RP-HPLC同时测定黄连及金芪降糖片中3种小檗型生物碱

目的:建立同时测定黄连及金芪降糖片(金银花、黄连、黄芪)中3种小檗型生物碱(药根碱、巴马汀、小檗碱)的反相高效液相色谱法。方法:色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢钾(30∶70)为流动相,检测波长为345 nm,流速为1.0 mL/min。结果:在上述条件下测定黄连中药根碱、巴马汀、小檗碱的平均含量分别1.34%、1.61%、7.12%,金芪降糖片中药根碱、巴马汀、小檗碱的平均含量分别为0.35%、0.64%、1.54%。结论:本方法操作简单、结果准确、回收率高、重现性好,可用于黄连及金芪降糖片的质量控制。

酶解辅助提取关黄柏生物碱的工艺研究

目的:考察酶解辅助提取技术对关黄柏生物碱提取率的影响,优选出总生物碱的最佳提取工艺条件。方法:采用正交实验,考察酶解辅助法在不同pH,不同温度,不同浸取时间对关黄柏中总生物碱提取率的影响。结果:优化酶解法的最佳提取工艺条件为:纤维素酶用量为0.9%,在pH4.5,35℃条件下酶解2.5 h。酶解法可将总生物碱提取率提高约27%。结论:酶浸-回流法提取总生物碱方法可行,该方法提取时间短,提取率高,适合工业化生产。

关于生物技术运用于现代化农业分析

生物技术是一项非常重要的技术,解决了粮食、健康、环境和能源等方面的问题,为人类的进步发挥了巨大作用,本文将探讨生物技术在现代化农业中的运用,更好的提高农业的健康有序发展。

采用奥曲肽皮下注射与微量泵注治疗胰腺炎的效果差异

目的探讨对胰腺炎患者分别采用奥曲肽实施皮下注射治疗以及微量泵注治疗后获得的临床效果。方法随机选取2020年2月—2022年4月漳平市医院收治的80例胰腺炎患者为研究对象,以随机数表法分为参照组和研究组,每组40例。参照组采用奥曲肽皮下注射治疗,研究组采用奥曲肽微量泵注治疗。对比两组治疗总有效率、系列时间指标(恢复进食时间、血淀粉酶恢复时间、腹痛消失时间、住院时间)、腹泻发生率。结果研究组治疗总有效率高于参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与参照组恢复进食时间(5.25±0.53)d、血淀粉酶恢复时间(6.26±2.11)d、腹痛消失时间(7.15±1.17)d以及住院时间(14.29±2.21)d比较,研究组胰腺炎患者恢复进食时间(3.53±0.26)d、血淀粉酶恢复时间(5.21±1.26)d、腹痛消失时间(4.11±1.06)d以及住院时间(9.21±2.26)d明显更短,差异有统计学意义(t=18.427、2.702、12.178、10.164,P均<0.05)。两组腹泻发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论同奥曲肽皮下注射治疗比较,选择奥曲肽微量泵注方法对胰腺炎患者展开治疗,可提升疗效,有效缩短恢复进食时间、血淀粉酶恢复时间、腹痛消失时间、住院时间,并且不会呈现出严重腹泻症状,可促进胰腺炎患者的良好预后。

鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达与反应原性分析

为了利用原核表达系统表达鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus, DTMUV)E蛋白,试验利用RT-PCR方法扩增DTMUV E基因,经核苷酸序列测定后,与pET-30a(+)载体连接,然后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,构建重组表达载体pET-DTMUV-E,再转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达DTMUV E蛋白,通过SDS-PAGE分析表达产物,Western-blot方法鉴定反应原性,分别从诱导时间和IPTG浓度方面对表达条件进行优化,并进行表达产物的可溶性分析。结果表明:克隆得到大小约为1 503 bp的DTMUV E基因,并成功与pET-30a(+)载体连接,获得分子质量约65 ku的融合蛋白,可以与兔抗6×His多克隆抗体和鸡抗DTMUV多克隆抗体发生特异性免疫反应,终浓度为4 mmol/L的IPTG诱导4 h为最佳表达条件,重组蛋白DTMUV E主要以包涵体形式表达。说明利用原核表达系统表达的以包涵体形式存在的DTMUV E蛋白,具有较好的反应原性。

