利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼prkd1基因敲除品系

蛋白激酶D1 (protein kinase D1, PKD1;也称作PRKD1)是蛋白激酶家族成员之一,该家族由3种结构相关的应激激活酶组成,可调节机体多种生物学功能,主要涉及细胞增殖、分化、凋亡、免疫调节、心脏收缩、血管生成和癌症等,其中PRKD1与心脏肥大、收缩和缺血再灌注损伤的底物磷酸化有关。相关研究报道,先天性心脏病患者存在PRKD1基因突变,但其在心脏中的特异性功能和分子机制并未阐明。为了便于后期研究PRKD1基因在人类早期心脏发育的作用机制,本文拟利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼prkd1基因敲除品系。首先,通过生物信息学网站筛选出两个最佳的基因敲除靶位点,合成相应靶位点的单链向导RNA (single guide RNA,sg RNA)和引物;然后,将两个靶位点的sg RNA进行体外转录,并将其与Cas9蛋白混合后共同注射到斑马鱼的1-细胞期;最后,对基因敲除后的F0、F1、F2及F3代斑马鱼的胚胎和成鱼进行有效性鉴定及表型观察。结果显示,靶位点附近出现了不同程度的碱基缺失;成功构建了F1代能够稳定遗传的prkd1基因敲除的3个亚系;与野生型相比, F3代纯合子胚胎表现出不同程度的心腔膨大、环化异常及心管线性化等畸形现象。综上可知,本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了斑马鱼prkd1基因敲除品系,为进一步研究该基因在人类心脏发育中的特异性功能提供了有益参考,并为后期的先天性心脏病筛查和精准医疗提供了重要依据。

一个人类新基因ZNF322的研究初报

利用果蝇心脏发育基因 zfh-1的 c DNA序列和计算机克隆方法 ,在 9号染色体上发现了一个新的人类同源基因 .经国际基因命名委员会批准 ,命名为 ZN F32 2 .该基因总长度约为 2 .8kb,为一个连续的序列 ,编码一个 4 0 2个氨基酸的蛋白质 ,与小鼠 zfp-35编码的蛋白质最相似 (同源度为 51 .4 % ) .该基因在人体肾、脑、结肠、胚胎心脏及黑色素瘤等多种组织中广泛表达 ,其功能有待深入研究 .

不同贮水材质容器中贮存水余氯衰减规律研究

为了研究水在贮存过程中,不同贮水材质对水中余氯衰减的影响,选取工程上常用的混凝土、不锈钢、玻璃钢、陶瓷和塑料五种材质贮水容器,分别在环境温度为22 ℃和31 ℃两种情况下,研究了不同材质贮水容器中贮存水余氯衰减规律。结果表明,一定温度下,五种材质贮水容器中贮存水余氯衰减系数由大到小为: K混凝土>K塑料>K玻璃钢>K不锈钢>K陶瓷,即混凝土容器中贮存水余氯衰减最快,其次分别是塑料容器、玻璃钢容器和不锈钢容器,陶瓷容器中贮存水余氯衰减最慢。

洁悠神防治急性放射性皮炎29例效果观察

目的评价洁悠神防治急性放射性皮炎的临床效果。方法58例接受放射治疗过程中出现急性放射性皮炎的头颈部恶性肿瘤患者随机分为两组,治疗组29例采用洁悠神治疗,对照组29例用冰片、滑石粉外敷,两组治疗时间均为6周。评价6周后治疗组与对照组2级及以上放射性皮炎的发生率。结果治疗组和对照组2级以上急性放射性皮炎的发生率分别为58.6%(17/29)和86.2%(25/29),治疗组与对照组差异有显著性(χ2=0.4179,P<0.05)。结论洁悠神可促进放射性皮肤损伤的愈合,能降低急性放射性皮炎的发病率。

