牛膝有效部位含药血清联用对损伤软骨细胞的增效作用

目的观察牛膝多糖(ABP)含药血清、牛膝甾酮皂苷(ABTS)含药血清联合应用于损伤的软骨细胞的增效作用。方法提取纯化ABP、ABTS,大鼠灌胃7 d后腹主动脉取血,制备含药血清;培养C28/I2软骨细胞系,优化细胞铺板数、硝普钠造模浓度;分别加入体积分数5%、10%、15%ABP或ABTS或ABP/ABTS(生药比1∶1)含药血清与硝普钠共培养24、48、72 h,确定药物活性、给药浓度和时间;5%以下不同浓度ABP、ABTS配比组合,与硝普钠共培养24 h,确定增效活性及药物浓度配比;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性。结果 ABP、甾醇、皂苷含量分别为(34.7±0.03)%、(16.7±0.03)%、(66.5±0.01)%;C28/I2细胞最佳损伤模型条件为铺板数15×10~3个/孔、硝普钠1.00 mmol/L培养24 h;与模型组相比,ABP、ABTS、ABP/ABTS含药血清均显著提高细胞增殖活性(P<0.05);以ABTS为基础,配伍ABP均能提高细胞增殖活性,ABP-ABTS最佳配比1.25%-5.00%。结论 ABP、ABTS联合应用于损伤的软骨细胞有增效作用,对防治骨关节炎的新药开发具有重要意义。

双肢薄壁高墩施工过程稳定性分析的快速算法

根据能量原理,推导了双肢薄壁高墩在施工荷载作用下静力稳定系数的代数表达式。算例分析表明,运用本文推导的稳定系数表达式计算结果与ANSYS有限元计算结果非常相近。本文方法运用方便、准确性高,具有很高的现场应用价值。

野蔷薇根总黄酮的提取及纯化工艺

目的:优化野蔷薇根总黄酮提取及纯化工艺。方法:L9(34)正交试验回流提取确定最适提取剂乙醇浓度、料液比、提取时间组合;从静态吸附-解吸、动态吸附-解吸两方面筛选最佳树脂型号,单因素考察最佳纯化条件。结果:UV 508 nm检测波长下,最佳提取条件为50%乙醇溶剂,料液比1∶10,进行90℃、90 min回流提取;14种大孔树脂中,HPD-400型大孔树脂对野蔷薇根总黄酮的吸附-解吸能力最好,树脂纯化最佳上样浓度为浸膏母液稀释1.5倍;上样量35 m L,流速3 s/滴;除杂用水量40 m L,流速1 s/滴;50%乙醇32 m L洗脱,流速2 s/滴。结论:最优提取纯化条件下,总黄酮回收率达50%以上。

连续刚构桥双肢薄壁高墩风荷载研究

采用计算流体动力学(CFD)方法模拟了连续刚构桥双肢薄壁高墩在纵桥向和横桥向风作用下的风载特性。针对工程实际范围内的单肢截面宽厚比和双薄壁间净距比,分别研究了纵桥向风作用下这些参数变化对上下游薄壁阻力系数的影响,以及横桥向风作用下当这些参数变化时薄壁顺风向风力系数和横风向风力系数的变化。

野蔷薇根总黄酮对H_(2)O_(2)诱导损伤的HUVEC线粒体功能及凋亡通路的影响

目的探讨野蔷薇根总黄酮(TF-RM)对H_(2)O_(2)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)线粒体功能及凋亡通路的影响。方法将SD雄性大鼠随机分正常对照组、维生素C组(0.08 g·kg^(-1))、TF-RM组(2.5 g·kg^(-1)),每组10只。灌胃给药,每天1次,连续7 d,制备含药血清。采用H_(2)O_(2)(950μmol·L^(-1))诱导HUVEC损伤,并分别与维生素C及TF-RM低、中、高剂量(5%、10%、15%)含药血清共培养24 h。采用DCFH-DA荧光定量法检测HUVEC中活性氧(ROS)的含量;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;Fluo-4染色法检测细胞内Ca^(2+)浓度;Western Blot法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9、Caspase-3蛋白的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组HUVEC内的ROS水平、线粒体膜电位下降率、Ca^(2+)浓度以及Bax蛋白表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,TF-RM各剂量组细胞内的ROS水平、Ca^(2+)浓度及Bax蛋白表达量均明显降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.05);TF-RM高剂量组的线粒体膜电位下降率明显降低(P<0.05);TF-RM中剂量组的Caspase 9蛋白表达量明显降低(P<0.05)。结论TF-RM能够改善H_(2)O_(2)诱导的HUVEC线粒体功能损伤,发挥对细胞凋亡的保护作用。