双份非亲血缘脐血造血干细胞移植治疗岩藻糖贮积症患儿的护理

探讨双份无关脐血干细胞移植治疗岩藻糖贮积症的预处理、干细胞输注、预防感染及抗GVHD护理经验。对1例岩藻糖贮积症患儿实施异基因双份脐血移植术病例进行回顾性总结。在移植期间,患儿出现多次皮肤、肠道、肺部移植物抗宿主病。经精心护理完全康复,+32天患儿嵌合率在95%以上,+165天患儿顺利出院,+470天患儿停用免疫抑制剂。现患儿移植后随访43个月,各种指标完好,嵌合率在95%以上,岩藻糖苷酶正常,基因检测正常。

SBDS基因突变相关血细胞减少患儿的临床特点分析

目的探讨Shwachman-Bodian-Diamond syndrome(SBDS)基因突变相关血细胞减少儿童的临床特点。方法回顾性分析我院7名SBDS基因相关血细胞减少患儿的临床资料及基因信息,描述这些患儿的临床特点及诊治经过。结果7名患儿均携带SBDS基因突变,其中4名患儿携带SBDS基因复合杂合突变,表现为骨髓造血衰竭,并伴其他系统异常,诊断为Shwachman-diamond syndrome(SDS);另外3名患儿携带杂合c.258+2T>C突变,仅表现为血细胞减少。不同患儿的治疗方案及效果不同,1名SDS患儿药物治疗效果欠佳,其他患儿处于临床稳定状态。所有患儿至今未发生恶性转化。结论SDS患儿的临床表现可能不典型,临床医师应引起重视。SBDS杂合突变携带者可表现为血细胞减少,杂合c.258+2T>C突变可能是其易感因素之一。

鸭坦布苏病毒NS1蛋白的原核表达与多克隆抗体制备

[目的]利用原核表达系统制备鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)NS1蛋白及其多克隆抗体。[方法]利用PCR与核苷酸序列测定方法克隆DTMUV NS1基因,连接至重组表达载体p ET-30a(+),构建重组质粒p ET-NS1,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,SDS-PAGE和Western blot进行IPTG诱导表达产物分析与鉴定,从IPTG的浓度和诱导时间进行表达条件优化,并进行表达产物可溶性分析,重组DTMUV NS1蛋白经亲和层析纯化后免疫小鼠,制备鼠抗DTMUV NS1蛋白多克隆抗体,并通过间接免疫荧光试验(IFA)鉴定。[结果]成功克隆DTMUV NS1基因,约1065 bp,获得重组质粒p ET-NS1,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)后,可见分子质量约43 ku的特异蛋白,可以与鸡抗DTMUV多克隆抗体发生免疫反应,终浓度为0.8 mmol/L的IPTG诱导2~5 h为DTMUV NS1蛋白最佳表达条件,呈包涵体形式表达,经亲和层析纯化后,成功获得分子质量约43ku的NS1蛋白,蛋白质量浓度为329μg/m L,鼠抗DTMUV NS1蛋白多克隆抗体可以与DTMUV发生特异性免疫反应。[结论]本研究利用原核表达系统表达和纯化DTMUV NS1蛋白,并制备鼠抗DTMUV NS1蛋白多克隆抗体,可为DTMUV致病机制研究和免疫学检测方法建立提供物质材料与技术指导。

