血府逐瘀丸高效液相色谱数字化定量指纹图谱研究

目的建立血府逐瘀丸(Xuefuzhuyu Pill,XFZYP)HPLC数字化定量指纹图谱,对其进行数字化整体质量控制。方法采用RP-HPLC法,以阿魏酸对照品(ferulic acid,FA)为参照物峰,确定42个共有指纹峰,建立了XFZYP-HPLC数字化定量指纹图谱。以47个数字化参数评价指纹图谱,并用6级系统指纹定量法(6-SFQM)鉴定15批XFZYPs质量。结果用16个数字化指数鉴别出2批样品不合格,用6-SFQM鉴别出11批质量极好(1级),1批质量很好(2级),3批质量良好(4级)。结论所建立XFZYP-HPLC数字化定量指纹谱可准确反映XFZYP质量特征。

循环冲程数可变发动机研究现状概述

围绕循环冲程数可变发动机,详细阐述了近几年的研究现状。在现有技术下,冲程数可在二冲程、四冲程、六冲程以及多冲程之间进行可变,根据发动机负荷来进行不同冲程数工作模式的切换。使发动机经济性、排放性和动力性得到统一。

基于滚动半径法轮胎气压异常报警系统设计

利用轮胎气压与滚动半径之间的线性关系,提出了一种轮胎气压监测与报警系统。它通过测量车轮转动时发出的脉冲(成反比地反映轮胎滚动半径的大小),并经车速、磨损等修正后,间接地估计出轮胎气压。当其偏差超出预先设定的门限后,发出异常警报。根据道路试验数据,设计制作了轮胎气压监测和异常报警系统,并设定了两级门槛值和三级报警模式。经实车道路试验验证,效果良好。

防风通圣丸高效液相色谱数字化定量指纹图谱研究

目的建立防风通圣丸(FFTSP)高效液相色谱数字化定量指纹图谱,用于FFTSP质量控制。方法采用RP-HPLC法,以1%冰醋酸溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱。以46个数字化参数评价指纹图谱并鉴别其质量,用系统指纹定量法鉴定12批FFTSPs质量。结果以黄芩素(BCE)为参照物峰,确定52个共有指纹峰,建立了FFTSP-HPLC数字化定量指纹图谱。用16个数字化指数鉴别出1批不合格,用系统指纹定量法鉴定1批质量很好(2级),1批质量好(3级),4批质量良好(4级),3批质量中等(5级),2批质量一般(6级),1批质量劣(8级)。结论所建立的FFTSP-HPLC数字化定量指纹图谱可清晰反映FFTSP质量变异,用数字化定量指纹图谱控制中成药质量准确可行。

银翘解毒丸八波长高效液相色谱定量指纹图谱研究

目的建立银翘解毒丸(Yinqiaojieduwan,YQJDW)八波长高效液相色谱(EW-HPLC)指纹图谱综合评价YQJDW整体质量。方法采用信息熵权重法整合分析八波长下样品定性定量信息,以6级系统指纹定量法鉴定15批样品质量。结果以绿原酸(CGA)为参照物峰,在203,228,246,265,280,300,326,345 nm下分别确定了39,40,38,46,39,35,26和23个共有峰。依据6级系统指纹定量法(L6-SQFM)综合评价YQJDW质量:6批质量极好(1级);2批质量很好(2级);2批质量一般(6级);4批质量劣(8级);1批质量次(7级)。结论多波长指纹图谱信息熵权重整合法从信息权重角度综合鉴定银翘解毒丸质量,其结果准确可靠。

德国产汽车长途试验用油耗计及其应用

文章首先给出了用于电喷发动机汽车长途试验油耗计的基本条件,介绍了几种德国产小型精密流量计的基本结构和参数,给出了基本标定和使用方法。文章对汽车道路油耗试验人员有一定参考意义。

德国产汽车长途试验用油耗计及其应用

给出了用于电喷发动机汽车长途试验油耗计的基本条件,介绍了几种德国产小型精密流量计的基本结构和参数,给出了基本标定和使用方法,对汽车道路油耗试验人员有一定参考意义。

