乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其临床意义

目的:探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与血清标志物之间的关系,了解其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附实验检测乙型肝炎病毒血清标志物及前S1抗原,并采用速率法检测血清丙氨酸氨基转移酶。结果:乙肝表面抗原阳性率为9．2%,乙肝表面抗原阳性人群中前S1抗原阳性率为28．6%;乙肝e抗原阳性及阴性人群中前S1抗原阳性率分别为81．1%、13．9%(p＜0．01);前S1抗原阳性人群ALT(49．5U/L)高于前S1抗原阴性人群(43．2U/L,p＜0．01)。结论:前S1抗原与血清标志物e抗原有较高的一致性,是反映病毒复制的良好指标,能较早发现肝损伤。

miR-544a对非小细胞肺癌细胞系Wnt信号通路抑制因子GSK3β表达的调控作用

目的探讨微小RNA-544a(miR-544a)对肺癌干细胞的自我更新能力影响及其可能的机制。方法通过生物信息学预测miR-544a的靶向基因,用荧光素酶报告系统及western blot验证其靶向关系;构建稳定表达miR-544a的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D,并用荧光定量PCR验证;用肿瘤球悬浮培养实验检测miR-544a在形成肿瘤球中的作用。结果生物信息学预测发现,miR-544a可以靶向调节Wnt信号通路的抑制子GSK3β,并通过荧光素酶报告系统得到了验证(F=201.37,P<0.01);western blot结果显示,miR-544a可以下调GSK3β的表达,而β-catenin、CD133蛋白表达水平明显上调(F分别为7.73,3.37,9.43,P均<0.01);荧光定量PCR结果显示,95C、95D细胞在转染miR-544a后,miR-544a表达水平增高,分别为20.51±0.97、15.16±1.38(F=418.05,P<0.01)。肿瘤球悬浮培养实验发现,稳定表达miR-544a的细胞能够反复形成具有肿瘤干细胞特性的肿瘤球。结论 miR-544a可以通过直接下调GSK3β的表达来激活Wnt信号通路,以维持肺癌干细胞自我更新能力。

转染miR-544a对肺癌细胞侵袭和转移能力的影响

目的探讨miR-544a对肺癌细胞的侵袭和转移能力的影响及其分子机制。方法用miRNA芯片对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D进行miRNA谱系分析,并用荧光定量PCR验证其miR-544a表达水平;用Targetscan软件预测miR-544a的靶基因;Transwell实验观察细胞的侵袭转移能力的变化;western blot验证其表达。结果 miRNA芯片及荧光定量PCR结果显示,与95C细胞(1.00±0.00)比较,miR-544a在95D细胞中表达上调(2.95±0.26,t=12.94,P<0.05);Transwell实验结果显示,95C转染miR-544a mimic后增加(32.00±1.00,q=18.67,P<0.01),95D转染miR-544a inhibitor后,侵袭和转移能力降低(11.00±1.00,q=13.67,P<0.01);Targetscan软件预测E-钙粘连素(CDH1)可能为miR-544a的靶基因;western blot显示,95C转染miR-544a mimic后,CDH1表达下调,vimentin表达上调(0.202±0.017,0.574±0.009,q分别为63.86,9.45,P均<0.01);而95D转染miR-544a inhibitor后,CDH1表达上调,而vimentin表达下调(0.769±0.014,0.320±0.020,q分别为18.67,5.99,P均<0.01)。结论 miR-544a可能通过下调CDH1和上调vimentin的表达来促进肺癌细胞的侵袭和转移。

电化学发光法在检测孕产妇乙肝中的应用

背景与目的：探讨电化学发光法(electrochemiluminescence ECL)在检测孕产妇乙肝病毒中的应用价值,从而正确指导乙肝孕产妇产后的喂养方式。方法：用ELISA法和ECL法平行测定孕产妇血清乙肝病毒血清标志物(HBV-M),并对ELISA法检测表面抗原为阴性而ECL法为低浓度的标本,用荧光定量PCR测定病毒DNA。结果：ECL法表面抗原的检出率(9．66%)明显高于ELISA法(6．54%),p＜0．05,ELISA法检测为阴性而ECL法为低浓度的标本,病毒DNA均为阳性。结论：ECL法测定HVV-M的敏感性比ELISA法高,可以更灵敏的检出低浓度的表面抗原,从而可以更好的指导孕产妇产后的喂养方式,但HBcAb阳性率过高。

