肝纤维化进展中脾脏对肝脏巨噬细胞活化肝星状细胞作用的影响

目的 研究肝纤维化小鼠脾脏对肝脏中巨噬细胞活化肝星状细胞作用的影响。方法 18只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,A、B组注射CCl4制备肝纤维化模型,C组注射玉米油作为正常对照组。4周后,A、B组分别行脾切除术(切脾组)或假手术(有脾组)。继续注射2周后取材3组小鼠肝脏,制备肝脏匀浆(L-Homo)并分离肝脏细胞。Luminex检测3组L-Homo中IL-1β、IL-13、TGF-β、TNF-α、PDGF-β、VEGF的表达;RT-qPCR与流式细胞术进一步观察如上因子在A、B组肝脏巨噬细胞(L-Mφ)及肝脏其他单个核细胞中的表达。利用A/B组L-Homo分别进行体外处理,以模拟脾脏存在与否时肝脏微环境对巨噬细胞的影响。收集接受不同L-Homo处理的巨噬细胞,一方面利用RT-qPCR比较其中细胞因子与谷氨酰胺合成/分解酶与谷氨酰胺转运蛋白的表达差异;另一方面与肝星状细胞JS1进行共培养,分析其对JS1存活与胞外基质表达的影响。组间比较使用Student’s t检验(两组间)或单因素方差分析(多组间)。结果 与正常对照组相比,IL-1β、IL-13、TGF-β与TNF-α的浓度在模型组L-Homo中显著升高,且在模型有脾组中显著高于切脾组;其中巨噬细胞是表达这些细胞因子的主要细胞类型群。相较于切脾组,有脾组L-Homo体外处理上调巨噬细胞中IL-1β、TGF-β、TNF-α等细胞因子以及谷氨酰胺酶的表达,并且促进巨噬细胞发挥活化肝星状细胞胞外基质分子表达的能力。结论 脾脏参与调控L-Mφ炎性因子表达,增强其活化肝星状细胞的能力。

肝癌细胞系中circAMOTL1的表达及对肝前体细胞增殖和恶性转化的影响

目的探讨环状RNA circAMOTL1在肝癌细胞系中的表达及其对肝前体细胞(HPCs)系WB-F344的增殖迁移及恶性转化的影响。方法通过实时荧光定量PCR检测circAMOTL1在5种肝癌细胞系和正常肝细胞系L-02以及HPCs系WB-F344中的表达;同时构建过表达和敲除circAMOTL1的WB-F344的细胞系;通过CCK-8实验检测过表达或敲除cAMOTL1后HPCs的增殖变化;细胞划痕实验验证细胞迁移的变化;通过蛋白免疫印迹实验验证过表达或敲除circAMOTL1后对肝癌干细胞(LCSCs)标志物CD133的表达影响。结果5种肝癌细胞系中circAMOTL1的表达水平均高于L-02(P<0.05);过表达circAMOTL1后HPCs的增殖能力显著提高(P<0.01),敲除circAMOTL1后细胞的增殖能力显著下降(P<0.001);过表达circAMOTL1后显著提升了细胞的迁移能力(P<0.01),敲除后细胞的迁移能力明显下降(P<0.01);过表达circAMOTL1后可以检测到CD133的表达。结论circAMOTL1在5种肝癌细胞系中高表达,过表达circAMOTL1可以促进HPCs的增殖和迁移能力,诱导其向LCSCs方向恶性转化。

长链非编码RNA ZIM2-AS1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:利用癌症基因组图谱(TCGA)数据探讨长链非编码RNA(lncRNA)ZIM2-AS1在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义和诊断价值。方法:从TCGA数据库下载374例HCC组织样本和50例癌旁组织样本的转录组测序(RNA-seq)数据及相关临床资料,基于R语言进行相关生物信息学分析,以解析ZIM2-AS1在HCC中的表达模式及其与临床病理特征、预后及免疫细胞浸润的相关性,并评估其在HCC中的诊断价值;采用qRT-PCR检测ZIM2-AS1在人正常肝细胞及不同HCC细胞系中的表达情况。结果:ZIM2-AS1在HCC组织中的表达呈升高趋势(P<0.001),其表达水平与患者年龄、性别、肿瘤N分期、组织学分级和AFP水平显著相关(P均<0.05),且高表达患者的总生存期(OS)和疾病相关生存期(DSS)显著短于低表达患者(P<0.05),是影响HCC患者OS的独立危险因素。肿瘤免疫细胞浸润分析显示,ZIM2-AS1与Th2细胞、CD56brightNK细胞、滤泡辅助性T细胞(Tfh)、中性粒细胞和浆细胞样树突状细胞(pDC)的浸润水平显著相关(|Spearman's r|>0.1,P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示ZIM2-AS1表达水平对HCC、N0分期、组织学分级G1和G2期、OS及DSS均具有一定诊断价值(AUC均>0.50)。qRT-PCR结果显示ZIM2-AS1在HCC细胞系中的表达水平显著高于人正常肝细胞(P均<0.05)。结论:LncRNA ZIM2-AS1的高表达是HCC预后不良的独立危险因素,具有成为HCC诊断、预后判断及肿瘤免疫微环境评估生物标志物的潜在应用价值。

