半胱氨酸、蛋氨酸对体外培养绒山羊次级毛囊生长及毛乳头细胞增殖的影响

旨在探讨半胱氨酸(Cys)、蛋氨酸(Met)对体外培养燕山绒山羊次级毛囊(SF)生长及毛乳头细胞(DPCs)增殖凋亡的影响。本研究选取1只1周岁左右健康雄性燕山绒山羊皮肤若干,完整分离的次级毛囊随机分成Cys试验组和Met试验组,每组各浓度3个重复,每个重复8根毛囊,Cys试验组添加浓度分别为0、40、80、120、160和200μg·mL^(-1);Met试验组添加浓度分别为0、10、15、20、25和30μg·mL^(-1)。毛囊培养7 d,每隔24 h观察毛囊生长形态并测量毛囊生长长度。从燕山绒山羊次级毛囊中提取、纯化DPCs,细胞计数并绘制DPCs生长曲线,将DPCs随机分为Cys试验组和Met试验组,每组各浓度6个重复,Cys试验组添加浓度分别为0、20、40、60、80、100μg·mL^(-1);Met试验组添加浓度分别为0、2、4、6、8、10μg·mL^(-1)。培养2 h后用CCK-8试剂盒进行细胞增殖活力测定,确定燕山绒山羊DPCs中Cys和Met的最适培养浓度,利用qRT-PCR技术检测不同浓度Cys和Met的DPCs增殖相关基因(PCNA、CCND1、CDC42、CDK 4)、凋亡相关基因(P21、P53、Bax、Caspase-3、Bcl-2)、皮肤细胞分化相关基因(IVL)及角蛋白相关基因(K10、K 14)mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,添加80和120μg·mL^(-1) Cys与10、15、20和25μg·mL^(-1) Met均可显著影响次级毛囊生长速率和累计生长长度(P<0.01),且120μg·mL^(-1) Cys和20μg·mL^(-1) Met促生长效果最好;添加20、40和60μg·mL^(-1) Cys可以显著影响DPCs增殖(P<0.05),添加40μg·mL^(-1) Cys显著上调PCNA、CCND1、CDK4、Bcl-2、K10、K 14和IVL基因mRNA表达量(P<0.05);添加6μg·mL^(-1) Met可以显著影响DPCs增殖(P<0.05),并显著上调PCNA、CCND1、CDK4、P21、Bcl-2、K 10和K 14基因mRNA表达量(P<0.05)。综上,添加Cys和Met可以显著促进长绒期燕山绒山羊次级毛囊生长,最适添加量分别为120μg·mL^(-1)和20μg·mL^(-1);添加Cys和Met可通过上调细胞增殖、分化、角蛋白等基因mRNA、下调细胞凋亡基因mRNA表达,促进乳头细胞增殖、抑制细胞凋亡进而促进燕山绒山羊次级毛囊生长。

羔羊日粮中添加缓释尿素对体外发酵参数及主要营养物质消化率的影响

试验旨在探究羔羊日粮中添加不同比例缓释尿素(SU)对瘤胃体外发酵参数和主要营养物质消化率的影响。采用体外发酵法,设置6个试验组,分别在羔羊育肥期日粮中添加0%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%SU,每组4个重复。结果表明:1.0%SU组和1.5%SU组2、4、8h累积产气量高于对照组、2.0%SU组和2.5%SU组(P<0.05),1.0%SU组和1.5%SU组10、12、24 h累积产气量高于2.5%SU组(P<0.05);2.5%SU组6、8、10、12 h累积产气量低于对照组(P<0.05),各试验组48 h累积产气量无显著变化;1.0%SU组干物质消化率高于对照组、0.5%SU组、2.0%SU组、2.5%SU组(P<0.05),1.0%SU组、1.5%SU组、2.0%SU组、2.5%SU组总能、粗蛋白质消化率均低于对照组(P<0.05),0.5%SU组总能消化率高于对照组(P<0.05),1.5%SU组、2.0%SU组和2.5%SU组中性洗涤纤维消化率低于对照组(P<0.05),1.0%SU组酸性洗涤纤维消化率最高(P<0.05);2.0%和2.5%SU组体外发酵液pH高于对照组(P<0.05);1.5%SU组、2.0%SU组和2.5%SU组乙酸/丙酸值低于对照组(P<0.05)。由此可见,羔羊育肥日粮中添加1.0%和1.5%SU可以提高瘤胃产气量,提高干物质、粗蛋白质消化率,稳定瘤胃液pH,并利于丙酸发酵,但1.5%SU组中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维消化率较1.0%SU组有所下降,添加1.0%SU效果最佳。