血清降钙素原与内毒素对医院获得性肺炎病原诊断和疗效的判断价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)与内毒素(LPS)在医院获得性肺炎(HAP)病原类型鉴别和疗效判断价值的意义。方法对某院110例HAP患者进行前瞻性研究,分为革兰阴性(G-)菌感染肺炎组(50例),革兰阳性(G+)菌感染肺炎组(30例),对照组(非典型病原体或病毒感染组,30例)。动态监测患者血清PCT、LPS、C反应蛋白(CRP),并采用受试者工作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC),评估PCT与LPS对预测HAP病原菌感染类型的效能。结果 G-菌感染肺炎组PCT、LPS水平分别为(3.43±1.15)ng/mL、(0.20±0.08)EU/mL,高于G+菌感染肺炎组[分别为(0.42±0.12)ng/mL、(0.05±0.02)EU/mL]和对照组(0.14±0.08)ng/mL、(0.02±0.01)EU/mL],差异均具有统计学意义(均P<0.05)。G-菌感染肺炎组治疗前后PCT[(3.43±1.15)ng/mL vs(0.63±0.22)ng/mL]、CRP[(47.26±30.35)mg/L vs(9.21±6.54)mg/L]水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。中重度组较轻度组血清PCT[(5.43±1.05)ng/mL vs(0.72±0.32)ng/mL]、LPS[(0.33±0.07)EU/mL vs(0.09±0.04)EU/mL]和CRP[(57.46±20.15)mg/L vs(8.25±5.24)mg/L]水平均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。PCT和LPS联合检测区分G-菌和G+菌感染HAP的敏感度为95.83%,特异度为96.15%,AUC为0.95。结论 PCT和LPS在HAP患者病原类型鉴别中具有一定价值,PCT和LPS联合检测可提高鉴别HAP感染类型的特异度,并可根据其动态变化评估抗菌药物疗效。

TLR-9 rs187084基因多态性与山东汉族人群系统性红斑狼疮的相关性研究

目的研究山东地区汉族人群TLR-9基因rs187084单核苷酸多态性,探讨其与系统性红斑狼疮易感性之间的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性等方法对92例系统性红斑狼疮患者和88名健康对照TLR-9基因rs187084C/T多态性进行分析,计算基因型和等位基因频率。结果(1)SLE患者TLR-9基因rs187084CC、CT、TT基因型频率分别是0.185、0.413和0.402,与对照组相比没有统计学差异(χ2=2.99,P>0.05);(2)SLE患者TLR-9基因rs187084C、T等位基因频率分别是0.394、0.606,与对照组间差异没有统计学差异(χ2=3.07,P>0.05)。结论山东汉族人群SLE的易感性与TLR-9基因rs187084多态性无关。

吸毒人员隐孢子虫感染及其免疫功能状态的研究

目的了解男性静脉吸毒人员隐孢子虫的感染及其免疫功能状态。方法对研究对象进行调查,采用快速改良抗酸染色法检测粪便中隐孢子虫卵囊,用免疫透射比浊法、双抗体夹心ABCELISA法测血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和白介素-12。结果男性静脉吸毒人员隐孢子虫感染率为19.05%。隐孢子虫阳性组IgM、IgA和阴性组IgG高于对照组(P<0.05);隐孢子虫阳性组和阴性组白介素-12均低于对照组(P<0.05)。结论男性静脉吸毒人员是隐孢子虫感染的高危人群,其免疫功能受到一定程度的抑制,对隐孢子虫易感性增加。

IRF5 rs10954213基因多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的研究山东地区汉族人群干扰素调节因子5(IRF5)基因rs10954213单核苷酸多态性,探讨其与系统性红斑狼疮易感性之间的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性等方法对92例系统性红斑狼疮患者和88名健康对照IRF5基因rs10954213G/A多态性进行分析,计算基因型和等位基因频率。结果SLE患者IRF5rs10954213GG、GA、AA基因型频率分别是0.318、0.409和0.273,与对照组间有显著差异(χ2=6.36,P<0.05);SLE患者IRF5rs10954213A、G等位基因的频率分别为0.609、0.391,与对照组有显著差异(χ2=6.26,P<0.05)。结论山东汉族人群IRF5基因位点rs10954213的多态性,可能与山东地区汉族人群SLE的易感性有关。

