重组李斯特菌细胞溶解素LLO蛋白表达纯化及溶血活性鉴定

目的克隆单核细胞增生症李斯特菌细胞溶解素O(LLO)基因hlyA,构建其原核表达系统,鉴定融合蛋白LLO的抗原性和溶血活性。方法采用PCR技术从Lm总DNA中扩增hlyA基因,与基因库中其它9株hlyA基因序列相比较。用pET30a载体构建LLO原核表达质粒pET30ahlyA,在E.coliBL21(DE3)宿主菌中用IPTG诱导表达,Ni2+柱纯化后,Westernblot鉴定其抗原性。用人红细胞检测溶血活性。结果所克隆的hlyA基因PEST样结构与GenBank上9个菌株的相应氨基酸序列相比,最多有3个氨基酸替代。LLO融合蛋白在大肠杆菌中可高效表达,纯化后获得高纯度的重组蛋白,具有较高的抗原性。在酸性pH5.5条件下,LLO溶血活性最大为1.41×104HU/mg。结论已成功构建LLO原核表达系统,所表达的蛋白具有较高的抗原性和溶血活性。

以自主可控核电安全生产平台为基础的企业数字化转型实践

2019年中国核能电力股份有限公司(以下简称“中国核电”)充分考虑国际形势和自身发展需要作出决定,研发核电全流程国产化安全生产管理平台(ASP-1),打造具有自主知识品牌的国内首创大型核电工业软件,解决核心技术受制于人的问题,并为数字化转型奠定坚实基础。该项目历时三年半时间,成功完成了各项研发任务并满足各项性能指标。ASP-1设计时充分吸收中国核电30多年的运行管理经验,创建了有中国特色的核电安全生产绩效模型,并在此基础上开发了一款融合最新数字技术和先进架构的数字化安全生产管理平台,打破“人有我无”的被动局面,体现了中国核电的道路自信和理论自信,打造具备里程碑意义的核电生产信息管理国产化产品。

干扰素-β1b的高效表达、纯化及抗病毒活性研究

IFN - β1b是大肠杆菌产生的 17位Cys被Ser替换的人IFN - β的类似物 ,为了获得高表达 ,使用了大肠杆菌的偏爱密码子 ,人工合成了IFN - β - 1b基因 ,插入质粒 pBV2 2 0中 ,转化大肠杆菌DH5α。IFN - β1b的制备过程 ,包括发酵和一系列的纯化步骤。经修饰 ,IFN - β1b基因在启动子PRPL 控制下发酵表达 ,合成的蛋白质以包涵体的形式存在。培养的细菌经收集、裂解后 ,将包涵体释放出来 ,包涵体经含SDS的溶液溶解 ,DTT还原。纯化过程包括有机溶剂抽提、分子筛层析、脱盐、氧化复性和反相层析 ,并用旋转蒸发除去有机溶剂。IFN - β -

临床护理专家的培养思路及实践

通过查阅国内外文献介绍临床护理专家的定义、作用;结合我国国情及我国护理工作发展现状提出临床护理专家的入选条件及培养方式,并结合该院的学科优势,对冠心病临床护理专家的选拔培养、课程设置提出了大胆设想。

分泌型重组人生长激素工程菌的高密度发酵

目的 研究葡萄糖剂补加策略 ,以获得大肠杆菌的高密度发酵和人生长激素 (HGH)的高表达。方法 采用批式发酵和补料批式发酵方式 ,葡萄糖的补加采用逐渐增加的方式 ,包括pH、DO和浓度控制。结果 获得HGH的表达量为 30 0mg/L ,光密度达到 12 4(A60 0 )。结论 在大肠杆菌中表达异源蛋白时 ,葡萄糖的补加方式是关键因素 。

胰岛素注射液启封后无菌保存期及药物活性的探讨

目的探讨胰岛素注射液启封后无菌保存期,以及保存期内药物活性变化。方法将15瓶胰岛素注射液随机分为3组,按穿刺频度分3次/d、12次/d、24次/d进行穿刺抽吸,分别于第7、14、21和28天对药液进行细菌培养;同时,每组胰岛素注射液随机抽取2瓶,在第7、14、21和28天进行免疫活性检测。结果(1)药液开启后28d内无需氧菌、厌氧菌及霉菌生长;(2)药液活性随存放周期延长有降低趋势;(3)药液免疫活性与穿刺频度无显著相关性。结论胰岛素注射液在使用过程中,按操作规范进行抽吸并适当存放,在28d内是安全无菌的,但药液活性逐步衰减,存放周期最好在7d以内。

