奶牛α干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性测定

提取经新城疫病毒诱导培养的奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛α干扰素成熟蛋白基因,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,扩增片段为牛α干扰素成熟蛋白序列,与Genebank上发表的α1干扰素序列同源性为98%。然后将特异性片段连接到含分泌信号肽序列的Pichiapastoris表达载体pPICZαA上,将重组质粒经SacI酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。转化子经PCR分析鉴定后利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了BoIFN-α在毕赤酵母系统中的分泌表达。SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为23kDa,比其推导结果(20kDa)略大,推测可能是因为表达产物发生了一定程度的糖基化。细胞病变抑制法结果表明,重组牛IFN-α具有较高的干扰素活性,约为4.1×105U/ml,经微量蛋白测量仪测得,其表达量约为80μg/ml,比活为5.1×106U/mg。

高效毛细管电泳法研究美托洛尔、艾司洛尔和维拉帕米的对映体的手性分离

目的：用高效毛细管电泳法分离美托洛尔、艾司洛尔和维拉帕米的对映体的手性分离。方法：在６５ｍｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐缓冲溶液中加入５．５ｍｍｏｌ·Ｌ－１羧甲基βＣＤ（ＣＭβＣＤ）手性选择剂，ｐＨ＝４．５，紫外λ２１２ｎｍ检测。结果：美托洛尔、艾司洛尔和维拉帕米的对映体得到基线手性分离。结论：此方法分析速度快，手性分离效果好，可用于上述药物对映体的临床研究。

高效毛细管电泳法研究阿托品类药物的手性分离

目的：对阿托品、东莨菪碱和樟柳碱等药物对映体的手性分离进行研究。方法：用高效毛细管电泳法（ＨＰＣＥ），分别以β环糊精（βＣＤ）和羧甲基β环糊精（ＣＭβＣＤ）为手性选择剂。结果：ＣＭβＣＤ可使阿托品和东莨菪碱的对映体得到部分分离，使樟柳碱的对映体得到完全分离；βＣＤ未能拆分阿托品和东莨菪碱的对映体，仅使樟柳碱的对映体得到部分分离。

羧甲基-β-环糊精用于若干手性药物的毛细管电泳拆分

以羧甲基β环糊精（ＣＭβＣＤ）为手性选择剂，利用毛细管电泳（ＣＥ）法对五种手性药物进行了成功的拆分，并与β环糊精（βＣＤ）进行了对比。对影响手性分离的主要因素：手性选择剂、背景电解质（ＢＧＥ）、分离体系的酸度和温度进行了讨论，并对手性识别机理进行了探讨。

南阳盆地农业生态系统合理布局研究

在系统分析南阳盆地生态农业环境特征的基础上，根据生态系统建设的要求，将整个盆地分为四个农业生态类型区，并因地制宜的进行了生态农业综合开发布局。

南阳盆地恐龙蛋化石古地理环境初探

南阳盆地恐龙化石群的发现是我国科学界的又一重大发现。本文依据野外调查和已有的资料，在深入分析区域地质构造、地层特点和化石分布规律的基础上，深入探讨了当时的古地理环境及其演变过程。对区内古地貌轮廓，古气候与生物界，盆地沉积环境，恐龙灭绝的环境因素等进行了分析，并对“保存环境”提出保护措施。

奶牛γ干扰素基因的高效表达及活性测定

经刀豆素(conA)刺激诱导奶牛外周血淋巴细胞,应用RT-PCR方法从其总RNA中对奶牛γ干扰素基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经SDS-PAGE分析,原核表达产物为16kDa的重组蛋白,占菌体总蛋白的42%,表达产物以包涵体形式存在。经7mol/L盐酸胍的变性液溶解及0.5mol/L盐酸胍复性液处理,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化,细胞病变抑制法结果表明,重组牛IFN-γ具有较高的干扰素活性,约为6.0×105U/mg。

用遥感图象编制河南1:25万土地类型图

土地类型图是土地类型分布特征、土地类型结构及其特点在地图上定性、定量和定位的反映。目前,国内还没有其他省编制出全省系统的1∶25万土地类型图,无成规可循。 一、区域概况 河南总土地面积16.7万平方公里,占全国土地总面积的1.74％。大致以京广线为界;西为连绵起伏的山地,东为广阔坦荡的平原。自西向东地势呈阶梯状降低。气候属大陆性季风气候。依据区内热量和水分状况及区域组合差异,以秦岭、淮河为界可分为北亚热带湿润区和暖温带半湿润区。

论豫西黄土丘陵区的综合治理与开发

豫西黄土丘陵台地位于河南省西部,西邻陕西,北濒黄河,南与伏牛山区交错,东同黄淮平原接壤。包括三门峡、洛阳、郑州三市的大部和平顶山、许昌两市的部分地区,共计21个县、市。总土地面积约24733平方公里,总人口1128万人,分别占全省土地面积和总人口的14.8％和12.3％。区内耕地面积1392万亩,占全区土地总面积的40％,人均耕地1.23亩,同全省人均耕地数量相当。由于本区地处西部黄土高原与东部黄、淮、海平原的交接和过渡地带,在特定的环境条件下。

岩溶地貌旅游资源特征与开发导向

本本从分析岩溶地貌发育机理的三大基本要素入手,对那些可供观赏的类型或造型奇特具有旅游价值的岩溶地貌,据其评价标准,进行了全面的旅游资源质量评价。提出岩溶地貌旅游资源系统开发利用导向,应该是岩溶旅游资源、环境生态美学相结合的开发型导向。即资源—环境复合型的开发导向;旅—工—农开放型的开发导向;利用与保护结合型的开发导向。

