大豆株型与产量相关性状QTL定位及候选基因预测

为探究与大豆株型和产量相关QTL位点及候选基因,对以东农42(♀)和东农50(♂)为亲本,与168个家系构建的F_(2:12)、F_(2:13)重组自交系(Recombination inbred lines,RILs)群体的株高、分枝数、四粒荚数、百粒重性状测定表型数据,运用IBM SPSS Statistics、R语言进行统计和相关性分析,并利用完备区间作图法(Inclusive composite interval mapping,ICIM)进行加性效应及上位效应分析,共计定位到43个QTL位点,贡献率超过10%的主效位点为14个,包括株高3个、分枝数8个、四粒荚数1个和百粒重2个;其中11个位点与前人已报道位点重合,分别位于4、6、8、16和19号染色体上;qBN-6-2(13.21%)、qBN-6-5(19.96%)和qBN-6-6(13.69%)为3个环境重复定位到的位点,qHSW-19-1与多个已报道位点均有重合。通过上位性分析,获得株高、分枝数、四粒荚数和百粒重位点分别为3、6、6和62对。根据所定位到的物理区间和定量预测,筛选到Glyma.04G238800、Glyma.03G181600、Glyma.08G271900、Glyma.18G278800和Glyma.19G187000等5个与株高、分枝数、四粒荚数和百粒重性状相关的候选基因,为分子辅助育种奠定基础。

大豆种质资源脂肪酸组分含量及品质性状的相关性分析

对黑龙江省大豆种质资源的脂肪酸含量及其与品质性状的相关性进行分析,为科学地评价和利用大豆种质资源奠定基础。采用毛细管气相色谱法,对100个大豆品种(系)的脂肪酸组分进行了测定,并对各组分和品质性状间的相关性进行了分析。结果表明:大豆中的脂肪酸含量高低顺序为:亚油酸>油酸>棕榈酸>亚麻酸>硬脂酸。不同大豆品种各脂肪酸含量均有一定的差异,其中硬脂酸的变异系数最大,为13.24%,亚油酸的变异系数最小,为4.57%。通过组分间的相关性分析表明,油酸与亚油酸、亚麻酸和棕榈酸呈极显著负相关,棕榈酸与硬脂酸呈显著负相关,而亚油酸与亚麻酸呈显著正相关。蛋白质与油份呈极显著负相关。

腹腔镜下腹腔内网片植入术治疗成人腹股沟疝(546例中期随访结果)

目的总结腹腔镜下腹腔内网片植入术（intraperitoneal onlay polytetrafluoroethylene mesh repair，IPOM）治疗成人腹股沟疝的中期随访结果。方法回顾分析2002年6月～2004年12月两家医院以腹腔镜IPOM方法治疗的546例603侧腹股沟疝。以钉合枪固定补片，利用脐内侧韧带腹膜覆盖网片的内侧。结果除2例因疝缺损太大中转开放手术外，手术均获成功，无手术并发症。术后并发症5例，均为血清肿，理疗后吸收。手术时间25-40min，平均31min。住院时间36-72h。平均46h。随访18-48个月，平均28个月，6例复发（复发时间30-45个月，平均38．2月），复发率0．995％。结论腹腔镜下IPOM治疗成人腹股沟疝效果确切、创伤少、并发症少、术后恢复快，充分体现微创优点。

大豆抗倒伏相关性状全基因组关联分析

研究以150份大豆种质为试验材料开展2年3点试验,在收获期测定抗倒伏相关性状,并利用RTMGWAS方法作关联分析,共检测到99个显著关联SNP位点,其中48个效应显著位点,解释0.28%~3.38%表型变异;89个与环境互作显著位点,解释0.53%~7.04%表型变异;其中,21个位点主效表型变异解释率高于1%;与6个倒伏相关性状显著关联SNP位点中,与茎粗显著关联SNP位点最多,与抗倒指数显著关联SNP位点最少;获得22个有功能注释基因,根据基因表达量和基因功能注释,推测3个基因(Glyma.18G149700、Glyma.04G244100、Glyma.18G011400)可作为与大豆抗倒伏相关候选基因。

