目的构建RECK(reversion-induc ing-cyste ine-rich prote in w ith Kazal motifs)基因的真核表达载体,通过脂质体介导法转染人肝癌细胞株HepG2并获得高表达RECK蛋白的细胞克隆。方法用RT-PCR方法扩增出人RECK基因,构建真核表达载体pcDN...目的构建RECK(reversion-induc ing-cyste ine-rich prote in w ith Kazal motifs)基因的真核表达载体,通过脂质体介导法转染人肝癌细胞株HepG2并获得高表达RECK蛋白的细胞克隆。方法用RT-PCR方法扩增出人RECK基因,构建真核表达载体pcDNA3-RECK,采用脂质体介导法将重组质粒导入体外培养的HepG2细胞,RT-PCR和W estern b lot检测转染细胞和未转染细胞中RECK基因mRNA及蛋白质的表达。结果本实验成功构建了真核表达载体pcDNA3-RECK,并用脂质体介导的方法获得了高稳定表达RECK的细胞克隆;W estern b lot显示转染前的细胞未检测到RECK基因mRNA及蛋白质表达,但转染后表达量明显增高。结论重组质粒pcDNA3-RECK经转染能在HepG2细胞中高效表达,为进一步研究RECK对肝癌细胞的生物学影响奠定了基础。展开更多
美国胸科医师学会(American College of Chest Physicians,ACCP)于2016年在《Chest》上发表了其最新(第10版)血栓栓塞性疾病抗栓治疗指南(ACCP-10)[1]。ACCP-10对 ACCP-9进行了12项更新[2],并增加了3项内容,总计30条建议...美国胸科医师学会(American College of Chest Physicians,ACCP)于2016年在《Chest》上发表了其最新(第10版)血栓栓塞性疾病抗栓治疗指南(ACCP-10)[1]。ACCP-10对 ACCP-9进行了12项更新[2],并增加了3项内容,总计30条建议,现就其内容作一解读。推荐等级:1强推荐,2弱推荐;证据等级:A 高质量证据,B 中等质量证据,C 低质量证据。展开更多
文摘目的构建RECK(reversion-induc ing-cyste ine-rich prote in w ith Kazal motifs)基因的真核表达载体,通过脂质体介导法转染人肝癌细胞株HepG2并获得高表达RECK蛋白的细胞克隆。方法用RT-PCR方法扩增出人RECK基因,构建真核表达载体pcDNA3-RECK,采用脂质体介导法将重组质粒导入体外培养的HepG2细胞,RT-PCR和W estern b lot检测转染细胞和未转染细胞中RECK基因mRNA及蛋白质的表达。结果本实验成功构建了真核表达载体pcDNA3-RECK,并用脂质体介导的方法获得了高稳定表达RECK的细胞克隆;W estern b lot显示转染前的细胞未检测到RECK基因mRNA及蛋白质表达,但转染后表达量明显增高。结论重组质粒pcDNA3-RECK经转染能在HepG2细胞中高效表达,为进一步研究RECK对肝癌细胞的生物学影响奠定了基础。
文摘美国胸科医师学会(American College of Chest Physicians,ACCP)于2016年在《Chest》上发表了其最新(第10版)血栓栓塞性疾病抗栓治疗指南(ACCP-10)[1]。ACCP-10对 ACCP-9进行了12项更新[2],并增加了3项内容,总计30条建议,现就其内容作一解读。推荐等级:1强推荐,2弱推荐;证据等级:A 高质量证据,B 中等质量证据,C 低质量证据。