微小扇头蜱microRNA文库建立及miR-275靶蛋白Vg-2的生物信息学分析

【目的】建立饱血状态雌性微小扇头蜱的microRNA文库,鉴定所含microRNA的种类,分析miR-275靶蛋白Vg-2的二、三级结构,检测其信号肽、跨膜结构域、磷酸化及糖基化位点,预测其优势抗原表位。【方法】以雌性、饱血状态的微小扇头蜱为研究对象,通过高通量测序技术建立其microRNA文库,利用软件miRDP及检索miRBase数据库,鉴定饱血状态雌性微小扇头蜱所含的microRNA种类;运用在线软件EXPASY、PRABI与SWISS-MODEL等分析Vg-2蛋白质理化性质,推断其二、三级结构;运用在线软件SignalP 5.0、TMHMM、NetPhos 3.1及NETCGlyc 1.0检测该蛋白的信号肽、跨膜结构域、磷酸化与糖基化位点;利用在线软件ABCpred Prediction、Scratch、IEDB和NetCTL预测Vg-2蛋白的B、T细胞优势抗原表位。【结果】获得成熟的microRNA 383个,其中67个为已被鉴定和注释的microRNA,316个为新发现的microRNA;微小扇头蜱的Vg-2基因序列全长5040 bp,共编码1679个氨基酸;Vg-2蛋白为亲水性酸蛋白,分子大小为189.89 kDa,理论等电点(pI)为6.08,其二级结构以无规则卷曲为主要结构成分,而其三级结构却以β-折叠为主要结构成分;Vg-2蛋白存在268个磷酸位点,20个糖基化位点,无信号肽和跨膜结构域,拥有58个B细胞优势抗原表位和8个T细胞优势抗原表位。【结论】在饱血状态雌性微小扇头蜱体内含有383个microRNA,受miR-275调控的Vg-2蛋白为结构不稳定的亲水性酸蛋白,具有良好的抗原性与免疫源性。

微小扇头蜱P0基因的克隆及其编码蛋白的生物信息学分析

为探究微小扇头蜱P0基因序列特征,预测P0蛋白的理化性质和二、三级结构,筛选出P0蛋白的B、T优势抗原表位,本研究克隆了微小扇头蜱P0基因,运用Clustal X软件分析P0基因序列特征,用在线软件EXPASY、PRABI和SWISS-MODEL预测P0蛋白的理化性质和二、三级结构,用在线软件ABCpred Prediction、Scratch、IEDB和NetCTL筛选P0蛋白的B、T优势抗原表位。试验结果显示:微小扇头蜱P0基因全长957 bp,碱基A含量为24.0%,T含量为20.3%,G含量为27.5%,C含量为28.2%,A+T含量为44.3%,G+C含量为55.7%,共编码318个氨基酸;P0蛋白分子量为34 ku,理论等电点(pI)为5.86,平均亲水系数为-0.153,不稳定指数为38.15;P0蛋白的二级结构含163个α螺旋(占比51.25%),130个无规卷曲(占比40.88%),25个延伸链(占比7.86%),其中以α螺旋为主要结构;P0蛋白的三级结构以α螺旋的含量最高,该蛋白的全局模型质量评估(global model quality estimation, GMQE)、定性模型能量分析(qualitative model energy analysis, QMEAN)值分别为0.49和0.52±0.05,无信号肽和跨膜结构域,但存在40个磷酸化位点和1个糖基化位点;P0蛋白有13个B淋巴细胞优势抗原表位和6个T淋巴细胞优势抗原表位。综上所述,微小扇头蜱P0基因序列呈GC偏好,P0蛋白是以α螺旋为主要结构成分的亲水性酸蛋白,具有B、T淋巴细胞优势抗原表位,是今后研制防控微小扇头蜱疫苗的理想靶标。

非真空坩埚下降法生长CsI(Tl)晶体的闪烁性能

研究了用非真空铂坩埚下降法生长的CsI(Tl)晶体的在紫外和γ射线激发下的光致发光和光衰减特征,探索了CsI(Tl)晶体的发光强度和发光不均匀性与Tl离子含量和分布之间的关系以及改善晶体发光均匀性的措施。并对CsI(Tl)晶体在γ射线辐照下光输出随积分时间和辐照剂量的变化做了分析和讨论。实验表明,用这种方法所生长的CsI(Tl)晶体的发射波长、衰减时间和辐照硬度与其他方法生长的同类晶体相同。