大豆脂肪酸含量积累动态及亚麻酸代谢候选基因筛选

大豆脂肪酸5种组分中亚麻酸含量是影响大豆品质主要因素之一,与其他4种脂肪酸比例直接影响大豆油脂品质特性及贮运加工,大豆油具有适宜亚油酸与亚麻酸比例。文章通过高效气相色谱法对品种‘合丰25’(高亚麻酸含量品种,5.94%)与加拿大稳定品系‘L-5’(低亚麻酸含量品种,2.75%)及其组配重组自交系群体中选取高/低亚麻酸品系各2份,盆栽试验分析脂肪酸组分及含量。结合KEGG中大豆脂肪酸代谢途径筛选与不饱和脂肪酸代谢相关候选基因,对筛选RIL群体后代品系发育各时期作实时定量PCR,分析其在‘合丰25’和‘L-5’及后代品系中表达模式。结果表明,相同基因在不同品种之间对亚麻酸含量调控机制不同,不同时期基因表达量对亚麻酸积累量具有不同程度影响。研究结果为探索大豆亚麻酸积累规律及其候选基因影响,选育理想脂肪酸组分比例大豆新品种提供参考。

大豆种间杂种早代回交和高代选择性回交性状改良效果的研究

分别运用早代(F_1)连续回交和高代(F_3)选择性回交两种交配方式,探讨了改良大豆种间杂种野生性状及最大限度遴选优良基因型的有效途径。结果表明,高代有选择地回交可以有效地保持野生大豆的高蛋白特性;同时,对提高百粒重和扩大黄色种皮类型入选率也有明显效果。早代随机回交使高蛋白、高亚油酸和丰产基因型频率大幅度下降。从育成超高蛋白(>45％)品种考虑(长期计划),野生种质渗入率不应低于0.25;而从育成普通高蛋白(<45％)品种考虑(短期计划),渗入率可以降到0.125以下。在大豆种间杂种后代,种皮色遗传较复杂,出现IIrrttW_1W_1gg基因型的机率非常低。不同种皮色的BC_0F_2单株分离产生含黄色种皮类型的能力为:黄褐(单株)>黄黑>褐绿>黑绿>黑>褐。野生大豆炸荚性的遗传比较简单,但不符合3:1分离模式,通过二次回交炸荚卒降至25％以下。本研究选择指数结果指出,在早代回交和高代回交后代,用对蛋白质含量有较强相关选择进度的生育期、茎粗和主茎节数,间接选择高蛋白基因型,将产生良好的效果。

2009年大豆分子标记及辅助选择育种研究进展

DNA分子标记技术、QTL定位和分子辅助选择育种的应用对优质多抗大豆品种的快速选育具有十分重要的意义。诸多重要的性状包括大豆形态性状、产量性状、品质性状、生态性状、抗生物及非生物胁迫性状等的相关QTL研究和利用在国内外均有报道。随着功能基因组学的发展和实验技术手段的进步,分子标记和QTL研究向基于基因组功能区段的新型分子标记以及QTL的精细定位研究转移已成为发展方向。目前,国外相关研究已经取得了显著成效。我国现阶段偏重于利用随机分子标记进行QTL研究,对于先进的技术手段还在起步或摸索阶段,与真正实现高效的分子辅助选择育种的目标还有一定距离。文章就2009年国内外大豆分子标记技术、分子标记辅助育种技术及应用的发展动态做一综述。