双波长超高效液相色谱指纹图谱鉴定芪参益气滴丸质量

目的建立芪参益气滴丸(QSYQDP)双波长UPLC指纹图谱,用系统指纹定量法鉴定其质量。方法采用超高效液相色谱法,以毛蕊异黄酮苷为参照峰,分别确定30个(254 nm)和36个(203 nm)共有指纹峰,建立QSYQDP-UPLC双波长指纹图谱。以系统指纹定量法的宏定性相似度Sm、宏定量相似度Pm为评价指标,采用均方开方法整合双波长下各样品的信息,并结合系统聚类分析,实现对49批QSYQDPs的整体质量评价。结果 254 nm波长下80%的样品质量在5级以上;203 nm波长下70%的样品质量在5级以上;指纹信息整合后数据显示,83%的样品质量在5级以上。结论所建立的多波长QSYQDP-UPLC指纹图谱的评价方法可权衡各个指纹信息,清晰、全面地反应QSYQDP的整体质量,适用于其质量控制。

一种多肽分子P2中高分子蛋白质杂质含量方法学研究

建立多肽分子P2中高分子蛋白质检测的分子排阻色谱法并进行全面的分析方法学验证。采用分子排阻色谱法分离多肽分子P2中单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行准确定量。结果表明:本方法的检测限为3.1×10^(-4)mg/ml;定量限为9.4×10^(-4)mg/ml,仪器精密度为RSD为1.1%;多肽分子P2在0.01%-120%的浓度范围内之间存在良好的线性关系,线性方程为Y=432.39X-0.6269,R^(2)=1.00;稳定性及耐用性均符合要求。本方法可快速有效地对多肽分子P2中高分子蛋白质进行定性和定量分析。

改良的幽门螺杆菌噬菌体裂解酶在大肠杆菌和毕赤酵母中表达的活性差异

目的:改良型幽门螺杆菌噬菌体裂解酶由具有穿透外膜作用的疏水多肽和幽门螺杆菌噬菌体编码的裂解酶和穴蛋白构成,比较其在大肠杆菌和毕赤酵母中表达活性的差异。方法:构建的重组质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3)和毕赤酵母X33,经过表达纯化得到改良型裂解酶,体外通过滤纸片法和液体法比较不同表达系统所表达的改良型裂解酶的活性差异。结果:体外抑菌实验表明,大肠杆菌表达的改良型裂解酶的溶菌效果明显强于毕赤酵母表达的改良型裂解酶。结论:2种表达系统各有优势,就活性而言,大肠杆菌表达系统更佳,毕赤酵母表达系统对外源蛋白的糖基化修饰影响改良型裂解酶活性。

重组猪胰蛋白酶原及其突变体在毕赤酵母X33中的组成型表达

目的:设计以PGAP为启动子的组成型质粒,构建高效表达重组猪胰蛋白酶原的毕赤酵母X33菌株,获得重组猪胰蛋白酶。方法:首先将质粒转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,电转化至毕赤酵母X33,表达重组猪胰蛋白酶原,经肠激酶激活,纯化提取得到重组猪胰蛋白酶。结果:筛选到高效表达重组猪胰蛋白酶原的毕赤酵母X33菌株,获得了重组猪胰蛋白酶。结论:以PGAP为启动子的质粒,转化毕赤酵母X33后表达的重组猪胰蛋白酶原避免了补加甲醇带来的危害,且操作方便,大大缩短了周期,提高了生产效率,避免了动物源性污染。

气相色谱法测定利拉鲁肽中四种溶剂的残留量

目的:建立利拉鲁肽原料药中四种残留溶剂的测定方法。方法:采用顶空气相色谱法,色谱柱为DB-624(6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷为固定液)的毛细管柱(30 m×0.53 mm×3μm);检测器为氢火焰离子化检测器(FID),检测器温度设定250℃;进样口温度为200℃;初始温度45℃保持5 min,以10℃/min速率升温至100℃,再以40℃/min升温至200℃,保持7 min;顶空平衡温度设定为80℃,平衡30 min。结果:在该色谱条件下,四种残留溶剂的分离效果良好,线性相关系数均大于0.99%;重复性、稳定性与耐用性试验中各溶剂测定结果良好;四种溶剂的检测限分别为0.174、0.019、0.400、0.005μg/ml,定量限分别为0.695、0.077、1.201、0.025μg/ml,方法检测灵敏度高;四种溶剂回收率均在92.0%~108.0%之间(RSD<10.0%,n=9)。结论:该方法操作简便、灵敏度高、重复性好,测定结果稳定可靠,可用于利拉鲁肽原料药中四种残留溶剂的测定。