我国铁路桥梁的发展与对策

回顾和概述了我国铁路桥梁活载标准和设计规范的演变、动力设计问题以及桥梁建设发展的历程,分别从钢桥、预应力混凝土桥、拱桥以及桥梁设计理论等方面对我国铁路桥梁的发展现状进行简略的评述,探讨在新世纪我国铁路桥梁要从设计理论到建设水平赶超世界一流水平应该注意的几个问题。

蛋白质组学在中医药高血压领域研究的进展

蛋白质组学从整体上研究生物体或组织、器官内全部蛋白质结构和功能,与中医基础理论的整体性和系统性不谋而合。高血压某一阶段病理变化的"证",可能与机体在某一特定环境下所表达的蛋白质组存在必然联系。因此,蛋白质组学研究中医中药治疗高血压具有高效解码症候生物学基础的潜力,将是揭示"证"实质的有效手段。

野蔷薇根总黄酮对类风湿关节炎模型大鼠血管损伤的改善作用及机制

目的研究野蔷薇根总黄酮对类风湿关节炎(RA)模型大鼠血管损伤的改善作用及其潜在机制。方法将雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、阿司匹林组(阳性对照,30mg/kg)和野蔷薇根总黄酮低、高剂量组(4.15、8.30g/kg,以生药量计),每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠采用胶原诱导+高脂饮食喂养建立RA模型。造模14 d后,各组大鼠灌胃相应药液/0.5%羧甲基纤维素钠溶液,每天1次,连续36d。定期评估大鼠的全身评分、关节炎指数和足爪肿胀数;末次给药后,检测大鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)水平,观察大鼠胸主动脉血管组织病理学形态变化,检测胸主动脉血管组织中Toll样受体4(TLR4)蛋白表达水平和Janus激酶2(JAK2)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)蛋白磷酸化水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清中IL-6、ICAM-1、VCAM-1水平和胸主动脉血管组织中TLR4蛋白表达水平及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平均显著升高(P<0.01),胸主动脉血管组织可见动脉粥样斑块(粥瘤)、胆固醇结晶、淋巴细胞浸润及少量未破裂的泡沫细胞聚集。与模型组比较,在第28天时,野蔷薇根总黄酮各剂量组大鼠的全身评分(低剂量组除外)、关节炎指数和足爪肿胀数均显著降低(P<0.05或P<0.01);在第49天时,野蔷薇根总黄酮低剂量组大鼠的全身评分、关节炎指数和足爪肿胀数均显著降低(P<0.05或P<0.01);野蔷薇根总黄酮各剂量组大鼠血清和血管组织中其余定量指标均显著逆转(P<0.05或P<0.01),血管组织病理损伤明显减轻。结论野蔷薇根总黄酮可改善RA模型大鼠的血管损伤,其作用可能与降低血管组织中TLR4蛋白表达,抑制IL-6/JAK2/STAT3信号通路活性有关。

多指标综合评分正交试验法优化熟地黄的炮制工艺

目的:优化熟地黄的炮制工艺。方法:以梓醇、地黄苷D、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和多糖的转移率为指标进行综合评分,以蒸制温度(压力)、蒸制时间和蒸制次数为考察因素,采用L_9(3~4)正交试验优化熟地黄的炮制工艺并进行验证试验。结果:熟地黄的最优炮制工艺为在蒸制温度125℃、蒸制压力150 kPa下蒸制2次,每次2 h;验证试验中3批样品的综合评分分别为0.698 5、0.675 5、0.701 6,各指标的RSD均小于5%(n=3)。结论:优化的炮制工艺简单、稳定、可行,可为熟地黄的工业化炮制生产提供参考。