应用SELDI-TOF-MS技术建立SLE患者血清蛋白质指纹图谱筛选模型

目的筛选系统性红斑狼疮(SLE)血清蛋白质指纹图谱模型,并探讨其意义。方法用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SEIDI-TOF-MS)技术获得SLE、类风湿关节炎患者(RA组)、健康人群(对照组)血清中的蛋白质谱,用计算机软件比较分析,建立SLE血清蛋白质指纹图谱筛选模型,并验证该模型诊断SLE的灵敏度和特异性。结果SLE组与非SLE组共有11种蛋白质表达有显著性差异;以其中4个蛋白质生物标志物(5 739 Da、10 832 Da、4 650 Da、15 797 Da)组建的筛选模型,经双盲法验证其灵敏度为84.4%,特异性为90.3%。结论应用SEIDI-TOF-MS技术建立的血清蛋白质指纹图谱模型在SLE的早期诊断中具有一定价值。

血小板膜糖蛋白CD62p在肝素诱导的血小板减少症患者中的表达和临床意义

目的探讨血小板膜糖蛋白CD62p在肝素诱导的血小板减少症（HIT）中的表达和临床意义。方法选取2011年11月至2014年5月在山东省青岛市市立医院住院并接受普通肝素治疗的心血管疾病患者550例。根据患者肝素/血小板因子4复合物（HPF4）抗体产生和血小板减少情况分为2个组，其中产生HPF4抗体同时伴有HIT为临床HIT组，其余患者为非HIT组。同期选取30例门诊健康体检者作为正常对照组。3组受试者于临床HIT组使用肝素后1、3、5 d以及停用肝素后1周同期4个时间点采用流式细胞仪测定静脉血CD62p阳性率和HPF4阳性率，组间做比较。结果550例患者中共检出HPF4抗体阳性患者95例，总阳性率为17.3%。应用肝素1、3、5 d后，临床HIT组的CD62p阳性率分别为（20.62±4.48）%、（24.62±5.88）%、（25.62±3.65）%，明显高于非HIT组［（2.15± 0.55）%、（1.93±0.65）%、（1.99±0.99）%］及正常对照组［（1.95±0.45）%、（1.85±0.23）%、（1.72±0.69）%］，差异均有统计学意义（均P〈0.05）；停用肝素1周后临床HIT组CD62p阳性率明显下降，与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论CD62p表达情况与HIT的发生、发展密切相关，对HIT的诊断有一定价值。

标本稀释液对电化学发光法检测血清人绒毛膜促性腺激素结果的影响

目的探讨不同的稀释液对电化学发光法检测血清中人绒毛膜促性腺激素(hCG)水平结果的影响。方法 27例孕周为3～8周的妊娠妇女血清,按β-hCG的浓度分为以下3组:低浓度组β-hCG<1 000mIU/ml;中浓度组β-hCG 1 001～10 000 mIU/ml;高浓度组β-hCG>10 000 mIU/ml。分别用通用稀释液、0.9%氯化钠注射溶液、蒸馏水以1∶10稀释,然后用Roche cobas E601电化学发光分析仪测定其β-hCG值。结果低浓度组用0.9%氯化钠注射溶液稀释所测得的β-hCG值与通用稀释液稀释后测得的值相比差异有统计学意义(P=0.042),而在中、高浓度组两者的检测结果差异无统计学意义(P=0.201,P=0.076);在低、中、高三个浓度组用蒸馏水稀释所测得的β-hCG值与通用稀释液测得的值相比,差异均有统计学意义(P=0.000)。结论稀释液对电化学发光分析仪测定β-hCG结果影响较大,0.9%氯化钠注射溶液和蒸馏水均不适宜作为低浓度β-hCG的替代稀释液,而对于中高浓度的标本可以选0.9%氯化钠注射溶液作为替代稀释液。

