APPSWE转基因鼠的繁育及子代鉴定的研究

目的 :探讨老年性痴呆 (AD)转基因模型鼠 (TgAPPSWE2 576杂合子鼠 ,Tg2 576)的优化繁育方法 ,鉴定APPSWE基因阳性的子代鼠 ,为下一步AD研究奠定基础。方法 :(1)用 3种不同的交配方式观察子代鼠的存活率及APPSWE基因阳性的比率 ;(2 )从子鼠鼠尾中提取基因组DNA ,用PCR方法扩增APPSWE基因片段 ,电泳后观察结果 ;(3 )PCR产物装入pGEM -Teasy载体中 ,测序证实其基因序列。结果 :雄性和雌性Tg2 576互交 ,所产 4窝子鼠 ,2d内全部死亡。雄性Tg2 576和雌性C57BL交配所产子鼠存活率 81% ,APPSWE基因的阳性率为 43 3 %。雌性Tg2 576和雄性C57BL交配存活率 82 4% ,APPSWE基因的阳性率 2 1 9%。经秩和检验两种繁育方式所产子鼠的存活率无显著差异 (P >0 0 5) ,APPSWE基因的阳性率有显著差异 (P <0 0 5)。琼脂糖电泳显示PCR产物分子量为 42 8bp ,与目的基因片段相对分子质量大小一致 ;DNA序列测定证实PCR产物基因序列和APP片段基因序列一致 ,并存在APPSWE(K670N ,M671L)突变。结论 :雄性Tg2 576和雌性C57BL品系小鼠交配是繁育APPSWE基因阳性子鼠的较好方法 ;本实验所用PCR方法能够精确鉴定APPSWE基因阳性子鼠 。

高效液相色谱法测定谷子种质资源中维生素E的研究

谷子是富含维生素E的粮食作物,建立了应用高效液相色谱法(HPLC)测定谷子种质资源中维生素E的检测技术,并应用统计学原理对方法的精密度、准确度、再现性等进行了较全面的考察和评价。利用该方法对400份谷子种质资源进行了鉴定、评价,并筛选出一批高维生素E含量的种质资源。

Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠对脑内淀粉样斑块沉积和行为学的影响

目的探讨Aβ亚单位疫苗接种对Tg2576鼠淀粉样斑块沉积和行为学损害的影响。方法24只Tg2576鼠随机分为Aβ1-15组、Aβ36-42组、Aβ42组和对照组，9月龄时开始分别接种相应的疫苗，间接ELISA法检测血清和脑匀浆上清液特异性抗体的滴度；免疫组织化学染色观察脑内淀粉样斑块沉积；Morris水迷宫测试行为学变化；组织染色观察脑、肝、脾、肺和肾的组织学变化。结果第2次接种后各实验组即明显有抗Aβ42抗体产生，抗体滴度随接种次数的增加而增加。停止接种，抗体滴度下降。脑匀浆上清液中也检测出低滴度的抗Aβ42抗体；疫苗接种6个月后，Aβ42、Aβ1-15和Aβ36-42组鼠皮层和海马淀粉样斑块沉积量与对照组相比均明显减少（P〈0．01），其认知能力显著高于对照组（P〈0．01）。Aβ1-15组和Aβ42组相比差异无显著性（P〉0．05），但优于Aβ36-42组（P〈0．01）；各组鼠的脑、肝、脾、肺和肾均未发现病理变化。结论邯亚单位疫苗接种能有效阻抑Tg2576鼠淀粉样斑块形成和认知功能退化，未发现不良反应。提示用Aβ1-15疫苗替代其全肽疫苗而用于AD免疫治疗，值得进一步研究。

