GnRH拮抗剂和激动剂方案中扳机日子宫内膜厚度对新鲜移植周期妊娠结局的影响

目的:研究促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)和激动剂(GnRH-a)方案中扳机日子宫内膜厚度(EMT)对新鲜移植周期妊娠结局的影响。方法:选择2015年1月至2021年12月在郑州大学第二附属医院生殖中心接受体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)助孕的患者,共纳入新鲜移植2 559周期,其中GnRH-ant方案298周期,GnRH-a方案2 261周期。根据扳机日EMT分为7~9 mm、>9~12 mm和>12 mm组。比较两种方案中3组的临床特征和妊娠结局。结果:GnRH-ant方案中EMT 7~9 mm组的临床妊娠率、持续妊娠率和活产率均低于其他两组(P<0.017);GnRH-a方案中扳机日EMT 7~9 mm组的临床妊娠率、持续妊娠率和活产率低于>9~12 mm组,>9~12 mm组低于>12 mm组(P<0.017)。Logistic回归分析结果显示扳机日EMT较高的患者临床妊娠、持续妊娠和活产增加[GnRH-ant方案:>9~12 mm组的OR(95%CI)分别为2.243(1.173~4.288)、3.995(1.891~8.438)、3.814(1.810~8.036),>12 mm组的OR(95%CI)分别为3.298(1.490~7.299)、6.637(2.742~16.065)、5.249(2.184~12.616);GnRH-a方案:>9~12 mm组的OR(95%CI)分别为1.561(1.266~1.925)、1.378(1.112~1.707)、1.448(1.166~1.798),>12 mm组的OR(95%CI)分别为2.266(1.747~2.940)、2.257(1.736~2.933)、2.254(1.732~2.933)]。结论:扳机日EMT增加可改善妊娠结局;无论是GnRH-ant方案,还是GnRH-a方案,随着扳机日EMT增加,妊娠成功率升高。

FSH/LH、25(OH)D及AMH对卵巢储备功能及体外受精-胚胎移植结局的预测

目的探讨卵泡刺激素/黄体生成素(FSH/LH)、25-羟维生素D[25(OH)D]及抗苗勒氏管激素(AMH)对卵巢储备功能及体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的预测价值。方法选取2020年8月至2022年9月于郑州大学第二附属医院行IVF-ET助孕女性112例,根据获卵数分为3个亚组:低反应组(获卵个数≤3个)36例、正常反应组(获卵个数4~15个)48例,高反应组(获卵个数≥16个)28例。对比不同卵巢反应者FSH/LH、25(OH)D、AMH水平;根据COH方案治疗后14 d人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平,判断患者妊娠结局,收集不同妊娠结局患者临床资料[年龄、不孕类型、不孕病程、优质胚胎数、获卵总个数、受精率、移植胚胎数、LH/FSH、25(OH)D及AMH水平];采用二元Logistic回归分析影响不良妊娠结局的危险因素;计算FSH/LH、25(OH)D、AMH单一及联合对患者不良结局的预测效果。结果不同卵巢反应者中FSH/LH、25(OH)D及AMH水平比较:高反应组>正常反应组>低反应组,差异具有统计学意义(P<0.05)。112例患者中,正常妊娠组77例和非正常妊娠组35例。两组不孕类型、优质胚胎数、不孕病程、获卵总个数、受精率比较差异无统计学意义(P>0.05);两组Gn用量、年龄、移植胚胎数、FSH/LH、25(OH)D及AMH水平比较差异具有统计学意义(P<0.05)。二元Logistic回归分析显示:Gn用量(≥2014.58 U)、年龄(≥39岁)、FSH/LH(≥1.8)、移植胚胎数(≥1.34个)、25(OH)D(≥25.05μg/L)及AMH(≥2.92 ng/mL)为影响妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)。ROC结果显示,FSH/LH、25(OH)D、AMH联合预测妊娠结局的敏感度和特异度分别为0.812、0.755,AUC=0.827(95%CI:0.731~0.923),明显高于三指标单独预测(P<0.05)。结论FSH/LH、25(OH)D、AMH水平在高卵巢反应中呈升高状态,三者可作为监测、预防行IVF-ET助孕女性不良妊娠结局的重要指标,且联合预测价值更高。

