马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇遮盖红细胞RhD抗原研究

[目的]马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(MDPEG)修饰红细胞,遮蔽RhD抗原,使Rh+红细胞转变为Rh-红细胞。[方法]甲基苯甲酸和聚乙二醇单甲醚(分子量5000)为原料合成MDPEG(分子量5910)。红细胞修饰:3%～5%RBC+MDPEG+2-亚氨基硫烷(IT)、pH 7.4、室温2 h。盐水法进行红细胞与ABO血型、RhD血型血清学实验。血流变仪测定红细胞黏度等指数。盐水梯度法测定红细胞渗透脆性。[结果]30 mg/ml马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇能有效遮蔽3%～5%红细胞RhD抗原,红细胞与抗RhD抗体无凝集反应,光学显微镜观察红细胞无聚集,细胞形态正常。红细胞膜渗透性、红细胞聚集指数轻微升高,刚性指数轻微下降。[结论]马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(MD-PEG)能完全遮盖RhD抗原,获得RhD阴性红细胞,细胞形态,结构正常。

温度时间对马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇遮蔽Rh抗原的影响

目的观察时间、温度等因素对马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇遮盖Rh抗原的影响。方法马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(30mg/ml)、2-亚氨基硫烷盐酸盐(3mg/ml),在pH7.4磷酸钠缓冲液中修饰红细胞(3%-5%),修饰红细胞与ABO/Rh抗体反应,观察马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇、乙-亚按基硫烷盐酸盐和红细胞加入的先后顺序以及温度时间对Rh抗原遮盖的效果。结果马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇、2-亚氨基硫烷盐酸盐和红细胞加入的先后顺序对红细胞RhD抗原遮盖无影响;但温度、时间对Rh抗原遮盖有明显影响,25-37℃修饰红细胞30min能完全遮蔽Rh抗原,但4℃修饰红细胞120min,仍有部分Rh抗原未被遮盖,显微镜下可见小细胞团块。结论温度、时间对聚乙二醇修饰红细胞遮盖Rh抗原有明显影响,而加入的顺序和间隔时间对抗原修饰无影响。

血液相关病毒核酸检测工作模式概述

人类为达到目的而进行有组织的社会活动定义为“工作”。既然是工作必然执行任务以达成目的。血液病毒核酸检测（NAT）是1项特定工作，它的组织活动就是它的工作模式。病毒核酸检测（NAT）首先在血液制品厂的原料血浆中进行，美国从1997年开始原料血浆HCV和HIV-1 NAT筛查，混浆规模为96～1200人份。随着核酸检测技术发展。尤其是病毒多重检测、加之高通量、自动化、封闭式实时荧光检测仪器的运用，为血站开展血液NAT检测奠定了基础和条件。

临床输用红细胞悬液调查

成份输血就是按病人的需要输注相应的血液成份,提高输血的疗效。成份输血是临床输血发展的必然趋势。在成都市各医院临床输用红细胞悬液已经多年。现将成都市红细胞悬液临床输用情况调查分析如下。

合理输血

输血是治疗疾病、抢救病人生命的重要措施之一.无论是外科医生、内科医生或是其他专科医生都曾经历或将使用输血治疗,因此,正确和科学合理地给病人进行输血治疗是十分重要的.不合理和不科学的输血将不能发挥输血治疗的目的,还可能适得其反,损害病人健康.所以,合理科学的输血治疗是每位医务工作者必须掌握的基础知识和基本技术.

罕见的B(A)表型血清学及基因检测

目的对1例B(A)表现型用血清学及基因检测进行鉴定。方法使用2个厂家的单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂;进口单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂;Diamed凝胶系统;人源抗-A、抗-B、抗-H血型试剂和试剂红细胞,用常规血清学方法对被检血样进行ABO血型定型。采用吸收放散方法;分子生物学PCR-RFLP方法;ABO基因第6、7外显子的PCR产物正反向测序方法进一步分析。结果被检血样红细胞及血清经2种单克隆抗-A、抗-B和试剂红细胞进行抗原抗体鉴定:正定型结果不一致;正反定型结果不符合。用吸收放散方法,人源抗-A、抗-B、抗-H;进口单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂和Diamed凝胶系统检测:有弱A抗原、强H抗原检出;PCR-RFLP基因分型:检出B/O基因;基因克隆测序证实为:B(A)700/O*02。结论证实该例为B(A)700/O*02。

四川汉族HLA基因频率和显著连锁不平衡单型分析

目的分析四川汉族HLA基因频率和HLA-A、-B位点常见显著连锁不平衡单型。方法应用微量PCR-SSP基因分型技术,将随机抽样350例造血干细胞捐献者的血样标本进行HLA-A、-B和DR基因分型。结果HLA-A、-B位点常见显著不平衡单型为A2-B46、A24-B60、A11-B75/B62、A30-B13。结论四川汉族人中A2与B46、A24与B60、A11与B72/62、A30与B13常呈显著连锁不平衡。

血液中心血液信息管理系统

成都市血液中心负责市区和郊区县等十区县的献血工作和向１００多家医院供血的任务。每日有大量的血液采集保存和发放各医院的工作，任务繁重，加上血液的特殊性，微小的失误将造成严重的输血事故，危及病人的生命安全。因此传统的手工业管理方式已经不能满足血液管理工作...

