HCV核心基因转染对QBC939细胞凋亡及细胞周期的影响

【目的】研究丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)对肝门部胆管癌细胞(QBC939)细胞凋亡及细胞周期的影响。【方法】将包含HCV-C基因的真核表达质粒pcDNAHCV-C和空载体,利用脂质体介导将其转染QBC939,经G418筛选获得稳定转染HCV-C的QBC939细胞(QBC939HCV-C+),RT-PCR和免疫荧光法检测HCV-C蛋白表达,MTT法检测QBC939HCV-C+细胞、空白质粒转染QBC939(QBC939pcDNA)细胞和未转染QBC939细胞生长增生率;流式细胞术(FACS)检测3组细胞凋亡率和细胞周期,以及QBC939HCV-C+细胞经Fas抗体诱导凋亡后的细胞周期变化。【结果】①QBC939HCV-C+细胞增殖率显著高于空白质粒转染QBC939和未转染QBC939细胞增殖率;②细胞未经Fas抗体诱导凋亡时,QBC939HCV-C+细胞S期(20.1%±1.8%)高于未转染QBC939细胞S期(14.2%±3.6%),QBC939HCV-C+细胞凋亡率(5.0%±0.7%)低于无HCV-C转染QBC939细胞凋亡率(9.2%±0.7%);③QBC939HCV-C+细胞经Fas抗体诱导凋亡时,细胞S期低于未经诱导凋亡细胞S期。【结论】HCV-C蛋白具有抑制QBC939细胞凋亡和促进细胞增殖作用。

HCVC蛋白调控肝门部胆管癌细胞中NF-κB活性的研究

目的 探讨HCVC蛋白在肝门部胆管癌细胞中对核转录因子κB(NF κB)调控作用。方法 利用稳定表达HCVC蛋白的QBC939细胞株 (QBC93 9HCVC+) ,通过NF κB报道基因分析法、凝胶迁移率分析 (EMSA)检测HCVC蛋白增强肝门部胆管癌细胞NF κB的DNA结合活性和反式激活活性。RT PCR、Westernblot检测HCVC蛋白对核转录因子κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA及 p5 0、p6 5、IκBα蛋白表达及IκBα蛋白磷酸化的影响。 结果 ①EMSA结果显示QBC93 9HCVC+细胞系中NF κB相对信号密度明显比QBC939细胞高。②将pNF κB lun表达质粒转染稳定表达HCVC蛋白胆管癌细胞系中 ,通过单光子检测仪检测荧光素酶活性 ,结果显示QBC93 9HCVC+细胞中活化NF κB为 12 .8倍 ,而QBC939细胞中NF κB为 2 .6倍。③RT PCR显示IκBαmRNA在QBC93 9HCVC+细胞和QBC939细胞中的表达无明显差异 ;Westernblot结果显示稳定表达HCVC蛋白的QBC93 9HCVC+细胞株的胞核中的p5 0、p6 5蛋白高水平表达 ,而未转染HCVC蛋白的QBC939细胞仅检测出极低水平的p5 0、p6 5蛋白。在QBC93 9HCVC+细胞胞浆中IκBα蛋白低水平表达 ,QBC939细胞高水平表达 ,但IκBα蛋白磷酸化水平则相反。结论 HCVC蛋白通过增加IкBα降解激活的NF

冬小麦高光谱信息提取方法的研究

针对高光谱数据波段多、数据量大和冗余度大等特点，本文以 ASD 便携式高光谱仪为光谱数据获取手段，以不同生育时期冬小麦冠层高光谱为研究对象，采用主成分分析和波段自相关分析两种方法来进行数据降维，通过采用基于高光谱与叶面积指数估算（LAI）相关系数法进行验证，以确定冬小麦高光谱遥感信息提取的最佳波段。结果表明，主成分分析法（PCA）和波段自相关分析法选择的波段主要在可见光区域（350～450 nm 和600～700 nm）、近红外区域（1100～1200 nm）和短波红外区域（1500～1750 nm），包含了验证方法基于高光谱与 LAI 相关系数法所选择的主要波段范围：可见光区域和近红外区域。综合考虑，用主成分分析法和波段自相关分析法两种方法对冬小麦高光谱提取的信息是全面、可靠的，包含了针对某一生理指标如 LAI 的有关信息。