取卵后使用GnRH拮抗剂防治卵巢过度刺激综合征的临床研究

目的评价取卵后使用促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)防治中/重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)的应用价值。方法收集2019年10月至2022年10月在郑州大学第二附属医院生殖中心接受拮抗剂方案助孕因OHSS高风险行全胚冷冻的160例患者作为研究对象,根据取卵术后使用的药物不同分为GnRH-ant组(n=80)与对照组(n=80);对照组采用常规治疗及取卵术后第2天开始给予低分子肝素钙治疗5 d,而GnRH-ant组在对照组治疗的基础上于取卵术后当日开始给予GnRH-ant治疗3~7 d。比较两组患者的一般资料、促排卵情况、OHSS相关临床和实验室指标及临床结局,并采用Spearman相关性分析探讨GnRH-ant组患者各临床指标与中/重度OHSS的关系。结果GnRH-ant组的获卵数、2PN胚胎数及冷冻胚胎数均显著高于对照组(P<0.05);GnRH-ant组取卵后提前来月经的患者比例显著高于对照组(P<0.05);GnRH-ant组穿刺放腹水比例、中/重度OHSS发生率及取卵后2~5 d雌二醇(E 2)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比容(HCT)、血管内皮生长因子(VEGF)、血浆纤维蛋白原(FIB)均显著低于对照组(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,GnRH-ant组患者的中/重度OHSS发生与取卵后GnRH-ant总剂量呈负相关(r=-0.224,P<0.05),与获卵数呈正相关(r=0.252,P<0.05)。结论取卵后使用GnRH-ant可以加速黄体溶解并显著降低OHSS高危患者E 2及VEGF水平,降低中/重度OHSS发生风险,并能改善患者的凝血功能,降低血栓风险。

输卵管积水的不同处理及附件手术对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨输卵管积水的不同处理、输卵管手术及卵巢手术对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法选择2003年10月至2007年12月我中心常规IVF-ET助孕的1,452个周期的临床资料,按不同处理分为输卵管切除组与输卵管造口组;卵巢巧克力囊肿(巧囊)与非巧囊囊肿剔除组;输卵管积水近端结扎远端造口组、输卵管积水切除组、积水穿刺抽吸组与积水未治疗组,以单纯输卵管阻塞为对照组,比较各组超排卵中卵巢反应及妊娠结局。结果与对照组相比,输卵管切除组、造口组卵巢反应及妊娠结局无明显差异,单侧输卵管手术不影响术侧卵巢反应(P>0.05);卵巢囊肿剔除术后Gn用量显著增加,获卵数显著减少,单侧卵巢手术影响术侧卵巢功能(P<0.05)。与输卵管积水未治疗组相比,积水手术治疗后临床妊娠率、胚胎种植率显著增加(P<0.05),积水穿刺抽吸组临床妊娠率显著升高(P>0.05)。结论输卵管手术不影响卵巢功能;卵巢囊肿剔除术后卵巢储备能力降低;输卵管积水对IVF-ET有负面影响,适当处理可改善妊娠结局,与积水穿刺抽吸术比较,IVF-ET前积水输卵管切除疗效更佳。