护士对化疗药物外渗知识掌握程度的调查分析

目的 了解护士对化疗知识的掌握情况。方法 采用问卷对 2所三级甲等医院的 15 5名护士进行调查。结果 化疗药物外渗是临床护理工作中经常遇到的问题。造成化疗药物外渗可能有以下一些原因 :护士对外渗性损伤的化疗药物知识掌握不牢固 ;对化疗药物不典型外渗不够重视 ;对早期处理程序不清楚 ;对预防措施没有给予足够的重视。结论 加强化疗药物外渗知识学习、教育 ,使护士牢固树立防止化疗药物外渗的安全意识 ;制定相应的化疗药物外渗防护措施预案 ;正确判断化疗药物不典型外渗并采取积极有效的处理措施 。

桃红四物汤对肢体缺血-再灌注损伤大鼠骨骼肌三磷酸肌醇受体表达的影响

目的观察桃红四物汤对肢体缺血-再灌注损伤大鼠骨骼肌三磷酸肌醇受体(IP3R)表达的影响,从Wnt/Ca2+信号通路角度探讨其作用机制。方法取2月龄雄性SD大鼠80只,随机分为正常组、模型组、桃红四物汤组和阻滞剂组,每组20只,除正常组外,其余各组均阻断血流制备大鼠右后肢缺血-再灌注损伤模型,桃红四物汤组、阻滞剂组造模前分别给予桃红四物汤灌胃、阻滞剂腹腔注射预处理,HE染色和DAPI荧光染色观察再灌后8 h腓肠肌细胞凋亡,免疫组化检测再灌后8 h腓肠肌IP3R蛋白的表达,RT-PCR检测再灌后0、2、4、8 h腓肠肌IP3R mRNA的表达。结果HE染色和DAPI荧光染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠腓肠肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤组和阻滞剂组大鼠腓肠肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05),桃红四物汤组低于阻滞剂组(P<0.05)。免疫组化及RT-PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组大鼠腓肠肌IP3R蛋白和m RNA表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤组、阻滞剂组大鼠腓肠肌IP3R蛋白和m RNA表达明显下调(P<0.05)。结论桃红四物汤通过下调Wnt5a/Ca2+信号通路IP3R的表达减轻肢体缺血-再灌注损伤。

重组人干扰素-β(rhIFN-β)中试工艺研究

目的 建立适合大规模生产重组人干扰素 β(rhIFN β)的分离纯化工艺。 方法 采用超声破菌、离心分离包涵体、仲丁醇萃取、Sephacryl 10 0、HIC层析等分离纯化步骤。结果 纯化的rhIFN β纯度达 98%以上 ,比活性为 2 .0× 10 7IU/mg,各项质量指标均符合质控标准。结论 此纯化工艺简便 ,可重复性好 ,适于大规模生产。

推行ISO 9000标准 建立科学的护理质量管理体系

为使护理质量尽快与国际接轨,达到标准化、规范化、系统化目标,我院于2003年6月在护理质量管理体系中全面启动ISO9000标准,按ISO9000要求进行体系文件设计,加强体系文件控制,强调过程管理,倡导持续改进,使原来护理管理中的一些不健全之处得到补充和完善,全面提高护理质量。实践证明,在护理管理中推行ISO9000标准,是提高质量、促进管理,建立科学的护理质量管理体系的有效途径。

总护士长在推行ISO9000质量保证体系中的作用

在推行ISO9000质量保证体系中,总护士长要充分发挥其中介指挥和督导作用。首先总护士长层应统一思想,达成共识,明确目标和方向;在体系文件建立中承担主要任务,扮演主角;在ISO标准实施中既要考虑质量体系的广泛性,也要重视其特殊性,特别是在重点部位、重要环节、重要技术以及风险安全管理方面发挥主导作用。在ISO质量认证后,保持、改进、控制成为总护士长持之以恒地检查、指导各级护理人员落实ISO标准的重要工作。

医疗改革对护士长素质和领导技能的需求

探讨了医疗改革过程中护理结构变化对护士长个性特质需求及其对护士长领导技能的需求 ,以及护理管理多元化对护士长领导艺术的需求。护士长应努力把自己锻炼培养成一名创新型护理管理者 ,以顺应改革潮流。

