MALDI-TOF MS在临床微生物鉴定中的常见问题及对策

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDITOF MS)是目前临床实验室中应用最为广泛的质谱技术之一。然而,MALDI-TOF MS微生物鉴定的上机前准备、检测分析及结果判读等方面均易出现各种问题,严重时会影响鉴定结果。经文献查阅及实验室长期经验总结、验证,该文对目前MALDITOF MS鉴定中存在的问题进行分析,并提出相应对策。

MALDI-TOF MS微生物鉴定的室内质量控制体系建立

基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDITOF MS)具有快速、准确、低成本、操作简单的特点,是临床微生物鉴定的首选技术之一。MALDI-TOF MS的准确鉴定依赖于良好的仪器状态、有效的菌株蛋白质抽提及规范的操作与结果判读原则,任一环节的失误均直接影响鉴定结果的准确性。因此,严格的室内质量控制对MALDI-TOF MS微生物鉴定至关重要。该实验室根据6年的应用经验及研究,建立了一套较为完整的MALDI-TOF MS微生物鉴定室内质量控制体系,覆盖硬件、软件及人工操作各个环节,内容包括仪器参数设置、维护与校准,菌株与试剂的准备以及谱图采集与结果判读分析,使鉴定结果异常时可迅速溯源并及时处理。

新时代乡村治理创新:动态演进、关键问题与路径选择

乡村治理现代化既是走中国式现代化道路的基础,也是在乡村振兴战略、城乡融合发展的新时代语境中动态演进并持续深化的。在社会流动进程中,城乡要素配置失衡、乡村社会共同体解体、治理机制碎片化等关键问题亟须解决。推动新发展阶段乡村社会治理创新,实施乡村振兴战略,既能恢复乡村社会的公共生态价值,也能改善城乡之间不充分不平衡发展的问题。新时代乡村治理创新要推动整体协调治理,实现村级治理范式的“嵌入性整合”,突破治理机制碎片化困境;要鼓励动态平衡发展,健全城乡要素互动的“联动性发展”机制,激活城乡融合高质量发展内生动力;要提升思想价值意识,通过“公共性赋能”强化村域自治,保障村落集体利益的多元供给,在走中国式现代化道路中保障乡村振兴战略的全面推进。

感染性腹泻患者病原菌流行趋势及耐药性分析

目的了解感染性腹泻患者常见病原菌的流行趋势及耐药性,为临床治疗提供科学依据。方法对2012年4月1日-2017年10月31日本院肠道门诊12 156例感染性腹泻患者粪便标本进行增菌及分离培养,用Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定/药敏分析系统和基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)进行菌种鉴定,凝集试验进行血清分型,K-B纸片扩散法测定6种抗菌药物敏感性。结果 12 156份标本共培养出病原菌1 218株,致病菌总检出率为10.02%,其中弧菌属7.62%(926/12 156)、气单胞菌属0.79%(96/12 156)、沙门菌属1.46%(178/12 156)、志贺菌属0.15%(18/12 156)。2012-2017年致病菌年检出率分别为9.2%、11.9%、13.4%、7.0%、11.3%和7.2%。志贺菌属检出率维持较低水平,但其对氨苄西林、复方磺胺甲噁唑存在较高耐药现象。其余病原菌除对氨苄西林耐药率较高外,对其余5种抗菌药物均保持较高的敏感性。结论本院感染性腹泻患者的病原菌主要为弧菌属,耐药性最高的为志贺菌属,整体感染呈散发态势,应加强对感染性腹泻患者病原菌及耐药性的检测。

