类风湿关节炎合并失眠的多中心横断面调查

目的昼夜节律紊乱与自身免疫疾病具有相关性。本研究探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者合并失眠这一昼夜节律紊乱的相关影响因素。方法采用多中心横断面临床调查方法,由风湿专科副主任医师及以上资质的专家经统一培训后进行问卷采集相关信息。调查问卷从睡眠严重程度指数和RA患者相关临床信息两个维度设计。在河北省的13家研究中心,按纳排标准筛选门诊或住院RA患者的相关信息,对患者失眠的相关因素进行比较和分析。结果共纳入RA患者181例。①一般资料:失眠者60例(33.1%),非失眠者121例,两者男女比均为1∶5;失眠者平均年龄大于非失眠者(P<0.01)。②共病:RA患者合并高血压、呼吸系统疾病、甲状腺疾病、骨质疏松或骨关节炎共病者,其失眠发生率高于无共病患者(P<0.05)。③临床用药:服用中(成)药/中药提取物的RA患者失眠发生率高于未用中药者(P=0.019)。④疾病状态:在疾病活动度和双手X线片的分级中,不同分级RA患者的失眠发生率差异有统计学意义(P<0.05)。⑤RA失眠与非失眠患者其生化和免疫学指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论RA患者存在较高比例的失眠,这一昼夜节律障碍与年龄、存在相关共病、中高疾病活动度及影像学分级有关。

蜂毒镇痛作用的昼夜变化及对外周血P物质β-内啡肽和IL-1β水平的影响

目的:探讨小鼠疼痛模型的昼夜节律和注射用蜂毒(Bee venom for injection,BVI)镇痛作用的昼夜差异及其相关机制。方法:采用热板法、辐射热甩尾法建立小鼠疼痛模型,在6个授时(Zeitgeber time,ZT)时间点(ZT2、ZT6、ZT10、ZT14、ZT18、ZT22)测量痛阈并分析其昼夜节律。将合格昆明小鼠随机分为注射用蜂毒大剂量(Bee venom for injection-High dose,BVI-H)、注射用蜂毒中剂量(Bee venom for injection-Medium dose,BVI-M)、注射用蜂毒低剂量(Bee venom for injection-low dose,BVI-L)、吗啡(Morphine,MOR)和模型(Model,MOD)组;每组再根据小鼠痛阈的昼夜节律分为两个亚组,分别在痛阈的峰值和谷值2个时间点给药。观察各组对热板法、辐射热甩尾法和扭体法疼痛模型小鼠行为学影响的动态变化;ELISA法检测血清P物质(Substances P,SP)、β-内啡肽(Beta-endorphin,β-EP)和IL-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平。结果:小鼠疼痛模型的痛阈显示出峰值在明中期(ZT6)、谷值在暗后期(ZT22)的昼夜节律。BVI三个剂量组和MOR组均显示出明显的镇痛作用,并且BVI在热板法和扭体法模型的镇痛作用具有剂量依赖性。在热板法和辐射热法疼痛模型中,BVI于ZT22给药比ZT6给药显示出更强的镇痛作用。蜂毒对疼痛模型小鼠血清β-EP水平未显示上调作用;但可明显降低血清SP含量,且具有ZT22给药低于ZT6给药的昼夜变化(P<0.05);对扭体法和辐射热法(仅ZT22给药组)疼痛模型小鼠血清IL-1β水平显著下调,而在热板法则显示IL-1β水平明显增高。结论:小鼠的痛阈存在峰值在明中后期、谷值在暗后期的昼夜节律;BVI对小鼠多种疼痛模型均具有镇痛作用,且存在昼夜差异;BVI的镇痛作用及其昼夜变化可能与调节内源性疼痛介质有关。