成都地区无偿献血者血小板数量调查

[目的]调查成都地区献血者血小板数量参数,帮助血小板献血者的招募。[方法]采用血清学流行病学方法对献血者血液标本在24h内用血细胞分析仪测定血小板计数。[结果]成都地区献血者以青壮年为主,18～29岁占71.6%,30～39岁占20.6%,40岁以上占7.8%。女性血小板数明显高于男性(P<0.001);年龄增加血小板数下降。血小板均数和标准差:男性,(153±53)×109/L;女性,(167±58)×109/L。血小板数≥150×109/L的概率,18～29岁男性为56%、女性为67%;30～39岁为45%;40～55岁为40%。影响男性血小板数的明显因素为脂质与素食饮食(P<0.038),肥胖(BMI≥24kg/m2)与消瘦(BMI<18.5kg/m2=(P<0.036);体力与脑力劳动对女性血小板数量有显著影响(P=0.017);其他因素,如血型、居住等,对献血者血小板数无明显影响。[结论]该地区献血者血小板数量低于国内平均水平。血小板数量的影响因素需进一步调查。

PCR-SSP在人类血小板抗原1—6、15系统基因分型中的应用

目的探索PCR-SSP技术在人类血小板抗原(HPA)-1、2、3、4、5、6、15系统的基因分型中的应用。方法合成23条序列特异性引物,通过调节引物浓度、Mg2+离子浓度和探索最佳PCR扩增条件,建立HPA-1—6、15系统同步扩增基因分型方法。用该法盲检100名献血者HPA-1—6、15系统的基因分型结果,与用美国G&T公司的HPA-1—6、15系统的基因分型试剂所测试的这100名献血者的基因分型结果进行比较。结果该分型方法和美国G&T公司试剂同时检测100名随机献血者,其HPA-1—6、15分型结果完全一致,符合率达100%,基因频率分别是:HPA-1a和1b为1和0,HPA-2a和2b为0.98和0.02,HPA-3a和3b为0.63和0.37,HPA-4a和4b为0.997和0.003,HPA-5a和5b为0.997和0.003,HPA-6a和6b为1和0,HPA-15a和15b为0.548和0.450。结论该分型方法具有简便、快速、准确的特点,适合常规HPA基因分型。

血站核酸检测(NAT)实验室建设

输血相关病毒检测是保证血液安全的主要措施。病毒核酸检测能够在血液中病毒抗原和抗体之前检测到病毒核酸,缩短病毒检测的窗口期,提高血液安全。上世纪未,病毒核酸检测（NAT）已在日本、德国等发达国家开展[1,2]。现在已有许多国家开展了NAT检测[3]。2010年,卫生部确定在我国12个省（市）15家血站开展血站核酸检测试点工作[4]。

四川省血站成分科人员设备和血液成分制备调查

目的:了解四川省血站成分科的建设和当地临床输血技术水平。方法:调查四川省21家血站成分科的人员、设备和血液成分的制备情况。结果:血站成分科人员主要是初中级卫生技术人员。大容量低温离心机平均2.6台,一半以上血站没有无菌接口机、全自动血液成分分离机、红细胞洗涤机和辐照仪等。血液成分制备主要是红细胞成分、血浆、手工血小板和冷沉淀等,制品量很小,有些血液成分还不能分离制备。结论:四川省血站成分科人员技术水平较低,主要仪器设备缺乏,血液成分的开发和制备不足。

成都地区献血人群CD36基因突变频率的调查

目的调查成都地区无偿献血者中CD36基因频率,为探索因CD36抗体导致的PTR提供基础。方法提取308例无偿献血者的血液DNA,采用PCR-SBT的方法对CD36基因的3-14外显子进行测序,计算CD36的突变频率。结果308例标本中有48例发生了不同类型的突变,10例携带已报道的CD36基因突变位点;突变频率较高的三个位点是329-330 del AC,410 T>C,1228-1239delATTGTGCCTATT突变频率都为0.32%。同时发现1657-1672delGCAC AAATAAAGCACT突变频率最高,突变频率为5.03%;其次为879T>C,突变频率0.97%。结论初步得出成都地区CD36基因突变频率。