优化差速离心法在血培养报警瓶MALDI-TOF MS细菌鉴定中的应用

目的评价用于血培养报警瓶基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorptionionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）细菌直接鉴定的前处理方法。方法建立优化差速离心法流程。收集首都医科大学附属北京同仁医院2015年10月至12月外周血培养报警标本100例（均为单一菌）,以转种培养后菌落MALDI-TOF MS鉴定为金标准,对比差速离心法优化前后、BRUKER SEPSITYPER试剂盒（简称试剂盒法）鉴定结果,评价优化差速离心法的准确率。收集2016年1月至10月外周血及体液培养报警标本516例（经革兰染色确认为细菌）,对优化差速离心法进行大样本应用研究。结果优化的差速离心法、试剂盒法及优化前的差速离心法鉴定准确率分别为97%、94%及92%,差异无统计学意义;优化的差速离心法鉴定分值〉2.0的例数则多于其他两种方法,与优化前相比差异具有统计学意义（χ~2=3.916,P=0.048）。516例样本单一菌486例,混合菌30例。优化的差速离心法鉴定准确率为92.2%（476/516）。外周血及其他体液样本鉴定准确率分别为96.5%（179/289）、86.8%（197/227）,差异有统计学意义（χ~2=16.92,P〈0.01）。单一菌鉴定准确率为97.1%（472/486）,其中革兰阳性球菌和阴性杆菌分别为96.9%、99.1%,均明显高于阳性杆菌（55.6%）,差异有统计学意义（χ~2=25.329,P〈0.01;χ~2=48.526,P〈0.01）。混合菌鉴定准确率为13.3%（4/30）。体液样本混合菌比例为11%（25/227）,显著高于外周血[1.7%（5/289）,χ~2=20.008,P〈0.01]。结论优化差速离心法鉴定率高、成本低、易操作,优于试剂盒法,对单一细菌MALDI-TOF MS血培养报警直接鉴定更具临床应用价值。

分枝杆菌液体培养MALDI-TOF MS快速直接鉴定法的建立与评价

目的建立并评价分枝杆菌液体培养基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)直接鉴定技术。方法收集2014年6月至2016年5月首都医科大学附属北京同仁医院1 466例呼吸科住院患者痰标本,进行BactecTMMGITTM960分枝杆菌快速液体培养(简称液体培养),以其中报警并经萋-尼抗酸染色确认为抗酸杆菌的105例(无重复病例)为研究对象,对比本实验室自行设计并改良的"同仁"分枝杆菌液体培养直接鉴定法(培养液经特殊前处理后直接进行MALDI-TOF MS鉴定)及传统鉴定法(培养液转种于L-J固体培养基,得到菌落后再进行MALDI-TOF MS鉴定),并通过16S rRNA基因及16S^23S rRNA基因间隔区测序验证。结果以基因测序鉴定为金标准,液体培养直接鉴定与传统鉴定法结果一致率为100%;二者鉴定至属的准确率均为100%(105/105),鉴定至种的准确率均为99.05%(104/105)。液体培养后直接鉴定与传统鉴定法MALDI-TOF MS鉴定分值≥2.000分的比例差异无统计学意义(χ~2=2.952,P=0.086)。4例分值<1.700分的菌株谱图杂峰较多而有效峰较少。结论本实验室自行设计的"同仁"分枝杆菌液体培养MALDI-TOF MS直接鉴定法鉴定结果准确,缩短了分枝杆菌培养和鉴定的时间,且可保证生物安全,对分枝杆菌感染的快速诊断和及时治疗意义重大,适用于我国各级临床实验室。

