10只,糖尿病大鼠20只,将其分为正常对照组(NDR)、糖尿病对照组(DR)和冰冻干燥血小板治疗组(TLP);在各组大鼠背部造成直径2cm圆形创面,分别于第l、3、5、7、12天进行创面照相和透明膜描计法计算创面愈合速度。结果显示,注射STZ72小时后糖尿病组血糖明显高于16.7mmol/L。1周后糖尿病大鼠体重与正常对照组比较明显减轻(p<0.05)。糖尿病对照组创口的愈合速度在各个时间点均低于正常对照组创口(p<0.05),冰冻干燥血小板治疗组创口愈合速度显著快于糖尿病对照组。第12天时,正常对照组和治疗组创口再上皮化率分别达到88.1%和81.8%,而糖尿病组只有62.8%。结论 :以链脲佐菌素建立的糖尿病大鼠能成功制备难愈合创口模型,冰冻干燥血小板对该难愈性创伤模型具有治疗作用。

玻璃化深低温保存小鼠卵巢组织的研究

对小鼠卵巢组织进行玻璃化深低温保存的初步研究,探索合适的玻璃化保护剂及保存方法。取3周龄小鼠卵巢组织,采用不同保护剂进行玻璃化深低温保存,-196℃液氮保存一周后复温,进行组织切片HE染色观察,筛选合适的玻璃化保护剂;对保存后的小鼠卵巢组织进行自体移植体内培养2周后,取出卵巢组织进行形态学观察及基因表达研究,采用RT-PCR方法检测到了在原始卵泡向初级卵泡发育过程中特异表达的AMH基因及在各个阶段的卵泡中均表达的KL基因。结果表明采用高浓度渗透性保护剂(二甲基亚砜、乙酰胺、丙二醇)的玻璃化保护液对小鼠卵巢组织保存效果较好,说明采用玻璃化技术保存卵巢组织的方法可行,并可采用检测基因表达的方法验证深低温保存卵巢组织的效果。

小分子糖类负载后血小板超微结构和功能初步研究

本研究探讨血小板在37℃条件下负载小分子糖类物质4小时后形态、结构和功能的变化。应用透射电子显微镜观察小分子糖类物质负载前后血小板超微结构的变化,用血细胞计数仪检测血小板数及血小板平均体积(MPV)的变化,用血小板聚集测试仪检测血小板最大聚集率,采用流式细胞术检测血小板膜表面标志CD62p及磷脂酰丝氨酸(PS)。结果表明:小分子糖类物质负载后,血小板超微结构无明显变化;血小板最大聚集率可达新鲜血小板的60%以上;血小板计数和血小板平均体积(MPV)与新鲜血小板相比无显著差异(p>0.01);血小板膜表面标志CD62p的标记率及Annexin V的结合率与新鲜血小板相比均无明显差异。结论:小分子糖类物质负载后血小板仍然具有相对完整的超微结构和较好的聚集活性,功能基本正常。