浅析新疆高校少数民族大学生责任感教育

在界定少数民族大学生的责任感基础上,概括了责任感的内容,分析了加强新疆高校少数民族大学生责任感教育的意义：少数民族大学生是新疆现代化建设的主力军,加强他们的责任感教育对于我区少数民族地区优秀人才的培养,对民族地区的经济、文化等方面的发展都具有重要的现实意义。

稀土对α-Al_2O_3/Al基复合材料组织与性能的影响

采用稀土固态混合法和稀土液相包裹法制备含稀土α-Al2O3/Al基复合材料,研究了稀土元素加入方式和稀土含量对α-Al2O3/Al基复合材料组织和性能的影响。结果表明,与固态混合法相比,液相包裹法制备的Al基复合材料具有较高的硬度和耐磨性,添加适量的稀土Ce对α-Al2O3/Al基复合材料组织性能起到较好的改善作用。

浅谈新疆少数民族大学生的责任感的特点

本文根据当代新疆少数民族大学生责任感的实际情况,通过作者的观察和了解,对新疆少数民族大学生的责任感的特点进行了分析、归纳和总结。本文从新疆少数民族大学生的责任感值得肯定的方面和存在的问题两个大的方面进行了阐述。

宁波至武汉货运中通道建设必要性分析

目前,宁波至武汉货运通道分为南北两个通道,北通道合武铁路货运功能不足,经宣杭—芜铜铁路运输效率低,而南通道衢九铁路货运功能弱,沪昆铁路金华至衢州段能力无法满足运输需求。基于此,文章针对既有通道存在的问题,提出构建新通道——宁波至武汉货运中通道。根据通道内主要货物运输径路比较分析,合理确定通道分工,进而对区域内通道货运量进行OD分配预测及新通道货运量预测,并论证了建设武汉至宁波货运中通道的必要性。

常州至泰州铁路功能定位研究

首先根据本项目所在区域铁路网分析,通过主要运输径路比较合理界定区域内相关铁路客运分工及本项目吸引范围,进行区域铁路OD分配预测确定本项目铁路转移运量;再分析项目吸引范围内公路、民航转移运量及诱增运量,预测本项目客运量;最后综合项目吸引范围、客运分工、运量预测、客流构成分析研究本项目功能定位,是一条以区域城际为主,兼顾路网中长途客流的高标准铁路。

湖南省怀化市鸡蛔虫流行情况调查及其遗传多样性与种系发育关系研究

为调查湖南省怀化市鸡蛔虫的流行情况,探究其遗传多样性,阐述其种系发育关系,试验以采自湖南省怀化市不同地区的430份鸡粪便,用饱和盐水漂浮法检测虫卵,利用IBM SPSS Statistics 22软件统计、分析数据,并用χ^(2)法检验各地区、各类型鸡感染鸡蛔虫的差异性;PCR扩增其cox1与nad4基因的部分序列并测序;运用Clustal X、DNAStar软件分析基因的碱基组成与遗传多样性;运用Clustal X、PhyML 3.0软件分析鸡蛔虫的种系发育关系。结果表明:湖南省怀化市鸡蛔虫的总感染率为56.98%,其中圈养鸡的感染率为9.07%,放养鸡的感染率为47.91%,各地区、各类型鸡对鸡蛔虫的感染存在一定程度的差异;鸡蛔虫cox1基因序列的长度为953 bp,A、T、G、C碱基含量分别为19.0%~19.3%、45.9%~46.5%、23.0%~23.2%、11.3%~12.0%,A+T及G+C含量分别为64.9%~65.8%和34.3%~35.2%,种内差异为0~2.1%,种间差异为13.12%~14.48%;nad4基因序列的长度为876 bp,A、T、G、C碱基含量分别为19.1%~19.4%、52.4%~52.9%、19.9%~20.2%、7.9%~8.3%,A+T及G+C含量分别为71.5%~72.3%和27.8%~28.5%,种内差异为0~2.0%,种间差异为26.37%~27.40%;来自于湖南省怀化市的鸡蛔虫均处于发育树的一个分支上。说明湖南省怀化市鸡蛔虫的流行情况较严重,其cox1、nad4基因序列均呈AT偏好,均具有种内差异小而种间差异大的特征,是一类良好的遗传标记,且其个体之间虽存在一定程度的基因变异和遗传多样性,但具有较近的亲缘关系。

语文教学中的读背能力

语文教育的主要模式是在交际过程中训练学生理解、运用语言的能力。这就意味着语文教育的本质属性是教师指导下的学生言语实践，实现这种实践最重要的手段是培养学生的读背能力。

