骨髓增殖性肿瘤患者血清金属蛋白酶抑制剂-1、基质金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子与骨髓纤维化程度的相关性

目的探讨骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)与骨髓纤维化(MF)分级的关系。方法选择90例费城染色体阴性(Ph-)MPN初诊患者为MPN组。根据世界卫生组织(WHO)2016年骨髓纤维化分级标准将MPN患者分为纤维化前期或早期组54例和明显纤维化期组36例;另选取健康志愿者50例作为对照组。采用酶联免疫吸附实验检测血清VEGF、MMP-9、TIMP-1水平并计算TIMP-1与MMP-9比值(TIMP-1/MMP-9)。采用Spearman秩相关检验分析VEGF、MMP-9、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9与MF分级的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标单独或联合诊断MPN或区分MF分级的预测价值。结果与对照组相比,MPN组血清VEGF、MMP-9和TIMP-1均升高,差异有统计学意义(P<0,05)。VEGF、MMP-9、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9诊断MPN的曲线下面积(AUC)分别为0.834、0.745、0.923、0.618;VEGF、MMP-9和TIMP-1联合诊断MPN的AUC为0.960;当最佳截断值为0.627时,敏感度为85.56%,特异度为92.00%。与纤维化前期或早期组相比,明显纤维化期组患者血清VEGF、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,VEGF(r=0.378,P=0.001)、TIMP-1(r=0.512,P<0.001)、TIMP-1/MMP-9(r=0.353,P=0.001)与MPN患者MF分级呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,VEGF、MMP-9、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9区分纤维化前期或早期患者和明显纤维化期患者的AUC分别为0.723、0.523、0.802、0.708;VEGF、TIMP-1和TIMP-1/MMP-9联合区分纤维化前期或早期患者和明显纤维化期患者的AUC为0.838;当最佳截断值为0.530时,敏感度为72.22%,特异度为85.19%。结论血清VEGF、TIMP-1和TIMP-1/MMP-9均可反映MPN患者MF进展,各指标联合检测可预测MPN患者MF程度。

费城染色体阴性急性淋巴细胞白血病诱导化疗2周后骨髓原始细胞比例及其对完全缓解和总体预后的影响

目的:探讨费城染色体阴性急性淋巴细胞白血病(Ph^-ALL)诱导化疗2周后骨髓原始细胞比例及其对获得完全缓解和总体预后的影响。方法:选取本院于2012年3月至2016年2月期间收治的172例初治Ph^-ALL患者,对患者诱导化疗2周后的骨髓原始细胞比例进行受试者工作特性曲线(ROC)分析,同时确定其对获得完全缓解以及患者总体预后的影响。结果:患者达到完全缓解的界值为0.075,其曲线下面积为0.763,并且曲线下面积和A_z=0.5相比较,差异具有统计学意义。因此我院将172例患者按照其治疗2周后的骨髓原始细胞比例进行分组,其中骨髓原始细胞比例<0.075的患者有104例,占60.5%;而骨髓原始细胞比例≥0.075的患者则有68例,占39.5%。前者在诱导治疗4周后的获得CR的患者以及最终获得CR的患者分别为89(85.6%)和99(95.2%),显著高于后者的29(42.6%)和52(76.5%),2组患者数据比较差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,临床上降低患者OS率和DFS率以及增加患者复发率的影响因素主要有化疗而非移植、诱导治疗4周后未能达到完全缓解、诱导治疗2周后骨髓原始细胞比例≥0.075以及诊断时伴随有中枢神经系统白血病等,而诊断时WBC升高则是影响患者DFS率的不利因素。结论:Ph^-ALL经诱导化疗2周后,骨髓原始细胞比例升高的患者将不利于获得完全缓解,并且总体预后较差。

多发性骨髓瘤的治疗进展

多发性骨髓瘤是一种浆细胞恶性增殖性疾病,其特征是骨髓微环境中恶性浆细胞克隆性增生,血液或尿中存在单克隆蛋白,并伴随器官功能障碍.多发性骨髓瘤大约占肿瘤性疾病的1％以及血液系统恶性肿瘤的13％.近年来,造血干细胞移植以及药物（如沙利度胺、来那度胺和硼替佐米）的应用已延长了患者的总生存时间.本文对多发性骨髓瘤患者在临床上不同治疗阶段的治疗方案进展综述如下.