豫南丘陵山区农业生态环境问题与对策

本文是在实地科学考察研究的基础上,针对豫南丘陵山区农业生态环境存在的突出问题,通过深入的分析研究,提出了保护和创建良好的农业生态环境,尽快实现区域生态经济平衡的对策。

云南巍山谷波罗斑岩体岩石地球化学特征及岩浆演化

谷波罗斑岩体为哀牢山-金沙江富碱岩浆岩带的组成部分,受红河断裂西北段及其两侧次生断裂控制,具有极其独特的地质意义(张娟,2009)。前人已对该区及周边地区侵入岩做了初步研究,但并未对该区斑岩体做较为系统地地球化学研究,本文以区内盟铺马幅西北端碱性斑岩体的主量、微量和稀土元素分析数据为依据,系统讨论了斑岩体的岩石地球化学特征。

我国锅炉压力容器安全评估技术获重大进展——“八五”国家科技攻关成果介绍

本文综合介绍了我国"八五"国家重点科技攻关课题《在役锅炉压力容器安全评估与爆炸预防技术研究》的攻关目标、技术路线、主要研究内容和取得的重要成果,攻关成果达国际先进水平,并已在数百项工程与检测评估项目中得到应用。

尿素氮反应板的研制及临床应用

应用最早的尿素氮(BUN)干化学方法是试纸法。试纸法具有简易、快速和经济等优点,在临床上有一定的应用价值。但在血液pH小于7.3或大于7.6时,BUN试纸法的测定结果存在负的或正的干扰。针对试纸法存在的问题,本文报告一种“分隔-偶联—密闭”的反应系统,可消除血液pH变化的干扰,提高测定的可靠性并扩大测定范围.

内蒙古克什克腾旗广兴源地区花岗岩岩石化学特征及含矿性

华北地台北缘的广兴源地区分布着大量北东东向展布的花岗岩,主要受区域一级构造道营水—八里庄复式背斜的褶皱的影响及北东向大断裂及其衍生的小断裂控制,岩石类型主要为似斑状细粒花岗岩、正长花岗岩、黑云母花岗岩,岩石中K2O、Na2O、SiO2含量较高,里特曼指数σ【

把新洛轴工程建成世界一流的轴承研发生产基地

2010年7月9日至11日，中共中央总书记、国家主席、中央军委主席胡锦涛在河南省考察工作。这是胡锦涛在洛阳轴承控股有限公司新洛轴工程现场同干部职工亲切交谈，希望企业一靠机制、二靠创新，努力把新洛轴工程建成世界一流的轴承研发生产基地。

羌塘盆地晚三叠世裂谷盆地演化——来自同裂谷期那底岗日组的证据

在羌塘盆地剖面地质调查基础上,综合区域最新的油气调查及地质进展,采用LA-ICP-MS测试方法,提供锆石U-Pb测年,分析羌塘盆地晚三叠世同裂谷期那底岗日组岩性组合、分布特征、喷发—沉积时限、与下伏地层接触关系及裂陷机制。结果表明:那底岗日组分为两个岩相组合类型,一类是陆上喷发系列,以基性熔岩—酸性熔岩—火山碎屑岩为主;另一类是水下沉积系列,为沉火山角砾岩—沉凝灰岩—凝灰质砂岩—粉砂岩—泥岩等,具有典型的双峰式组合特征,与其中玄武岩地球化学特征显示的、与裂陷相关的构造背景一致。那底岗日组的分布受上三叠统顶部的裂陷基底控制,与之具有良好的匹配关系;样品年龄分别为(210.5±2.1)Ma和(214.9±1.8)Ma,属于晚三叠世诺利期;那底岗日组沉积超覆于下伏地层之上。羌塘盆地在晚三叠世之前完成南北羌塘、羌塘与北部大陆的拼合,在晚三叠世诺利期—瑞替期结束前陆盆地沉积,伴随南部班公湖—怒江洋再一次打开,开启新一轮裂谷盆地演化,形成同裂谷期那底岗日组火山—沉积序列。

三个HIV-1广谱中和表位与HBV S抗原融合表达可诱导小鼠特异性抗体应答

为了增强HIV-1交叉中和表位的免疫原性,本研究使用PCR克隆技术将HIV-1三个具有一定广谱中和活性的线性抗原表位ELDKWA(简称2F5)、NWFDIT(简称4E10)和GPGRAFY(简称447-52D)基因分别融合到HBV S基因的3'末端,构建了分别表达这三种融合基因的天坛株重组痘苗病毒疫苗RVJ1175S-2F5、RVJ1175S-4E10和RVJ1175S-447-52D,使用这三种重组痘苗病毒感染的细胞培养上清液经分离纯化制备了三种相应的蛋白亚单位疫苗PS-2F5、PS-4E10和PS-447-52D,对重组痘苗病毒和亚单位疫苗中三种融合抗原的生物学及免疫学特性进行了比较研究。PCR和测序结果表明,三种融合基因序列正确重组到痘苗病毒TK区,HBsAg的ELISA检测表明三种融合蛋白有效表达并分泌到细胞培养上清液中,SDS-PAGE凝胶电泳显示三种纯化后的融合蛋白均含分子量为23kD和27kD两种典型HBsAg条带,Western blot证明这两个条带均能与HBsAg抗体反应,并分别能与三种表位相应的HIV-1单抗2F5、4E10和447-52D反应。小鼠免疫结果显示,三种重组痘苗病毒疫苗和三种蛋白亚单位疫苗均能诱发较高水平的HBsAg抗体和相应HIV-1交叉中和表位抗体,蛋白亚单位疫苗诱生的这两类抗体均明显高于对应的重组痘苗病毒疫苗。这些结果为进一步研究三种表位抗体的中和活性和通过不同类型疫苗联合免疫进一步增强其免疫效果研究奠定了基础。