北京两家综合医院呼吸科住院患者结核分枝杆菌检出率分析

目的通过不同痰检方法，调查分析北京两家综合医院呼吸科住院诊断为非肺结核患者的MTB检出率，为综合医院肺结核病原学检测能力的提高提供依据。方法选取2014年1月至2015年6月于首都医科大学附属北京同仁医院和中国中医科学院望京医院呼吸科临床诊断为其他肺部疾病（非肺结核）的住院患者830例为研究对象。根据临未诊断分为8组：肺部感染组267例，慢性阻塞性肺疾病组143例，支气管扩张合并感染组110例，慢性支气管炎急性发作组79例，肺纤维化并发感染组74例，肺部阴影待查组66例，肺癌组62例及其他未明确诊断肺部疾病组29例。通过萋-尼染色涂片镜检法（Ziehl-Neelsenstaining，Z-N染色）、MTBMGIT960快速液体培养（BACTECTM MGITTM 960 Mycobacterial Detection System,简称“MGIT960培养法”）及Xpert MTB／RIF（简称“Xpert法”）检测MTB与利福平耐药情况，培养阳性的标本经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS）鉴定菌种，通过16S～23SrRNA基因转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）测序对3种方法鉴定结果进行确认。结果830例患者经3种方法检测，MTB总检出率为6．14％（51／830）。其中老年人（≥65岁）占MTB检出者的64．71％（33／51），有糖尿病、肿瘤等疾病的患者占80．39％（41／51）。男、女患者MTB检出率分别为5．85％（34／581）、6．83％（17／249），差异无统计学意义（χ2=0．32，P=0．553）。肺部阴影待查组MTB检出率达18．18％（12／66），明显高于肺部感染组（6．74％，18／267）（χ2=8．45，P=0．004）、慢性阻塞性肺疾病组（5．59％，8／143）（χ2=8．27，P=0．004）、支气管扩张合并感染组（4．55％，5／110）（χ2=8．79，P=0．003）、慢性支气管炎急性发作组（5．06％，4／79）（χ2=5．04，P=0．025）、肺纤维化合并感染组（2．70％，2／74）（χ2=7．65，P=0．006）及肺癌组（0．00％，0／51）（P〈0．001）；Z-N法、MGIT、960培养法、Xpert法检测MTB检出率分别为3．86％（32／830）、3．98％（33／830）和6．14％（51／830），Xpert法高于Z-N法和MGIT960培养法，差异有统计学意义（χ2=4．56，P=0．032；χ2=4．06，P=0．044）。结论综合医院临床症状及影像学表现不典型的肺部疾病患者易漏检MTB，痰涂片镜检结合Xpert技术可考虑作为综合医院门诊MTB快速筛查方法。

非体外循环与体外循环冠状动脉旁路移植术治疗对老年冠心病患者脏器损伤及Th1/Th2免疫平衡的影响

目的探讨非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCAB)与体外循环冠状动脉旁路移植术(CABG)治疗对老年冠心病患者脏器损伤及Th1/Th2免疫平衡的影响。方法将2014年11月~2016年11月于宜宾市第一人民医院就诊的老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者102例按随机数字表法分为两组,平均年龄为(73.5±5.4)岁。OPCAB组与CABG组各51例,两组性别、年龄等差异无统计学意义。对比两组治疗效果及手术并发症(指标包括桥血流量、输血量、血管搭桥数、气管插管时间、呼吸机使用时间、呼吸衰竭发生率、二次开胸率、新发心房颤动率、住院时间、死亡率、肺部感染发生率、急性肾衰发生率、脑梗死发生率)。检测患者脏器损伤的生化指标,包括肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(c Tn I)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血清肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)水平及Th1/Th2免疫平衡指标,包括干扰素γ(INF-γ)、白介素-4(IL-4)、INF-γ/IL-4水平。结果 OPCAB组桥血流量、输血量、血管搭桥数、气管插管时间、呼吸机使用时间、呼吸衰竭发生率、二次开胸率、新发心房颤动率、住院时间、死亡率、肺部感染发生率、急性肾衰发生率、脑梗死发生率均明显低于CABG组(P均<0.05)。OPCAB组在术后4 h、8 h、12 h、24 h及48 h CK-MB、c Tn I、AST、ALT、Scr及BUN水平均明显低于CABG组(P均<0.05),肺功能氧合指数(OI)明显高于CABG组(P<0.05)。不同时间点各组间INF-γ、IL-4、INF-γ/IL-4水平差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 OPCAB法与CABG法对老年冠心病患者脏器均有一定损伤,且影响机体Th1/Th2免疫平衡,但OPCAB法损伤程度小,治疗效果更佳。

民族地区乡村文化振兴:现实掣肘、发展逻辑与战略选择

乡村文化振兴作为推动乡村全面发展、满足各族群众美好生活的基础,对于民族地区经济社会高质量发展有着深远意义。现阶段,民族地区乡村文化振兴存在村落民族文化特色弱化、治理力量离散化和主体缺位、价值认同变迁等现实问题。推动乡村文化发展的核心在于发挥文化的主体性作用,依照特色产业发展与民族品牌构建、城乡文化交融与生态优化、凝聚村落内源性动力赋能发展的原则,增强民族地区乡村文化与村民之间的互动性,提升民族地区乡村文化振兴的质量。