MiR-543对人白血病细胞株K562增殖与凋亡的调控及其机制研究

目的:探讨miR-543对人白血病细胞株K562增殖与凋亡的调控作用及其机制。方法:选择2018年2月-2018年9月在本院接受治疗的CML患者46例(男性27例,女性19例)作为CML组,同时选择30例同期体检健康者作为对照组。利用Lipofectamine 2000脂质体将miR-543模拟物(mimic)及阴性对照mimic转染至K562细胞后,应用CCK8方法检测miR-543对K562细胞增殖的影响,荧光素酶报告法分析miR-543对Wnt基因的靶向关系,流式细胞术检测miR-543对白血病细胞凋亡影响,Western blot方法检测Wnt、β-catenin、BCL-2、C-Myc及BAX表达水平。结果:慢性髓系白血病患者的miR-543水平显著低于健康对照组(P <0.05);miR-543 mimic组的miR-543的表达水平显著高于空白对照组(P <0.05);miR-543 mimic组的Wnt基因mRNA水平显著低于空白对照组(P <0.05)。miR-543 mimic可降低Wnt野生质粒的荧光素酶表达水平(P <0.05);miR-543 mimic对Wnt突变质粒的荧光素酶表达水平无抑制作用(P <0. 05)。miR-543 mimic组K562细胞增殖水平显著低于空白对照组及阴性对照scramble mimic组(P <0. 05)。miR-543 mimic组K562细胞凋亡水平显著高于空白对照组及阴性对照scramble mimic组(P <0. 05)。miR-543 mimic组细胞的Wnt、β-catenin、BCL-2及C-Myc蛋白水平均显著低于空白对照组及阴性对照(scramble mimic)组(P <0.05);miR-543 mimic组的BAX蛋白水平高于空白对照组及阴性对照(scramble mimic)组(P <0.05)。结论:miR-543可靶向Wnt蛋白,抑制Wnt信号通路活性,从而抑制白血病细胞的增殖能力,提高细胞凋亡水平。

NPM1突变阳性AML患者化疗后早期微小残留病水平与预后的关系

目的:分析NPM1基因突变阳性的急性髓系白血病(AML)患者经化疗后,早期微小残留病水平与患者预后状况的相关性。方法:收集本院112例NPM1基因突变阳性的初诊成人AML患者的临床资料,分析患者化疗后NPM1基因突变转录本水平与患者预后状况的相关性。结果:在112例AML患者中,初诊时NPM1基因突变转录本中位水平为83.68%(5.86%-486.57%),FLT3-ITD突变阳性44例(39.29%),染色体核型异常22例(19.64%),完全缓解96例(85.71%);多因素Logistic回归分析结果发现,初始诱导治疗方案和白细胞计数(WBC)与完全缓解密切相关(P<0.05)。在112例患者中,中位随访时间为22(3-36)个月,3年总生存率为66.07%;多因素Logistic回归分析发现,在初次获得完全缓解时微小残留病高水平、巩固治疗后微小残留病高水平是患者总生存期的独立危险因素(P<0.05)。结论:在NPM1基因突变阳性的成人AML患者中,化疗后微小残留病早期高水平与患者预后不良密切相关。