大豆种间杂种后代自交与回交群体数量性状的遗传分析

用一系列自交和回交材料,探讨了大豆种间杂种群体改良的部分遗传理论。结果指出,与野生大豆利用关系密切的性状均于回交二次产生明显的趋栽培性变化,初步确定BC_1F_2系保留种间杂种优良基因型的关键世代,继续回交将引起高蛋白基因型频率过量下降,不利于高蛋白后代的选择。试验还表明,连续回交使“重组纺锤体”逐渐放宽,为削弱野生有利性状与有害性状之间的连锁与互作创造了良好条件,种间杂种回交群体较适宜的结构为:n=8,m=10～15(n=F_1代家系数;m=每一家系的F_2代株数)。倘若不考虑质量性状的作用,自交群体(BC_0F_2)保持90—100株基本可以容括全部遗传变异。此外,在种间杂种自交(BC_0)与回交(BC_1,BC_2)群体中,某些性状间存在“动态相关”,建议不同自交或回交世代的相关结果不替代使用。

增强CT细胞外体积分数预测胰腺癌术后患者预后

目的探索细胞外体积分数(ECVf)对胰腺癌术后患者预后的预测价值。方法选取2014年1月至2022年12月中山大学孙逸仙纪念医院因胰腺癌行手术治疗的66例患者。使用多层探测器CT扫描仪行多期增强CT扫描,获取平扫期与平衡期图像,通过公式计算胰腺癌病灶ECVf。根据ECVf中位数将患者分为高ECVf和低ECVf两组,分析两组患者预后是否存在差异,并联合临床病理特征建立列线图模型以预测胰腺癌术后患者预后。结果高ECVf组较低ECVf组具有更长的OS(P=0.002)和DFS(P=0.024)。高ECVf组和低ECVf组的中位OS分别为32.0个月和20.3个月,中位DFS分别为20.7个月和12.3个月。列线图模型预测患者1年、2年、3年生存率的曲线下面积(AUC)分别等于0.854、0.802、0.707。结论ECVf可以作为胰腺癌术后患者的预后预测指标。

大豆分子标记及辅助选择育种技术的发展

分子标记、QTL的研究和辅助选择应用已经得到很大的发展,一批与大豆形态性状、产量性状、品质性状、生态性状、抗生物胁迫性状相关的QTL在国内外均有报道。但近年来分子标记和QTL研究在比较发达的国家已经转向功能标记(FM s:EST-SSR、SNP和候选基因)的研究,相继启动大豆EST计划和大豆功能基因组计划,以期使功能基因和性状直接联系起来,目前已经取得了显著成效。而我国目前分子标记和QTL的研究还主要集中在利用随机标记(RM s:RAPD、SSR和AFLP)对性状进行研究。该文就国内外大豆分子标记和分子标记辅助育种及分子育种技术发展动态和发展中存在的主要问题做一概述。

核因子Y在植物中的分类及其功能概述

核因子Y(NF-Y)是近十年来新发现的具有多种生物功能的植物特异转录因子,由三个不同的亚基组成,分别是NF-YA(CBF-B/)HAP、NF-YB(CBF-A/HAP3)和NF-YC(CBF-C/HAP5)。NF-Y是一种典型的通过与调控因子相互作用来调控下游基因表达的转录因子,通过保守专一性的序列与真核生物启动子区域的CCAAT框相结合。NF-Y在植物中普遍存在,并参与调节植物体的诸多重要生理过程,包括逆境反应,胚胎和叶绿体发育,光合作用等重要生理过程。文章主要就植物NF-Y转录因子的基本结构特征、生物学功能、研究方法及进展等进行了综述。

大肠杆菌谷氨酸脱氢酶基因的克隆及功能分析

谷氨酸脱氢酶是生物体内最主要的氧化脱氨基酶类,为进一步研究其功能,将大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株中克隆得到的谷氨酸脱氢酶基因gdhA插入pCAMBIA3301质粒载体上,替换bar基因,构建植物表达载体pCAMBIA3301-gdhA。用该质粒转化烟草(Nicotiana tobaccum)havana425,成功得到转基因植株。对盆栽烟草干旱胁迫,同时取T1代转基因后代叶片使其自然失水7 h。结果表明,与野生型相比,转基因烟草表现出较强的抗旱性,叶片保水力较强。草铵膦试验表明,gdhA基因可显著提高烟草抗除草剂性能。