白芍总苷对雷公藤多苷治疗狼疮性肾炎减毒增效作用的实验研究

目的探讨白芍总苷(TGP)对雷公藤多苷(TG)治疗狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)小鼠的减毒增效作用。方法取B6D2F1代杂交小鼠建立慢性移植物抗宿主病(cGVHD)LN小鼠模型,将成模小鼠随机分为3组,模型(LN)组、TG组、TG+TGP组,每组6只,另设正常对照组6只。TG组给予雷公藤多苷灌胃,剂量为30mg·kg-1·d-1;TG+TGP组给予雷公藤多苷及白芍总苷灌胃,剂量分别为30mg·kg-1·d-1和200mg·kg-1·d-1,正常对照组和LN组分别给予等容量生理盐水灌胃,每日给药1次,各组给药方法及时间均相同,共计4周。实验结束时,观察并比较各组小鼠的24h尿蛋白排泄率(UPE)、肝肾功能及肾脏病理改变。结果与LN组相比,TG组、TG+TGP组小鼠的24hUPE、尿素(BUN)、肌酐(SCr)显著降低(P<0.05或P<0.01),TG+TGP组显著低于TG组(P<0.05或P<0.01)。与LN组相比,TG组小鼠的ALT、AST和MDA均显著增高(P<0.01),SOD、GSH均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与TG组相比,TG+TGP组的ALT、AST、MDA均显著降低(P<0.01),SOD、GSH均显著增高(P<0.01)。TG+TGP组对LN肾脏病理改变的改善作用显著优于TG组(P<0.05或P<0.01)。结论TGP对TG治疗LN具有减毒增效的作用。

经方治疗血液病患者新型冠状病毒感染后遗症验案4则

血液病是指原发于血液系统的疾病,如再生障碍性贫血、白血病、淋巴瘤等,以及主要累及血液及造血器官的疾病,如原发性血小板减少症、缺铁性贫血等,具有病程长、病情多变、症状复杂和易并发其他疾病等特点。血液病可归属于中医学“虚劳”“紫癜”“血证”等范畴,病理要素多为热、毒、虚、瘀等。新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染可归属于中医学“疫病”范畴,其病邪以“寒邪”“寒湿”“湿热”等为主,具有易损阳气、耗阴血、阻气机等特点。血液病由于病程较长、疾病耗损及久虚不复等因素,患者多表现为气血阴阳俱伤,以正虚为主,虚实夹杂,复感染新冠病毒,五脏功能益损,正气更虚。因体质及邪气所侵犯脏腑不同,部分血液病(如再生障碍性贫血、血小板减少、浆细胞疾病等)患者新冠病毒感染恢复期出现畏寒、食欲不振、恶心、失眠、肢体关节疼痛等症状长时间不能消退[1],严重影响了患者的生活质量,甚者导致原发病加重[2]。此类患者在治疗方面虽已有相关指南共识可以参考[3],但因异质性等原因总体治疗效果欠佳。中医药因具有辨证论治之特色,治疗此类患者具有一定的优势。导师王永敏教授运用经方治疗血液病患者新冠病毒感染后遗症收效甚佳,现整理4则验案如下。

雷公藤多苷联合人参皂苷对胶原诱导关节炎大鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和白介素-17的影响

目的观察植物中药有效成分配伍——雷公藤多苷(TG)与人参皂苷(GS)对胶原诱导关节炎(CIA)大鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)和白介素-17(IL-17)的影响。方法选择体质量150～180 g的Wistar大鼠24只,皮内注射鸡Ⅱ型胶原建立CIA模型,随机分为模型组、TG+GS组、甲氨蝶呤(MTX)组,每组8只。另设8只正常大鼠为正常对照组。正常对照组和模型组予生理盐水灌胃,TG+GS组、MTX组分别予TG+GS、MTX灌胃,共给药21 d。给药结束后测量各组大鼠足爪厚度,与造模前比较并计算关节肿胀率;分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+Treg;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平。结果给药结束后与模型组相比,TG+GS组和MTX组大鼠足爪肿胀率明显降低(P<0.01)、外周血CD4+CD25+Treg百分率和CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率均显著增高(P<0.01)、血清IL-17水平降低(P<0.05);TG+GS组和MTX组上述指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。CD4+CD25+Foxp3+Tregs和血清IL-17水平呈显著负相关(r=0.423,P<0.05)。结论 TG联合GS对大鼠CIA具有明显治疗效应,其作用机制可能与调节Treg/Th17平衡有关。