不同化疗方案治疗MDS-RAEB/AML-MRC临床对比研究

目的:探讨常规CAG方案与地西他滨+减量CAG方案对骨髓增生异常综合征伴原始细胞增多(MDS-RAEB)/急性髓系白血病伴骨髓增生异常相关改变(AML-MRC)患者疗效及安全性的影响。方法:回顾性分析于2012年3月-2017年7月本院收治的67例MDS-RAEB/AML-MRC患者的临床资料。67例中采用常规CAG方案治疗37例设为对照组,采用地西他滨+减量CAG方案治疗30例设为D+dCAG组,比较2组患者的完全缓解(CR)率、总缓解率(ORR)、总生存时间(OS)、无进展生存时间(PFS)及不良反应的发生率。结果:D+dCAG组CR率显著高于对照组(P<0.05);2组ORR比较差异无显著性(P>0.05);2组累积OS率比较差异无显著性(P>0.05);2组非移植的累积OS率和PFS率比较差异无显著性(P>0.05);2组血液系统不良反应、肺部感染、皮肤软组织感染、粒细胞缺乏期发热及真菌感染发生率比较差异无显著性(P>0.05);2组粒细胞缺乏持续时间和血小板计数小于20×10^9/L持续时间比较差异无显著性(P>0.05)。结论:相较于常规CAG方案,地西他滨+减量CAG方案治疗MDS-RAEB/AML-MRC在改善疾病缓解效果方面具有优势,总体安全性良好,但仍未提高患者的生存率。

青岛市市北区空巢老人健康素养现状调查

目的了解青岛市市北区空巢老人的健康素养水平。方法 2014年8—10月,通过随机抽样方法抽取青岛市市北区空巢老人133人,采用自行设计的调查问卷进行调查。结果问卷有效回收率为100%,空巢老人对健康知识的知晓率为64.8%,对健康生活方式的知晓率为53.5%,对健康技能的知晓率为65.7%。结论空巢老人对健康知识和健康生活方式的知晓率并不很高,有必要采取积极的措施来提高空巢老人的健康素养水平。

急性髓性白血病骨髓单个核细胞CPT1A表达与疗效的关系

目的检测急性髓性白血病患者骨髓单个核细胞中肉碱棕榈酰转移酶1a(CPT1A)表达与诱导化疗疗效和预后的关系。方法从GEO数据库收集GSE9476、GSE30029、GSE1159数据集中的患者基因表达谱资料,进行生物信息学分析。另收集2016年3月至2019年7月在我院初诊并接受诱导化疗的正常核型急性髓性白血病(CN-AML)86例。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测骨髓单个核细胞中CPT1A表达。分析CPT1A表达与临床病理特征以及诱导化疗疗效的关系。Logistic回归分析影响疗效的因素,COX风险比例回归模型分析影响总生存时间(OS)的因素。结果GSE9476数据集中CPT1A在AML患者骨髓样本(5.18±0.94 vs.4.95±0.27,P<0.05)和外周血样本(5.23±1.33 vs.4.52±0.22,P<0.05)中高表达。GSE30029数据集中AML患者CD34+细胞中CPT1A表达高于健康献血者(6.51±1.20 vs.5.70±0.57,P<0.05)。qPCR结果显示,CN-AML患者骨髓单个核细胞中CPT1A相对表达量高于健康志愿者[1.25(1.03,1.73)vs.0.95(0.86,1.14),P<0.05]。多因素Logistic回归分析显示,CPT1A基因高表达是影响CN-AML患者诱导化疗疗效的独立危险因素(P<0.05)。CPT1A high组患者死亡率高于CPT1A low组中位OS短于CPT1A low组(18.0个月vs.未达),差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素COX风险比例回归分析显示,CPT1A基因高表达是影响CN-AML患者OS的独立危险因素(P<0.05)。结论对于CN-AML患者,骨髓单个核细胞中CPT1A mRNA普遍升高,高表达的CPT1A mRNA是影响CN-AML患者化疗反应性和生存预后的独立危险因素。

