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钙、镁离子对烟草花叶病毒侵染的抑制作用 被引量:4
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作者 李怀方 张莉 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 1994年第5期2-4,共3页
用珊西烟半叶法接种,测定了钙、镁离子以及离子螯合剂(EDTA)等对TMV浸染的抑制作用。结果高浓度的钙离子或镁离子溶液与等体积的TMV稀释液混合接种,显著地抑制病毒的侵染(抑制率高达80%─90%);而且处理半叶上的... 用珊西烟半叶法接种,测定了钙、镁离子以及离子螯合剂(EDTA)等对TMV浸染的抑制作用。结果高浓度的钙离子或镁离子溶液与等体积的TMV稀释液混合接种,显著地抑制病毒的侵染(抑制率高达80%─90%);而且处理半叶上的枯斑直径小于对照,用ELISA方法检测病毒明显减少。接种前、后间隔一定时间使用钙、镁离子,抑制率仍在50%─90%;EDTA的作用依赖于叶片生理状态。说明植物、病毒与此二离子间存在复杂的相互关系。 展开更多
关键词 钙离子 镁离子 烟草 花叶病毒 侵染 抑制
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数种烤烟品种中碳氮代谢与酶活性的研究 被引量:78
2
作者 刘卫群 韩锦峰 +2 位作者 史宏志 王延亭 李怀方 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期22-26,共5页
本文研究了烤烟品种K326,NC89,中烟90在不同生育期碳氮代谢和酶活性的关系。结果表明,团棵期K326的叶绿素含量、硝酸还原酶和转化酶活性及总氮含量均高于NC89和中烟90。现蕾期后,中烟90的硝酸还原酶活性高于K326和NC89,转化酶活性... 本文研究了烤烟品种K326,NC89,中烟90在不同生育期碳氮代谢和酶活性的关系。结果表明,团棵期K326的叶绿素含量、硝酸还原酶和转化酶活性及总氮含量均高于NC89和中烟90。现蕾期后,中烟90的硝酸还原酶活性高于K326和NC89,转化酶活性在整个生育期都低于K326和NC89。K326的C/N增加主要在现蕾期后,中烟90的C/N增加主要在现蕾期前。3个品种的碳氮代谢协调程度依次为K326,NC89,中烟90。 展开更多
关键词 烤烟 品质 烟草
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白草花叶病毒CP基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备 被引量:15
3
作者 邓丛良 韩丽娟 +3 位作者 燕照玲 程玉琴 周涛 李怀方 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期442-445,共4页
将白草花叶病毒(Penn isetum mosaic virus,PenMV)的外壳蛋白(CP)基因连接到表达载体pET22b(+)上,获得重组子pET-PCP。SDS-PAGE和W estern b lotting分析表明,经IPTG诱导后,含pET-PCP的大肠杆菌BL21(DE3)pLys产生分子量为36 kDa的融合... 将白草花叶病毒(Penn isetum mosaic virus,PenMV)的外壳蛋白(CP)基因连接到表达载体pET22b(+)上,获得重组子pET-PCP。SDS-PAGE和W estern b lotting分析表明,经IPTG诱导后,含pET-PCP的大肠杆菌BL21(DE3)pLys产生分子量为36 kDa的融合蛋白。以N i2+亲和层析柱纯化该蛋白,并以其为抗原免疫德国大白兔制备了特异性较强的抗血清。微量免疫沉淀法测其效价为1∶1 024,酶联法(enzym e-linked immunosorbant assay,ELISA)测定的效价为1∶8 192。该血清可替代常规病毒粒子所制备的抗血清,用于检测PenMV。 展开更多
关键词 白草花叶病毒 外壳蛋白 原核表达 抗血清 ELISA