AD转基因模型Tg2576鼠阳性子鼠的病理和认知行为变化

为探讨老年性痴呆(AD)转基因模型Tg2576(hAPPSWE)鼠阳性子一代鼠的病理和行为学变化,确定其是否具有亲代的性状,为AD研究提供理想的动物模型。本研究随机选取我室繁育并鉴定的子一代hAPPSWE基因阳性鼠(hAPPSWE+)和hAPPSWE基因阴性鼠(hAPPSWE-),分别在4、7、9月龄时经Y迷宫及15月龄时经水迷宫检测其行为学变化和脑内病理变化,并对皮质和海马的淀粉样斑块进行定量研究。结果显示:(1)4月龄和7月龄的子一代hAPPSWE+鼠的空间辨别学习记忆能力与hAPPSWE-鼠相比,差异无显著性(P>0.05),但9月龄时两者之间的差异有高度显著性(P<0.01);(2)在4月龄和7月龄的子一代hAPPSWE+鼠的脑组织切片上免疫组化染色未观察到淀粉样斑块,9月龄时均观察到明显的淀粉样斑块沉积,但hAP-PSWE-鼠无论在任何1个月龄均未观察到淀粉样斑块沉积;(3)定量结果显示9月龄的子一代hAPPSWE+鼠的皮层淀粉样斑块占整个皮层面积的0.21%,海马的淀粉样斑块占海马面积的0.14%,而15月龄时其淀粉样斑块的数量和面积增加明显,占整个皮层面积的4.26%,海马的淀粉样斑块占海马面积的2.51%。上述结果表明子一代hAPPSWE+鼠的行为学变化及脑内淀粉样斑块出现的时间、部位、类型与亲代一致。因此,子一代hAPPSWE+鼠和其亲代一样可用于AD研究,本实验的定量结果也为评价AD的干预治疗效果提供了参考数据。

自转微椭、非均匀地球的潮汐变形

鉴于当前国际上关于自转微椭、非均匀地球（ＳＲＥＨＩ）的固体潮汐响应的结果之间存在明显分歧，特别是Ｌｏｖｅ数ｋ及重力潮汐因子δ对纬度的依赖情况截然不同，本文借助于摄动法与张量正则分量的广义球谐展开建立起来的侧向非均匀、自转微椭、粘弹地球的潮汐模拟理论，计算了ＳＲＥＨＩ地球的潮汐形变及相应的引力位变化．结果表明，描述径向位移的Ｌｏｖｅ数的纬度依赖部分系数ｈ＿＋与球对称部分ｈ＿０＋δｈ＿０之比不大于１．０‰；对Ｏ＿１波为０．２７‰；对Ｍ＿２波为０．１９‰；对Ｍ＿３波为０．４９‰；对Ｍ＿４波为０．８８‰．描述地球引力位变化的Ｌｏｖｅ数的纬度依赖部分系数ｋ＿＋与球对称部分ｋ＿０＋δｋ＿０之比小于３．０‰；对Ｏ＿１波为２．６７‰；对Ｍ＿２波为１．８９‰；对Ｍ＿３波为２．２４‰；对Ｍ＿４波为２．７０‰．

谷子初级核心种质生育酚的组分及其评价

利用高效液相色谱法(HPLC)对466份谷子初级核心种质资源进行了生育酚含量的测定与评价。结果表明:谷子子粒中生育酚总含量和(β+γ)-T的含量呈正态分布,α-T、δ-T的含量呈偏态分布,且(β+γ)-T是谷子生育酚的主要组成成分。在6大生态区中,淮河以南和西北内陆的生育酚总含量及(β+γ)-T的含量较高,而东北平原和西北内陆α-T的含量较高。同时发现黑色、褐色子粒生育酚及各组分的含量均高于其他粒色。文中对谷子种质资源生育酚及其组分含量的分布、分类进行了分析,并筛选出一批高生育酚含量和高α-生育酚含量的种质资源。

兔心肌缺血及缺血再灌注模型的制备

目的 探讨制备兔心肌缺血及缺血再灌注损伤模型的最佳选择血管。方法 30例兔心脏乳胶灌注后解剖观察左冠状动脉及分支的走行。活体观察左冠状动脉分支的位置和形态 ,制备模型并验证模型效果。结果 典型左室支 2 2例 ,占73 3%。前降支呈现三种类型 :Ⅰ型 17例占 5 7% ,Ⅱ型 10例占 33% ,Ⅲ型 3例占 10 %。结论 在制备兔心肌缺血及缺血再灌注损伤模型时应以左冠状动脉的左旋支发出的左室支为模型制备的首选血管 。

