4835株尿路感染的病原菌分布特征及耐药性分析

目的通过对尿路感染病原菌分布及药敏的分析,总结尿路感染的特点与耐药变化。方法收集武汉大学人民医院2020年1月—2022年12月的尿培养标本分离的病原菌4853株,经Bruker质谱仪鉴定细菌类别和Phoenix 100进行药敏,用WHONET 5.6软件进行抗菌药物敏感性分析。结果尿路感染的主要病原菌是革兰阴性菌(占64.2%),其中前3位的为大肠埃希菌(占39.0%)、肺炎克雷伯菌(占10.0%)、铜绿假单胞菌(占3.8%);革兰阳性菌占比28.5%,主要为屎肠球菌(占12.7%)和粪肠球菌(占9.1%);革兰阴性菌对黏菌素、亚胺培南、美罗培南、替加环素、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦的敏感率较高;革兰阳性菌对糖肽类抗菌药物如万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁的敏感率较高,一般可达90.0%以上。结论细菌对抗菌药物的耐药性日益严重,及时总结分析尿路感染的病原菌分布及耐药性,对于控制耐药菌株传播、指导临床合理用药具有十分重要的意义。

深部真菌医院感染的临床调查与耐药现状研究

目的 了解深部真菌医院感染的临床状况、病原菌分类、危险因素及耐药现状。方法 对186例深部真菌医院感染的病案进行了资料统计,并按卫生部《医院感染诊断标准》进行分析。结果 深部真菌感染率为7.8％,其中以白色假丝酵母菌为主,占53.2％,热带假丝酵母菌次之,为12.9％;医院感染危险因素为严重的相关基础疾病、年龄老龄化、住院日长、皮质激素和免疫抑制剂的应用,各种侵入性诊疗技术及广谱抗生素的大量使用等;深部真菌对两性霉素B（AMB）、氟康唑（FCZ）、制霉菌素（NYS）与5-氟胞嘧啶（5-FC）的敏感率均较高,分别为98.9％、96.7％、96.7％和91.4％;但对酮康唑（KET）耐药率已达31.7％,咪康唑（MIZ）、益康唑（ECO）耐药率和中介率均达10％或以上。结论 深部真菌医院感染及耐药性呈上升趋势,特别是唑类抗真菌药已呈明显耐药,采用有效的防治措施刻不容缓。

奥硝唑治疗口腔厌氧菌感染的临床与实验研究

目的 了解口腔厌氧菌感染的菌群分布及奥硝唑治疗口腔厌氧菌感染的疗效。方法 采用双盲随机方法选择 6 0例口腔厌氧菌感染患者 ,其中受试组 (奥硝唑 ) 30例和对照组 (替硝唑 ) 30例进行治疗 ,在治疗前后作厌氧菌培养 ,观察临床疗效和厌氧菌清除率 ,并进行比较。结果 口腔感染厌氧菌与口腔正常厌氧菌种群一致 ,奥硝唑总有效率 83.3% ,细菌清除率 91.7% ;替硝唑总有效率 73.3% ,细菌清除率 88.4 % ,二者间差异无显著性(P>0 .0 5 )。结论 奥硝唑用以治疗口腔厌氧菌感染疗效显著 ,口腔厌氧菌培养应注意标本采样技术规范化。

盐酸左氧氟沙星对眼部感染细菌的体外抗菌活性研究

目的 比较盐酸左氧氟沙星、氧氟沙星和环丙沙星对临床分离的 15 0株眼部感染细菌的体外抗菌活性 ,为眼部感染性疾病的治疗提供新一代喹诺酮药物的药敏信息。方法 用双倍琼脂稀释法测定并比较 3种喹诺酮药物的最低抑菌浓度 ,计算出平均敏感率 ,并与 K- B法平均敏感率对照。结果 盐酸左氧氟沙星对眼部感染的金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌等的 MIC50 值均低于氧氟沙星、环丙沙星 ,对铜绿假单胞菌活性稍弱于环丙沙星。结论 盐酸左氧氟沙星为一个广谱抗生素 。