不同卵巢刺激方案应用于POSEIDONⅣ组人群的疗效

目的评价不同卵巢刺激方案在POSEIDONⅣ组人群的应用效果。方法回顾性分析体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)助孕的POSEIDONⅣ组患者临床资料,按卵巢刺激方案分组:A组(黄体期长方案,n=50)、B组(拮抗剂,n=153)、C组(PPOS,n=182),比较不同方案临床疗效。结果与拮抗剂和PPOS方案相比,黄体期长方案能够获得更多的卵子数、MII数、优胚数、可利用胚胎数(P<0.05),更低周期取消率(P=0.009),更高的累积妊娠率(P=0.004);黄体期长方案和拮抗剂方案到达妊娠时间显著早于PPOS方案(P<0.001)。结论从增加可利用胚胎数、提高累积妊娠率、缩短到达妊娠时间来看,POSEIDONⅣ组人群采用黄体期长方案具有更大的优势,但临床工作中也需结合患者自身特点制定个体化治疗方案。

课程思政理念下任务驱动教学法在妇产科临床教学中的应用效果

目的探讨课程思政理念下的任务驱动教学法在妇产科临床教学中的应用效果。方法纳入2021年6月至2022年3月在郑州大学第二附属医院妇产科参与实习培训的60个实习生。按随机数表法分为两组,每组30人:试验组接受课程思政理念下的任务驱动法式教学;对照组接受传统教学方式。比较两组学生对教师的教学满意度、学生的理论知识水平、专业技能考核、实习期学生总体情况自评,以评价2种教学方法。结果试验组教师教学满意度总评分、学生理论知识及专业技能成绩、实习期学生总体情况自评均高于对照组(P<0.05)。结论课程思政理念下的任务驱动教学法在妇产科临床教学中比传统教学模式可以取得更好的教学效果。

冷冻前胚胎培养时间不同对冻融周期妊娠结局的影响

目的探讨冷冻前胚胎培养时间不同对冻融周期妊娠结局的影响。方法分析2011-01—2011-12行冻融胚胎移植的275个周期临床资料,比较D2和D3胚胎复苏后复苏率及临床妊娠率。结果 D2胚胎冷冻后复苏率显著高于D3胚胎,但临床妊娠率显著低于D3胚胎(P<0.05)。结论 D2胚胎对冷冻解冻可能具有更好的耐受,但在提高冻融周期妊娠率上D3胚胎更有优势。

胚胎干细胞维持基因组稳定性机制的研究进展

胚胎干细胞(ESCs)具有体外无限增殖及高度自我更新能力,体外一定条件下可分化为3个胚层来源的各种细胞。胚胎干细胞对损伤高度敏感,任何遗传突变都会影响其基因组稳定性及整个细胞系功能,甚至将突变遗传给子代细胞。因此胚胎干细胞必须具有某种高度有效机制来预防或修复DNA损伤,从而维持基因组的稳定性。简要综述胚胎干细胞维持基因组稳定性的机制。

不同促排卵与激素替代治疗方案对人种植窗期子宫内膜LIF、IL-1β与整合素αVβ3表达的影响

目的:探讨诱发排卵、控制性超促排卵(COH)、激素替代治疗(HRT)方案对人种植窗期子宫内膜容受性的影响。方法:选取60例取消移植的患者作为研究对象。20例为自然周期排卵,10例为诱发排卵,20例为COH方案,10例采用HRT方案。每个方案分别于排卵后第5、6天(D5、D6)采集半数研究对象的内膜,免疫组化SP法检测LIF、IL-1β与整合素αVβ3蛋白的表达。结果:相同方案的D5与D6内膜间比较,3种蛋白的表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。诱发排卵组、COH组、HRT组3种蛋白在内膜中的相对表达量均低于自然周期组,其中诱发排卵组最低,HRT组高于COH组(P<0.05)。结论:HRT方案对人种植窗期子宫内膜容受性的影响最小。