高校绩效审计工作现状与优化路径探究

在高等教育不断发展和“双一流”学科建设背景下,各大高校越来越重视自身的高质量发展。高校绩效审计工作的深入推进,可以帮助高校切实解决教育资源使用效率不高、仪器设备重复购置、预算执行效果较差等问题,在提高高校教育资源利用率的同时,推动高校健康可持续发展。基于此,文章简单阐述绩效审计的内涵与作用,细致分析高校绩效审计工作开展现状,并从精准定位绩效审计、创新审计技术方法、健全审计评价体系以及加强审计队伍建设等方面入手,提出几条优化路径。

浅析新媒体时代的传播个人主义

美国著名新闻评论员杰弗里·罗森在他的《赤裸的人群》一书中曾经写道:'诚挚性的年代的座右铭来自德尔斐神庙:认识你自己。本真性的年代的座右铭来自心理治疗师:成为你自己。'无论时下这个让人眼花缭乱的新媒体时代是'诚挚性'的还是'本真性'的,真正懂得'自己'这个词的深层含义已经变得越发重要也越发艰难。网络媒体的繁荣,手机这一新兴媒介的迅猛发展为每一个个体都提供了发布讯息的渠道与平台。

黏滞阻尼对隔震结构减震效果的影响规律

为分析隔震层阻尼对隔震结构减震效果的影响规律,以简谐激励下的结构响应为理论基础,通过绘制单自由度结构在ATC-63推荐的地震波作用下的标准加速度反应谱和傅里叶谱,深入分析阻尼变化的情况下减震效果的影响因素。在对单自由度结构分析的基础上,利用有限元软件设计了采用黏滞阻尼隔震支座的多自由度结构,考察在隔震结构在不同的地震波作用下隔震层阻尼比变化对减震效果的影响。研究表明,阻尼对多自由度隔震结构的影响规律与单自由度是一致的,都与隔震周期和地震波的频谱特性有关;地震波傅里叶谱中出现峰值处近似于一个简谐激励,由于共振效应,对于隔震周期在激励周期附近的结构,增大阻尼比会减小加速度响应,当隔震周期大于激励周期的2^(1/2)倍以上时,由于放大效应,增加隔震层的阻尼将会导致其绝对加速度响应的增大,没有减震效果。

为基础教育说几句话

最近10多年来,我国教育事业得到了长足的发展,特别是九年义务教育的普及,高校招生的扩大,使中国受教育的人口得到快速的增加。进入新的世纪以来,国家加大了对教育的投入,在全国农村地区逐步实行免费教育。

走向市场,让航天产业成为新的经济增长点——美、欧航天产业政策借鉴

航天不仅仅代表一国的科技实力，同样也为其经济发展提供强大的助推作用，而良好的产业政策无疑在航天发展中扮演了重要的角色。最早开启航天产业化道路的美国与欧洲，都制定了一系列的政策法规，推动本国、本地区的航天技术与产业发展。这些政策法规主要包括：美国的《国家航天政策》、《零重力零税收法》、《航天现代投资法》、《NASA灵活性法案》、《商业航天法》、《商业航天发射法》、《载人航天飞行独立调查委员会法》、《欧洲航天政策决议》、欧洲共同体与欧洲空间局（ESA）签署的框架协议、ESA理事会在2005年部长级会议上所作出的决策，

内在逻辑与实践机制:公民身份视角下的互嵌式城市民族社区建设探析

互嵌式民族社区是在多民族交往交流交融关系之上建构的社会共同体,其本质是对各族成员身份区隔和社会排斥的突破。身份认同视域下互嵌式城市民族社区建设是一种整体、内源、基础的社区治理方略,目的在于建构共同的身份认知结构用以消除区隔及文化认同匮乏的问题。当前互嵌式城市民族社区建设面临着“群内交际过密化”“民族认同极化”“城市适应困境”三大阻碍,需要建构公民身份的认同模型并嵌入基层社会治理结构,发挥其社会粘合剂作用。通过公民教育加强各族成员公民角色认同,鼓励多民族成员职业身份的发展,为铸牢中华民族共同体意识创造内生动力。