永州地区犬球虫的感染情况调查、虫种鉴定及种系发育关系研究

为了了解永州地区犬球虫的感染情况,确定优势虫种,并探究不同球虫虫种之间的种系发育关系,试验利用饱和重铬酸钾溶液漂浮法对采自永州地区的362份犬粪便进行虫卵检测,通过宏基因组测序技术鉴定虫种,PCR扩增球虫的18S r RNA、ITS-1基因,经测序、比对确定永州地区流行的优势虫种,并对其种系发育关系进行分析。结果表明:有124份犬粪便为阳性,总体感染率为34.25%,其中宠物犬的感染率为24.31%,流浪犬的感染率为44.20%;在永州地区有犬等孢球虫与俄亥俄等孢球虫流行,其中犬等孢球虫33株(占比26.61%),俄亥俄等孢球虫91株(占比73.39%);犬等孢球虫18S r RNA、ITS-1基因序列的长度分别为738 bp与1000 bp,俄亥俄等孢球虫18S r RNA、ITS-1基因序列的长度分别为1051 bp和398 bp。两种犬球虫18S r RNA、ITS-1基因序列的相似性分别为98.53%~98.76%和99.58%~99.72%。此外,在基于18S r RNA、ITS-1基因序列所组建的2个种系发育树中,犬等孢球虫与俄亥俄等孢球虫均处于每个种系发育树的同一分支上。说明在永州地区犬球虫的感染率较高,俄亥俄等孢球虫为该地区的优势虫种,且犬等孢球虫与俄亥俄等孢球虫之间存在较近的亲缘关系。

陕西省榆林地区犬弓首蛔虫的流行情况调查及其遗传多样性与种系发育关系分析

为了调查陕西省榆林地区犬弓首蛔虫的流行情况,并研究其基因变异、遗传多样性及种系发育关系,试验采用饱和盐水漂浮法对采自该地区的402份犬粪便进行虫卵检查,利用IBM SPSS Statistics 22软件对虫卵检测数据进行统计和分析,并采用χ^(2)检验分析各地区、各类型犬感染犬弓首蛔虫的差异性;PCR扩增犬弓首蛔虫的cox1、18S rRNA基因序列并测序;运用Clustal X与DNAStar软件分析2个基因的碱基组成与遗传多样性;运用Clustal X及PhyML 3.0软件分析犬弓首蛔虫的种系发育关系。结果表明:陕西省榆林地区犬对弓首蛔虫的总感染率为20.65%,其中宠物犬的感染率为8.42%,而流浪犬的感染率为33.00%,各地区、各类型犬感染犬弓首蛔虫的情况存在一定差异;cox1基因序列长度为1044 bp,A+T含量为61.5%~62.2%,G+C含量为37.8%~38.5%,种内差异为0~1.3%,种间差异为9.87%~14.37%;18S rRNA基因序列长度为598 bp,A+T含量为50.0%~50.5%,G+C含量为49.5%~50.0%,种内差异为0~1.4%,种间差异为0.33%~6.68%。在2个种系发育树中,犬弓首蛔虫均互相掺杂在一起共同形成每个种系发育树的一个分支。说明犬弓首蛔虫在榆林地区的流行情况较为严重,各个体之间虽存在较低程度的基因变异和遗传多样性,但具有较近的亲缘关系。

不同地区褐黄血蜱的基因变异及遗传进化分析

为探究不同区域褐黄血蜱的基因变异情况及其遗传进化关系,试验以采集自湖南、河南省的20只褐黄血蜱为研究对象,通过PCR扩增其内转录间隔区Ⅱ(ITS-2)和烟酰胺脱氢酶亚基Ⅰ(nad1)基因序列,并对所获序列进行基因变异分析;在所获ITS-2和nad1基因序列的基础上,对不同地区褐黄血蜱的遗传进化关系进行分析,并利用ITS-2和nad1基因序列分别构建褐黄血蜱的系统进化树。结果显示,褐黄血蜱ITS-2基因序列长度均为1160 bp,nad1基因序列长度均为285 bp;两省褐黄血蜱ITS-2及nad1基因的种内差异分别为0~1.9%和0~0.4%;湖南省褐黄血蜱的种内差异分别为0~1.4%和0~0.4%,而河南省的种内差异分别为0~1.2%和0~0.4%;两省褐黄血蜱ITS-2及nad1基因的种间差异分别为37.0%~52.0%和13.6%~24.8%。系统进化树结果显示,所有来自于两省的褐黄血蜱共处于同一分支上。结果表明,来自于两省的褐黄血蜱之间均存在基因变异的现象,但湖南省褐黄血蜱的基因变异程度和遗传多样性均高于河南省;两省褐黄血蜱之间的亲缘关系较近,暗示两省褐黄血蜱之间有基因交流,未出现遗传分化。