肿瘤坏死因子-α致体外肝细胞凋亡效应的研究

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对HepG2细胞的致凋亡作用。方法利用HepG2细胞作为体外肝细胞模型,HepG2细胞经TNF-α(400U/ml)作用12、24、48h后,分别测定培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量。选择TNF-α作用24h的细胞,电镜观察细胞形态,检测DNA梯形条带,采用原位末端标记技术(TUNEL)、流式细胞仪检测细胞凋亡。结果TNF-α作用24h后,培养上清中LDH轻度增高;电镜观察发现部分细胞出现典型的细胞凋亡形态改变;细胞内片段化DNA经琼脂糖凝胶电泳后出现了典型的DNA梯形条带;TUNEL法绝大多数细胞核呈棕褐色阳性染色,而对照组无阳性染色;用Apo2.7抗体标记凋亡细胞后经流式细胞仪检测,阳性比例达98.37%,而对照组阳性比例为16.52%。结论TNF-α可引起HepG2细胞凋亡。

一氧化氮对静脉吸毒人员隐孢子虫感染的影响(英文)

目的 了解静脉吸毒人员隐孢子虫 (Cryptosporidiumparvum ,C .p)感染情况 ,探讨一氧化氮 (nitricoxide ,NO)对C .p感染的影响。 方法 快速改良抗酸染色法检测粪便中的C .p卵囊 ,分别用硝酸还原酶法和免疫透射比浊法测血清NO和免疫球蛋白 (IgG、ISA、IgM ) ,C .p感染人员在治愈后再次测定血清NO和Ig。结果 吸毒人员C .p阳性率为 9.18% ;C .p阳性组NO明显高于C .p阴性组和对照组 ,C .p阴性组NO也明显高于对照组 ;C .p阳性组在治疗后NO明显降低 ;NO含量与感染程度有关 ;C .p阴性组IgG及C .p阳性组IgM、IgA稍高于对照组。 结论 静脉吸毒人员对C .p有较高的感染率 ;NO对吸毒者及其C .p的感染过程有一定的影响 ,并可反映C .p感染的严重程度 ;感染者经治疗后效果较好 ,NO可明显降低。

系统性红斑狼疮患者IRF5、TLR-9基因表达的研究

目的 研究IRF5、TLR-9基因表达水平与系统性红斑狼疮的相关性.方法 收集92例SLE患者与88名正常对照人群的外周血,提取总RNA并反转录为cDNA,以实时荧光定量聚合酶链反应方法检测患者组和对照组的IRF5、TLR-9的mRNA表达水平.结果 SLE患者外周血IRF5、TLR-9 mRNA的表达分别是0.232±0.076、0.189±0.054,与对照组相比,SLE患者IRF5、TLR-9 mRNA表达水平升高（P〈0.05,P〈0.05）.结论 SLE患者外周血IRF5、TLR-9表达异常,可能在SLE发病中起一定作用.

系统性红斑狼疮患者IRF5基因表达的研究

目的探讨SLE人群和正常对照干扰素调节因子5(IRF5)基因表达的差异。方法收集92例活动期的SLE病例与88名正常对照,提取外周血总RNA并反转录为cDNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应扩增IRF5基因,获得扩增体系的Ct值后,用公式2-⊿⊿Ct计算SLE组和正常对照组的IRF5的mRNA表达水平。SLE患者抗ds-DNA抗体检测采用免疫印迹法。结果利用实时荧光定量聚合酶链反应扩增得到了预期大小的IRF5基因片段;SLE组、正常对照组外周血IRF5mRNA的表达水平分别为0.232±0.076、0.081±0.040,SLE组IRF mRNA表达水平升高(P<0.05)。SLE患者抗ds-DNA抗体阳性组IRF5基因表达水平有增高的趋势,但与阴性组相比没有差异。结论系统性红斑狼疮SLE患者外周血IRF5表达异常,可能在系统性红斑狼疮组发病中起一定作用。

内毒素诱导肝细胞凋亡及肝细胞生长因子的抑制作用观察

目的观察内毒素(LPS)诱导肝细胞凋亡的作用及肝细胞生长因子(HGF)对LPS的拮抗作用。方法HepG2细胞传代培养24 h,分三组。对照组加原培养液,LPS组加含LPS(20μg/ml)的培养液,干预组加含LPS(20μg/ml)、HGF(40 U/L)的培养液．继续培养16 h。Tunel标记法检测细胞凋亡。结果LPS组细胞凋亡率为98．65%±0．64%．干预组为35．97%±0．45%,两组相比,P＜0．01。结论LPS可诱导肝细胞凋亡,HGF可抑制LPS所诱导的肝细胞凋亡。