联合应用经腹腹膜前腹腔镜疝修补术和腹腔内网片植入术治疗成人腹股沟疝

目的 联合应用经腹腹膜前腹腔镜疝修补术(transabdominal preperitoneal prosthetic,TAPP)和腹腔内网片植入术(intraperitoneal onlay mesh,IPOM),探讨理想的腹腔镜下腹股沟疝修补的方法. 方法 2006年1月～12月,对30例成人腹股沟疝行腹腔镜下修补.以腹壁下血管内侧缘为界,把疝薄弱区纵行分成内侧和外侧,内侧采用改进的TAPP方法,外侧仍用IPOM方法.沿腹壁下血管内侧缘纵行剪开腹膜后向内侧游离的区域内基本上是无血管区,亦无重要的神经,组织疏松极易游离,数分钟内即可分离出所需要的面积(7.5 cm×6.5 cm).补片的材料亦分为内侧和外侧,内侧是聚丙烯材料,外侧应用Proceed补片. 结果 30例均在硬膜外麻醉下完成,手术时间单侧30～40 min,平均35 min,双侧50～60 min,平均55 min,术中出血1～5 ml,术后第2天可离床活动,术后3～4天出院,术后2周均恢复工作.术后随访2～12个月,平均9个月,无粘连性肠梗阻,腹股沟部和全身无不良反应. 结论 联合应用TAPP和IPOM后,能体现微创的原则,易掌握,损伤少,手术时间短,恢复快,手术效果确切.

干旱胁迫下20个大豆品种抗旱性评价

选用20份大豆品种,利用PEG6000模拟干旱、旱棚盆栽方式,分别统计芽期、苗期和花期发芽率、生理、叶绿素荧光等指标,收获后测定农艺性状,同时利用抗旱系数、抗旱指数、隶属值函数法综合分析抗旱性。结果表明,不同指标或方法在大豆抗旱性鉴定中的作用存在差异,不同品种不同生育期抗旱性存在差异。综合评价全生育期抗旱性,最终筛选出3个高抗旱型品种:龙品03-311、晋豆21和艾卡166;2个抗旱型品种:绥农14和铁丰8;3个干旱敏感型品种:猫眼豆、合丰47和东农594。

重组生长激素在肝胆外科老年病人术后恢复中的应用价值

目的评价重组生长激素在肝胆外科老年病人术后恢复中应用的疗效。方法2004年1月到2004年12月在3间不同医院的肝胆外科中选择腹腔镜胆囊切除的65岁以上的患者共40人,随机分为实验组和对照组,每组各20人。分别应用重组生长激素4单位四天和生理盐水四天。于术前两天,术后一天,术后三天,术后一周,术后两周作为观察点。结果两组在总住院天数,白蛋白水平,双手握力,疲劳评分等方面改善有明显差异,试验组明显优于对照组。结论在老年病人腹部手术后应用生长激素能缩短住院时间,提高营养水平,能明显改善术后疲劳综合征的程度。

重组人生长激素在肝胆外科老年病人术后恢复中的应用

目的:评价重组人生长激素(rhGH)在肝胆外科老年病人术后恢复中应用的疗效。方法:2004年1月至2005年12月在3所不同医院的肝胆外科中选择腹腔镜胆囊切除的65岁以上的病人共40例,随机分为生长激素组和等渗盐水组,每组各20例。分别应用rhGH 4 U,连续4 d和等渗盐水4 d。于手术前2 d,术后第1、3、7和14天作为观察点。结果:两组病人在总住院天数、清蛋白水平、握力试验和疲劳评分等方面改善有明显差异,生长激素组明显优于等渗盐水组。结论:在老年病人腹部手术后应用生长激素能缩短住院时间,提高营养水平,明显改善术后疲劳综合征的程度。