肺动脉内隧道术治疗婴幼儿左冠状动脉起源于肺动脉:超声心动图随访

目的 探讨超声心动图评价肺动脉内隧道术治疗婴幼儿左冠状动脉起源肺动脉 (ALCAPA)疗效。方法 对 5例肺动脉内隧道术矫治ALCAPA患儿 ,于手术后出院前及门诊随访时行超声心动图检查。结果 全部患儿重建之左冠状动脉 /肺动脉内隧道通畅 ,左心室功能明显改善 ,射血分数显著增加 ,术后 2～ 3个月恢复正常。结论 肺动脉内隧道术可以显著改善ALCAPA患儿左心功能。超声心动图随访能够显示内隧道通畅情况、心功能恢复程度、并发症及术后残留异常。

禾本科8种牧草DNA条形码通用序列筛选

DNA条形码技术是利用DNA保守片段对物种进行快速准确鉴定的新兴技术。本研究根据GenBank中禾本科牧草matK和rbcL基因的核苷酸序列,设计4对通用引物,建立并优化了针对禾本科7个主要牧草属8种牧草11个样品[高丹草（Sorghum bicolor×S.sudanense）、玉米（Zea mays）、针茅（Stipa capillata）、＂贝克＂多年生黑麦草（Lolium perenne‘Plxie）、＂凯帝莎＂多年生黑麦草（L.perenne‘Caddieshack’）、甘肃羊茅（Festuca kansuensis）、＂百琪＂紫羊茅（F.rubra‘Bargena’）、＂梦神＂紫羊茅（F.rubra‘Maxima’）、＂百胜＂草地早熟禾（Poa pratensis‘Barvictor’）、＂钻石＂草地早熟禾（P.pratensis‘Diamond’）和芨芨草（Achnatherum splendens）]的目的片段的扩增条件。对扩增产物进行测序和分析,经分别比对,筛选出8种牧草的4个标记位点5’端和3’端保守序列。对各标记位点保守区内的核苷酸进行单核苷酸多态性（SNPs）的单倍型分析。结果表明,matK1、matK2、matK3分别有6个单倍型（H1^A、H1^B、H1^C、H1^D、H1^E和H1^F）、7个单倍型（H2^A、H2^B、H2^C、H2^D、H2^E、H2^F和H2^G）和3个单倍型（H3^A、H3^B和H3^C）,rbcL基因有5个单倍型（H4^A、H4^B、H4^C、H4^D和H4^E）。根据matK（matK1、matK2、matK3）和rbcL基因筛选的4个标记位点为8种牧草建立了相对应的特异DNA识别码。本研究可为混合禾本科牧草饲料中的高粱属、玉蜀黍属、芨芨草属、针茅属、黑麦草属、羊茅属和早熟禾属的8种牧草准确识别提供分子水平上的科学依据。

西葫芦新品种嫩玉的选育

嫩玉是以植株生长势强、光合效率高的自交系63-1为母本,以株型紧凑、耐寒、早熟的63-2为父本配制而成的。它适应于露地、保护地栽培。在节能日光温室冬季栽培,长势较强,叶色浓绿,抗逆性较强,耐弱光短日照,节成性好,高产、稳产,瓜直长筒形,瓜色淡绿,商品性好,在全国各地推广面积已达2万hm2以上。

原发性腹膜后肿瘤31例诊疗分析

目的：总结腹膜后肿瘤的临床特征以及与肾肿瘤的鉴别，提高腹膜后肿瘤诊治率。方法回顾性分析31例腹膜后占位患者的临床资料及治疗情况。结果本组患者手术治疗22例（肿瘤切除20例，无法切除2例），放弃治疗7例，放射治疗2例。随访时间1~60个月，患良性肿瘤的患者死于原发性腹膜后肿瘤1例；患恶性肿瘤的患者死亡10例。结论原发性腹膜后肿瘤病理成分复杂，以恶性为主，手术是腹膜后肿瘤的首选治疗方式。

