EFNA3和ITGA9基因多态性与公猪精液品质性状的关联分析

精液品质性状是评估公猪繁殖性能的重要性状。本研究通过基因组分析,筛选出磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路中影响公猪精液品质性状的候选基因肝配蛋白A3(Ephrin A3,EFNA3)和整合素α9(Integrin Alpha 9,ITGA9)。进一步鉴定出EFNA3基因的g.94708472 G>A位点与总精子数、精子活力和精子畸形率性状显著相关;ITGA9基因的g.22284275 G>T位点与精子活力和精子畸形率性状显著相关,g.22437684 C>T位点与有效精子密度、精子活力和精子畸形率性状显著相关。ITGA9基因的2个SNPs位点连锁不紧密。EFNA3基因g.94708472G>A位点与ITGA9基因g.22284275G>T和g.22437684C>T位点存在互作关系。EFNA3基因g.94708472G>A位点与ITGA9基因g.22284275G>T和g.22437684C>T位点与公猪精液品质性状显著关联,可作为公猪精液品质选育的潜在分子标记。

Dkk2基因对雌性小鼠卵泡发育过程的功能探究

卵巢颗粒细胞的生长对哺乳动物卵泡发育至关重要,本研究旨在探究Dkk2对雌性小鼠卵泡发育的影响,并对其潜在的调控机制进行分析。运用Crispr-cas9的方法构建Dkk2基因敲除C57BL/6小鼠,通过免疫荧光、免疫组化和蛋白免疫印迹等实验探究了Dkk2基因敲除对小鼠卵泡发育的影响及其作用机制。结果显示:相比野生型小鼠,Dkk2基因敲除小鼠的产仔数和原始卵泡显著减少,卵泡闭锁显著升高;抑制Dkk2的表达会显著促进小鼠卵巢颗粒细胞凋亡,抑制细胞增殖;对8周龄Dkk2基因敲除小鼠的卵巢组织进行转录组测序发现,Dkk2可能通过Wnt信号通路调控卵巢颗粒细胞的增殖和凋亡。本研究揭示了Dkk2在小鼠卵泡发育过程中的作用,可为哺乳动物繁殖性状的遗传改良提供新的靶基因。

猪肌内脂肪前体细胞成脂分化中miRNA差异分析

miRNA在成脂分化的过程中发挥着重要的调控作用,本研究旨在探究miRNA在猪肌内脂肪(Intramuscular Fat,IMF)前体细胞成脂分化过程中的表达模式,并对其潜在的调控功能进行分析。通过SmallRNA-seq、实时荧光定量PCR、miRanda、RNAhybird等技术和软件,对猪IMF前体细胞成脂诱导分化过程中miRNA的表达模式及靶基因进行了生物信息学分析。结果显示:猪IMF前体细胞诱导4 d后出现脂滴,在诱导0 d和4 d的猪IMF前体细胞中共鉴定到617个miRNAs,其中22个miRNAs诱导4 d表达显著上调,27个miRNAs表达下调;差异miRNAs共预测到13 869个靶基因,GO分析和KEGG分析发现靶基因主要富集到细胞分泌、细胞分解代谢、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等。此外,对miR-30家族的ssc-miR-30a-5p和ssc-miR-30c-3p进行定量验证,验证结果与测序结果一致。本研究揭示了miRNAs在猪IMF前体细胞成脂分化过程中的表达模式及潜在调控网络,为研究猪IMF沉积的调控机制奠定了前期基础。

猪品种间ESR基因PCR-RFLP的初步研究

利用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,检测了不同猪品种的ESR基因PvuⅡ RFLP。结果表明 :品种间基因频率差异极显著 (P <0 .0 1 )。并试分析了PvuⅡ

猪FSH-β位点对猪繁殖性状的影响

采用 PCR- SSCP技术对猪 FSH- β亚基基因的多态性进行了研究。结果表明 ,基因型分布与品种极显著相关 (P<0 .0 0 5 ) ;除大梅 F1 以外 ,所研究群体的 FSH-β PCR- SSCP位点均处于遗传平衡状态 ;在头胎中 ,G等位基因可以显著提高产仔数和产活仔数 ,加性效应分别为 1.2 0 0头 /窝、1.345头 /窝 (P<0 .0 5 ) ;在经产胎次 ,GG基因型母猪的产仔数和产活仔数显著高于 HH基因型 (P<0 .0 5 ) ,每拷贝 G等位基因可以控制 0 .6 18头 /窝的产仔数和 0 .834头 /窝的产活仔数 ;GG基因型母猪乳头数多 (P<0 .0 5 ) ,加性效应为 1.4 2 9个 ,而后代乳头数没有显著的差异 ,可以确定猪乳头数主要受自身基因型决定 ,且具有一定母本效应 ;GG型后代平均初生重比 HH型低 ,GH型的育成率显著比 HH型高(P<0 .0 5 ) ;GG基因型母猪的年产仔窝数显著低于 GH型 (P<0 .0 5 ) ;GG基因型的断奶到发情间隔比 GH基因型显著短 (P<0 .0 5 ) ,GH基因型的断奶到配种间隔显著比 HH基因型短 (P<0 .0 5 )。