PLK1在原发性肝癌组织中的表达

目的探讨极样激酶1(Polo-like kinase1,PLK1)在原发性肝癌细胞中的表达情况,并且探索其与肝癌病人临床病理特点及预后的关系。方法采用免疫组化技术研究PLK1在40例原发性肝癌组织石蜡切片中的表达情况。数据分析采用SPSS13.0统计软件处理,P<0.05表示差异有统计学意义。结果癌栓、包膜侵犯、肿瘤直径大小、BCLC分期等因素和PLK1的阳性表达呈明显相关性(P<0.05);PLK1阳性组和阴性组之间在术前AFP数值上存在着明显的统计学差异(P=0.029);通过生存分析,发现PLK1的表达情况和患者的生存时间没有明显关联;Kaplan-Meier法分析原发性肝癌的预后的单因素相关因子显示与包膜侵犯、TNM分期、癌栓及转移与生存期有相关性(P<0.05)。与性别、乙肝、肝硬化、肿瘤数目BCLC分期及临床分期无关。结论 PLK1的表达在肝癌的发展及其生物学行为方面有着较为密切的关系,是重要的分子标记物,PLK1可能在肝癌早期的诊断中有重要作用。

原发性肝癌细胞中Py NPase的表达及其临床意义

目的通过免疫组化检测原发性肝癌中嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)的表达,揭示依赖于嘧啶核苷磷酸化酶转化的化疗药物在临床应用的分子基础。方法从我院外科2001年6月至2004年6月间183例原发性肝癌手术切除标本中随机抽取40例作为实验组。术前均未经任何放化疗。并随机抽取同期肝内胆管结石手术肝切除标本40例,且证实为正常肝组织,作为对照组。使用SP免疫组化法分别检测肝癌细胞与正常肝细胞PyNPase的表达。结果原发性肝癌细胞和正常肝细胞PyNPase的表达指数分别为62.34+/-19.53和12.61+/-10.17,有显著性差异(P<0.05)。不同组织分型的肝癌组织的PyNPase的表达也有显著的差异(P<0.05)。结论原发性肝癌细胞中PyNPase呈高表达,则提示其对依赖于嘧啶核苷磷酸化酶转化的化疗药物如氟铁龙,希罗达等更为敏感。

大豆GAMYB基因序列分析及拟南芥同源突变体鉴定

GAMYB基因是赤霉素(GA)信号转导途径中的一个重要促进因子,该基因与植物由营养生长向生殖生长的开花过渡以及生殖发育有重要关系。通过构建系统进化树分析,发现该基因与拟南芥MYB33和MYB65亲缘关系较近,根据TAIR网站上公布的GAMYB-Like基因信息,从美国拟南芥生物资源中心购买该基因的T-DNA插入拟南芥突变体材料,运用双引物法对此突变体进行T-DNA插入位点的鉴定,分别获得3株和6株稳定遗传的纯合突变体,可为深入研究GmGAMYB基因的功能及进行互补拟南芥突变体myb33或myb65试验奠定基础。

嘧啶核苷磷酸化酶与原发性肝癌预后的关系

目的初步探讨嘧啶核苷磷酸化酶在原发性肝癌中表达的临床预后意义。方法随机从我院外科2001年6月～2004年6月间185例原发性肝癌手术切除标本中随机抽取40例。术前均未经任何放化疗。使用SP免疫组化法分别检测肝癌细胞中PyNPase的表达。对所有病例的AFP水平，瘤体直径，门脉癌栓，转移复发率进行回顾性分析。结果①PyNPase的表达与肝癌Edmondson病理分级正相关。②PyNPase的表达与是否有PVTT、是否有肝内转移、淋巴结转移、肿瘤大小有关系，而与AFP水平、HbsAg阳性率无关。结论PyNPase在原发性肝癌组织中的表达水平除了对手术后的药物治疗有指导意义，其表达对肿瘤的预后有一定的提示意义。