异位子宫内膜组织自然杀伤细胞和造血祖细胞对子宫内膜异位症合并不孕术后妊娠结局的影响

目的探讨异位子宫内膜组织自然杀伤细胞和造血祖细胞(HPCs)对子宫内膜异位症(EMs)合并不孕术后妊娠结局的影响。方法选择116例EMs合并不孕症患者作为研究对象,采集患者异位子宫内膜组织和外周血,分离异位子宫内膜组织和外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测子宫自然杀伤细胞(uNKs)和外周循环自然杀伤细胞(pbNKs)表型,同时检测异位子宫内膜组织和外周血HPCs比例,分析异位子宫内膜组织HPCs与妊娠结局的关系。结果 116例患者中,50例(43.1%)于术后自然妊娠(自然妊娠组),66例(56.9%)于术后行辅助生殖技术(ART)。66例行ART的EMs合并不孕症患者最终妊娠(辅助妊娠组)46例(69.7%),未妊娠(未妊娠组)20例(30.3%)。uNKs主要表型为CD56bright CD16-,pbNKs主要表型为CD56dimCD16+;未妊娠组、辅助妊娠组和自然妊娠组CD56bright CD16-和CD56dimCD16+的uNKs细胞和pbNKs细胞比例差异均无统计学意义(均P>0.05)。辅助妊娠组和自然妊娠组异位内膜组织CD34+HPCs比例明显高于未妊娠组,差异具有统计学意义(P<0.05);但3组外周血HPCs比例差异无统计学意义(均P>0.05)。异位子宫内膜组织HPCs细胞比例预测ART妊娠的曲线下面积(AUC)为0.889(95%CI:0.788～0.953),预测EMs患者术后总体妊娠的AUC为0.821(95%CI:0.739～0.886)。结论异位子宫内膜组织HPCs细胞比例在EMs术后成功妊娠和未妊娠的MEs患者中存在显著差异,有望成为预测EMs术后妊娠结局的预测指标之一。

人卵丘细胞PROK1表达与IVF- ET后胚胎发育及妊娠结局的关系

目的:探讨人卵丘细胞前动力蛋白1(PROK1)表达与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)后胚胎发育及妊娠结局的关系。方法:选择162例行IVF-ET的不孕症患者作为研究对象,蛋白质印迹法检测所有患者卵丘细胞PROK1表达,按照PROK1表达值分为PROK1高表达组和低表达组,比较两组患者一般资料、胚胎发育和妊娠结局,以及p53、活化型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)蛋白表达和卵丘细胞葡萄糖含量的差异。结果:高表达组基础卵泡生成激素(FSH)值、卵母细胞成熟率、受精率、卵裂胚数、可利用胚胎数、优质胚胎数、种植率、临床妊娠率均明显高于低表达组(P<0.05),活化型caspase-3、PCK1蛋白及葡萄糖含量明显低于低表达组(P<0.05)。相关性分析显示卵丘细胞活化型caspase-3、PCK1蛋白及葡萄糖含量均与PROK1表达呈显著负相关(P<0.05)。结论:卵丘细胞PROK1表达与IVF-ET患者胚胎发育、临床妊娠结局有关,PROK1高表达有利于卵母细胞成熟和胚胎发育。

增加1枚非优质胚胎移植对IVF-ET妊娠结局的影响

目的:研究在IVF-ET的新鲜取卵周期,增加1枚非优质胚胎的移植对妊娠结局的影响。方法:回顾分析2015年1月至2018年12月在郑州大学第二附属医院生殖中心接受IVF-ET助孕的患者的资料。按移植胚胎数分为3组:移植1枚优质胚胎97个周期(组1),移植2枚优质胚胎1810个周期(组2),移植1枚优质胚胎和1枚非优质胚胎279个周期(组3)。比较3组的临床资料和妊娠结局。结果:组2的获卵数、优胚数、HCG日E 2值、P值、临床妊娠率和多胎妊娠率均高于组1,差异均有统计学意义( P <0.05)。组3的着床率明显低于组1,多胎妊娠率明显高于组1,差异有统计学意义( P <0.05),临床妊娠率与组1无显著差异。Logistics回归显示,年龄是妊娠结局的危险因素,HCG日内膜厚度是保护因素。结论:增加移植优质胚胎数可提高临床妊娠率,增加1枚非优质胚胎的移植,不能提高临床妊娠率,由于多胎妊娠率明显增高反而增加了妊娠风险。