利拉鲁肽中高分子蛋白质杂质含量方法学研究

目的:建立利拉鲁肽中高分子蛋白质检测的分子排阻色谱法并进行全面的方法学验证。方法:采用分子排阻色谱法分离利拉鲁肽单体以及高分子蛋白质,并对高分子蛋白质进行准确定量。结果:确定了利拉鲁肽中高分子蛋白质的主要形式为二聚体,建立的分子排阻色谱法可准确地测定利拉鲁肽中高分子蛋白质的含量,并考察了高分子蛋白质分析方法的专属性、检测限、定量限、线性与范围、进样精密度、重复性与中间精密度、稳定性和耐用性。结论:建立的方法可快速有效地对利拉鲁肽高分子蛋白质进行定性和定量分析,可作为利拉鲁肽中高分子蛋白质的质量研究和质控分析方法。

斑马鱼神经元损伤模型在养血清脑颗粒质量控制中的应用分析

目的：探讨斑马鱼神经元损伤模型在养血清脑颗粒质量控制应用的可行性,为该制剂提供一种新型生物活性质量控制方法。方法：以养血清脑颗粒为例,采用吗替麦考酚酯诱导的斑马鱼神经元损伤药效模型对养血清脑颗粒进行神经细胞保护生物活性评价和质量稳定性检测。结果：斑马鱼神经元损伤模型作为神经细胞保护药物生物活性质控方法具有较好的精密度,日内RSD 2.2%～3.7%,日间RSD 1.2%;重复性（RSD 8.4%）和稳定性（RSD 4.9%）良好;在0.10～1.00 g·L-1内养血清脑颗粒对神经细胞保护率成良好的线性关系,方法学考察符合生物活性测定指导原则的要求。结论：采用斑马鱼神经元损伤模型评价养血清脑颗粒神经细胞保护作用的方法快速、稳定可靠,可作为现有质量控制方法的有效补充,为中药的生物活性质量控制研究提供一定的技术参考。

应用核素标记相对和绝对定量技术结合纳升液-质联用筛选养血清脑颗粒对斑马鱼神经损伤预后的生物标志物

目的分析斑马鱼神经元模型损伤给药治疗前后总蛋白差异,寻找养血清脑颗粒对斑马鱼神经元损伤预后的生物标记物及其作用机制。方法采用核素标记相对和绝对定量技术结合纳升液相色谱和串联质谱(Nano LC-MS/MS)对给药前后斑马鱼药效模型总蛋白进行分离并分析肽段,采用Proteinpilot 4.2软件对蛋白进行鉴定和定量分析,对获得的差异蛋白进行生物信息学分析,应用蛋白印迹法对可能的生物标记物进行验证。结果通过Nano LC-MS/MS分析鉴定出置信度>95%的蛋白质共1 933种,其中总差异表达蛋白质130种,模型组与模型给药组表达量上调≥1.5倍的蛋白质有9种,下调≤0.70倍的蛋白质有23种。通过GO分析显示,差异蛋白的分子功能主要集中在神经元离子通道的翻译和代谢过程;Western blot结果显示,与模型组相比,差异表达蛋白Ef1-α(elongation factor 1-alpha)和α-6-F(Na^+/K^+ transporting ATPase alpha 1 polypeptide)在给药后表达量下调,差异具有统计学意义(P<0.05),且与质谱结果一致。结论 iTRAQ联合Nano LC-MS/MS技术能高通量地筛选斑马鱼神经元损伤相关蛋白,初步阐述养血清脑颗粒对斑马鱼神经元损伤预后的作用机制。

色谱、光谱指纹图谱及燃烧热整合评价柏子养心丸质量

建立柏子养心丸的高效液相指纹图谱、紫外指纹图谱、红外指纹图谱以及燃烧热谱,基于优势互补原则,用5种模型对上述分析方法进行整合,每种分析方法均用系统指纹定量法评价柏子养心丸质量。综合分析结果显示1批质量稍差(5级或以上),1批质量差异显著,其余批次质量较好(3级或以下)。色谱、光谱指纹图谱及燃烧热实现了对中药全化学成分(双键、三键和饱和键)的全面监测,为中药质量控制提出一种新思路。