硬脂酸聚乙二醇阿霉素纳米粒的制备及其对人肝癌细胞的杀伤作用

目的合成硬脂酸聚乙二醇阿霉素纳米微粒(DOX鄄SLNs鄄PEG)并检测其相关参数,观察其对人肝癌细胞杀伤作用。方法以“乳化蒸发鄄低温固化”法合成DOX鄄SLNs鄄PEG纳米粒。透射电镜计算粒径,分光光度法计算载药率,噻唑蓝法(MTT法)观察对肝癌细胞的体外杀伤效应及观察体内抑瘤效应。结果DOX鄄SLNs鄄PEG纳米粒平均粒径120±4.84mm,包封率68.6%,体外释放实验提示,7d可释放所载60%左右的药物。体内抑瘤实验表明:控释制剂间隔给药疗效已优于未包载药物每日给药的疗效,量效关系明显。结论DOX鄄SLNs鄄PEG纳米粒可有效抑制肝癌细胞的生长。

白术在方剂中的配伍应用

白术为中医临床常用之药物,被广泛应用于诸多方剂中,其与不同药物配伍作用各有不同。现从固表止汗、散寒除湿、健脾养血、淡渗利水、补气安胎、消积化滞、温中散寒、渗湿止泻等方面阐述白术在方剂中的配伍应用,以期对白术临床应用有所启发。

提高诊断学教学质量初探

该本文就《诊断学》教学中,改变传统的教学模式,强调在传授知识的同时,注重培养学生的综合能力,灵活应用各种教学形式和教学方法,提高诊断学教学质量,为培养出新一代独立、创新、合格的医学人才,做了一些探讨。

彩色多普勒能量图探测胆囊肿瘤血流的临床意义

目的 :应用彩色多普勒能量图 (ＣＤＰＩ)在体外检测胆囊肿瘤血管生成 ,期望发展一种无创伤性评价肿瘤血管生成的方法。方法 :3 6例胆囊癌和 2 6例胆囊腺瘤患者术前均行ＣＤＰＩ探测胆囊肿瘤血流 ,术后切除标本行ＭＶＤ和流式细胞计数检查 ,ＣＤＰＩ检测结果与术后ＭＶＤ和临床病理资料进行对照分析。结果 :ＣＤＰＩ探测的胆囊腺瘤血流以ＣＤＰＩⅠ型、Ⅱ型和周边血流为主 ,胆囊癌则以ＣＤＰＩⅢ型、Ⅳ型和内部血流为主 (Ｐ < 0 . 0 5)。ＣＤＰＩ检测到的肿瘤血管数目和分布与ＭＶＤ测定结果呈正相关(Ｐ <0 . 0 5) ;ＣＤＰＩⅢ型、Ⅳ型者 ,发生淋巴转移者及Ｓ +Ｇ2 Ｍ期指数明显高于ＣＤＰＩⅠ型、Ⅱ型(Ｐ < 0 . 0 5)。结论 :ＣＤＰＩ能够在体外评价胆囊肿瘤血管生成 。

转染HCV核心基因后对人胆管癌细胞中hTERT mRNA表达的影响

目的 探讨丙型肝炎病毒核心基因 (hepatitisCviruscoregene ,HCVC基因 )调控端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因表达在肝门部胆管癌发生中的作用。方法 将构建成功的HCVC基重组真核表达载体pcDNAHCV -C和空载体与绿色荧光蛋白基因共转染人胆管正常上皮细胞 (hu mannormalbiliaryepithelialcells ,BEC)和胆管癌细胞QBC939,RT -PCR和免疫组织化学方法分析转染后细胞内hTERTmRNA和蛋白的表达。结果 pcDNAHCV -C在BEC和QBC939细胞中的转染率为 16 %和 32 % ,转染HCVC基因的BEC组表达hTERTmRNA ,而转染空载体的BEC不表达hTERTmRNA ;表达HCVC蛋白QBC939中hTERTmRNA和蛋白的表达明显高于空载体组。结论 转染的HCVC基因可以上调hTERT基因的表达 。