白芍总苷治疗大鼠急性痛风性关节炎的作用及对血清IL-1β、IL-6、TNF-α的影响

目的观察白芍总苷对大鼠急性痛风性关节炎(AGA)的防治效果及对AGA大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平的影响。方法选取雄性SD大鼠48只,随机分为对照组、模型组、秋水仙碱0.8 mg/kg组、白芍总苷低、中、高剂量(75、150、300 mg/kg)组,共6组,每组各8只大鼠。给药5 d后,采用踝关节注射微晶型尿酸钠(MSU)混悬液法建立AGA大鼠模型。检测基线期及造模后不同时间点的踝关节直径,以造模后与基线期踝关节直径的差值作为关节肿胀度。试验结束后,大鼠腹主动脉采血,ELISA检测血清IL-6、IL-1β、TNF-α的含量,比较组间差异。结果与对照组相比,模型组大鼠造模后不同时间点的关节肿胀度均增加(P均<0.01);与模型组相比,白芍总苷低、中、高剂量组及秋水仙碱组在造模后各时间点的关节肿胀度均降低(P均<0.05),各治疗组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,模型组大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高(P均<0.01);造模后24 h,白芍总苷低、中、高剂量组与秋水仙碱组大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平较模型组降低(P均<0.01),而各治疗组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论白芍总苷对AGA大鼠有治疗作用,其作用机制可能与抑制MSU诱导的促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α的产生有关。

雷公藤多苷对rmMIF诱导大鼠成纤维样滑膜细胞增殖及RANKL/OPG表达的影响

目的观察雷公藤多苷(tripterygium glycoside,TG)对重组鼠巨噬细胞移动抑制因子(recombinantmouse macrophage migration inhibitory factor,rmMIF)诱导大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的增殖及其细胞核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappaB ligand,RANKL)、骨保护素(osteo-protegerin,OPG)表达的干预作用。方法采用大鼠FLS细胞株RSC-364,常规方法复苏、培养、传代,实验用3～5代FLS。分为4组:空白对照组加入200μl DMEM培养液,另3组分别加入200μl含rmMIF(200 ng/ml)(MIF组)、rm-MIF(200 ng/ml)+TG(20μg/ml)(MIF+TG组)、rmMIF(200ng/ml)+MTX(0.5μg/ml)(MIF+MTX组)的DMEM培养液。置37℃、5%CO2孵箱培养48 h。MTT法检测FLS的增殖活性;免疫组化法检测滑膜细胞OPG/RANKL的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测FLS上清液OPG、RANKL表达。结果 MIF组增殖活性高于空白对照组,MIF+TG组、MIF+MTX组增殖活性低于空白对照组和MIF组(P<0.01)。MIF+TG组和MIF+MTX组细胞OPG标记指数均高于空白对照组和MIF组,MIF+TG组OPG标记指数高于MIF+MTX组(P<0.01,P<0.05)。MIF组细胞RANKL标记指数高于空白对照组,MIF+TG组、MIF+MTX组RANKL标记指数均低于MIF组(P<0.05,P<0.01)。MIF组上清液RANKL浓度和RANKL/OPG值均高于空白对照组,MIF+MTX组上清液RANKL浓度低于空白对照组(P<0.05,P<0.01);MIF+TG组和MIF+MTX组上清液RANKL浓度和RANKL/OPG值均低于MIF组(P<0.01)。结论 rmMIF可促进体外培养大鼠FLS增殖,上调FLS的RANKL表达和RANKL/OPG值;TG抑制rmMIF诱导的大鼠FLS增殖、降低rmMIF诱导大鼠FLS分泌RANKL、下调FLS的RANKL表达和RANKL/OPG比值,可能是其治疗类风湿关节炎的骨免疫学机制之一。

佐剂性关节炎大鼠外周血TNF-α、IL-1β、MIF与MLT的昼夜节律

目的观察佐剂性关节炎(AA)大鼠外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和褪黑素(MLT)水平的昼夜变化。方法采用Wistar大鼠复制AA模型,光、暗周期L∶D=12∶12;于造模后第19天08:00、12:00、16:00、20:00、24:00、04:00共6个时间点采集尾静脉血,采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β、MIF、MLT含量,余弦法分析其昼夜节律。造模前与造模后6个时间点采用容积测量仪检测大鼠双侧足爪容积。结果 AA大鼠足爪容积未发现明显昼夜变化(P>0.05)。昼夜不同时间点外周血细胞因子TNF-α、IL-1β、MIF、MLT水平的波动具有统计学意义(P<0.05);4种细胞因子昼夜节律特征相似,即峰值相位均位于夜间(暗期),其中MIF的峰值出现时间较早,谷值相位均位于白天(明期)。结论 AA大鼠外周血TNF-α、IL-1β、MIF与MLT的表达存在昼夜节律,提示生物钟在类风湿关节炎的病理生理及治疗研究中具有重要意义。