谷子(Setaria italica)分子遗传研究进展

近年来不断发展和完善的生物技术为谷子的研究开辟了新的思路,且提供了新的手段。本文概述了谷子在分子标记、遗传图谱的构建、基因定位、功能蛋白基因的克隆、转基因技术等方面的研究进展,提出了谷子分子遗传研究中存在的问题,并对今后的发展趋势作了初步探讨。

兔实验性心肌缺血再灌注损伤与心肌细胞凋亡的关系

目的 探讨实验性心肌缺血再灌注损伤时心肌细胞是否凋亡及凋亡率的大小。方法 阻断左冠状动脉的左室支建立家兔心肌缺血模型 ,达到预定的缺血时间后 ,使血管再通 ,建立心肌的缺血再灌注模型。采用透射电镜、原位末端探针标记 ,图像分析 ,对缺血再灌注损伤区心肌细胞的损伤情况进行研究。结果 电镜观察显示缺血再灌注损伤区呈现明显的心肌细胞凋亡征象 ,TUNEL检测结果显示缺血再灌注损伤区出现心肌凋亡阳性细胞 ,平均凋亡率为 2 1 10 %。结论 心肌缺血再灌注损伤的发生与凋亡机制有关 ,并可能是其发生的重要原因。

兔心肌缺血再灌注损伤的超微结构变化及凋亡检测

目的 探讨实验性心肌缺血再灌注损伤时心肌超微结构变化及心肌细胞凋亡的发生。方法 选家兔 6只 ,阻断左冠状动脉的左室支建立心肌缺血模型 ,达到预定的缺血时间后 ,使血管再通 ,建立心肌的缺血再灌注模型。采用透射电镜、原位末端探针标记 (TUNEL)对不同损伤区心肌细胞的损伤情况进行研究。结果 电镜观察显示缺血再灌注损伤中心区呈现明显的心肌细胞凋亡征象 ,在缺血再灌注损伤交界区可见心肌细胞凋亡的早期征象 ,TUNEL检测结果显示缺血再灌注损伤中心区出现较多的凋亡阳性细胞 ,而损伤交界区出现较少的凋亡阳性细胞。结论 心肌细胞凋亡是心肌缺血再灌注损伤的重要特征 。

不同表位Aβ亚单位疫苗引起免疫反应类型及疫苗安全性评价

为了研究不同表位Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠引起的免疫反应类型和疫苗的安全性,本研究选用32只5月龄Tg2576小鼠,并随机分成对照组、Aβ42组、Aβ1-15组和Aβ36-42组,5月龄时开始分别接种相应疫苗,接种7个月,间接ELISA法测定血液及脑匀浆上清液中抗Aβ42的抗体滴度。分别取4组小鼠的脾细胞进行培养,用刀豆蛋白(ConA)和各自抗原刺激,ELISA法检测培养液中IFN-γ,IL-2,IL-4和IL-10的含量,免疫组化法检测脑内小胶质细胞的增生情况,组织化学法检测脑、肝、脾、肺、肾组织有无病理性改变。结果显示:(1)与对照组相比,疫苗免疫组血清和脑组织匀浆上清液中抗Aβ42抗体的滴度明显有所增高(P<0.01);(2)脾细胞培养,经ConA或各自抗原刺激后,3组疫苗免疫组细胞增殖显著高于对照组(P<0.01)。培养液中免疫因子检测显示Aβ42组IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10均较高,Aβ1-15组中IL-4和IL-10较高,Aβ36-42组IFN-γ和IL-2较高。免疫组织化学法显示4组小鼠大脑皮质与海马部位均有大量OX-42阳性小胶质细胞,疫苗免疫组OX-42细胞数量更多,但4组之间无显著性差异(P>0.05);(3)HE及组织特异性染色显示在疫苗接种组鼠的重要器官未见病理性改变。上述结果表明,Aβ42疫苗可引起Th2和Th1免疫反应,Aβ1-15亚单位主要引起Th2免疫反应,Aβ36-42疫苗主要引起Th1免疫反应。3种疫苗均可进一步激活脑内小胶质细胞,增强其Aβ清除能力,未发现疫苗接种引起的毒副作用。因此,本实验结果提示Aβ1-15亚单位疫苗更符合AD免疫治疗的要求。