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小西葫芦黄花叶病毒外壳蛋白基因的克隆及序列分析 被引量:16
4
作者 古勤生 范在丰 +3 位作者 Piero Roggero 陈红运 俞正旺 李怀方 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期498-502,共5页
以小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)的中国分离物(CH-87)接种发病的叶片中提取的总RNA为模板,经RT-PCR扩增获得ZYMV CP基因,将其克隆到pUCm-T质粒上进行序列分析。结果表明该CP基因由837个核苷酸组成,编码279个... 以小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)的中国分离物(CH-87)接种发病的叶片中提取的总RNA为模板,经RT-PCR扩增获得ZYMV CP基因,将其克隆到pUCm-T质粒上进行序列分析。结果表明该CP基因由837个核苷酸组成,编码279个氨基酸。与已发表序列相比较,该CP基因与国际上已报道的4个基因型不同,应属于新的基因型,暂命名为基因型Ⅴ。 展开更多
关键词 ZYMV 中国分离物 外壳蛋白基因 基因型
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植物过氧化物酶研究进展 被引量:249
5
作者 田国忠 李怀方 裘维蕃 《武汉植物学研究》 CSCD 2001年第4期332-344,共13页
Studies on plant peroxidases are reviewed in this paper, including enzyme types and localization, molecular structure, purification and identification and gene expression and regulation related to plant growth, develo... Studies on plant peroxidases are reviewed in this paper, including enzyme types and localization, molecular structure, purification and identification and gene expression and regulation related to plant growth, development, wounding and pathogen infection etc. The physiological functions of peroxida ses in plant are also discussed, which cover such as active oxygen metabolism, formation of lignin and suberin, degradation of auxin, oxidation of other compounds and responses for various environmental stresses, especially the pathogen attack. 展开更多
关键词 植物 过氧化物酶 酶结构 分子生物学 生理功能 环境胁迫
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烟草花叶病毒丁香分离物的分离与鉴定 被引量:12
6
作者 黄金光 邓丛良 +2 位作者 范在丰 田国忠 李怀方 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期215-220,共6页