雷公藤多苷配伍人参皂苷对佐剂性关节炎大鼠TNF-α、IL-1β和MIF的影响

目的观察中药有效成分雷公藤多甙(TG)和人参皂苷(GS)配伍对佐剂性关节炎大鼠关节炎的疗效及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)表达的影响。方法建立大鼠佐剂性关节炎模型,分为5组。TG组、GS组、TG+GS组分别给予TG8 mg/(kg.d)、GS80 mg/(kg.d)、TG8 mg/(kg.d)+GS80 mg/(kg.d)灌胃,空白对照组和模型组给予等量生理盐水,造模后21、42天观察各组关节炎指数(AI)的变化;采血、分离血清,采用放射免疫法测定血清TNF-α、IL-1β水平,采用ELISA法测定血清MIF含量。观察踝关节病理变化。结果造模后第42天,TG组、GS组、TG+GS组AI变化值与模型组比较显著下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。各用药组血清TNF-α、IL-1β和MIF水平与模型组比较显著下降(P<0.05,P<0.01),TG+GS组IL-1β和MIF下降更为明显(P<0.01)。各用药组踝关节病理改变较模型组有减轻趋势,但病理积分与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TG配伍GS可明显增强对佐剂性关节炎大鼠关节炎的疗效,其机制可能与下调TNF-α、IL-1β和MIF表达有关。

三七总皂苷配伍雷公藤多苷对胶原诱导关节炎大鼠心血管损伤的保护作用

目的观察植物药有效成分三七总皂苷(PNS)与雷公藤多苷(TG)配伍对胶原诱导关节炎(CIA)大鼠血管和心肌损伤的保护效应。方法 Wistar大鼠50只中选6只为对照组,其余皮内注射鸡II型胶原建立CIA模型,成模后随机分为模型组、雷公藤多苷组(TG)、TG+PNS(三七总皂苷)组,每组6只。对照组、模型组生理盐水灌胃,TG组雷公藤多苷灌胃,TG+PNS组三七总皂苷配伍雷公藤多苷灌胃,共42 d。治疗结束后,腹主动脉取血,采用蛋白芯片技术检测白介素(IL)-6、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-l)含量;采血后立即开胸,取胸主动脉及心脏,进行病理学观察。结果模型组及TG组、TG+PNS组造模第21天、给药4、6周后体重及体重增加值明显低于对照组(P<0.01),PAI-1、IL-6表达明显高于对照组(P<0.01);给药第4、6周TG+PNS组体重增加值明显高于模型组(P<0.05,P<0.01),血清PAI-1、IL-6水平显著降低(P<0.01),且PNS+TG组优于TG组(P<0.05)。模型组胸主动脉内皮不完整,可见炎细胞浸润、脂质沉积及泡沫细胞形成,心肌可见广泛炎性病变;TG组可见部分单核细胞、淋巴细胞等聚集,部分心肌细胞肥大;PNS+TG组内皮完整,未见明显病理改变,心肌仅见零星炎性细胞。结论 CIA大鼠存在心血管损伤,TG联合PNS在治疗关节炎的同时可能具有心血管保护作用。

活动期类风湿关节炎血清MIF与TNF-α、IL-1β表达的相关性研究

目的:探讨活动期类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)血清巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migrationinhibito-ry factor,MIF)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的相关性。方法:根据DAS积分选择活动期和稳定期RA患者各30例,并设30名健康者为正常对照;分别采用双抗体夹心ELISA法和放射免疫法检测血清MIF和TNF-α、IL-1β浓度;采用SSPS11.5软件进行相关性等统计学分析。结果:活动期RA患者血清MIF水平显著高于稳定期患者和健康者(P<0.05),且与血清TNF-α、IL-1β含量呈正相关关系;活动期RA患者血清MIF表达与关节肿胀指数、关节压痛指数、ESR、CRP、PLT均呈正相关,而与年龄、病程、晨僵时间和RF无相关性。结论:在活动期RA血清MIF水平显著增高且与TNF-α、IL-1β表达密切相关。