多维度人文关怀在初诊住院急性白血病患儿护理中的应用

目的探讨多维度人文关怀护理在初诊住院急性白血病患儿及其家属中的应用及效果。方法采取便利抽样方法,选取2016年1月—2017年12月入住本科的初诊急性白血病患儿及其家属作为研究对象。按照时间顺序将2016年1月—12月住院的144例患儿设为对照组,2017年1月—12月住院的140例患儿设为观察组。对照组行常规护理,观察组在常规护理基础上实施系统的多维度的人文关怀护理,分别对两组白血病患儿家属进行护理服务满意度调查。结果实施系统性多维度的人文关怀护理后,观察组的护理满意度评分分别为:护士服务态度(94.67±3.08)分、用药指导(95.33±3.21)分、住院指导(95.33±3.91)分、及时床边服务(94.67±3.72)分、护士操作技术(94.67±5.03)分及总分(94.91±5.03)分均高于对照组,组间各项数据间的差异均具有统计学意义(P>0.001)。结论系统性多维度人文关怀护理应用于初诊住院急性白血病患儿的照护过程,能有效缓解患儿及其家属的焦虑情绪,改善护患关系,提高患儿家属的照护能力和护理满意度。

光纤陀螺中的相位差与谐振频率差的推导及理论分析

光纤陀螺是一种基于Sagnac效应的环形干涉仪,常见的光纤陀螺包括干涉型和谐振型。首先,对于这2种光纤陀螺,本文采用了以惯性空间为参考系的路程叠加法证明了Sagnac效应是一种与介质无关的纯空间延迟,有效折射率n对Sagnac时间差Δt和光程差Δδ均没有影响;其次,对于干涉型光纤陀螺,有效折射率n对Sagnac相移差Δφ也没有影响;再次,对于谐振型光纤陀螺,文中提出了2种方法,即基于激光物理学中的行波谐振腔理论和基于多光束干涉机理,求出谐振环形腔的谐振频率差Δνq的表达式,其与光纤环匝数N无关。最后,得出光纤陀螺中的相位差Δφ和谐振频率差Δνq之间所满足的关系,并分别从数学形式和物理意义上对这一关系作出分析。2种陀螺的光路结构虽不同,但可使用统一的模型表达及分析光学物理量之间的关系。

异基因造血干细胞移植治疗粘多糖病10例的护理体会

目的总结异基因造血干细胞移植治疗粘多糖病(MPS)的护理经验。方法对10例异基因造血干细胞移植治疗MPS的护理措施进行总结和分析。其中男6例,女4例;MPS-Ⅰ1例,MPS-Ⅱ1例,MPS-Ⅳ4例,MPS-Ⅵ4例,年龄中位数4岁7月。结果所有均能顺利渡过白细胞"零期",顺利出仓及出院,造血干细胞移植成功,10例患儿现均存活。结论造血干细胞移植治疗MPS效果良好,护理过程中应着重患儿的心理疏导,防跌倒损伤及导管护理。

闭合复位经皮克氏针内固定治疗GartlandⅢ型肱骨髁上骨折的疗效分析

目的探讨对GartlandⅢ型肱骨髁上骨折患者采用闭合复位经皮克氏针内固定方法的治疗效果。方法选取2020年2月—2023年1月无锡儿童医院收治的68例GartlandⅢ型肱骨髁上骨折患儿为研究对象,以随机数表法分为参照组和研究组,各34例。参照组施以石膏固定治疗,研究组施以闭合复位经皮克氏针内固定治疗。对比两组的视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale,VAS)评分、Flynn肘关节评分量表评分、手术时间、住院时间、并发症(血管神经损伤、肘内翻畸形)总发生率。结果治疗前,两组VAS评分及Flynn评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组VSA评分与Flynn评分分别为(2.02±0.53)分、(85.79±6.53)分优于对照组,差异有统计学意义(t=9.001、9.771,P<0.05)。研究组手术时间、住院时间明显短于参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论闭合复位经皮克氏针内固定治疗,可改善GartlandⅢ型肱骨髁上骨折患儿的疼痛程度、肘关节功能,缩短手术时间、住院时间,显著降低并发症发生率,促进GartlandⅢ型肱骨髁上骨折患儿良好预后。