从表现花叶症状的丁香病株上获得一病毒分离物 ,其在电镜下为约 3 0 0 nm× 1 8nm的杆状粒子 ;电泳分析表明感病组织中 ds RNA大约为 6.4kbp,而其外壳蛋白分子量约为 1 7.6k Da。以上实验结果初步将该病毒分离物鉴定为烟草花叶病毒... 从表现花叶症状的丁香病株上获得一病毒分离物 ,其在电镜下为约 3 0 0 nm× 1 8nm的杆状粒子 ;电泳分析表明感病组织中 ds RNA大约为 6.4kbp,而其外壳蛋白分子量约为 1 7.6k Da。以上实验结果初步将该病毒分离物鉴定为烟草花叶病毒属 ( Tobamovirus)。根据该属病毒复制酶基因序列设计通用引物 ,进行 RT-PCR检测 ,扩增出约 1 0 0 0 bp的预期特异片段( Gen Bank AY5 6670 3 )。将 PCR产物克隆后测序 ,序列分析表明 ,与从蚕豆中分离的 TMV-B株系序列 ( Gen Bank AJ0 1 1 93 3 .1 )同源性为 99.90 %。根据烟草花叶病毒 ( Tobacco mosaicvirus,TMV)的 RNA CP基因序列设计引物 ,进行 RT-PCR,扩增出约 80 0 bp的预期特异片段 ( Gen Bank AY5 6670 2 ) ,序列分析表明 ,与 TMV-B株系序列 ( Gen Bank AJ0 1 1 93 3 .1 )同源性达99% ,上述实验结果表明 ,该病毒分离物为 TMV。由于该分离物与 TMV-B在指示植物上的症状存在明显差异 ,所以 ,作者把该分离物暂命名为 TMV-S。 展开更多
关键词 丁香 烟草花叶病毒 鉴定 序列分析
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根癌农杆菌对感染植原体的泡桐组培苗症状的影响 被引量:6
7
作者 田国忠 朱水芳 +2 位作者 罗飞 李怀方 裘维蕃 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2001年第3期258-264,共7页
采用含有激素合成相关基因的根癌农杆菌 ,伤口接种已感染植原体的泡桐丛枝组培苗和健康组培苗 ,结果发现对丛枝苗的致瘤能力明显低于健康对照苗 ,且被接种病苗的丛枝症状缓解。从健苗获得的 T- DNA转化泡桐瘤组织细胞能在无激素培养基... 采用含有激素合成相关基因的根癌农杆菌 ,伤口接种已感染植原体的泡桐丛枝组培苗和健康组培苗 ,结果发现对丛枝苗的致瘤能力明显低于健康对照苗 ,且被接种病苗的丛枝症状缓解。从健苗获得的 T- DNA转化泡桐瘤组织细胞能在无激素培养基上稳定生长和连续继代培养 2年以上 ,说明瘤组织细胞自身已获得了细胞分裂素和生长素合成能力。根据已报道的根癌农杆菌株系p Til5955T- DNA的异戊烯基转移酶基因 ( ipt)的保守序列 ,设计了一对引物 ( CYT和 CYT′) ,用多聚酶链式反应 ( PCR)扩增了我国杨树致瘤农杆菌 ipt基因部分序列 ( 4 2 7bp片段 ) ,也从遗传转化的两个泡桐无性系瘤组织 At- ZH和 At- T35扩增出此特异片段 ,从而进一步肯定了 T- DNA已被整合到泡桐的染色体上 ,表明泡桐易于通过 Ti质粒载体途径进行基因转移操作 ,但用此引物未能从泡桐、甘薯健株和感染植原体的组培病苗扩增出相应的 4 2 7bp特异片段。当用此遗传转化瘤组织嫁接病苗时 ,可减轻丛枝症状的严重度 ,延长病苗的存活时间和诱导病株生根 。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 泡桐丛枝病植原体 病害症状 异戊烯基转移酶基因 组培苗 PCR
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潍坊萝卜红心病病原鉴定 被引量:8
8
作者 李向东 刘金亮 +3 位作者 李文法 范在丰 李怀方 王洪刚 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期13-18,共6页
本文用生物学、血清学和分子生物学证据证明,引起潍坊萝卜红心病的病原为芜菁花叶病毒 (Turnipmosaicvirus,TuMV)。该病毒可系统侵染曼陀罗、油菜、咸阳黄瓜、丝瓜、大白菜和普通烟,局部侵染苋色藜和假酸浆,不侵染豌豆。病毒粒体弯曲线... 本文用生物学、血清学和分子生物学证据证明,引起潍坊萝卜红心病的病原为芜菁花叶病毒 (Turnipmosaicvirus,TuMV)。该病毒可系统侵染曼陀罗、油菜、咸阳黄瓜、丝瓜、大白菜和普通烟,局部侵染苋色藜和假酸浆,不侵染豌豆。病毒粒体弯曲线状,长约 700nm,可由蚜虫传播,在红心病组织内形成风轮状和片层凝集状内含体,它在SDS 琼脂糖凝胶免疫双扩散试验中可与TuMV的抗血清形成明显的沉淀线。该病毒的CP基因共 867个核苷酸,编码 288个氨基酸,分子量为32 98kD。该序列与国内外 20个TuMV分离物的CP氨基酸序列比较结果表明,这些分离物可以分为 5组,其中引起萝卜红心病的病毒与日本的H1J、KYD81J、意大利的ITA7同属一组。 展开更多