VITEK-AMS CC4仪对凝固酶阴性葡萄球菌的鉴定及药敏分析

目的研究凝固酶阴性葡萄球菌（ＣＮＳ）的分布及耐药性状况，指导临床合理用药。方法应用ＶＩＩＥＫ ＡＭＳ全自动微生物分析系统对本院感染标本中分离出的１０３株ＣＮＳ进行鉴定及β－内酰胺酶测试，并分别测定了耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（ＭＲＣＮＳ）和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（ＭＳＣＮＳ）对青霉素等１０种抗生素的耐药率。结果 １０３株 ＣＮＳ中，表皮葡萄球菌的分离率居首位，为 ５４． ４％，其次为耳葡萄球菌和溶血葡萄球菌，ＭＲＣＮＳ占 ５２． ４％， ＭＲＣＮＳ和 ＭＳＣＮＳ产β－内酰胺酶的百分率无明显差异。 ＭＲＣＮＳ和 ＭＳＣＮＳ皆对万古霉素敏感。此外，ＭＲＣＮＳ对１０种抗生素呈多重耐药现象，耐药率介于５２％～１００％。结论ＣＮＳ可引起尿道、伤口、血液等有关感染，体外药敏试验显示ＣＮＳ大多呈多重耐药，万古霉素是治疗ＭＲＣＮＳ感染的首选抗生素，ＭＲＣＮＳ的耐药性应引起广泛关注。

二甲亚砜和维甲酸对人卵巢癌细胞COC1的生长抑制和超微结构的影响

本实验以人卵巢癌细胞株COC1为模型，观察了诱导分化剂二甲亚砜（DMS0）与维甲酸（RA）对该细胞生长增殖及超微结构的影响。结果表明，DMSO和RA可明显抑制COC1细胞的生长，并改变其恶性细胞的结构特征，使之向正常细胞的方向逆转，从而提示DMSO和RA对人卵巢癌细胞有一定的诱导分化作用。

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的检测及基因分型研究

目的 对产ESBL肺炎克雷伯菌的耐药现状进行分析研究 ,对耐药株进行基因分型 ,监测耐药株的流行状况。方法 对临床分离的 195株肺炎克雷伯菌进行药敏试验和ESBL检测 ,对产ESBL菌株以随机扩增多态性DNA分型法 (RAPD)进行基因分型。结果 产ESBL肺炎克雷伯菌占 2 3% ,其中 5 1%来源于重症监护病房 (ICU)。ESBL阳性细菌对 12种抗生素的耐药性远远高于ESBL阴性菌。 2 0株产ESBL肺炎克雷伯菌分为 11型。结论 本院脑外SICU、呼吸科RICU存在产ES BL肺炎克雷伯菌的流行 ,合理使用抗生素 ,加强重点病区的消毒隔离措施 ,是控制医院感染流行的重要措施。RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速。

下呼吸道肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的了解下呼吸道标本中肺炎克雷伯菌耐药特点及产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的检出率、基因型特点。方法收集下呼吸道标本中分离出的肺炎克雷伯菌,微量稀释法检测细菌药敏情况,确证试验检测产ESBLs菌,并使用对CTX-M型ESBLs基因特异的引物,PCR扩增产酶菌的ESBLs基因。结果下呼吸道产ESBLs肺炎克雷伯菌占25%。ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ES-BLs阴性菌。35株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,16株携带CTX-M型基因。结论该院下呼吸道标本肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率、耐药性高,CTX-M型基因的出现应引起临床医生的足够重视。

多重耐药鲍曼不动杆菌体外联合用药抗菌活性的研究

目的评价体外联合用药对多重耐药的鲍曼不动杆菌（MDRAB）的杀茵效果以及外排泵抑制剂对抗生素敏感性的恢复作用。方法使用肉汤倍比稀释法分别检测头孢哌酮／舒巴坦（SCF）、米诺环素（MH）、SCF与MH联合用药、碳酰氰间氯苯腙（CCCP）与MH联合用药及CCCP与SCP联合用药对临床分离的24株MDIKAB最低抑菌浓度（MIC），并计算抑菌浓度指数（FIC）。结果SCF、MH单用MIC与联合使用MIC比较。单独用药均明显高于联合用药，差异具有统计学意义（t=2．19，P〈0．01；t=1．68，P〈0．05；C=2．68，P〈0．01）oSCF和MH分别与CCCP联用时的MIC明显低于SCF与MH联用时的MIC，差异具有统计学意义（c=1．76，P〈O．01；t=2．20，P〈0．01）。SCF与MH联合应用FIC指数O．o~0．5占50．00％，O．5～1．0占45．83％，1．0—2．0占4．17％。结论SCF与MH联合用药具有协同和相加作用；抗生素与外排泵抑制剂联用可降低抗生素MIC及用量，恢复其敏感性。