在ANSYS中实现双肢薄壁桥墩参数优化设计的方法

在双薄壁墩连续刚构桥设计中,选择合理优化的双薄壁墩的墩距和壁厚等参数是至关重要的。根据主梁与桥墩共同变形协调条件,考虑单墩强度和稳定约束,应用ANSYS通用程序提供的参数优化设计方法进行优化设计,通过实例计算并与传统统计拟合方法进行比较,结果基本一致,验证了此方法的可行性。

野蔷薇根醇提物对大鼠动脉粥样硬化的影响

目的:观察YT对大鼠AS的影响。方法:50只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、YT低、高剂量组、AL组,灌胃给药90 d,每2周称摄食量和体质量,调整灌胃量;空白组喂标准饲料,其余组高脂饮食联合注射维生素D3并加免疫损伤造成AS;末次给药1h后,取主动脉进行病理组织学观察,比色法检测血清中SOD、MDA水平,化学发光法检测血清中CRP水平,ELISA法检测血清中sCD40L、ADNP、IL-18、IL-16水平,放射免疫分析法检测血清中IL-6、TNF-α水平。结果:YT低、高剂量组明显改善AS大鼠主动脉壁增厚、脂质沉积,减少泡沫细胞形成及淋巴细胞浸润;YT低剂量组体质量增加幅度、MDA水平显著降低,摄食量显著增加,YT高剂量组IL-18水平显著降低。结论:YT可通过调节脂质过氧化及炎症反应改善AS。

白杨素磷脂复合物固体分散体的制备及其体内药动学研究

目的制备白杨素磷脂复合物固体分散体,并考察其体内药动学。方法溶剂挥发法制备固体分散体,测定体外溶出、表观溶解度,采用XRPD进行晶型分析。大鼠灌胃给药(20 mg/kg)后,于0.167、0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、8、12 h采血,HPLC法测定白杨素血药浓度,计算主要药动学参数。结果药载比(磷脂复合物-PVP K30)为1∶6时,固体分散体240 min内累积溶出度达94.6%。白杨素在固体分散体中以无定型状态存在。与原料药、磷脂复合物比较,固体分散体在水、正辛醇中的表观溶解度升高(P<0.01),tmax缩短(P<0.05),Cmax、AUC0~t、AUC0~∞升高(P<0.01),相对生物利用度增加至2.16倍。结论固体分散体可改善白杨素磷脂复合物的体外溶出度和体内生物利用度。

降压宝蓝片含药血清对大鼠血管成纤维细胞增殖及表型转化的影响

目的观察降压宝蓝片含药血清对大鼠血管紧张素Ⅱ诱导的成纤维细胞增殖及转化的影响。方法原代培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞,分为空白组、模型组、降压宝蓝片含药血清低、中、高浓度组(体积分数为5%、10%、15%)。用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性,羟脯氨酸法检测胶原含量,酶联免疫吸附(ELISA)法检测转化生长因子(TGF)-β1含量,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况。结果与模型组相比,降压宝蓝片含药血清高浓度组细胞增殖、胶原、TGF-β1分泌、α-SMA表达显著降低(P<0.05或P<0.01),中浓度组细胞增殖、TGF-β1含量显著降低(P<0.05)。结论降压宝蓝片含药血清可抑制成纤维细胞增殖和表型转化。

不同配比人参总皂苷、丹皮总苷、丹皮酚含药血清对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的改善作用研究