对成人1p/19q未共缺失的“少突胶质细胞瘤”的临床病理及分子学分析

目的 探讨成人1p/19q未共缺失的“少突胶质细胞瘤”中的临床病理特征与及其他分子标记物相关性。方法 收集326例手术切除后组织病理诊断为少突胶质细胞瘤、间变少突胶质细胞瘤、少突-星形细胞瘤及间变少突-星形细胞瘤的病例。采用荧光原位杂交(FISH)检测1p/19q的共缺失状态,采用直接测序法检测IDH1/2、TP53、TERT启动子突变状态,采用免疫组化染色检测ATRX、PDGFRA、EGFR、 CIC、FUBP1、INA、PTEN表达水平,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测(MGMT)甲基化水平。结果 326例成人少突胶质细胞瘤的1p/19q状态检测结果为37.6%的肿瘤1p/19q未共缺失,超过一半的1p/19q未共缺失的“少突胶质细胞瘤”缺乏星形细胞特征性标记物p53和ATRX表达。1p/19q未共缺失的“少突胶质细胞瘤”队列中,年龄较小(<45岁)、WHO 2级和典型少突胶质细胞瘤组织形态学的患者,预后较好(P <0.01),典型少突胶质细胞瘤组织形态学与TERTp突变状态、p53表达、EFGR表达、PDGFRA表达相关(P <0.05)。FUBP1、TERT、MGMT、PDGFRA、EGFR、PTEN、INA和CIC的表达未检测到显著的预后价值(P> 0.05)。结论 依据2021年第5版WHO中枢神经系统肿瘤分类,星形细胞瘤不能解释所有的1p/19q未共缺失的“少突胶质肿瘤”,1p/19q未共缺失的“少突胶质细胞瘤”可能形成弥漫性胶质瘤的一个不同亚群。

脾脏的基础研究进展与展望

近年来,随着对脾脏组织结构、细胞功能、分泌功能和神经支配的深入研究,对于脾脏的功能有了更深层次的认识。脾脏是机体免疫-神经-内分泌网络调节中心的一个重要组成部分,它不仅具有滤血、免疫、造血和储血等功能,而且其免疫功能具有"双向性"和"时相性"的特点。然而,要确切评价脾脏的功能尤其是病理状态下的脾脏功能,明确阐述脾功能亢进的机制、脾脏与其他脏器的关系等一系列问题还有待于对其进行进一步的深入研究。本文将从多个角度对脾脏的基础研究进展进行简要的介绍。

MBBS留学生医学影像学全英文教学初探

目的探讨如何保障并提高全英文授课MBBS留学生医学影像学教学质量.方法以昆明医科大学2011级和2012级MBBS留学生共144人、医学影像学全英文授课师资13人的教学实践为基础,采用基础数据分析和问卷调查的方法,从生源特点、师资队伍建设、教学方法等方面进行了调查研究.结果昆明医科大学留学生主要来自印度、孟加拉国、尼泊尔等南亚国,英语发音有别于英美;医学影像学全英文教学师资队伍以中青年骨干教师为主,具有较好的英语和专业基础,但专业英语沟通能力有待加强;大部分留学生认为"启发式教学法"对提高学习兴趣和效率等有积极作用,授课教师认为"启发式教学法"对促进师生交流、提高教师能力等有明显作用.结论 "启发式教学法"能促进教师熟悉生源国的英语发音特点、增强教师专业英语沟通能力、提高MBBS留学生学习兴趣和学习效率,值得进一步完善和推广.