产质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌流行基因型及传播机制的研究

目的调查临床分离肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶的流行基因型和传播机制,以及时发现并监控这些高危菌群。方法收集临床分离的肺炎克雷伯菌,对头孢西丁耐药株采用酶提取物改良三维试验筛选高产AmpC酶株,采用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序分析质粒介导AmpC酶的流行基因型,并通过质粒接合实验、肠杆菌科基因组内重复一致序列-PCR(ERIC-PCR)探讨流行基因型的传播机制。结果16株高产AmpC酶肺炎克雷伯菌中,DHA组10株,EBC组6株,未发现MOX组、CIT组、ACC组和FOX组质粒AmpC基因。对部分PCR产物进行序列分析,证实为DHA-1型和ACT-1样质粒AmpC基因。16株产AmpC酶菌株中10株质粒接合实验成功,DNA同源性分析显示16株质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌分属于14种基因型。结论在临床分离肺炎克雷伯菌中发现DHA和EBC组质粒AmpC酶,其传播途径以水平传播为主导,产酶菌克隆垂直传播居次要地位,未发生同一克隆株的流行。

产新型广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的筛选和耐药性研究

目的研究我院产新型β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌(KP)的耐药现状,为临床用药提供合理依据。方法614株临床分离的无重复肺炎克雷伯菌,采用NCCLS表型筛选和确证试验检测ESBLs,酶提取物改良三维试验检测AmpC酶株,纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶;KB纸片法检测产酶株对11种抗菌药的体外抗菌活性;琼脂二倍稀释法测定9种抗生素对同时产AmpC酶和ESBLs菌株的最低抑菌浓度(MIC)。结果单产ESBLs的检出率为31.8%,单产AmpC酶的检出率为2.6%,同时产ESBLs和AmpC酶的检出率为1.1%,未检出产金属β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌。产ESBLs菌对多种抗生素的耐药性较非产酶株显著升高;产AmpC酶菌对含酶抑制剂抗生素耐药率比产ESBLs菌高;同时产ESBLs和AmpC酶株对多种抗生素耐药;三种酶型均未见亚胺培南耐药株。结论亚胺培南可作为治疗产ES-BLs和AmpC酶肺炎克雷伯菌引起重症感染的首选药物;但产新型β-内酰胺酶菌株的多重耐药和交叉耐药现象十分严重,应高度重视产酶株的监测与控制。

老年产ESBLs肺炎克雷伯菌感染耐药现状及基因型分析

目的了解产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌在老年患者中的感染情况及耐药基因型特点。方法对2002年1月～2003年12月651份老年患者的各类标本中的肺炎克雷伯菌进行分离鉴定,微量稀释法检测细菌药敏情况,确证试验检测产ESBLs菌,并分别使用对TEM型、SHV型和CTXM型基因特异的引物,聚合酶链反应(PCR)扩增产酶菌的ESBLs基因。结果共分离出123株肺炎克雷伯菌,其中产ESBLs的占25.2%。ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌。31株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,TEM型基因占48.4%,CTXM型基因占35.5%,SHV型基因占29%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌在老年患者中的感染率较高,耐药性较强,其基因型分布呈多样性,合理使用抗生素,加强对特定基因的监控,是控制其医院感染流行的重要措施。