生长激素释放肽在胃黏膜癌变过程中表达变化的研究

目的探讨生长激素释放肽（Ghrelin）在胃癌及其癌前疾病诊断中的价值。方法选择浅表性胃炎患者31例，萎缩性胃炎患者21例，上皮异型增生患者6例，胃癌患者19例，健康志愿者21例，分别进行胃镜检查及胃黏膜活检，应用免疫组化的方法，检测胃黏膜Ghrelin的表达水平。结果①胃黏膜Ghrelin的表达：浅表性胃炎、萎缩性胃炎、上皮异型增生患者Ghrelin积分光密度均低于对照组（P〈0．05），萎缩性胃炎患者、上皮异型增生患者低于浅表性胃炎患者（P〈0．05），伴有上皮异型增生患者与萎缩性胃炎患者比较无显著差异，胃癌患者Ghrelin积分光密度则高于对照组及其他各组（P〈0．05）；②Hp感染：Hp感染阳性DGR患者胃黏膜Ghrelin积分光密度低于Hp阴性组（P〈0．05）；③Hp感染阳性的胃癌组织Ghrelin积分光密度低于Hp感染阴性的胃癌患者（P〈0．05）。结论胃癌患者生长激素释放肽水平的变化对疾病的预后观察具有重要的临床价值。

MPO-ANCA阳性患者临床疾病谱分析

目的探讨髓过氧化物酶(MPO)-ANCA诊断ANCA相关血管炎(AAV)或其他疾病的临床意义。方法回顾性分析2017年7月至2019年6月青岛市市立医院检验科用酶联免疫吸附法(ELISA)检测初诊MPO-ANCA阳性住院患者共185例,其中33例MPO和PR3同时阳性,因此排除在分析之外。152例MPO-ANCA阳性患者中,确诊AAV患者41例(26.97%)设为AAV组;non-AAV患者111例(73.03%)设为non-AAV组。结果AAV患者41例(26.97%),以显微镜下多血管炎(MPA)患者为主;非AAV(non-AAV)患者111例(73.03%),肺部疾病患者占比最多,以肺间质纤维化伴感染为主;其次为脑卒中、肾脏疾病、结缔组织病、消化道疾病、恶性肿瘤等。MPO-ANCA诊断AAV的cut-off值是30.88U/mL,特异性是82.00%,敏感性是65.90%。结论MPO-ANCA阳性患者的临床疾病谱很广,对MPO-ANCA阳性结果的解读应结合临床表现、实验室检查等信息综合分析。

IRF5rs2004640基因多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的研究山东地区汉族人群干扰素调节因子5（IRF5）基因rs2004640单核苷酸多态性，探讨其与系统性红斑狼疮易感性之间的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性等方法对92例系统性红斑狼疮患者和88名健康对照IRF5基因rs2004640G／T多态性进行分析，计算基因型和等位基因频率。结果SLE患者IRF5rs2004640GG、GT、TF基因型频率分别是0．198、0．521和0．281，与对照组有显著差异（x^2=8．73，P〈0．05）；SLE患者IRF5 rs2004640T、G等位基因的频率分别为0．402、0．598，与对照组有显著差异（x^2=7．41，P〈0．01）。结论山东汉族人群IRF5基因位点rs2004640的多态性，可能与山东地区汉族人群SLE的易感性有关。

HLA-B27基因亚型检测与强直性脊柱炎相关性研究

目的探讨HLA-B27基因亚型与强直性脊柱炎的相关性。方法采用酵素免疫法检测HLA-B27，并进一步采用聚合酶链反应序列特异性引物法进行HLA-B27基因亚型分型。结果强直性脊柱炎HLA-B27检出率为95％，显著高于正常对照组，基因分型B2705分布最广（59.3％），其次是B2704（38．9％）。结论HLA-B27与AS具有明显的相关性，检测B2705和B2704亚型对于AS的辅助诊断具有重要意义。