pEGFP-N1脂质体转染方法的优化及其应用

目的:应用脂质体介导的转染方法将pEGFP-N1转染入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中,并获得较佳的优化方案,阐明该优化条件在转染其他目的基因时的适用性。方法:分别选取不同配比的质粒和脂质体,将pEGFP-N1转入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞。转染后36h,倒置荧光显微镜和流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况和转染效率;台盼蓝染色法检测细胞存活率,以此获得优化的转染条件。同时将pEGFP-Aquaporin2、pEGFP-Aquaporin4和pEGFP-Aquaporin5分别以上述条件转染,并获取相应优化的转染条件。结果:在质粒质量固定的条件下,随着脂质体质量的增加,其转染效率和细胞存活率升高;但是当质粒∶脂质体>1∶4时,转染效率和细胞存活率下降。在质粒和脂质体比例固定而质量增加时,其转染效率和细胞存活率下降;当质粒∶脂质体>3.2μg∶12.8μL时,转染效率降低。应用脂质体介导的方法转染pEGFP-N1和转染pEGFP-Aquaporin2、pEGFP-Aquaporin4和pEGFP-Aquaporin5时,在质粒与脂质体的配比为1∶4(3.2μg∶12.8μL)时,转染效率达最高。结论:在应用脂质体介导的目的基因转染时,pEGFP-N1优化的转染条件具有较为广泛的适用性,可用作后续目的基因高效转染优化条件。

轮辐过渡圆角对轮毂服役应力集中的影响

对具有不同过渡圆角半径的轮毂在相同状况下进行有限元服役应力比较分析。结果表明,在轮辐与轮圈的过渡连接部位的最大应力值和应力集中随过渡圆角半径的增大而减小,应力分布更趋于均匀,从而提高了轮毂的疲劳安全系数,为镁合金轮毂的结构再设计提供了理论基础。

猪ESR mRNA在不同组织表达的定量研究

以看家基因GAPDH为内标 ,采用半定量RT PCR法检查了ESRmRNA在卵巢等 12种组织中表达情况。结果表明ESR基因有 2种表达产物 ,其中在肠、卵巢、脾、心、肺、肝等组织的表达产物为一种形式 ,而子宫、肌肉等组织为另一种形式 ,在肾中 2种形式的表达产物共存。通过计算机凝胶成像分析系统 ,对胶进行扫描 ,显示出在 12种组织中 ,ESRmRNA表达量在肺中最高 ,其次是卵巢、肠、心、子宫、脾、肝、肌肉等。在输卵管、肾、脂肪和乳腺组织中 ,ESRmRNA表达量很少。

刘玉洁运用温胆汤联合黛力新治疗冠心病PCI术后伴抑郁状态68例临床观察

目的观察温胆汤联合氟哌噻吨-美利曲辛片(黛力新)治疗冠心病经皮冠状动脉介入术(PCI)术后病人伴抑郁状态(痰瘀内阻型)的临床疗效。方法选择符合纳入标准病人68例,中医辨证为痰瘀内阻证,给予温胆汤联合氟哌噻吨-美利曲辛片(黛力新)进行治疗。结果经治疗12周后统计临床疗效,显效53例(78%),有效12例(18%),无效3例(4%),总有效率96%。结论温胆汤联合黛力新治疗(痰瘀内阻证)冠心病PCI术后伴抑郁状态病人,临床疗效确定,作用明显。

重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的构建及其在FRT细胞中的表达和定位

目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得aquaporin-4编码区基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N1。经酶切和测序鉴定证实为aquaporin-4后,Lipofectamine 2000脂质体转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体至FRT细胞中,倒置荧光显微镜下观察aquaporin-4在FRT细胞中的表达和分布,并应用Western blotting法检测aquaporin-4蛋白的表达。同时检测转入FRT细胞内钙黄绿素的相对荧光强度以判断FRT细胞水通透性的状况。结果:EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切和测序重组载体结果证实目的基因aquaporin-4成功克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。荧光显微镜下观察融合EGFP的aquaporin-4主要在FRT细胞膜上表达;Western blotting结果证实脂质体转染重组载体的FRT细胞表达aquaporin-4。转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的FRT细胞水通透性显著高于未转染的FRT细胞,其水通透性是未转染FRT细胞的1.65倍。结论:成功构建aquaporin-4真核表达载体,证实其可在FRT细胞中表达,并具有明显的膜蛋白特性和良好水通透性。