关键词 萝卜 病毒病 芜菁花叶病毒 系统树分析
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玉米矮花叶病毒HC-Pro在蚜虫传毒过程中的作用机制 被引量:14
9
作者 李向东 李怀方 +1 位作者 范在丰 裘维蕃 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期217-221,共5页
本文用亲合印迹法测定了玉米矮花叶病毒 ( MDMV)与 MDMV HC- Pro,及二者与蚜虫蛋白之间的互作。结果表明 ,MDMV HC- Pro可以与 MDMV结合 ,也可以直接与 MDMV的介体——麦二叉蚜 ( Schizaphis graminum)中分子量约为 56k D的可溶性蛋白结... 本文用亲合印迹法测定了玉米矮花叶病毒 ( MDMV)与 MDMV HC- Pro,及二者与蚜虫蛋白之间的互作。结果表明 ,MDMV HC- Pro可以与 MDMV结合 ,也可以直接与 MDMV的介体——麦二叉蚜 ( Schizaphis graminum)中分子量约为 56k D的可溶性蛋白结合 ,而 MDMV不能与麦二叉蚜的可溶性蛋白直接结合。无论是 MDMV HC- Pro,还是 MDMV,都不能结合非介体灰飞虱 ( Laodelphaxstriatellus)的可溶性蛋白。酶联板模型的结果与此一致。上述结果说明 ,病毒不能直接与蚜虫口针中的病毒附着位点 ( VAS)结合 ;HC- Pro一端连接病毒 ,一端连接 VAS,在蚜虫传播 MDMV的过程中起桥梁作用。这是关于病毒 HC- 展开更多
关键词 玉米矮花叶病毒 辅助成份-蛋白酶 蚜虫传毒
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玉米矮花叶病毒HC-Pro的纯化及抗血清制备 被引量:5
10
作者 李向东 范在丰 +1 位作者 李怀方 裘维蕃 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期135-138,共4页
本实验提纯了玉米矮花叶病毒 ( MDMV)的辅助成份—蛋白酶 ( HC- Pro) ,并制备了其抗血清。MDMV HC- Pro的分子量约为 57k D,提纯产量为 0 .3mg/ 10 0 g病叶。琼脂免疫双扩散测定证明MDMV HC- Pro抗血清的效价为 1∶ 16;微量免疫沉淀法... 本实验提纯了玉米矮花叶病毒 ( MDMV)的辅助成份—蛋白酶 ( HC- Pro) ,并制备了其抗血清。MDMV HC- Pro的分子量约为 57k D,提纯产量为 0 .3mg/ 10 0 g病叶。琼脂免疫双扩散测定证明MDMV HC- Pro抗血清的效价为 1∶ 16;微量免疫沉淀法测定时其效价为 1∶ 10 2 4。该抗血清只与MDMV HC- Pro有明显的反应 ,与健康玉米汁液和 MDMV无反应。MDMV HC- Pro抗血清可以专化性地抑制 HC- Pro的蚜传活性。 展开更多
关键词 玉米 病毒 玉米矮花叶病毒 HC-PRO 辅助成份-蛋白酶 蚜虫传毒 纯化 抗血清
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寡糖在植物防卫反应中的作用及其信号传导 被引量:17
11
作者 李向东 李怀方 范在丰 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期47-49,共3页
寡糖是动植物生长发育过程中一类重要的信号,可以调节多种反应。寡糖可以影响豌豆茎切段的伸长及烟草外植体的形态发生,还可诱导乙烯产生和果实成熟。在植物抗病防卫反应中,寡糖可以诱导植保素的合成及蛋白酶抑制剂的合成,并可诱导... 寡糖是动植物生长发育过程中一类重要的信号,可以调节多种反应。寡糖可以影响豌豆茎切段的伸长及烟草外植体的形态发生,还可诱导乙烯产生和果实成熟。在植物抗病防卫反应中,寡糖可以诱导植保素的合成及蛋白酶抑制剂的合成,并可诱导对病毒的抗性。植物和真菌细胞壁降解时产生的寡糖片断均可作为信号诱导植物的抗病防卫反应。庚-β-葡聚糖和寡聚几丁质的结合蛋白已经得到鉴定。寡糖信号转导过程中有磷酸化和去磷酸化的发生,膜的过氧化,并涉及到离子流和活性氧的产生等。 展开更多