消渴清颗粒UPLC-PDA-ELSD指纹图谱的建立及5个主要成分的测定

目的建立消渴清颗粒的UPLC-PDA-ELSD指纹图谱研究方法,并对新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱进行定量测定,为消渴清颗粒的质量控制提供依据。方法采用RP-UPLC-PDA-ELSD法,分别以芒果苷和知母皂苷BII为参照峰,确定了23个紫外检测共有指纹峰和10个蒸发光检测共有指纹峰,建立了消渴清颗粒的数字化定量指纹图谱,并以三级系统指纹定量法鉴定28批消渴清样品的质量等级。采用外标法,测定了28批样品中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱的量。结果 19批消渴清颗粒合格,9批不合格;8批消渴清颗粒中5个主要成分的量有异常,定量测定与指纹图谱结果具有一致性。结论 UPLC指纹图谱和5个成分的定量测定方法准确、稳定、简便,可作为消渴清颗粒的质量控制依据。

UPLC-Q-TOF/MS^E方法分析养血清脑颗粒的化学成分

为系统阐明复方中药养血清脑颗粒的化学组成,本研究采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间/全信息串联质谱(UPLC-ESI-Q-TOF/MS^E)技术,对养血清脑颗粒的化学成分进行分析。通过Q-TOF-MS^E提供化合物的准确相对分子质量、质谱碎片离子信息,与对照品的保留时间和质谱数据比对,结合参考文献,共鉴定出142种成分,主要包括酚酸类、单萜苷类、醌类、生物碱类和苯酞内酯类5类成分,并对各成分的药材来源进行归属。本研究全面、快速、准确地分析了养血清脑颗粒的化学成分,为养血清脑颗粒的药效物质基础和质量控制等研究奠定了基础。

治疗糖尿病和肥胖症的胃肠道激素类多受体激动剂研究进展

胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)类似物已广泛用于糖尿病和肥胖症的治疗,而将GLP-1类似物与其他肠道激素如葡萄糖依赖的促胰岛素肽、胰高血糖素结合的多受体激动剂正处于临床开发阶段。与GLP-1类似物相比,多受体激动剂可发挥多重生理效应、控制血糖和降低体重的效果更好、不良反应更小,有望成为糖尿病和肥胖症的新疗法。本文对在研的肠道激素类多受体激动剂进行综述,总结其设计思路及临床表现,为多受体激动剂类药物的开发提供参考。

唾液酸修饰绿原酸脂质体制备及其体外抗肿瘤活性研究

目的响应面设计制备唾液酸(sialic acid,SA)修饰的绿原酸(chlorogenic acid,CA)脂质体(CA-SAL),考察其体外细胞毒性和摄取。方法采用改良逆相乙醇注入法制备CA-SAL,以葡聚糖凝胶G-50柱离心法分离脂质体和游离药物,并通过HPLC法测定药物质量浓度,计算包封率。以包封率和载药量为考察指标,通过Box-Behnken响应面设计实验优化CA-SAL的处方和工艺,MTT法评价其对人肺癌A549细胞的细胞毒性,倒置荧光显微镜观察A549细胞对CA-SAL的摄取情况。结果优化后的CA-SAL制备条件:氢化大豆磷脂与绿原酸的质量比为15∶1,水化温度60℃,超声功率400W。CA-SAL平均粒径为(90.13±0.51)nm,多分散指数(PDI)为0.16±0.01,Zeta电位为(-25.3±0.5)mV;包封率为57.8%,RSD为0.1%。MTT实验结果显示,CA-SAL对A549细胞的增殖抑制作用显著强于绿原酸脂质体(CA-CL),细胞摄取实验表明A549细胞对唾液酸修饰脂质体的摄取更高。结论通过响应面优化制备的CA-SAL粒径小、性质稳定。经唾液酸修饰后的脂质体可以增强人肺癌A549细胞的细胞摄取及体外细胞毒性。