兔心肌缺血性损伤致心肌细胞凋亡的定位及定量研究

目的探讨实验性急性心肌梗塞时心肌细胞凋亡的部位及凋亡率。方法结扎左冠状动脉的左室支建立心肌缺血模型,采用原位末端探针标记、透射电镜、自动图像分析仪和统计处理,对不同损伤区心肌细胞的损伤情况进行研究。结果中心缺血区心肌组织呈现缺血坏死征象,未见心肌凋亡细胞;在梗塞交界区存在心肌细胞凋亡现象,平均凋亡率为25.51％。结论急性心梗时,中心缺血区心肌损伤以坏死为主,心肌细胞凋亡参与梗塞交界区心肌的损害。这为进一步研究心肌梗塞的治疗提供一个新的参考依据。

Aβ_(1-15)肽疫苗接种改善AD转基因模型Tg2576鼠的学习记忆能力

目的探讨Aβ1-15亚单位疫苗接种对AD转基因模型鼠学习记忆能力的影响。方法将24只AD转基因模型鼠(Tg2576鼠)随机分为Aβ1-15组、Aβ42组和对照组,每组8只。9月龄开始分别皮下接种相应的疫苗,每只鼠共6次(抗原量0.1mg/次),接种时程6个月;对照组皮下注射等量PBS加佐剂。疫苗接种前用Y-迷宫作行为学测试,接种后用Morris水迷宫测作行为学测试。结果疫苗接种前,各组Tg2576鼠的空间学习记忆能力无显著性差异(P>0.05);疫苗接种6个月后,Aβ1-15组,Aβ42组鼠的空间学习记忆能力明显高于对照组鼠(P<0.01);Aβ1-15组鼠与Aβ42组鼠相比差异无显著性(P>0.05)。结论Aβ1-15亚单位疫苗接种和其全肽疫苗一样可以改善Tg2576鼠的学习记忆能力,因而可以替代其全肽疫苗用于AD免疫治疗的进一步研究。

兔心肌缺血性损伤的超微结构变化及凋亡检测

目的 探讨实验性急性心肌梗塞时不同损伤区域心肌超微结构的变化及心肌细胞是否凋亡。方法 结扎左冠状动脉的左室支建立心肌缺血模型 ,采用透射电镜、原位末端探针标记 ,对不同损伤区心肌细胞的损伤情况进行研究。结果 电镜观察显示中心缺血区心肌组织呈现缺血坏死征象 ,而梗塞交界区呈现明显的心肌细胞凋亡征象。TUNEL检测结果显示中心缺血区未见心肌凋亡细胞发生 ,而梗塞交界区有心肌凋亡细胞检出。结论 急性心梗时 。

基于PREM模型的地球椭率及其一、二阶导数沿径向的分布

本文基于ＰＲＥＭ模型，通过解Ｃｌａｉｒａｕｔ微分方程求出地球的椭率及其一、二阶导数沿径向的分布，作为比较，计算分别采用自然边界和用大地测量给出的地表椭率两种边界条件，结果表明二者的椭率分布相对误差为３．９‰，最大不超过４‰。

内部膨胀源引起的粘弹地球的重力场变化及地面起伏──理论部分

本文主要研究由内部膨胀源引起的粘弹介质地球的重力场变化及地面起伏．首先建立了适用于地球物理问题的关于一个粘弹性、自转、自引力、任意初始构形、任意模型参数分布及具有任意初始应力的地球之Ｂｅｔｔｉ互易定理在Ｌａｐｌａｃｅ变换参数域的表达形式；然后将这个理论用于讨论粘弹性、非自转、球形径向非均匀、自引力，初态为流体静力平衡的地球响应于内部膨胀源的重力场变化和地表起伏．