小鼠MHC-Ⅰ/MHC-Ⅱ类分子限制性表位MAGE-3多肽疫苗的设计及其免疫效应

【目的】设计小鼠MHC-I/MHC-II类分子限制性表位黑色素瘤抗原-3(MAGE-3)多肽疫苗即包含CD4+-CD8+T细胞表位的MAGE-3多肽抗原,并探讨其免疫效应。【方法】采用计算机模拟设计的方法,结合文献资料选择MHC-I/MHC-II类分子限制性表位的MAGE-3多肽。采用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)、细胞毒性实验评价多肽诱导T淋巴细胞的增殖能力及刺激的T淋巴细胞释放细胞因子的能力。【结果】获得的联合表位多肽序列为FITC-YEEYYPLIFLDNDQETMETSEEEEYEEYYPLIF,高效液相色谱法分析多肽纯度≥90%。MAGE-3表位多肽抗原能够诱导T淋巴细胞增殖,并诱导T淋巴细胞分泌IFN-γ,高于对照组(49vs.6spots/106,P≤0.05)。MAGE-3表位多肽可诱导细胞毒T淋巴细胞使42%的MFC细胞溶解破裂,高于对照组(P≤0.05)。【结论】包含CD4+-CD8+T细胞表位的MAGE-3多肽抗原在体外实验中显示有一定的免疫效应,此抗原肽可作为多肽疫苗用于对表达MAGE-3抗原的H-2KK型小鼠胃癌进行免疫治疗。

环磷酰胺、阿霉素、5-氟尿嘧啶方案与紫杉醇、顺铂方案治疗晚期乳腺癌的疗效比较

背景及目的:环磷酰胺、阿霉素、5-氟尿嘧啶方案(CAF方案)和紫杉醇、顺铂方案(TP方案)均是治疗晚期乳腺癌的有效方案,但TP方案给药复杂。我们对两组晚期乳腺癌病例进行回顾性分析,比较CAF方案及TP方案治疗晚期乳腺癌的客观疗效和不良反应。方法:经病理检查证实的晚期乳腺癌患者117例,按不同治疗方案分为CAF组和TP组,两组病例特征具可比性(P>0.05)。CAF组(66例):环磷酰胺600mg/m2,静脉推注,第1天;5-氟尿嘧啶600mg/m2,静脉滴注,第1、8天;阿霉素60mg/m2,静脉推注,第1天。TP组(51例):紫杉醇135mg/m2,静脉滴注3h,第1天;顺铂60mg/m2,静脉滴注,第2、3天。两组均以3周为1个疗程,至少接受2个疗程化疗。结果:CAF组初治病例有效率54.8%(17/31),复治病例有效率31.4%(11/35),总有效率42.4%(28/66);TP组分别为62.5%(15/24),59.3%(16/27),60.8%(31/51)。两组初治病例有效率差异无统计学意义(P>0.05,χ2检验),复治病例有效率及总有效率差异有统计学意义(P<0.05,χ2检验)。CAF组中位无进展时间7.8个月犤95%可信区间(confidenceinterval,CI)为5.3～10.8个月犦、中位生存时间17.8个月(95%CI为13.3～22.5个月);TP组分别为8.6个月(95%CI为6.5～12个月)和19个月(95%CI为15～25.5个月),两组差异均无统计学意义(P>0.05。