新形势下护理工作面临的问题与对策

社会主义市场经济的建立给医院护理工作发展带来了机遇,也带来了挑战。本文拟在分析新形势下护理工作面临的新问题的基础上提出护理工作抓好的关键要素及应采取的对策。一、新形势下护理工作面临的新问题(一)护理人员专业思想不稳定的现象更为突出护理人员专业思想不稳定。

桃红四物汤对大鼠后肢缺血-再灌注损伤骨骼肌CaMKⅡ、PKC表达的影响

目的观察桃红四物汤对大鼠后肢缺血-再灌注损伤骨骼肌钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、蛋白激酶C(PKC)表达的影响,从Wnt/Ca^(2+)信号通路角度探讨其作用机制。方法取2月龄雄性SD大鼠80只,随机分成正常组、模型组、桃红四物汤组、阻滞剂组,每组20只。除正常组外,其他各组均阻断血流复制右后肢缺血-再灌注损伤模型,桃红四物汤组、阻滞剂组(FZR5、Wnt5a阻滞剂)在造模前分别予以桃红四物汤灌胃、阻滞剂腹腔注射预处理。DAPI法观察复灌后各组腓肠肌细胞凋亡变化;RT-qPCR检测复灌后(0、2、4、8 h)腓肠肌CaMKⅡ、PKC mRNA的表达;免疫组化(IHC)检测复灌后8 h腓肠肌中CaMKⅡ、PKC蛋白的阳性表达。结果DAPI荧光染色结果显示,与正常组比较,模型组、桃红四物汤组、阻滞剂组大鼠腓肠肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤组和阻滞剂组大鼠腓肠肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。RT-qPCR和IHC结果显示,与正常组比较,模型组、桃红四物汤组、阻滞剂组CaMKⅡ、PKC蛋白和mRNA表达一致性上调(P<0.05);与模型组相比,桃红四物汤组、阻滞剂组CaMKⅡ蛋白和mRNA表达一致性下调(P<0.05),PKC mRNA表达下调(P<0.05),但PKC蛋白表达下调不明显(P>0.05),不同时间点显示相同倾向性。结论CaMKⅡ、PKC为大鼠肢体缺血-再灌注骨骼肌损伤中的关键蛋白,桃红四物汤可通过调控Wnt5a/Ca^(2+)信号通路下调CaMKⅡ表达来减轻肢体缺血-再灌注损伤,PKC不是Wnt5a/Ca^(2+)信号通路中桃红四物汤的主要作用靶点。

油田井重复改造措施效果评价

随着油藏开发程度的加大 ,其储层和导流裂缝都会发生变化 ,从而影响油田产能。现有条件下 ,对采油井进行重复改造是解除这种影响的有效措施 ,解堵性压裂是重复改造的主要方法。在科学认识油井储层的基础上 ,对长庆油田进行的一系列重复改造试验 ,效果明显。

无呼吸系统感染机械通气病人呼吸机管道更换周期的研究

[目的]探讨无呼吸系统感染的机械通气病人呼吸机管道系统适宜的更换周期。[方法]选择机械通气前痰培养阴性且机械通气时间大于72h的病人,分别于机械通气后24h、48h、72h对出气侧冷凝瓶、入气侧冷凝瓶及出入气管道结合部位(“Y”型管)采样进行细菌培养和鉴定。[结果]无呼吸系统感染的机械通气病人呼吸机管道系统病原菌污染情况随时间延长而增加,24h、48h、72h呼吸机管道系统细菌培养阳性率分别为10.0%、11.11%、13.33%,“Y”型管阳性率明显高于出气管道和入气管道。[结论]无呼吸系统感染的机械通气病人呼吸机管道系统“Y”型管应24h更换,入气管道48h更换,出气管道72h更换。

2000～2010年间中国4个血液中心的献血者中输血传播感染的流行研究

目的在中国,HBV和HCV呈高发流行、近年来梅毒也呈高速增长的流行趋势、HIV也由高危人群向普通人群蔓延的趋势,这些都对血液安全构成了威胁,该项研究是为了调查输血传播病原体标志物在中国4个血液中心的献血人群中的流行情况。方法我们调查了2000年1月～2010年12月间中国4个血液中心全血的采集量,使用2遍酶免的方法检测了输血可传播感染(TTIs)病原体(HIV、HBV、HCV和梅毒)的标志物,计算了TTIs的血清学标志物的流行率,并进行了相关的统计学分析以阐明TTIs相关的血清学流行特征。结果在4,366,283全血捐献标本中,60%为初次献血,40%是重复献血。