二甲亚砜与维甲酸对人卵巢癌细胞COC1的生长抑制及转化生长因子β_1表达的影响

本实验以人卵巢癌细胞株（ＣＯＣ１）为模型，观察诱导分化剂二甲亚砜（ＤＭＳＯ）与维甲酸（ＲＡ）对该细胞生长增殖、ＤＮＡ合成和转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在细胞内表达的影响。结果显示：ＤＭＳＯ与ＲＡ对人卵巢细胞ＣＯＣ１生长有明显的抑制作用，生长曲线表明作用５天后其生长抑制率分别为６２．７％和４２．１％；３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入实验说明ＤＭＳＯ组与ＲＡ组的单位时间计数率（ＣＰＭ）明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。用药３天后百分掺入抑制率分别为６０．４％与３７．９％，表明ＤＭＳＯ与ＲＡ抑制ＣＯＣ１细胞的ＤＮＡ合成；免疫细胞化学反应表明，ＤＭＳＯ或ＲＡ处理５天后，对照组细胞ＴＧＦβ１表达为阳性，定位于胞浆，而处理组细胞ＴＧＦβ１呈阴性或弱阳性反应。以上结果提示ＤＭＳＯ和ＲＡ对人卵巢癌细胞有一定的诱导分化作用。

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌医院感染肺炎临床危险因素的病例对照研究

目的探讨产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌医院感染肺炎的临床危险因素。方法用SPSS11.5软件进行统计,对101例肺炎克雷伯菌医院感染肺炎的临床危险因素进行病例对照研究。结果单因素分析发现住院时间大于20天、入住重症监护病房、气管插管或切开、留置导管、机械通气、头孢噻肟的使用是产ESBLs肺炎克雷伯菌医院感染肺炎的主要危险因素。多因素非条件logistic回归分析表明,头孢噻肟的使用是产ESBLs肺炎克雷伯菌医院感染肺炎的独立危险因素。结论合理使用头孢噻肟、采用替换性抗生素治疗策略是防止产ESBLs肺炎克雷伯菌感染肺炎流行的重要措施。

呼吸道嗜血杆菌的分离及耐药性研究

目的 提高呼吸道嗜血杆菌的分离率并了解其耐药性现状。方法 对 15 5 9份痰及咽拭样本进行嗜血杆菌分离、鉴定 ,用头孢硝噻吩法测试 β 内酰胺酶的产生率 ,并用琼脂扩散法进行药敏试验。 结果 共检出嗜血杆菌 2 15株 ,检出率 13.7%。氨苄西林、环丙沙星、复方新诺明、氯霉素等对嗜血杆菌的耐药率均较高 ,为 2 5 .5 %～ 5 6 .9%。而大环内酯类药物阿奇霉素和二代头孢对嗜血杆菌耐药率则较低。结论 在嗜血杆菌的分离中 ,痰样本的采集质量、培养基的营养成分、对杂菌的抑制及认真识别对于提高检出率非常重要。嗜血杆菌的耐药率有上升的趋势。临床微生物室应对此类细菌的分离及药敏试验采用标准化操作 ,加强监控 。

反向膜杂交技术快速检测质粒介导喹诺酮耐药基因qnr方法的建立

目的结合PCR与反向膜杂交技术，探讨建立快速筛查细菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因qnr的方法。方法将qnr各亚型的特异性探针加尾后固定于尼龙膜上，用标记生物素的各亚型引物分别扩增经提取的细菌DNA，与固定在膜上的探针杂交。结果25株qnr阳性菌株中，有6株qnrA阳性菌株，9株qnrB阳性菌株，10株qnrS阳性菌株。所有阳性菌株均能通过反向膜杂交检测到相应的qnr基因的亚型，且可以在同一张膜上进行检测。结论该方法能够快速、准确地检测出临床病原微生物中质粒介导的喹诺酮类耐药基因qnr，这对于指导临床及时合理用药，采取措施防止耐药菌的传播均有重要意义。

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的随机扩增多态性DNA分型研究

目的 对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药现状进行分析研究,对耐药株进行基因分型流行病学研究。方法 对临床分离的195株肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测并采用微量稀释法测定MIC值,判断细菌的耐药性;对产ESBLs菌株以随机扩增多态性DNA分型法（RAPD）进行基因分型。结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌占23％,其中51％来源于重症监护病房（ICU）;ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌;20株产ESBLs肺炎克雷伯菌分为11型。结论 本院神经外科SICU、呼吸科RICU存在产ESBLs肺炎克雷伯菌的流行;合理使用抗生素,加强重点病区的消毒隔离措施,是控制医院感染流行的重要措施;RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速、可靠的基因分型方法。