miR-330-3p调控ALAS2在红细胞分化中的作用

目的探讨miR-330-3p在红细胞分化中的作用和机制。方法胚胎干细胞诱导分化为红系细胞,分别测定0 d、7 d、14 d、21 d miR-330-3p和ALAS2表达水平。比较红系细胞(K562细胞)和非红系细胞(HELA细胞)miR-330-3p和ALAS2表达差异。K562分转染miR-330-3p抑制物组、miR-330-3p模拟物组,考察miR-330-3p对ALAS2表达的影响。K562分别进行ALAS2过表达和ALAS2过表达+miR-330-3p模拟物共转染,考察对Ferritin蛋白和HO-1蛋白表达的影响。结果随分化时间增加,ALAS-2蛋白表达逐步增高(F=29.124,P=0.000),miR-330-3p表达逐步下降(F=21.323,P=0.000);K562细胞ALAS-2蛋白水平显著高于HELA细胞(t=6.977,P=0.002),K562细胞miR-330-3p水平显著低于HELA细胞(t=4.538,P=0.011);转染miR-330-3p inhibitor后,ALAS2蛋白表达上调(t=6.977,P=0.002),miR-330-3p表达下调(t=4.397,P=0.012);转染miR-330-3p模拟物后,ALAS2蛋白表达下调(t=18.971,P=0.000),miR-330-3p表达上调(t=3.910,P=0.017)。过表达ALAS2,Ferritin蛋白表达下调(t=2.170,P=0.032),HO-1蛋白表达上调(t=3.755,P=0.020);ALAS2过表达和miR-330-3p模拟物共转染,Ferritin蛋白表达上调(t=3.791,P=0.019),HO-1蛋白表达下调(t=3.618,P=0.022)。结论 miR-330-3p可能通过调控ALAS2转录,进而影响Ferritin和HO-1的表达,发挥促进红系细胞分化的作用。

地西他滨联合HAAG方案治疗复发急性髓系白血病的疗效及安全性分析

目的探讨地西他滨(DAC)联合HAAG方案[三尖杉酯碱(HHT)、阿糖胞苷(Ara-C)、阿柔比星(Acla)和重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)]治疗复发急性髓系白血病(AML)的效果及安全性。方法回顾性分析2019年1月至2021年1月山东第一医科大学附属人民医院89例复发AML患者的临床资料,根据治疗方案分为观察组(n=48)和对照组(n=41)。观察组包括男25例,女23例,年龄(44.4±9.3)岁,给予DAC联合HAAG方案治疗。对照组包括男24例,女17例,年龄(42.2±10.1)岁,给予DAC方案治疗。治疗3个周期后判断两组患者治疗效果,包括完全缓解、部分缓解及未缓解。采用直接免疫荧光标记单抗流式细胞仪检测两组患者血清P-糖蛋白(P-gp)水平,采用酶联免疫吸附试验检测可溶性尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(suPAR)水平。记录两组患者治疗期间消化道反应、肝肾功能异常、出血、感染等不良反应发生率。结果治疗3个周期后,观察组完全缓解、部分缓解及未缓解分别为10例、21例、17例,对照组分别为3例、11例、27例,观察组患者的总体疗效优于对照组(Z=-2.919,P=0.004)。观察组治疗3个周期后血清P-gp和suPAR水平分别为(5.2±1.8)%和(464.4±103.4)ng/L,明显低于对照组的(8.8±1.9)%和(660.6±110.4)ng/L(均P<0.05)。观察组治疗期间消化道反应、肝肾功能异常、出血、感染发生率分别为29.2%(14/48)、22.9%(11/48)、16.7%(8/48)、33.3%(16/48),对照组分别为26.8%(11/41)、21.9%(9/41)、14.6%(6/41)、24.4%(10/41),差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论DAC联合HAAG方案治疗AML的总体疗效优于单独应用DAC,其不良反应发生率与单独应用DAC相近,安全性较好。

环磷酰胺联合氟达拉滨方案以及沙利度胺治疗华氏巨球蛋白血症15例疗效分析

Waldenstorm巨球蛋白血症（WM）是一种原因未明的B淋巴浆细胞恶性增生性疾病，以合成及分泌单克隆IgM型球蛋白的淋巴样浆细胞恶性增生为特征，该病多见于老年人，发病率较低。目前治疗主要为烷化剂、核苷类似物、利妥昔单抗、硼替佐米及造血干细胞移植等。我院自2009年1月至2013年6月应用环磷酰胺以及氟达拉滨（FC）方案联合沙利度胺治疗WM患者15例，取得一定疗效，现报道如下。

miR-451靶向调控c-Myc抑制多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞的增殖侵袭和迁移