D2/D3移植对体外受精-胚胎移植周期妊娠结局的影响

目的探讨取卵后第2天(D2)和第3天(D3)胚胎移植对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期的妊娠结局的影响。方法回顾性分析2008年1月至2011年1月在本中心行IVF-ET助孕的596个周期的临床资料,分D2移植组(182周期)和D3移植组(414周期),比较两组优质胚胎率、临床妊娠率、流产率、异位妊娠率等。结果两组之间临床妊娠率、流产率、异位妊娠率等无显著差异。与D2移植组相比,D3移植组优质胚胎率显著下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 D2移植和D3移植对IVF-ET妊娠结局无明显影响。但胚胎在体外延长培养1 d,优质胚胎减少。

多囊卵巢综合征来源人胚胎干细胞系的建立及成脂分化

1998年美国科学家James Thomson和John Gearhart分别首次用体外受精-胚胎移植（IVF-ET）患者捐赠的胚胎和流产胎儿的生殖嵴细胞建立人胚胎干细胞（human embryonic stem cells，hESCs）系。此后，hESCs建系成功的报道日益增多。但有关多囊卵巢综合征（polycystic ovarian syndrome，PCOS）患者来源的hESCs细胞系的建立目前国内外尚未见报道。

利用冷冻胚胎建立人胚胎干细胞系

目的利用辅助生殖技术中废弃的冷冻胚胎建立人胚胎干细胞系。方法将体外受精胚胎移植周期中废弃的冷冻胚胎解冻,序贯培养至囊胚,分离出内细胞团,接种至混合饲养层,进行传代培养,对可连续传代的细胞系进行鉴定。结果共收集废弃冷冻胚胎44枚,形成囊胚15枚,原代接种内细胞团10枚,其中一枚已稳定传至25代,目前生长状态良好,经鉴定证实为胚胎干细胞。结论利用辅助生殖技术中废弃的冷冻胚胎,可成功建立人胚胎干细胞系。

以问题为中心教学法联合研讨会在生殖医学部硕士研究生培养中的应用观察

目的观察以问题为中心教学法(PBL)联合研讨会在生殖医学部硕士研究生培养中的应用效果。方法选取郑州大学第二附属医院生殖医学部专业2017年1月至2020年12月的48名学位硕士研究生为研究对象,按照随机数字表法分为对照组(N=24名)和研究组(N=24名)。对照组采用传统教学法,研究组采用PBL联合研讨会教学法,对两组的理论考核成绩、教学方法应用效果和对教学方法认可度进行对比分析。结果研究组的平均成绩高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的学习兴趣、知识面拓展、自主学习能力、分析解决问题能力、团队协作能力、信息检索能力、表达能力均评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),研究组的认可度平均得分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PBL联合研讨会应用于生殖医学部硕士研究生培养中效果显著,不仅可使学生的学习兴趣、知识面拓展、自主学习能力、分析解决问题能力、团队协作能力、信息检索能力、表达能力以及信息检索能力得到提高,而且大多数学生对该方法也表示认可。