Sb2O3@SiO2颗粒制备与热解及阻燃性能

以超声场醇盐水解法制备出微米级Sb2O3粒子,再通过溶胶-凝胶法获得复合阻燃剂Sb2O3@SiO2颗粒,并对该复合颗粒的结构与形貌进行表征。结果表明:制得的超微Sb2O3颗粒平均粒径为1.17μm,晶体类型为斜方晶型,颗粒的结晶度高、晶粒度大;同时较佳的硅包覆Sb2O3颗粒构建条件为:TEOS/Sb2O3摩尔比为3/3、温度为30℃、氨水浓度为0.75mol/L、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)/正硅酸四乙酯(TEOS)摩尔比为0.8,此时所得Sb2O3@SiO2为介孔结构,分散性及热稳定性优异。阻燃实验表明:复合颗粒在聚合物基体中分散均匀、结构稳定,复合阻燃效果中Sb2O3用量减少75%。

湖南和河南两省来源的褐黄血蜱遗传多样性及遗传进化关系分析

为了探究湖南和河南两省来源的褐黄血蜱遗传多样性及遗传进化关系,试验采用PCR方法扩增来自于湖南、河南两省的20只褐黄血蜱的核糖体ITS-1及线粒体cox1基因序列,通过DNAStar、MegAlign、ClustalX、PhyML 3.0及MEGA 5.0软件分析其遗传多样性及遗传进化关系。结果表明:褐黄血蜱ITS-1和cox1基因序列的长度分别为1500 bp和850 bp,经校准、对齐后的长度分别为1302 bp和800 bp;来自于湖南省褐黄血蜱ITS-1及cox1基因序列的种内差异分别为0~1.3%、0~0.4%;来自于河南省褐黄血蜱ITS-1、cox1基因序列的种内差异分别为0.1%~1.0%、0~0.1%,两省褐黄血蜱ITS-1、cox1基因序列的种内差异分别为0~1.3%、0~0.4%,种间差异分别为50.66%~52.77%、2.5%~14.3%;ITS-1基因序列的A+T和G+C含量分别为46.1%~46.3%、53.7%~53.9%;cox1基因序列的A+T和G+C含量分别为60.6%~62.6%、37.4%~39.4%;在构建的2个遗传进化树中,来自于湖南与河南两省的褐黄血蜱均处于一个分支上,两者亲缘关系较近。说明尽管来自于两省的褐黄血蜱之间均存在遗传变异现象,但亲缘关系较近,未出现遗传分化。

杜仲叶水提物对湘西土鸡生长发育及免疫功能的影响

为探究杜仲叶水提物对湘西土鸡生长发育及其免疫功能的影响,试验将300只湘西土杂鸡随机分为5组,每组5个重复,每个重复12只鸡,将杜仲叶水提物分别按照0.05%、0.1%、0.15%、0.2%的比例分别添加到试验组日粮中,试验共42 d,按每21 d为1个试验周期对湘西土鸡进行免疫器官称重和免疫蛋白含量测定,以明确杜仲叶水提物对湘西土鸡生长发育及免疫功能的影响。试验结果表明,与对照组(V)相比,添加0.15%处理组的土杂鸡平均日增重与对照组相比显著提高13.14%(P<0.05),料重比显著降低2.97%(P<0.05);处理组土杂鸡的法氏囊和胸腺指标伴随杜仲叶提取物投放量的升高表现为先升高再降低(P<0.05),脾脏指标无显著差异(P>0.05),0.1%的杜仲叶水提物对法氏囊指标影响最大((P<0.05)),而0.15%的杜仲水提物对胸腺指标的影响最大(P<0.05)。(3)不同处理组土杂鸡血清中的IgA、IgM没有明显变化(P>0.05)。第21天0.15%处理组的土杂鸡血清IgG浓度与对照组相比显著上升,0.05%和0.1%处理组土杂鸡的IgG浓度次之(P<0.05);但在第42天时,0.05%和0.1%处理组土杂鸡血清中IgG浓度相比对照组均有所升高,但无显著差异(P>0.05),0.15%处理组的土杂鸡血清中IgG达到峰值(P<0.05)。添加0.20%处理组土杂鸡血清中IgG浓度在整个试验周期表现出浓度下降的现象(P<0.05)。此试验结果说明,0.15%杜仲叶水提物能促进湘西土鸡的生长发育,并能提高其免疫功能。