关键词 寡糖 防卫反应 信号转导
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MDMV HC-Pro在玉米叶片中的积累及免疫定位 被引量:5
12
作者 李向东 范在丰 +1 位作者 李怀方 裘维蕃 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期310-314,共5页
本文以感病自交系 Mo17、掖 10 7和抗病自交系黄早四为材料 ,研究了玉米矮花叶病毒(MDMV)和 MDMV辅助成份—蛋白酶 (HC- Pro)在叶片中的积累动态和细胞内定位。结果表明 ,在接种后 3d,MDMV就在掖 10 7和 Mo17接种叶的上位叶积累到了相... 本文以感病自交系 Mo17、掖 10 7和抗病自交系黄早四为材料 ,研究了玉米矮花叶病毒(MDMV)和 MDMV辅助成份—蛋白酶 (HC- Pro)在叶片中的积累动态和细胞内定位。结果表明 ,在接种后 3d,MDMV就在掖 10 7和 Mo17接种叶的上位叶积累到了相当高的程度 ,6d后达到高峰 ;而MDMV在黄早四中的浓度一直低于在掖 10 7和 Mo17中的浓度。在接种掖 10 7和 Mo176d后 ,MDMV HC- Pro在上位叶中的积累到达高峰 ,而在黄早四植株中 MDMV HC- Pro直到第 9d才到最高 ,而且浓度一直低于感病自交系掖 10 7和 Mo17。麦二叉蚜从发病植株上获毒后的传毒效率变化与MDMV、MDMV HC- Pro在叶片中的积累动态一致。通过胶体金标记对 MDMV HC- Pro进行免疫定位 ,发现在细胞质中、与质膜相联系的风轮状内含体、片层凝集状内含体、细胞质高密度物质和病毒粒子周围有金标记 ,说明在这些部位有 MDMV HC- Pro的存在。 展开更多
关键词 玉米叶片 辅助成份-蛋白酶 玉米矮花叶病毒 介体 HC-PRO 免疫定位
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侵染扶桑的烟草花叶病毒分离物鉴定 被引量:7
13
作者 黄金光 田国忠 +1 位作者 范在丰 李怀方 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期33-37,共5页
从表现叶斑驳症状的扶桑病株上获得一病毒分离物,电镜下可见约300 nm×18 nm的杆状粒子,其与烟草花叶病毒抗血清呈明显的阳性反应,dsRNA约为6.4 kbp。根据烟草花叶病毒(tobacco.mosaic virus,TMV)的RNA序列设计引物,进行RT-PCR检测... 从表现叶斑驳症状的扶桑病株上获得一病毒分离物,电镜下可见约300 nm×18 nm的杆状粒子,其与烟草花叶病毒抗血清呈明显的阳性反应,dsRNA约为6.4 kbp。根据烟草花叶病毒(tobacco.mosaic virus,TMV)的RNA序列设计引物,进行RT-PCR检测,扩增出约800 bp的预期特异片段。将PCR产物连接pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,得到了含有目的片段的重组子。序列分析表明,与周雪平等报道的序列(GenBank AJ011933.1)同源性达99%。通过生物学、病毒粒子观察、血清学以及分子生物学实验结果,确定该病毒分离物为TMV。 展开更多
关键词 植物病理学 烟草花叶病毒 扶桑 鉴定
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玉米矮花叶病毒种子传毒率检测 被引量:10
14
作者 马占鸿 李怀方 裘维蕃 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期36-36,共1页
玉米矮花叶病毒种子传毒率检测马占鸿李怀方裘维蕃(中国农业大学植病系病毒室,北京100094)DETECTIONOFMAIZEDWARFMOSAICVIRUSINMAIZESEEDMaZhanhongLiHuaifa... 玉米矮花叶病毒种子传毒率检测马占鸿李怀方裘维蕃(中国农业大学植病系病毒室,北京100094)DETECTIONOFMAIZEDWARFMOSAICVIRUSINMAIZESEEDMaZhanhongLiHuaifangQiuWeifan(Depar... 展开更多