褪黑素通过SIRT3/SOD2途径改善高龄卵巢功能减退女性颗粒细胞线粒体功能和减轻氧化应激

目的研究褪黑素在体外培养中改善高龄卵巢功能减退女性颗粒细胞线粒体功能、减轻氧化应激状态的作用及可能机制。方法收集在2022年3月至6月期间在郑州大学第二附属医院生殖医学中心接受辅助生殖技术助孕患者取卵后废弃的卵泡液,提取壁层颗粒细胞,按患者年龄分为高龄组(年龄≥38岁,6例)和年轻对照组(年龄<35岁,6例)。使用透射电子显微镜观察颗粒细胞的线粒体超微结构,通过ATP检测试剂盒检测细胞内ATP,实时荧光定量PCR检测线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,MitoSOX?Red线粒体氧化物指示剂检测活性氧含量,Western blotting法检测SIRT3、SOD2的蛋白表达。将高龄组的颗粒细胞样本根据随机数字表法分为褪黑素处理组和空白对照组(各5例),检测在体外培养颗粒细胞时添加褪黑素1μmol/L后线粒体上述检测指标与空白对照组的差异。转染siRNA下调颗粒细胞内SIRT3,检测褪黑素添加前后上述检测指标并与阴性对照组比较。结果高龄组颗粒细胞的线粒体超微结构与年轻对照组相比存在明显差异,线粒体结构显示不清,线粒体嵴少见且不规律排列,ATP水平(P=0.012)、mtDNA拷贝数(P=0.005)和线粒体膜电位(P=0.009)显著低于年轻对照组,活性氧含量显著增加(P=0.003),SIRT3和SOD2水平显著降低(P<0.001和P=0.002),差异均有统计学意义。经褪黑素体外培养后,线粒体超微结构有所恢复,ATP水平(P<0.001)、mtDNA拷贝数(P=0.038)和线粒体膜电位(P=0.002)高于空白对照组,SIRT3和SOD2水平高于空白对照组(P=0.011和P=0.031),活性氧含量低于空白对照组(P<0.001),差异均有统计学意义。siRNA转染后的颗粒细胞SIRT3的表达显著下调(P<0.001)。经褪黑素处理后,细胞内ATP水平、mtDNA拷贝数和线粒体膜电位均低于未下调SIRT3的阴性对照组(P<0.001、P=0.001、P<0.001),活性氧含量高于阴性对照组(P<0.001),差异均有统计学意义。结论在体外培养中添加褪黑素可以改善高龄卵巢功能减退女性颗粒细胞的线粒体功能和氧化应激状态。褪黑素除了直接抗氧化作用,还可通过调节SIRT3和SOD2水平来降低活性氧含量。

无精症患者睾丸癌发病率高

已有报道，不育及精液质量低下的男性有患睾丸癌的高风险。为探究不同生精模式的无精症患者睾丸肿瘤的发生率进行以下研究。

受精第3天胚胎早期融合可能与植入潜能增加有关

在体外受精（IVF）中最初尝试通过增加移植胚胎数目提高妊娠率（PR），但也增加了多胎妊娠发生率。为保持PR、降低多胎妊娠率，可减少第3天移植胚胎数或第5天移植1~2个囊胚，但囊胚移植并不适用所有患者。因此，第3天移植优质胚胎对提高植入率很重要。优质胚胎的潜在标志之一是胚胎早期融合。该研究旨在确定受精第3天有早期融合的胚胎与有少许或无融合胚胎相比，植入潜能是否增加。

宫腔镜治疗宫腔因素致不孕不育患者的生殖预后分析

目的:探讨宫腔镜治疗宫腔因素所致不孕不育患者的生殖预后疗效研究。方法:回顾性分析2018年1月至2018年12月在郑州大学第二附属医院生殖医学部治疗的106例宫腔因素所致不孕不育患者的临床资料,所有患者均采用宫腔镜检查及治疗,均已明确造成不孕不育的宫腔因素,通过其资料对宫腔镜治疗后的生殖预后进行评估。结果:经宫腔镜治疗后,各项宫腔因素在患者中的占比均明显降低,与治疗前比较,差异具有统计学意义(P <0.05);生殖预后分析结果显示,子宫内膜息肉、息肉样增生、宫腔粘连、子宫黏膜下肌瘤患者的妊娠率高于子宫纵膈、子宫内膜结核,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论:宫腔镜治疗宫腔因素所致不孕不育患者的疗效显著,有助于提升宫腔内疾病的治愈率,提高妊娠率,改善生殖预后,具有积极的临床意义。