老龄农户参与村集体旅游经济的行为研究——基于计划行为理论视角

探究并破解老龄农户参与村集体旅游经济的阻碍,是激发老龄化乡村活力实现乡村振兴的重要课题。文章基于计划行为理论,采用问卷调查和深入访谈的方式,依据主观规范、行为态度和感知行为控制的逻辑建立结构方程,探讨新阳村老龄农户参与村集体旅游经济行为的形成机制。研究结果发现,老龄农户的主观规范路径系数最大,行为态度次之,感知行为控制的路径系数最小。其中行为态度和主观规范对老龄农户旅游参与行为产生正向影响,感知行为控制对老龄农户旅游参与行为产生负向影响。老龄农户旅游参与行为呈现阶段性特征,随着主观规范和行为态度的影响作用加深,老龄农户逐渐转向低体力耗费的旅游参与行为,由家庭经营性收入向财产性收入转变。村集体应充分调动老龄农户旅游参与意识,积极搭建老龄农户参与旅游经济的平台,培育和提高老龄农户的技术水平和专业能力,促进老龄农户积极参与村集体旅游经济。

跨文化教育视域下非物质文化遗产保护研究

以非物质文化遗产的“教育保护”为主题,在融合访谈调查及学界已有研究的基础上挖掘“非遗保护”与“跨文化教育”之间的逻辑关系,同时结合跨文化教育理论视野中的跨文化交流、反身性构建、身份认同等分析工具,开展非物质文化遗产的跨文化教育实践研究。融合非物质文化遗产和跨文化教育的双重领域,不仅拓展了“非遗保护”的文化教育维度,还为跨文化教育视域中的非物质文化遗产研究生成新的研究路径及价值;在拓宽非物质文化遗产教育路径的同时,还有助于唤醒、加强传承人的文化参与、身份认同及社会交流,进而为非遗保护与发展营造内生动力。

传统工艺类非物质文化遗产的市场化保护

融合田野调查与学界已有研究,论文探究了传统工艺类非物质文化遗产市场化保护中市场实践经验不足,理论研究缺位的问题。基于市场化语境下分析传统工艺类“非遗”的保护,应从发挥传承人文化主体性以促进非遗传承,到保护与开发并举以保障其市场发展条件,再到依托社会公共文化服务机制“造血补血”以获取内生发展动力,进而建构一条传统工艺类非遗市场化保护与发展的可能路径。

英国文化人类学与教育的融合发展及对我国教育的启示

英国教育人类学的缘起与发展主要是由文化人类学家所推动的。英国文化人类学家对于学校教育、社会结构、社会文化与文化功能,尤其是教育系统与社会系统的互动等问题的关注,促进了英国教育人类学的奠基与发展。本文论述了20世纪以来英国文化人类学与教育的结合,着重讨论了马林诺夫斯基与拉德克利夫-布朗的结构功能论对教育问题的启示,以期对中国教育人类学的发展有所借鉴。此外,英国文化人类学研究视域下的"人种志",即"教育人种志",是本文所突出的基本研究方法,也是对我国现代教育具备启示意义的方法论原则。

城市民族互嵌式社区建设中的集体认同--对铸牢中华民族共同体意识的多元视角思考

在城市民族互嵌式社区建设中,正确理解和积极挖掘各民族成员社会生活中的集体认同要素并借此进一步增强中华民族认同,是铸牢中华民族共同体意识的重要工作。各族群众之间的相互了解与深层互动、彼此信任与高度认同,是城市民族互嵌式社区建设中集体认同的深层意涵,也是铸牢中华民族共同体意识的内在基础。现阶段需要发挥好社区的社会互动作用,大力推进各族群众在社区层面的交往交流交融;通过建设“共居、共学、共事、共乐”的城市社会环境,让各民族形成具有集体认同意义的情感结构,在文化交融中助推和谐城市民族关系的建设,从而更为根本地铸牢中华民族共同体意识。