关键词 玉米 矮花叶病毒 种子传毒率 检测
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新疆杨胰蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达 被引量:5
15
作者 梁文星 范在丰 +3 位作者 李永 宋丽敏 李怀方 田国忠 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2006年第4期446-451,共6页
杨树受损伤后能诱导一些基因的表达,其编码的蛋白质可能在杨树的防卫反应中起一定作用。用PCR方法从新疆杨叶片中克隆出一个损伤诱导型Kun itz胰蛋白酶抑制剂基因PaTI1。序列分析表明:此基因不含内含子,其翻译起点上游具有‘TATA’和‘C... 杨树受损伤后能诱导一些基因的表达,其编码的蛋白质可能在杨树的防卫反应中起一定作用。用PCR方法从新疆杨叶片中克隆出一个损伤诱导型Kun itz胰蛋白酶抑制剂基因PaTI1。序列分析表明:此基因不含内含子,其翻译起点上游具有‘TATA’和‘CCAAT’等转录控制元件,包含的阅读框架能编码一个长为213个氨基酸的多肽。此多肽与克隆自美洲山杨的PtTI2和PtTI1氨基酸序列同源性最高,分别为95%和80%,其N端存在一长度为27个氨基酸的信号肽。将此基因以融合蛋白的形式在大肠杆菌中进行表达,纯化后的融合蛋白对胰蛋白酶的活性有抑制作用,每8.5μg融合蛋白可完全抑制1μg牛胰蛋白酶的活性。W estern b lot分析表明融合蛋白与PtTI2特异的抗体之间有明显的血清学反应。 展开更多
关键词 蛋白酶抑制剂基因 新疆杨 损伤诱导
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侵染节瓜的小西葫芦黄花叶病毒CP基因的克隆、表达及其抗血清的制备 被引量:5
16
作者 宋丽敏 卢彩鸽 +2 位作者 梁文星 黄金光 李怀方 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期132-134,共3页
通过鉴别寄主反应、病毒部分序列测定确定了采自广州白云区表现花叶、斑驳症状的节瓜上的病毒为ZYMV。采用RT PCR方法扩增和克隆了该病毒的外壳蛋白基因 ,连接到原核表达载体pET 2 2b(+)上。获得的重组子pET ZCP转化大肠杆菌BL2 1(DE3)... 通过鉴别寄主反应、病毒部分序列测定确定了采自广州白云区表现花叶、斑驳症状的节瓜上的病毒为ZYMV。采用RT PCR方法扩增和克隆了该病毒的外壳蛋白基因 ,连接到原核表达载体pET 2 2b(+)上。获得的重组子pET ZCP转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后 ,用IPTG进行诱导表达。SDS PAGE和Westernblot分析表明 ,CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达 ,融合蛋白分子量约为 33 0kD。将融合蛋白纯化后免疫兔子 ,获得了特异性较高的抗血清。ELISA测定其效价为 1 4 0 展开更多
关键词 小西葫芦黄花叶病毒 外壳蛋白 原核表达 抗血清
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玉米矮花叶病研究进展与存在问题 被引量:11
17
作者 马占鸿 李怀方 周广和 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期33-36,共4页
玉米矮花叶病是禾谷类作物的重要病毒病害之一。1963年美国俄亥俄州大发生,十几个县4048hm2玉米田的50%受害,损失惨重。1965年Wiliams等明确由玉米矮花叶病毒(Maizedwarfmosaicvirus... 玉米矮花叶病是禾谷类作物的重要病毒病害之一。1963年美国俄亥俄州大发生,十几个县4048hm2玉米田的50%受害,损失惨重。1965年Wiliams等明确由玉米矮花叶病毒(Maizedwarfmosaicvirus,简称MDMV)侵染所致[1]。目... 展开更多