固体潮研究进展

本文较全面的叙述了固体潮学发展的历史及其基本原理、基本方法和基本研究内容阐明了这一学科的研究现状及存在问题。分析了其发展趋势和方向。

量纲统一在滑坡易发性评价中的影响分析

以往的区域性滑坡易发性评价研究多以对比不同评价模型结果和改进模型为主,而忽视了所选致灾因子的信息保留以及因子量纲如何统一的问题。为探究致灾因子的相关性和量纲对易发性评价结果的影响,以甘肃省靖远县北部地区作为研究区,选取高程、坡度、坡向和地形起伏度等12个因子,利用主成分分析提取的新因子参与易发性评价,并采用数据标准化、滑坡密度和信息量值替代法统一致灾因子的量纲,最后基于GIS平台绘制研究区滑坡易发性分区图。通过ROC曲线评估各模型的易发性评价结果精度。结果表明:在信息量模型、逻辑回归模型和感知机模型中,经主成分分析处理的因子得到的模型评价结果精度更高,采用信息量值替代法统一因子的量纲能够进一步提升逻辑回归和感知机模型的评价结果精度;同时,3种评价模型中感知机模型的结果精度最高(AUC=0.9367),优于信息量模型(AUC=0.9173)和逻辑回归模型(AUC=0.9272),是该研究区滑坡易发性评价的理想模型,应优先考虑。研究结果可为类似地区的防灾减灾工作提供基础数据和理论参考。

Aβ不同片段肽疫苗免疫鼠后血清对Aβ_(42)诱导细胞毒性作用的影响

【目的】探讨Aβ42及其亚单位疫苗免疫鼠后其血清对Aβ42诱导的细胞毒性作用的影响,为其体内应用提供依据。【方法】①用间接ELISA法测定Aβ42和K7Aβ36-42疫苗接种鼠后的血清中抗体滴度;②将不同浓度的Aβ42和K7Aβ36-42加入培养有PC12细胞的96孔培养板中,检测其对PC12细胞的毒性作用;③用不同浓度的Aβ42及K7Aβ36-42疫苗免疫鼠血清加入含Aβ42的培养基中,与PC12一起孵育培养,7d后用MTT法和酶标仪测定存活细胞的A值。【结果】①Aβ42和K7Aβ36-42疫苗接种后血清的平均抗体滴度分别为1∶6800和1∶4600;②10mg/L和20mg/LAβ42组细胞的存活率与空白组相比差异有显著性(P<0.01);③各浓度K7Aβ36-42组与空白组相比差异均无显著性(P>0.05)。在浓度为20mg/LAβ42的培养基中加入Aβ42疫苗或K7Aβ36-42疫苗免疫鼠血清,各浓度的免疫鼠血清组和阳性对照组相比差异均有显著性(P<0.05或P<0.01)。【结论】Aβ42疫苗和Aβ亚单位疫苗免疫鼠后,其血清均能在体外抑制Aβ42对细胞产生的毒性作用。

石菖蒲不同药效部位改善阿尔茨海默病模型小鼠的认知功能

目的:探讨石菖蒲不同药效部位改善阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型小鼠认知功能的机制。方法:雄性NIH小鼠,采用双侧海马CA1内注射淀粉样β蛋白(Aβ1-42,2 g/L,每侧2μL)制备AD小鼠动物模型,并以生理盐水模拟注射和不注射的正常组小鼠为对照。通过水迷宫测试,筛选出与两对照组均有显著差异的认知障碍小鼠,留作AD动物模型。AD动物模型又随机分为生理盐水灌胃组、石菖蒲水煎液灌胃组、石菖蒲去油水煎液灌胃组和石菖蒲挥发油灌胃组。每组6只,共4组。以生理盐水灌胃组为对照,石菖蒲不同药效部位灌胃组每天对应灌胃1次(0.2 g石菖蒲/10 g体重),连续3周。灌胃结束,Morris水迷宫检测小鼠的空间学习记忆能力,测定小鼠大脑和海马中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性,免疫组织化学方法检测脑中NOS的表达。结果:水迷宫测试结果表明,石菖蒲不同药效部位(水煎液和挥发油)灌胃2组模型小鼠与生理盐水灌胃组小鼠相比,60 s内跨越平台的次数和在目标象限的探索时间均明显增加(P<0.05);大脑和海马内NOS活性检测显示,石菖蒲不同药效部位灌胃3组AD模型小鼠和其对照组相比,大脑和海马内NOS活性下降,NOS阳性神经元数量明显减少(P<0.05)。结论:石菖蒲不同药效部位能显著改善Aβ1-42致AD模型小鼠的学习记忆能力,其疗效可能与降低大脑和海马中的NOS活性有关。