黄芪甲苷对人脐血间充质干细胞增殖与成管分化的影响

目的探讨黄芪甲苷(AS-ⅣV)对人脐血间充质干细胞(hUCBMSCs)体外增殖和成管分化的影响,为进一步研究AS-Ⅳ作用于间充质干细胞介导的血管新生奠定基础。方法从足月健康新生儿脐带血中提取并传代培养得到hUCBMSCs,分别进行成骨、成软骨和成脂诱导分化鉴定,同时对hUCBMSCs表面抗原CD44,CD73,CD105进行流式细胞仪鉴定。将鉴定成功的hUCBMSCs分别在不同浓度梯度的AS-Ⅳ(0.50、100、200.300.400 mg/L)干预下培养,确定AS-Ⅳ促hUCBMSCs增殖的最佳浓度。另将hUCBMSCs随机分为实验组和对照组,实验组用最佳浓度的AS-Ⅳ干预,对照组用等体积的PBS液处理。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测AS-IV对hUCBMSCs增殖的影响,另通过Matrigel体外成管实验检测AS-Ⅳ对hUCBMSCs成管分化的影响,并用免疫荧光检测hUCBMSCs向内皮细胞分化后CD31、血管性血友病因子(vWF)的表达情况。结果光镜下hUCBMSCs细胞边缘清晰,排列整齐,呈典型的长梭状结构。流式细胞仪证实hUCBMSCs细胞表面有间充质干细胞的表面标志物。AS-Ⅳ促进hUCBMSCs增殖的最佳浓度为300 mg/L。对照组和实验组的OD值分别为(0.51±0.01)和(0.98±O.05),差异具有统计学意义(t=15.96,P<0.05),显示实验组增殖能力增强。Matrigel成管实验显示.与对照组比较,实验组体外成管密度更大,体外形成管网状结构的长度更长,差异具有统计学意义[(629.80±52.94)mm vs(110.36±13.19)mm,P<0.05]。与对照组相比,实验组AS-Ⅳ诱导hUCBMSCs成管分化后CD31和vWF的表达均增多,差异有统计学意义(t=13.64,13.18,P<0.05)。结论AS-Ⅳ对人脐血间充质干细胞无毒性,且能改善其增殖功能,并诱导hUCBMSCs向内皮细胞成管分化。

2018—2020年豫南地区猪流行性腹泻病毒的遗传变异分析

为分析2018—2020年豫南地区猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的分子遗传变异情况,本研究利用RT-PCR方法从18个猪场PEDV感染仔猪组织中扩增S1基因部分片段、ORF3基因和N基因,进行核苷酸序列测定,并将PEDV流行株S1基因部分序列、ORF3基因和N基因推导氨基酸序列与参考毒株进行进化树构建与遗传变异分析。测序结果表明,18个猪场存在5株PEDV流行毒株。S1基因部分片段与N基因推导氨基酸进化树与相似性结果表明,5株PEDV流行株与已发表的2010年以后流行株组成G2群,与CV777株为代表的G1群毒株相似性分别为93.0%~96.7%和95.0%~96.8%。ORF3基因推导氨基酸进化树与相似性结果表明,5株PEDV流行株同其他非基因缺失毒株组成G2群,并分别属于G2a(HNXC和HNHC株)和G2c亚群(HNHB、HNNY和HNZY株),与缺失毒株组成G1群毒株的相似性为88.0%~92.4%,与CV777毒株所在G2b亚群毒株相似性分别为94.7%~96.4%和94.7%~96.9%。氨基酸遗传变异分析结果表明,与经典毒株CV777相比较,5株PEDV流行株的S1部分氨基酸、ORF3氨基酸和N氨基酸分别存在10,5,10个位置发生相同氨基酸置换,以及分别有16,10,14个位置氨基酸不同程度的突变,此外,5株PEDV流行株ORF3氨基酸不存在缺失,具有PEDV强毒株的分子遗传特征。综上所述,豫南地区PEDV流行具有PEDV变异毒株及强毒株的分子遗传特征,可为该地区PED的防控提供理论指导。