MAGE-3多肽纳米疫苗对小鼠胃癌种植瘤抑瘤效应研究

背景与目的:纳米颗粒作为疫苗载体可保护抗原免受酶解,增强免疫原性,是一类极具开发潜力的新型疫苗载体。本实验制备负载CD4+CD8+T细胞表位MAGE-3多肽抗原的纳米疫苗,探讨其相关特性及抗肿瘤免疫。方法:利用自组装技术制备多肽/Chit-DC(壳聚糖-脱氧胆酸)载药纳米胶束,透射电镜观察纳米微观形态,荧光分光光度法计算负载率、载药量,并测定药物释放规律。流式细胞仪检测DC(树突状细胞)对药物的吞噬率,酶联免疫斑点实验(ELISPOT)和细胞毒性实验检测MAGE-3多肽纳米疫苗激活机体细胞免疫反应的状况。动物实验观察其体内抑瘤效应。结果:成功制备多肽/Chit-DC纳米胶束,药物包封率约为37%,载药量为17%。载药纳米颗粒中的多肽在pH7.4的PBS中释放缓慢,于48h达释放平台;在2mg/mL溶菌酶溶液中,药物有一定的突释现象,于24h达释放平台。ELISPOT和细胞毒性实验显示MAGE-3多肽纳米疫苗可以激活体内免疫反应而产生针对MAGE-3的CTL,特异性杀伤表达MAGE-3的肿瘤细胞。体内抑瘤实验显示,多肽纳米疫苗组相对肿瘤抑制率为37.81%。结论:MAGE-3多肽/Chit-DC纳米疫苗能有效激活体内的抗肿瘤免疫效应,抑制MFC小鼠前胃癌细胞的生长。

肝内胆管结石合并肝胆管癌:附24例报告

目的探讨肝内胆管结石与肝胆管癌发生的关系及提高早期诊断的措施。方法回顾性分析近2 0年收治的2 4例肝内胆管结石并发肝胆管癌患者的临床资料。结果肝内胆管结石并肝内胆管肿瘤在所有肝内胆管结石的病例中占2.8%(2 4/8 6 0),癌肿均发生于含结石胆管处,部分切片中可见癌与不同程度的胆管上皮不典型增生同时存在。术前B超、CT和MR I/MPCP对肝内胆管结石并发肝占位病变诊断率分别为4 0.9%(9/2 2),5 3.8%(7/1 3)和6 6.7%(4/6);手术切除率70.8%(1 7/2 4),根治性切除率为3 3.3%(8/2 4)例,姑息切除率为3 7.5%(9/2 4)。术后1,3年生存率:根治组为6 2.5%,2 5.0%,姑息性组为3 3.3%,1 1.1%,活检组为0%。结论长期肝内胆管结石反复发作是引起胆管癌发生的重要原因;结石型肝内胆管癌的延误诊断率高、根治性切除率低、预后差。重视结石型肝胆管癌临床延误诊断的原因并采取相应的避免措施有助于早期诊断。

非金属元素掺杂二氧化钛纳米管的研究进展

TiO2纳米管对大部分可见光不能进行有效地吸收利用,成为其实际应用的"瓶颈"。非金属元素掺杂TiO2纳米管可以有效地减小TiO2带隙,拓展光谱响应范围。本文介绍了非金属掺杂TiO2纳米管的原理和制备方法,对非金属单一元素掺杂、非金属与其它元素共掺杂TiO2纳米管的研究现状进行了详细的评述,指出了非金属掺杂TiO2纳米管过程中存在的问题和未来的研究方向。

高强度聚焦超声热疗治疗晚期原发性肝癌疗效观察

目的:探讨高强度聚焦超声(highintensityfocusedultrasound,HIFU)热疗治疗晚期原发性肝癌(肝癌)的疗效及不良反应。方法:应用HIFU热疗治疗肝癌患者42例,观察有效率、生存时间及不良反应。结果:42例共行HIFU热疗治疗188次,平均4.5次,有效率33%,治疗后疼痛、腹胀、纳差等症状均获得不同程度的缓解,功能状况评分较前改善。平均生存期26.3周,中位生存期为22周。主要不良反应为入射范围内肋骨疼痛及皮肤烧灼感、潮红,经对症治疗后好转,不影响后续治疗,未出现其他不良反应。结论:热疗治疗晚期肝癌有一定疗效,且不良反应少,值得进一步探讨。