面神经损伤致周围性面瘫患者的背侧丘脑~1H-MRS的研究

目的用氢质子磁共振波谱成像(1H-magnetic resonance spectroscopy,1H-MRS)探讨桥小脑角区听神经瘤切除术后周围性面瘫患者背侧丘脑代谢的改变。方法对24例桥小脑角区听神经瘤切除术后周围性面瘫患者(将其分为面神经损伤手术侧组及非手术侧组)和24例健康志愿者(对照组)行背侧丘脑的二维点分辨波谱序列(point-resolved surface coil spectroscopy,PRESS)扫描,获得N-乙酰天门冬氨酸(N-acetyl aspartate,NAA)、胆碱复合物(Choline,Cho)和肌酸复合物(Creatine,Cr)的峰下面积值及NAA/Cr、Cho/Cr值。先将对照组左、右侧的NAA、Cho、NAA/Cr、Cho/Cr进行比较,然后将面神经损伤手术侧组、非手术侧组的NAA、Cho、NAA/Cr、Cho/Cr分别与对照组进行比较,并将有统计学差异的指标与面瘫时间长短行相关分析。结果对照组左、右侧间及面神经损伤非手术侧组与对照组间的NAA、Cho、NAA/Cr、Cho/Cr差异均无统计学意义(P>0.05),面神经损伤手术侧组在背侧丘脑外后份及内前份的NAA/Cr较对照组高(t=3.338,P<0.05;t=2.944,P<0.05),但其与术后面瘫时间无显著性相关(P>0.05)。结论桥小脑角区听神经瘤切除术致周围性面瘫患者手术侧背侧丘脑的神经元功能增强,这种改变可能与非面瘫侧面部本体感觉传入冲动代偿性增强有关。

济南市孕产妇碘缺乏病的现状及临床评估

目的:评估我市孕妇碘缺乏病的现状,并采取相应的预防和治疗措施。方法:应用国家碘缺乏病实验室推荐的武汉众生科技有限公司生产的尿碘快速定量检测试剂对孕妇尿标本进行检测。结果:3218例孕妇尿标本,参考范围内2502例(77.8%),碘缺乏677例(21.0%),碘偏高39例(1.2%)。结论:我市仍然是碘缺乏病高发地区,社会各界需要高度重视,采取相应的预防和治疗措施。

MR示踪观察面神经损伤大鼠脑内移植超顺磁性氧化铁标记神经干细胞

目的探讨大鼠面神经损伤后脑内移植超顺磁性氧化铁(SPIO)标记的绿色荧光蛋白(GFP)转基因胎鼠NSCs的迁移情况及MRI对移植NSCS示踪的可行性。方法24只SD大鼠随机分为4组,A、B和C组均行面神经切断,D组为正常大鼠。造模后1周,A、D组移植SPIO标记的GFP转基因胎鼠NSCs,B组移植未标记的GFP转基因胎鼠NSCs;C组移植含SPIO的NSCs培养液。分别于移植后第3天及第2、3、4周行MR,并于第4周处死大鼠,取材后观察GFP和SPIO双标的NSCs的迁移,并将该结果与MRI相比较。结果损伤侧面神经核区域:MRI:移植后第3天及第2周所有大鼠均无低信号改变,移植后第3、4周A组3只(3/6)见低信号,余所有大鼠均无低信号改变;普鲁士蓝染色:仅A组见多少不等的蓝染,且与MRI低信号区相符;GFP荧光检测:A、B组均见多少不等的GFP阳性细胞,其中A组与普鲁士蓝蓝染区对应。结论SPIO和GFP双标记的NSCs移植入面神经损伤大鼠脑内后可向损伤侧面神经核周围迁移;1.5TMR可对其迁移进行示踪。

排钉阻断法贲门周围血管断流术治疗门静脉高压症52例

目的:介绍一种自行设计的简便易行且能有效治疗门静脉高压症的手术方式——"排钉阻断法贲门周围血管断流术",并进行初步评价。方法:就1998年11月至今所施行的"排钉阻断法贲门周围血管断流术"治疗门静脉高压症52例,对其临床资料进行分析总结。结果:52例均属病毒性肝炎肝硬化,肝功能Child分级为A级9例(17%),B级31例(62%),C级12例(21%)。其中急诊手术6例,预防性手术8例,其余均为择期手术。手术过程均顺利,无手术死亡,术后均恢复良好。6例急症手术病人均于术后立即止血,无近期再出血,无肝性脑病发生。随访51例,随访期为术后1个月至术后9年3个月;3例术后出血,再出血率5.77%;4例死亡(术前肝功分级均为ChildC级)。其余47例术后6个月复查肝功能,较术前改善者40例(85.1%),无变化者7例(14.9%)。术后1年内复查食管钡餐检查,35例食管静脉曲张明显好转,11例曲张静脉消失,1例无变化。病人术后劳动能力和生活质量较术前普遍提高。结论:排钉阻断法贲门周围血管断流术治疗门静脉高压症简便易行,疗效满意,值得进一步研究及临床推广。