来氟米特对大鼠佐剂性关节炎的时间治疗学初步观察

目的探讨来氟米特(LEF)不同给药时间对大鼠佐剂性关节炎的治疗效果和对炎性细胞因子的影响。方法建立大鼠佐剂性关节炎模型,于9时和21时两个昼夜不同时间应用LEF 18 d,对比观察佐剂性关节炎模型炎症评分及外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和褪黑素(MLT)水平的变化。结果 LEF两个时间用药组关节炎指数和关节肿胀均明显下降,与用药前和模型组相比具有统计学差异(P<0.05),在关节肿胀抑制率方面显示LEF21时给药优于9时给药的趋势,但无统计学差异(P>0.05)。不同时间应用LEF均可显著下调外周血TNF-α、IL-1β、MIF、MLT表达(P<0.05);LEF21时组IL-1β水平明显低于LEF9时组(P<0.05),其他细胞因子在两个时间用药组之间无明显差别(P>0.05)。结论 LEF不同时间给药对大鼠佐剂性关节炎及其炎性细胞因子的影响可能存在差异,有待进一步研究。

单味中药及其提取物治疗类风湿关节炎研究进展

类风湿关节炎属中医学"痹症"范畴,病变呈持续、反复发作过程,是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要病因之一,治疗较为棘手。目前西医治疗以非甾体抗炎药、免疫抑制剂、生物制剂等治疗为主,不良反应明显、价格昂贵等限制了其应用。而中医药治疗本病在缓解病情、防止复发、控制进展等方面有良好效果。就近年来类风湿关节炎的单味中药及其提取物治疗进展作出综述。

D-二聚体检测在强直性脊柱炎中的临床意义

目的检测强直性脊柱炎(AS)患者D-二聚体的水平,探讨其在AS中的临床意义。方法 2013年3—10月收治的AS患者60例设为AS组,将Bath疾病活动度指数(BASDAI)≥4的38例设为高疾病活动度亚组,<4的22例设为低疾病活动度亚组。2013年9月的健康体检者60例设为对照组。分别检测外周血D-二聚体水平,比较其差异性;分析AS患者D-二聚体水平与BASDAI、年龄、性别、血沉、C反应蛋白、血脂、凝血功能的相关性。结果 AS组血浆D-二聚体水平显著高于对照组(P<0.01),高疾病活动度亚组D-二聚体水平显著高于低疾病活动度亚组(P<0.01)。D-二聚体水平与BASDAI、血沉、C反应蛋白、脂蛋白α和纤维蛋白原含量呈正相关(P<0.05,P<0.01),与纤维蛋白时间、载脂蛋白-A呈负相关(P<0.01)。结论 D-二聚体在AS发病及疾病转归中可能发挥重要作用,有望作为AS病情活动的血清标志物。

痛风的病机及中药治疗

流行病学研究表明,随着我国人民生活水平的改善,痛风的发病率逐渐提高,沿海经济发达地区更为明显[1]。目前痛风的标准药物治疗方案在控制炎症、降低尿酸方面短期疗效肯定,但长期应用不良反应明显;

灯盏花素对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用及其对滑膜MMP-3、TIMP-1表达的影响

目的观察灯盏花素(BRE)对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及其对滑膜基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、BRE组、来氟米特(LEF)组和联合用药(BRE+LEF)组,采用弗氏完全佐剂造模,观察治疗前后各组大鼠的足爪容积及关节炎指数;免疫组织化学方法检测MMP-3、TIMP-1在关节滑膜组织中的表达。结果与治疗前比较,BRE组、LEF组及BRE+LEF组治疗后大鼠的足爪容积及关节炎指数显著降低(P<0.05),联合用药组的效果更明显(P<0.01);与模型组比较,各用药组的MMP-3表达显著减少(P<0.05),TIMP-1表达均有所增加(P<0.05),联合用药组较单一用药组效果更明显(P<0.05)。结论BRE对大鼠佐剂性关节炎具有显著治疗作用,并可下调滑膜MMP-3表达、上调TIMP-1表达;BRE与LEF联合应用具有增效作用,为临床应用活血化瘀药联合治疗RA提供了实验依据。