湘西地区吕氏泰勒虫的单倍型多样性及种系发育关系分析

为探究湘西地区吕氏泰勒虫的单倍型多样性及其种系发育关系,以采自于湘西地区的16株羊源吕氏泰勒虫为研究对象,PCR扩增其核糖体18S rRNA、线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因序列,并分析其单倍型多态性及种系发育关系。结果表明,湘西地区吕氏泰勒虫核糖体18S rRNA基因序列的长度为384 bp,含9个变异位点、7个单倍型(A1—A7),单倍型多样性Hd为0.775;cox1基因序列的长度为1 092 bp,存在2个变异位点、4个单倍型(B1—B4),单倍型多样性Hd为0.625;在18S rRNA+cox1重组的基因序列中,共含有11个变异位点、10个单倍型(C1—C10),单倍型多样性Hd为0.925;其中,A1、A4、B1、B3、B4、C1、C8与C9均为古老单倍型。系统发育分析结果显示,供试的16株羊源吕氏泰勒虫均处于系统发育树的同一分支上。这说明来自于湘西地区的16株羊源吕氏泰勒虫之间尽管存在一定程度的基因变异现象和单倍型多样性,但它们之间存在共同古老的单倍型,表明其个体之间和单倍型之间均具有较近的亲缘关系,未出现遗传分化。

褐黄血蜱雌蜱不同消化阶段中肠蛋白组学分析

本研究旨在探明4个时间段褐黄血蜱(采自刺猬体表)中肠蛋白质成分,揭示参与血餐消化的蛋白种类及其含量变化规律。采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)对采集于刺猬体表的4个时间段褐黄血蜱的中肠蛋白组成分进行检测。基于该蜱的唾液、中肠转录组翻译文库及Uniprot数据库,利用软件Mascot 2.2对所获肽段及蛋白质进行鉴定。结果显示:在褐黄血蜱中肠蛋白提取液中共检测出特异性肽段3046条,鉴定303种蛋白,其中271种为高可信蛋白;在所有的高可信蛋白中,23种含量较为丰富,125种在后期消化阶段(第2至第4阶段)的含量为0,123种的含量发生不同程度的变化(24种蛋白的含量变化明显,其中12种含量上升明显,12种含量下降明显)。确定148种高可信蛋白来自于刺猬血清,推断24种可信蛋白可能参与蜱虫对血餐的消化。

湖南湘西地区鸡蛔虫遗传多样性及种系发育关系研究

为研究湖南省湘西地区鸡蛔虫的遗传多样性及种系发育关系,试验以采集于湖南省湘西自治州20条鸡蛔虫为研究对象,采用PCR扩增其线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅲ(Cytochrome c oxidase subunit Ⅲ,cox3)和核糖体18S rRNA的部分序列。结果显示:PCR扩增获得的鸡蛔虫cox3、18S rRNA基因序列的长度分别为399 bp、637 bp,种内差异分别为0~1.5%、0~1.6%,种间差异分别为13.0%~40.1%、5.18%~61.38%;构建了基于cox3、18S rRNA基因序列的种系发育树,来自于湖南省湘西地区的鸡蛔虫均处于发育树的同一分支上。研究表明来自于湖南湘西地区的鸡蛔虫间尽管存在一定程度的基因变异和遗传多样性,但它们之间的亲缘关系较近。

湖南省怀化地区白纹伊蚊核糖体18S rRNA和线粒体cox 1基因的序列测定及分析

为探究湖南省怀化地区白纹伊蚊的基因变异、遗传多样性及其遗传进化关系,本试验以收集于怀化地区的30只白纹伊蚊为研究对象,利用PCR技术扩增其核糖体18S rRNA及细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因序列,并对其基因变异、遗传多样性及遗传进化关系进行分析。结果显示,所获全部样品的18S rRNA和cox 1基因序列长度均为489和1004 bp;基于18S rRNA基因序列,怀化地区白纹伊蚊的种内差异为0~2.9%,种间差异为28.74%~61.46%;基于cox 1基因序列,怀化地区白纹伊蚊的种内差异为0~0.2%,种间差异为6.08%~12.65%。基于18S rRNA、cox 1基因序列所构建的进化树发现,来自于怀化市的白纹伊蚊全部位于同一分支上。结果表明,怀化地区白纹伊蚊之间存在一定程度的基因变异和遗传多样性,但它们之间的亲缘关系较近,且其18S rRNA、cox 1基因序列的种内差异小、种间差异大,可作为白纹伊蚊鉴定的理想遗传标记。