目的:研究不同配比的人参总皂苷(TGG)、丹皮总苷(TGM)、丹皮酚含药血清对H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的改善作用,筛选最优配比并探讨其作用机制。方法:将大鼠随机分为空白组(蒸馏水)、TGG组(TGG,2.025 g/kg)、TGM组(TGM,4.05 g/kg)、丹皮酚组(丹皮酚,1.08 g/kg),每组12只,每天灌胃相应药物2次,连续7 d,末次给药后1 h,腹主动脉取血,制备含药血清。以HUVEC细胞存活率为评价指标,人参总皂苷、丹皮总苷、丹皮酚含药血清不同配比为考察因素设计L_9(3~4)正交试验,优选3种含药血清的最优配比;将HUVEC细胞分为空白组、模型组、TGG组、TGM组、丹皮酚组、最优配比组,除空白组细胞加入相应培养基外,其余各组均采用1.2 mmol/L H_2O_2诱导HUVEC损伤,然后TGG组(含药血清体积分数为0.000 5%)、TGM组(含药血清体积分数为0.000 5%)、丹皮酚组(含药血清体积分数为1%)、最优配比组再加入相应药物含药血清进行干预。采用微板法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的水平。结果:含药血清最优配比为TGG 0.000 5%、TGM 0.000 5%、丹皮酚1%。与空白组比较,模型组细胞LDH、ET-1水平更高(P<0.01),NO水平更低(P<0.05);与模型组比较,TGG、TGM、最优配比组细胞NO水平更高(P<0.01),LDH、ET-1水平更低(P<0.05或P<0.01);与TGG组、TGM组、丹皮酚组比较,最优配比组细胞LDH水平更低(P<0.05或P<0.01),NO水平更高(P<0.05或P<0.01)。结论:TGG、TGM、丹皮酚联合应用对H_2O_2诱导的HUVEC损伤具有良好的改善作用,其作用机制与降低LDH、ET-1水平和升高NO水平有关。

木豆叶、鲜地黄提取物对ox-LDL损伤的HUVEC的保护作用

目的研究木豆叶、鲜地黄提取物(DMT)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响,初步探讨DMT防治动脉粥样硬化的机制。方法应用血清药理学方法制备正常对照、辛伐他汀、DMT血清,以供细胞实验使用。采用ox-LDL损伤HUVEC,与各组药物共培养,即空白组、模型组、辛伐他汀组(15%辛伐他汀血清)及DMT低(5%DMT血清)、中(10%DMT血清)、高剂量组(15%DMT血清),24 h后MTT法检测细胞活力;收集细胞,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量;硝酸还原酶法检测上清液NO含量;ELISA法检测上清液内皮素(ET-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)含量;Western Blot法检测细胞凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(Lox-1)、Caspase-3、Cytc蛋白的表达。结果与模型组比较,辛伐他汀组及DMT低、中、高剂量组细胞活力明显提高(P<0.01);DMT低剂量组ROS水平明显降低(P<0.05);辛伐他汀组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.05,P<0.01);DMT低剂量组细胞Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.01);DMT中剂量组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Caspase-3、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.05,P<0.01),细胞上清液中NO含量明显升高(P<0.01);DMT高剂量组细胞上清液ET-1、VCAM-1含量及Lox-1、Cytc蛋白含量明显降低(P<0.01),NO含量明显升高(P<0.01)。结论DMT能够抑制ox-LDL诱导的HUVEC损伤,恢复其收缩舒张分泌功能,其机制可能与影响Lox-1介导的内皮细胞氧化应激有关。

山茱萸RAPD反应体系的正交优化研究

为了优化山茱萸RAPD反应条件,采用改良CTAB法提取山茱萸基因组DNA,并采用三因素三水平正交试验对RAPD反应体系中Mg2+、dNTP、引物浓度进行初步优化,在此基础上,对温度条件进一步优化。结果表明:在25μL的RAPD反应体系中各因素的最佳浓度分别为1.925mmol/L Mg2+、0.275mmol/L dNTPs、0.55μmol/L引物、DNA模板40ng和1UTaq DNA聚合酶;引物Tm为36.9℃时,最佳退火温度为35℃;引物Tm为41.0℃时,最佳退火温度为38℃。在最优反应条件下,对100种随机引物进行RAPD扩增,其中93种随机引物均扩增出条带,建立了可靠的反应体系和反应程序,为山茱萸的DNA指纹图谱鉴定建立了基础。