基于光谱植被指数的冬小麦叶绿素含量反演

植物功能叶的SPAD值与其氮素和叶绿素有较强的相关性,研究功能叶SPAD与其冠层光谱的关系,对实现植株叶绿素含量快速、无损检测具有重要意义。本文通过对冬小麦生育期的冠层原始光谱进行一阶导数变换,研究其功能叶片SPAD值与冠层光谱的相关性,对监测冬小麦叶绿素含量的敏感波段进行了提取,并建立了叶绿素含量与冠层反射光谱的定量关系。结果表明,基于小麦冠层原始光谱反射率、冠层光谱导数反射率与SPAD的相关系数曲线,提取的各形式下冬小麦叶绿素含量的敏感波段分别为500、690、760和470、630、723nm;并构建了冬小麦叶绿素含量的预测模型,以FDNDVI(630,723)预测模型较好,其R2可达0.9485,模型验证参数R2、MRE和RMSE分别为0.8099、0.0294和1.805,拟合效果较好,表明该模型能有效地对冬小麦叶绿素含量进行预测。该研究结果可为冬小麦长势监测提供一定的理论参考。

丙型肝炎病毒核心蛋白对胆管癌细胞NFAT1基因表达的影响

目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV C)是否通过调控转录因子NFAT1的表达参与肝内胆管癌的发展及恶性生物学行为。方法构建表达HCV C核心蛋白的真核表达质粒pEGFP-N3-HCV C,通过瞬时转染pEGFP-N3-HCV C质粒,RT-PCR检测肝内胆管癌RBE细胞中NFAT1 mRNA的表达情况,Western blot检测NFAT1蛋白的表达情况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期变化情况。结果转染HCV C后胆管癌细胞NFAT1基因的mRNA及蛋白表达明显上升,差异具有显著性(P<0.05);HCV C能够促进细胞向G2/M期进展及使细胞增殖能力增加。结论 HCV C可上调胆管癌细胞中NFAT1基因的表达,促进细胞周期进展及胆管癌细胞增殖,可能与肝内胆管癌的发展有关。

金龙胶囊对晚期非小细胞肺癌患者CD4/CD8和自然杀伤细胞活性的影响

目的:观察金龙胶囊对晚期非小细胞肺癌(advancedNon-SmallCellLungCancer,ANSCLC)患者的CD4/CD8、自然杀伤细胞(NaturalKillercell,NK细胞)活性的影响。方法:89例非小细胞肺癌患者分治疗组49例和对照组40例,两组以顺铂、依托泊苷(EP)方案或紫杉醇、顺铂(TP)方案化学药物治疗(化疗)至少2个疗程。治疗组在化疗开始同时给予金龙胶囊4粒,每日3次口服,连服8周为1个疗程。所有病例在化疗前及第2个疗程结束后第15日检查CD4/CD8、NK细胞的活性。结果:治疗组治疗前后CD4/CD8分别为(1.2±0.3)和(1.5±0.4)(P<0.05),NK细胞活性分别为(27±9)和(32±10)(P<0.05);对照组相应为(1.2±0.3)和(1.2±0.2),(25±8)和(24±8)(均为P>0.05)。结论:金龙胶囊能增强晚期非小细胞肺癌患者的免疫水平。

pH对大孔弱碱性树脂吸附处理H酸废水的影响

采用几种大孔弱碱性树脂处理H酸水溶液进行吸附筛选实验,筛选出吸附效果最好的ND900和D301两种大孔弱碱性树脂,并进行了pH对树脂吸附H酸性能的影响实验。结果表明,pH对两种树脂吸附处理H酸废水的性能影响较为明显,pH过高和过低都不利于吸附。

太阳光/电-Fenton法降解H-acid的表观动力学研究

进行了太阳光/电-Fenton法降解染料中间体H-acid模拟废水的表观动力学研究,通过对不同初始H-acid浓度和Fe2+浓度体系以及不同初始电压浓度体系反应的分析,确定该反应的表观动力学方程和动力学参数,为该技术降解H-acid废水优化反应条件提供了依据.结果表明,在固定初始pH值、支持电解质Na2SO4为0.10 mo.lL-1、太阳光直射的条件下,太阳光/电-Fenton降解染料中间体H-acid的反应级数为1.88,其反应的表观动力学方程为:y=0.053×P0.8313×F0.1224×V0.9227.