大鼠面神经高位损伤后面神经核区磁共振波谱成像

目的探讨质子磁共振波谱成像(1H-MRS)对大鼠面神经高位损伤后面神经元细胞凋亡检测的价值。方法 20只正常SD大鼠(对照组)和20只面神经高位损伤SD大鼠(实验组)分别行1H-MRS并测量面神经核区N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌酸(Cr)和胆碱(Cho)的峰下面积,比较两组间NAA、Cho、NAA/Cr及Cho/Cr的差异。1H-MRS检查后取对照组2只与实验组4只行面神经核苏木素-伊红(HE)、甲胺苯蓝(TB)和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记(TUNEL)染色。结果与对照组相比,实验组NAA(t=3.159,P<0.05)及NAA/Cr(t=3.782,P<0.05)明显降低,同时实验组面神经核区HE、TB和TUNEL染色显示有大量凋亡细胞。结论 1H-MRS可以作为一种无创性评价面神经损伤后面神经核区神经元细胞凋亡的方法。

中晚期肝癌的综合治疗现状

肝癌起病隐匿,确诊时多数患者属于中晚期,常见的治疗手段包括手术、介入、局部治疗(如射频、微波等)、放疗、化疗、中医药以及生物治疗等综合治疗手段。多学科规范化的综合治疗可以使中晚期肝癌患者最大获益。本文就肝癌的综合治疗现状做一述评。

门静脉高压症贲门周围血管离断与结扎效果的比较

目的 比较断流门静脉高压症贲门周围血管时离断与结扎两种方法的效果。方法 将 48只SD肝硬变门静脉高压症模型大鼠随机均分为离断组、结扎组及假手术组 3组 ,另选 6只SD大鼠作正常对照组 (仅行剖腹探查 )。前 3组动物分别于术后 3 0d及 10 0d各处死 8只 ,正常对照组于术后 3 0d全部处死 ,观察贲门及胃底与周围组织粘连及新生侧支血管情况和食管下段粘膜下层及固有层的相对平均血管数及静脉口径。结果 术后贲门胃底与周围组织粘连及新建侧支血管以离断组为著 ,结扎组较轻。食管下段粘膜下层及固有层的相对平均血管数和相对平均静脉口径 ,假手术组不同时相均显著高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;术后 3 0d ,离断组及结扎组均显著低于假手术组 (P<0 .0 5 ) ;术后 10 0d ,两指标水平都有所回升 ,离断组已接近假手术组水平 (P>0 .0 5 ) ,但结扎组仍低于假手术组 (P<0 .0 5 )。结论 结扎法与离断法在对贲门周围血管进行断流时具有等同的近期效果 ,结扎法手术创面少 ,创伤小 ,术后粘连轻 ,新生血管较少形成 ,其断流的远期效果可能相对持久。

贲门后方“隧道”分离在门静脉高压症断流术中的应用

报道对126例门静脉高压症患者作断流术时[胃冠状静脉栓塞术(GCVE)70例、贲门周围血管离断术(PCD)56例]应用贲门区后方“隧道”分离术的结果。认为贲门区后方“隧道”分离术简单易行、出血甚少,只要严格按照解剖层次进行操作绝对安全。为有效地防止GCVE的严重并发症—异位栓塞和解决栓塞剂用量的个体化问题提供了可能和方便。使PCD操作更为容易、安全,又能保证断流的彻底性及持久性。

武维屏教授应用补中益气汤加减治疗肺科疑难病3例

武维屏教授应用补中益气汤加减治疗肺科疑难病3例,脾胃属土,肺属金,五行相生,土生金,通过培补脾土,使脾运正常,从而使肺得到补益以治疗肺脏疾病。临床验证疗效显著。

断流术加胃减动脉术后胃粘膜病理学变化的实验观察

胃镜、光镜及电镜下观察了门脉高压症模型犬行断流术加胃减动脉术后胃粘膜的病理学变化，并与单纯行断流术组进行比较。结果：加作胃减动脉术组术后不同时期（３天、７天、１月）的胃粘膜损害均明显轻于单纯断流术组。表明在断流术基础上加作胃减动脉术，能够起到防治术后门脉高压性胃病的作用。