γ-氨基丁酸对绵羊卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇激素分泌的影响

【目的】该文章旨在探究γ-氨基丁酸(GABA)对绵羊卵巢颗粒细胞(GCs)凋亡及类固醇激素分泌的影响。【方法】卵巢GCs培养液中分别添加0、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)和10^(-5)mol/L的GABA处理24 h后,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测GCs增殖及凋亡情况,筛选出GABA适宜培养浓度用于后续试验,采用ELISA检测GABA对GCs雌激素(E_(2))及孕酮(P_(4))分泌的影响,RT-q PCR及Western blot技术检测促GCs增殖(PCNA、CCNB1、CCND1)、促凋亡(Caspase-3、Bax)、抗凋亡(Bcl-2)和类固醇激素合成相关基因(CYP11A1、St AR、3β-HSD、CYP19A1)m RNA及蛋白的表达。【结果】添加GABA处理绵羊卵巢GCs 24 h,各组均可显著促进GCs增殖(P<0.05),抑制其凋亡(P<0.05)。GABA可显著上调PCNA、CCNB1、CCND1、Bcl-2 m RNA及蛋白表达量(P<0.05),显著下调Bax、Caspase-3 m RNA及蛋白表达量(P<0.05)和Bax/Bcl-2比值(P<0.05)。GABA可显著促进P_(4)的分泌(P<0.05),显著抑制E_(2)的分泌(P<0.05)。显著上调St AR、3β-HSD、CYP11A1的m RNA及蛋白表达水平(P<0.05),显著下调CYP19A1的m RNA及蛋白水平(P<0.05)。【结论】GABA通过调节CCNB1、CCND1、PCNA、Caspase-3、Bcl-2、Bax基因表达促进GCs的增殖,抑制其凋亡;通过调节St AR、3β-HSD、CYP11A1、CYP19A1基因表达促进GCs的P_(4)分泌,抑制E_(2)生成。

L-半胱氨酸对绵羊卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和类固醇激素分泌的影响

旨在探讨L-半胱氨酸(L-Cys)对体外培养绵羊卵巢颗粒细胞(GCs)增殖、凋亡和类固醇分泌的影响。本研究采集1~1.5岁龄体重相近饲养条件相同的30只健康性成熟小尾寒羊母羊新鲜卵巢,从优势卵泡(2~8 mm)中收集GCs,随机分为5组,每组6个重复,各组添加L-Cys浓度分别为0、100、300、500和700μmol·L^(-1),培养48 h后用CCK-8试剂盒进行细胞增殖活力测定,Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测GCs的凋亡情况,采用ELISA检测GCs培养液上清中孕酮和雌二醇的分泌水平并采用实时荧光定量PCR和Western blot分析L-Cys对绵羊颗粒细胞增殖相关基因(PCNA、CCND2、CCNB 1)、凋亡相关基因(BAX、Caspase-3、Bcl-2)和类固醇分泌相关基因的(STAR、3β-HSD、CYP 11A1、CYP 19A1)mRNA和蛋白表达的影响。结果显示,100、300和500μmol·L^(-1)组的L-Cys均可显著促进绵羊GCs的增殖活力(P<0.05),并显著抑制其凋亡率(P<0.05)。添加300μmol·L^(-1)的L-Cys显著抑制了孕酮(P 4,P<0.05)的分泌。进一步研究发现,300μmol·L^(-1)和500μmol·L^(-1)组的L-Cys可以上调增殖相关基因(PCNA、CCND2、CCNB 1)mRNA表达水平,其中300μmol·L^(-1)组的增殖蛋白(PCNA、CCND2、CCNB1)表达量显著上升(P<0.05);100μmol·L^(-1)和300μmol·L^(-1)组显著下调凋亡相关基因(BAX、Caspase-3)mRNA(P<0.05)及其蛋白表达水平(P<0.05)。添加300μmol·L^(-1)L-Cys显著降低了类固醇相关基因(STAR、3β-HSD)mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),添加100μmol·L^(-1)和300μmol·L^(-1)L-Cys显著升高了类固醇相关基因(CYP 11A1、CYP 19A1)mRNA(P<0.05)及其蛋白表达水平(P<0.05)。综上,L-Cys通过上调基因PCNA、CCNB1、CCND2、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达、下调基因BAX、Caspase-3 mRNA及其蛋白表达,促进绵羊GCs增殖,抑制其凋亡;L-Cys通过下调基因STAR、3β-HSD mRNA及其蛋白表达以及上调基因CYP 11A1 mRNA及其蛋白表达抑制P 4的分泌。

古浪县马铃薯生产现状与发展建议

马铃薯营养丰富,粮菜兼用,适应性强,种植范围广,是甘肃省古浪县种植的主要农作物之一。发展马铃薯产业在深入推进农业产业结构调整、增加农民收入、助推乡村经济振兴等方面发挥着重要作用。本文介绍了古浪县马铃薯产业发展现状,分析了存在的主要问题,提出了加强集成技术示范推广,规范种植技术;建立良繁体系,提高种薯质量;培育新型经营主体,延长产业链条;转变营销理念,拓展销售渠道;建设仓储冷链设施,减少产后损失等方面的发展建议,以期为马铃薯产业发展提供参考依据。