ESR基因型与青年母猪外周血液激素浓度的关系

采用放免法测定了不同ESR基因型青年母猪 (各 3头 )外周血液激素浓度的变化。结果表明 :4种激素浓度随着生理状况不同出现明显波动 ;3种ESR基因型雌二醇变化曲线一致 ,在发情同一时期 ,雌二醇浓度差异不显著 ;AA型和AB型孕酮变化曲线一致 ,在发情后第 7天 ,AA和AB基因型远高于BB型 (P <0 .0 5 ) ;在发情初期BB基因型FSH浓度显著比AA型高 (P =0 .0 5 ) ,但是在发情后第 14天AA型与AB基因型FSH浓度比BB型高 (P =0 .0 7)。没有检测到 3种基因型青年母猪LH浓度存在显著差异。

人参二醇组皂苷抗动脉粥样硬化作用实验研究

目的通过建立大鼠动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）模型,探讨人参二醇组皂苷（Panaxadiol saponins,PDS）的抗动脉粥样硬化作用及可能的作用机制.方法11周后颈动脉采血,检测血脂水平,血清一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平.结果PDS能够降低大鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白水平;提升高脂大鼠血清NO水平;提高血清SOD活力,降低MDA含量.结论PDS可通过降血脂,保护内皮细胞,稳定细胞膜作用而发挥抗动脉粥样硬化作用.

人参二醇组皂苷抗动脉粥样硬化的作用及机制

目的探讨人参二醇组皂苷(PDS)的抗动脉粥样硬化作用及机制。方法Wistar大鼠45只,随机分为对照组、模型组、PDS组,每组15只。对照组大鼠喂饲普通饲料,模型组及PDS组大鼠采用高脂饮食加维生素D3(总量7×105U/kg,分别于第1周和第6周腹腔注射)建立大鼠动脉粥样硬化模型。PDS组大鼠高脂喂养同时每日1次PDS(100mg·kg-1.d-1)灌胃,每周称重1次并根据体重变化调整给药量;对照组及模型组大鼠以相应生理盐水灌胃。11w后颈动脉采血检测血脂水平,光镜下观察主动脉弓形态学变化,免疫组化染色法检测胸主动脉细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果与模型组比较,PDS给药组TC、LDL-C和AI明显降低(P<0.01,P<0.05),血清甘油三酯、高密度脂蛋白水平无明显差异。光镜下模型组血管壁多处可见典型粥样硬化斑块,药物组血管壁结构变化轻微,局部仅见内皮脱落;对照组血管壁光滑完整,未发生病理变化。免疫组织化学染色结果显示,模型组阳性细胞率与对照组比较明显升高(P<0.01);与模型组比较,PDS组阳性细胞率明显降低(P<0.01);而PDS组阳性细胞率与对照组无明显差异。结论PDS具有预防动脉粥样硬化形成的作用,通过下调主动脉ICAM-1的表达量,抑制AS的形成。

股静脉置管行血液透析致动静脉瘘合并假性动脉瘤的护理

慢性肾功能衰竭的患者在开始血液透析前，常行股静脉置管建立临时通路，同时准备永久性的血管通路。股静脉置管不仅可以减少患者反复穿刺所带来的痛苦，还可以为血液透析提供较好的血流量，并等待永久性血管通路的建立。

血府逐瘀汤加味联合西药治疗气滞血瘀型冠心病心绞痛临床疗效观察

探究血府逐瘀汤加味联合西药治疗气滞血瘀型冠心病心绞痛临床疗效。方法 将冠心病心绞痛辨证属气滞血瘀证的60例患者,随机分为对照组和治疗组各30例。两组均予西医冠心病心绞痛药物治疗,治疗组加用血府逐瘀汤加味。治疗4周,记录两组患者临床有效率、中医证候评分、心绞痛发作次数和血脂水平。结果 治疗组总有效率和治疗后治疗组中医证候积分、TC、TG和心绞痛发作次数优于对照组(P<0.05)结论 血府逐瘀汤加味联合西药治疗气滞血瘀型冠心病心绞痛疗效肯定。