面神经损伤大鼠脑内移植绿色荧光蛋白转基因胎鼠神经干细胞的成活及迁移

背景:目前面神经损伤后的修复主要集中在外周神经干,但面神经损伤后会导致部分中枢运动神经元凋亡。现阶段关于干细胞植入面神经损伤大鼠脑后对面神经核团内凋亡神经元的影响相关报道甚少。目的:观察大鼠面神经损伤后,脑内移植绿色荧光蛋白转基因胎鼠的神经干细胞的成活和迁移情况。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-07/12在昆明医学院神经科学研究所完成。材料:孕14～16d的绿色荧光蛋白转基因蛋白小鼠1只,用于制备转基因神经干细胞。清洁级SD雄性大鼠24只,随机分为3组:面神经损伤转基因细胞组12只、面神经损伤细胞培养液组6只、面神经正常转基因细胞组6只。方法:面神经损伤转基因细胞组、面神经损伤细胞培养液组大鼠建立面神经切断模型。造模后1周,行转基因神经干细胞立体定向移植,注射点为前囟后方11.30mm、背侧9.00mm、正中线位置。面神经损伤转基因细胞组、面神经正常转基因细胞组各注入10μL转基因神经干细胞悬液(含5×106个细胞),面神经损伤细胞培养液组注入10μL神经干细胞培养液,4周后制作脑组织冰冻切片。主要观察指标:荧光显微镜观察移植部位绿色荧光蛋白阳性神经干细胞的存活情况,及其向损伤侧面神经核团周围迁移的情况。结果:①移植处:面神经损伤转基因细胞组、面神经正常转基因细胞组均可见数量不等的绿色荧光蛋白阳性细胞,其中部分绿色荧光蛋白阳性细胞位于血管内;面神经损伤细胞培养液组未见绿色荧光蛋白阳性细胞。②面神经核团周围:仅面神经损伤转基因细胞组可见数量不等的绿色荧光蛋白阳性细胞迁移于损伤侧面神经核团周围,而健侧面神经核周围未见绿色荧光蛋白阳性细胞;余2组双侧面神经核周围均未见绿色荧光蛋白阳性细胞。③移植处与面神经核团周围之间:未见绿色荧光蛋白阳性细胞相连。结论:神经干细胞移植入面神经损伤大鼠脑内后,可以向损伤侧面神经核周围迁移。

MRI观察超顺磁性纳米颗粒标记的Annexin V体外检测细胞凋亡

目的利用MRI观察超顺磁性纳米颗粒(SPIO)标记的膜联蛋白V(Annexin V)体外检测凋亡细胞的能力。方法对5管不同的细胞进行MRI和普鲁士蓝染色,分别为:A管:未经H2O2诱导凋亡处理的细胞与SPIO孵育;B管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞与SPIO孵育;C管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞的空白管;D管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞与Annexin V-SPIO孵育;E管:未经H2O2诱导凋亡处理的细胞与Annexin V-SPIO孵育。结果5管间总体比较MR信号值差异有统计学意义(F=569.38,P<0.01),其中A、B、C三管的MR信号值差异无统计学意义,D和B管、E和A管、D和E管的MR信号值比较差异均有统计学意义。普鲁士蓝染色显示Annexin V-SPIO可与凋亡细胞膜特异性结合。结论Annexin V-SPIO可与体外凋亡细胞特异性结合,并引起磁共振信号改变。

多体素氢质子波谱对脑脓肿的诊断价值

目的探讨磁共振氢质子波谱(1HMRS)技术对脑脓肿的诊断价值。方法对9例脑脓肿病人行常规MRI和1HMRS扫描。完成扫描后用随机分析软件包Functool2进行分析,获得脓液和脓肿壁的波谱图。结果9例病灶中8例检测到氨基酸(AA)峰,1例没有AA峰。另有2例脓液培养见厌氧菌生长的脓肿的波谱图中可见乙酸(Ac)峰和琥珀酸(Suc)峰。9例脓肿壁与对侧正常脑组织比较:Cho和NAA低于对侧并有显著性差异,Cho/NAA无显著性差异。结论1HMRS不但可提高细菌性脑脓肿的诊断准确率,而且还可根据Ac峰和Suc峰的有无提示是否厌氧菌感染,为临床治疗提供非常有价值的信息。