目的:探讨miR-451对多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:将体外培养的RPMI-8226细胞分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染miR-451模拟物阴性对照)和miR-451组(转染miR-451模拟物),采用实时定量PCR检测各组细胞中miR-451的表达,采用四甲基偶氮唑蓝法和克隆形成实验检测细胞的增殖情况,Transwell小室实验检测细胞的侵袭和迁移情况,Western blot检测c-Myc、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-451和c-Myc的靶向关系。结果:miR-451组和空白对照组细胞中miR-451的表达水平分别为2.85±0.27和1.02±0.06,细胞存活率分别为(47.28±3.15)%和(93.65±6.52)%,克隆形成率分别为(15.03±1.34)%和(28.48±2.12)%,侵袭细胞数分别为(86.65±5.58)个和(135.47±9.85)个,迁移细胞数分别为(106.36±6.48)个和(165.28±11.05)个,c-Myc蛋白的表达水平分别为0.35±0.03和0.66±0.05,MMP-2蛋白的表达水平分别为0.20±0.02和0.48±0.03,MMP-9蛋白的表达水平分别为0.28±0.03和0.59±0.06,差异均有统计学意义(均P<0.05)。阴性对照组细胞的miR-451表达水平、细胞存活率、克隆形成率、侵袭细胞数、迁移细胞数、c-Myc蛋白的表达水平、MMP-2蛋白的表达水平和MMP-9蛋白的表达水平分别为0.94±0.05、(95.16±5.04)%、(27.55±2.26)%、(128.96±8.32)个、(158.65±8.76)个、0.68±0.06、0.51±0.03和0.54±0.03,与空白对照组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,c-Myc为miR-451的潜在靶基因。结论:miR-451可通过靶向c-Myc抑制RPMI-8226细胞的增殖、侵袭和迁移。

2006—2013年青岛市职业病病例调查与分析

目的通过对青岛市新发职业病的分析,总结青岛市近年来职业病病例的某些职业和人口特征。方法根据青岛市职业病诊断机构诊断档案,对2006—2013年新发职业病情况进行汇总分析,使用EXCEL软件建立数据库,用百分率统计分析青岛市职业病状况。结果青岛市2006—2013年共有新发职业病700例,涉及5类29个病种,分别是尘肺病(70.3%)、职业中毒(14.0%)、职业性噪声聋(11.3%)、职业性皮肤病(2.1%)、职业性哮喘(1.2%)、职业性肿瘤(0.6%);病例分布在多种行业,建材、化工、矿业居于前3位,分别占28.7%、14.1%及7.4%;近5年职业病诊断例数呈递减趋势;但职业中毒呈V型反弹上升趋势。结论职业病预防策略仍需进一步改善。

KIF18B通过激活AMPK/mTOR信号通路促进儿童白血病恶化

目的探究KIF18B对白血病细胞株HL-60增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法RT-PCR和Western blot检测32例白血病患儿血清中KIF18B的表达量;CCK-8实验检测KIF18B对白血病细胞株HL-60增殖的影响;Transwell实验检测KIF18B对白血病细胞株HL-60侵袭能力的影响;Western blot实验检测侵袭相关蛋白MMP-1和MMP-9以及血管内皮生长因子VEGF的蛋白表达水平。结果KIF18B在白血病患儿血清中的表达量显著高于正常儿童(P<0.05);与转染对照si-RNA比较,当细胞转染siKIF18B时,KIF18B的表达量被显著抑制(P<0.05);干扰KIF18B显著抑制白血病细胞株HL-60的增殖和侵袭(P<0.05);此外si-KIF18B抑制AMPK/mTOR信号通路蛋白的表达(P<0.05);研究结果进一步表明AMPK/mTOR信号通路参与si-KIF18B对HL-60细胞增殖和侵袭的抑制进程(P<0.05)。结论KIF18B能够促进白血病细胞株HL-60的增殖和侵袭,其作用机制是通过调控AMPK/mTOR来实现的,这一结果能够为白血病的临床治疗和诊断提供分子基础。