真武汤合补心气方加味治疗冠心病慢性心衰(心肾阳虚证)的临床观察

观察真武汤合补心气方加味治疗心肾阳虚型冠心病慢性心力衰竭的临床效果。方法 选择我院2022年1月-2023年7月住院的80例冠心病慢性心力衰竭病人,采用随机数字表法将其分成2组,治疗组采用西医治疗,并在此基础上加用真武汤合补心气方,治疗4周,对比治疗前后左室射血分数、B型利钠肽(BNP)等指标。结果 观察组与对照组的疗效比较,总有效率94.87%,明显优于对照组的84.21%(P<0.05);两组患者的中医证候积分、左心室射血分数及BNP水平均无显著性差异(P>0.05);两组患者的LVEF、BNP均高于对照组(P<0.05)。结论 应用真武汤联合补心气方加味治疗冠心病慢性心力衰竭,可明显改善临床症状,延缓病情进展,改善生存质量。

人参二醇组皂苷(PDS)对血脂、血清NO、MDA含量、SOD活力的影响

目的:探讨人参二醇组皂苷(Panaxadiolsaponins,PDS)对动脉粥样硬化大鼠血脂、血清NO、MDA含量、SOD活力的影响.方法:高脂饮食加维生素D3(总量7×105U/Kg,分别于实验第1周和第6周腹腔注射),建立大鼠动脉粥样硬化模型.选用健康Wistar大鼠45只,体重180～230g,雌雄不限.按清洁级动物分笼喂养,适应性喂养1周后随机分为3组:正常对照组,以普通饲料喂养;高脂模型组,以高脂饲料喂养;PDS给药组,高脂饲料喂养,同时每日1次PDS[100mg/(kg·d)]灌胃,前两组以相应生理盐水灌胃,每周称重1次,并根据体重变化调整给药量.11周后颈动脉采血,检测血脂水平,血清一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平.结果:1、PDS对血脂的影响:与对照组相比较,模型组大鼠血清TC、LDL-c及AI显著升高(P<0.01);与模型组比较,PDS给药组TC、LDL-c和AI明显降低,差异显著(分别P<0.01,P<0.01,P<0.05);而血清甘油三脂、高密度脂蛋白水平相比无统计学意义.2、PDS对血清NO含量的影响:与对照组相比较,模型组大鼠血清NO含量明显降低,P<0.01;与模型组比较,PDS组NO含量明显增高,P<0.05;药物组与对照组相比无统计学意义.3、PDS对血清MDA含量与SOD活力的影响:模型组MDA水平与对照组相比明显升高,P<0.01;而SOD活力明显降低,P<0.01.与模型组相比,PDS对血清SOD活力有明显升高的作用,P<0.05;同时,PDS具有显著降低MDA水平的作用,P<0.05.PDS组与对照组相比无统计学意义.结论:1、PDS通过降低大鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白水平,发挥其抗AS作用.2、PDS能够提升高脂大鼠血清NO水平,从而保护血管内皮,抑制AS的形成.3、PDS能够提高血清SOD活力,降低MDA含量,增强清除氧自由基和抗脂质过氧化功能,从而稳定细胞膜,保护内皮而发挥抗AS作用.

浅谈美国高等学校课堂教学特点及启示——以圣路易斯大学为例

美国高校的课堂教学日益受到我国学者关注。文章通过整理访问美国大学学者对其所在大学课堂教学叙述及在圣路斯大学访学经历,从教学理念、教学环境、教学方式、课程考核、社会实践、网络应用等方面总结出美国大学共有课堂教学特点,以便为我国课堂教学改革提供一些思路。

血液透析护理操作分析及风险预防

目的:为了预防血液透析治疗中各种医疗事故的发生而进行有针对性的预防护理。方法:在透析器的预冲,建立体外循环,下机等方面的操作过程中,严格执行相关的各种操作程序和操作标准。结果:自从开展预防护理以来,各种医疗事故明显降低。结论:实行血液透析的预防护理,可以减少空气栓塞,凝血,静脉肿胀、渗血、交叉感染等医疗事故的发生,保证患者人身安全,提高医疗护理质量。

高职高专口腔医学专业课程体系的改革与效果

高职高专口腔医学专业传统课程体系不适应时代发展对培养人才素质的需要,针对其存在的诸多弊端,现以"突出主干课,减少必修课,加强实践课,丰富选修课"为原则,以知识、能力、素质为主线,淡化学科意识,打破学科型课程设置,加强课程的优化、整合,重新构建具有高职高专特色的课程结构、教学内容、教学方法、考试模式及教学评价系统。