洋山深水港区进港外航道台风期适航水深研究

为了减小航道维护的工程量,减少台风期所造成的损失,开展洋山深水港区进港外航道台风期适航水深研究。通过对航道及其附近浅滩底质及浮泥样品的密度、盐度、颗分分析,并进行航道沉积物的沉降特性试验、流变特性试验以及泥沙起动试验等内容的研究,提出洋山港区航道的适航密度,并应用SILAS走航式适航水深测量系统成功获得了适航水深测量成果,在淤泥质港口的水深维护应用中具有较好的推广价值。

某高速公路上面层配合比设计及施工质量控制

简要介绍了蚌明高速公路AC13上面层的配合比设计及现场施工控制手段,阐述了配合比及现场施工关键控制要点。

参量阵浅剖探测技术在海底管线探测中的应用

以航道、港口海底管线为探测目标,以浅地层剖面( sub-bottom profile)探测技术为主要技术手段,结合SES2000 系列浅地层剖面探测系统在近海航道、港口海底管线探测中的应用案例,探讨 SBP 探测技术在管线探测中的应用。就浅剖图像中的航道、港口海底埋深管线识别定位中存在的技术难题,提出了基于波路径的偏移处理定性分析法和基于信号分析的管道反射弧识别定量计算法进行管道埋深的分析与计算,结合 DGPS 导航系统可准确获取管线所在平面位置与埋深深度。对于航道适航安全、港口安全建设具有积极意义。

无人船在近浅海水下考古领域的工程实践

以无人船在我国某近浅海水下考古项目中的工程实践为样本,探讨无人船在典型水下浅埋不连续小目标探测任务中的施工方式设计方法以及优势和不足。本项目中一艘搭载条带探测设备的母船与两艘搭载参量阵浅地层剖面仪的无人船协同作业,母船进行大区域扫测,发现疑似目标后现场操作人员控制无人船对目标进行加密测量、精细探测,为水下目标的甄别提供更准确、丰富的参考数据。实践证明,该施工方法优势在于充分利用无人船对声学设备航行扰动弱、循线精度高、通过性好的优势,提高了作业效率、增大了现场可探测范围、提高了水下目标的探测准确性,不足之处在于受现阶段设备操作方式的限制,现场仍需根据设备数量投入较多的操作人员。

羔羊痢疾的症状及防治措施

羔羊痢疾是由B型魏氏梭菌引起初生羔羊的一种急性毒血症,其特征为剧烈腹泻和小肠发生出血性、溃疡性炎症。死亡率很高,对养羊业的危害很大。1流行病学本病主要危害1周龄以内的羔羊,其中2-3日龄羔羊发病最多,随着日龄的增长,易感性逐渐降低,7日龄以上的羔羊很少发病。？羔羊及带菌母羊是重要的传染源,其传播途径是病菌从污染的饲料、饮水等经消化道感染。

编读往来

你们好!我是电缆厂普通的一名员工，和《大众标准化》相识已经有1年多了，早就想跟编辑部的朋友们说说我的心里话了，今天，终于按捺不住心中的冲动，便提起了笔……

铁路货车用120阀与车体安装方式

文中通过对铁路货车120阀与车体紧固螺栓的联接结构形式进行分析,提出了改进建议,以达到切实提高铁路货车车下悬挂件使用安全的目的。

自翻车气缸轴承座与气缸架间加装调整垫板的研究

通过对KF60QK型自翻车倾翻性能和螺栓坚固性能的分析,探讨了该车检修中在气缸轴承座与气缸架之间加装调垫板的可行性,并指出了加装垫板的工艺要求。

JJF1411-2013《测量内尺寸千分尺校准规范》解读

一、修订背景 自GB／T6314—2004《三爪内径千分尺》替代了GB／T6314—1986《三爪内径千分尺》，以及GB／T22093—2008《电子数显内径千分尺》实施后，JJF1091—2002《测量内尺寸千分尺校准规范》（以下简称“旧规范”）在技术指标、校准范围和校准方法上已经落后。急需增加电子数显内测千分尺以及电子数显三点内径千分尺的校准要求及内容。为使校准规范更加合理、有效和具有指导实际工作的意义．并完善旧规范示值误差测量结果不确定度分析方面的内容，急需进行修订。

JJF1411-2013《测量内尺寸千分尺校准规范》解读

一、修订背景自GB/T6314-2004《三爪内径千分尺》替代了GB/T6314-1986《三爪内径千分尺》,以及GB/T22093-2008《电子数显内径千分尺》实施后,JJF1091-2002《测量内尺寸千分尺校准规范》(以下简称"旧规范")在技术指标、校准范围和校准方法上已经落后,急需增加电子数显内测千分尺以及电子数显三点内径千分尺的校准要求及内容。为使校准规范更加合理、有效和具有指导实际工作的意义,并完善旧规范示值误差测量结果不确定度分析方面的内容,急需进行修订。