关键词 玉米矮花叶病 研究进展 理化特性
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一种检测棉花黄萎菌毒素致萎性的新方法—叶片针刺涂抹法 被引量:21
18
作者 齐俊生 李怀方 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期228-232,共5页
用针在棉花叶片表面0.5cm^2的面积上刺15~20个小点,然后将黄萎菌毒素溶液涂抹于针刺部位,观察记载处理部位的萎蔫程度,由此检测黄萎菌毒素对棉花致萎性的强弱。利用层析纯化的黄萎菌V991毒素对棉花的致萎性试验表明:棉苗的子叶为... 用针在棉花叶片表面0.5cm^2的面积上刺15~20个小点,然后将黄萎菌毒素溶液涂抹于针刺部位,观察记载处理部位的萎蔫程度,由此检测黄萎菌毒素对棉花致萎性的强弱。利用层析纯化的黄萎菌V991毒素对棉花的致萎性试验表明:棉苗的子叶为最佳接种部位,毒素对陆地棉感病品种鄂荆3号的致萎下限为7.3μg,接种24h即可表现萎蔫症状。用8个不同致病力黄萎菌系的培养滤液(简称滤液)针刺涂抹3个不同抗病性陆地棉品种,同时设置相应毒素浸泡参比试验。结果表明,利用培养滤液,即可以快速、准确地检测滤液的致萎力强弱,该方法既可用于棉花品种资源对黄萎病的抗性鉴定,又可用于比较黄萎病菌的不同生理型。 展开更多
关键词 棉花 黄萎菌毒素 针刺涂抹方法 致萎性检测
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玉米种子携带MDMV的检测 被引量:14
19
作者 马占鸿 李怀方 +3 位作者 袭维蕃 李桂珍 陈柏柱 李济晨 《玉米科学》 CAS CSCD 1997年第2期72-76,共5页
采用苗期症状观察、ELISA和回接试验测定了几个玉米品种种子携带玉米矮花叶病毒(MDMV)的情况,并对采自河北承德制种田的玉米品种掖单2号种子带毒部位进行了ELISA检测和侵染活性的生物学测定。结果表明,各部位携带病毒及其侵染活性... 采用苗期症状观察、ELISA和回接试验测定了几个玉米品种种子携带玉米矮花叶病毒(MDMV)的情况,并对采自河北承德制种田的玉米品种掖单2号种子带毒部位进行了ELISA检测和侵染活性的生物学测定。结果表明,各部位携带病毒及其侵染活性差异显著。其中种表携带较多的丧失了侵染活性的MDMV;种皮携带病毒的侵染活性较低;胚乳带毒率和其侵染活性均较高;胚不带毒。此外,种子质量不同,其带毒情况也存在很大的差异。由此证明,种子处理和精选可以作为玉米矮花叶病防治的主要措施之一. 展开更多
关键词 玉米 矮花叶病毒 种子带毒 生物测定 ELISA
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棉花黄萎菌落叶型菌系毒素纯化及抗血清制备 被引量:3
20
作者 齐俊生 史雪岩 +1 位作者 简桂良 李怀方 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2004年第6期343-346,共4页
用SephacrylS 200HR层析柱纯化了V991菌系毒素,经叶片针刺涂抹方法确认其致萎功能后,免疫大白兔制备了抗血清。用间接ELISA方法对强、中、弱3种不同致病力共10个菌株的培养液进行了特异性检测,结果表明:抗血清具备一定生理型特异性,能... 用SephacrylS 200HR层析柱纯化了V991菌系毒素,经叶片针刺涂抹方法确认其致萎功能后,免疫大白兔制备了抗血清。用间接ELISA方法对强、中、弱3种不同致病力共10个菌株的培养液进行了特异性检测,结果表明:抗血清具备一定生理型特异性,能够准确检出全部强致病力落叶型菌系,可作为不同生理型划分的指标之一。用毛细管电泳、SDS PAGE和Western杂交方法检测了V991毒素的组分:在中性条件下,毒素在毛细管电泳时存在2个峰;SDS PAGE将毒素分为8条带,其中4条主带具有强烈的致萎性;Western点杂交的反应强度与相应蛋白回收带的致萎功能之间明显相关。 展开更多
关键词 棉花 黄萎菌 落叶型菌系 毒素 纯化 抗血清 制备
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