熊果酸固体分散体单层渗透泵片的制备及其体内药动学研究

目的 制备熊果酸固体分散体单层渗透泵片,并考察其体内药动学。方法 采用喷雾干燥法制备固体分散体后,将其进一步制成单层渗透泵片。以NaCl用量、CMC-Na用量、包衣增重为影响因素,12 h后累积释放度为评价指标,Box-Behnken设计优化处方。18只家兔随机分为3组,分别口服熊果酸普通片、固体分散体片、单层渗透泵片,于0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、10、12、18 h采血,测定熊果酸血药浓度,计算主要药动学参数。结果 最优处方为NaCl用量62.2 mg/片,CMC-Na用量29.3 mg/片,包衣增重6.1%,12 h后累积释放度为93.8%,体外释药符合零级模型。与普通片、固体分散体片比较,单层渗透泵片t_(max)、t_(1/2)延长(P<0.01),C_(max)波动较小,相对生物利用度提高至2.84倍。结论 熊果酸固体分散体单层渗透泵片体外释药均匀,体内缓释特征明显,生物利用度提高。

木豆叶提取物对H2O2诱导损伤HUVEC的影响

目的研究木豆叶提取物对H2O2诱导损伤的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)的影响,为其抗动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)提供技术支撑。方法制备各组含药血清。体外培养HUVEC,设立空白组、模型组、VitC组(0.08 g·kg^-1,15%含药血清)、木豆叶低剂量组(2.5 g·kg^-1,5%含药血清)、木豆叶中剂量组(2.5 g·kg^-1,10%含药血清)、木豆叶高剂量组(2.5 g·kg^-1,15%含药血清)。采用H2O2损伤HUVEC,给予相应药物共培养24 h。MTT法检测细胞活力,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,微量酶标法检测乳酸脱氢酶(Lactic Dehydrogenase,LDH)含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮(Nitric Oxide,NO)含量,酶联免疫吸附法(Elisa)检测内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)含量。结果与模型组比较,VitC组、木豆叶中剂量组细胞活力明显提高(P<0.01);VitC组、木豆叶中、高剂量组的细胞凋亡减少,木豆叶中浓度组逆转细胞凋亡效果最好;VitC组、木豆叶低剂量组的LDH含量显著提高,木豆叶高剂量组LDH含量显著降低(P<0.05或P<0.01);木豆叶低、高剂量组NO含量显著提高(P<0.01);木豆叶低、中、高剂量组ET-1含量显著降低(P<0.01)。结论木豆叶提取物含药血清具有抗H2O2诱导的AS内皮损伤作用。

膨胀岩隧道施工方法的选定

本文介绍了宝中线小坪隧道膨胀岩地段的施工概况,浅析了膨胀岩的特性及其隧道的施工特点,对其施工方法的选定进行了探讨。一。

冠心止痛胶囊对动脉粥样硬化大鼠血Ca^(2+)、主动脉Ca^(2+)及C反应蛋白的影响

目的:探讨冠心止痛胶囊对动脉粥样硬化大鼠血Ca^(2+)、主动脉Ca^(2+)和C反应蛋白(c-reactive protein,CRP)的影响。方法:用改良的高脂饲料饲养、维生素D3注射和卵清白蛋白免疫损伤复合法复制大鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)模型,观察大鼠的体质量和摄食量,于实验第63天和91天测定血清Ca^(2+)含量,于实验第91天采用火焰法测定主动脉组织Ca^(2+)含量,并采用透射比浊法测定血清CRP含量。结果:1模型对照组和各药物组的大鼠体质量、摄食量下降。2与正常对照组对比,模型对照组血清Ca^(2+)和主动脉Ca^(2+)含量升高,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型对照组对比,冠心止痛胶囊大、小剂量组主动脉Ca^(2+)含量降低,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01),血清Ca^(2+)变化无统计学意义(P>0.05)。3与正常对照组对比,模型对照组CRP含量升高,差别有统计学意义(P<0.05);与模型对照组对比,冠心止痛胶囊大、小剂量组CRP水平有下降的趋势,但差别无统计学意义(P>0.05)。结论:冠心止痛胶囊可降低AS大鼠的主动脉Ca^(2+)含量,抑制血管钙化,有助于延缓动脉粥样硬化的发展。