双色FISH和DNA纤维FISH方法的建立与应用

在构建了含毛细胞白血病相关的结构性倒位inv(5)(p13.1q13.3)的细胞系后,为了确定该新建细胞系在建株过程中其倒位断裂点关键区遗传物质是否发生改变,以生物素或地高辛标记的cCI5-216和cCI5-267黏粒DNA为探针,进行染色体中期、间期和DNA纤维3种双色荧光原位杂交的分析。结果表明:该新建细胞系的3种双色荧光原位杂交结果,均与该细胞系的原代细胞的完全相同,证实了该细胞系倒位断裂点关键区的遗传物质结构未发生改变。该细胞系是揭示毛细胞白血病发病的分子机理的重要研究材料。

一个与果蝇心脏基因同源的人类新基因——WNT-17基因的研究初报

利用果蝇心脏发育基因Wg的cDNA序列 ,运用计算机克隆方法 ,发现了一个新的人类同源基因 ,命名为WNT 17.该基因总长度为 10kb ,有 4个外显子和 3个内含子 ,定位于染色体1p35 1～ 1p36 2 3之间 .其mRNA全长约 2kb ,编码一个 2 96个氨基酸的蛋白质 ,与小鼠Wnt 4编码的蛋白质高度相似 .该基因与Wnt基因家族成员具有相似的同源框序列 .

沸石吸附处理低放射性废水试验研究

采用人工模拟放射性废水,进行吸附动态实验,得出沸石吸附的影响因素和最佳控制条件。

餐厨垃圾干燥特性理论模型及实验研究

考察了不同温度（60-100℃）．对餐厨垃圾热风干燥过程中的水分变化规律及动力学过程的影响，并采用7个数学模型对干燥过程水分变化规律进行拟合对比研究。结果表明：干燥温度越高，水分比下降越快，餐厨垃圾达到平衡含水率所需时间也越短；用Page模型和ModifiedPage模型描述餐厨垃圾热风干燥方程具有较好的拟合精度。

微波对大鼠血睾屏障影响的近期和远期效应观察

本实验在一次性微波照射大鼠睾丸后(采用谐振腔式辐射头照射,功率6～8W,睾丸表面温度保持在41～43℃之间,时间25分钟),用硝酸镧和氯化锂示踪,经电镜和光镜观察了大鼠急性期和恢复期的血睾屏障及支持细胞,并结合光镜观察,经多次(14～176次)微波照射(加温睾丸表面温度达40～43℃,时间30分钟)后恢复期的人睾丸组织的血睾屏障.结果发现大部分曲细精管中,血睾屏障的通透性未见明显改变,但有部分曲线精管中示踪剂进入近腔小室,显示出血睾屏障的局灶性损伤.此外还发现支持细胞的超结构有明显改变.

含结构性倒位inv(5)(p13.1 q13.3)的毛细胞白血病细胞系的建立

为从分子水平揭示毛细胞白血病 ( HCL)的发病机理提供研究材料 ,将患者外周血淋巴细胞分离 ,用EBV病毒转化后进行细胞培养、建立细胞系 ,在连续传代 3个月后 ,进行染色体组型分析 .所培养细胞的染色体组型分析结果 ,与患者新鲜的外周血淋巴细胞的完全相同 .

浙江景宁农产品生产安全隐患及应对措施浅析

随着社会的进步和人类生活水平的提高,农产品质量安全越来越受到社会的关注,农产品质量安全不仅关乎人类身心健康,也影响着社会稳定与经济发展。本文根据当地生产实践,试就当前农产品生产过程中存在的安全隐患作一粗浅分析,提出一些应对措施。

餐厨垃圾热风干燥过程特性及模拟

为了考察不同温度（60～100℃）对2种餐厨垃圾在热风干燥过程中的水分变化规律及动理学特性的影响,利用7个数学模型对餐厨垃圾干燥过程的水分变化规律进行了拟合对比。结果表明：温度是影响干燥的重要因素。干燥温度越高,餐厨垃圾达到平衡含水率所需时间越短;烹饪过程可以改变餐厨垃圾的热阻,增加其活化能;用Page模型和Modified Page模型描述餐厨垃圾热风干燥过程拟合精度最佳;2种餐厨垃圾有效湿分扩散系数分别为1.37×10-9～2.47×10-9,5.14×10-10～2.05×10-9m2/s,活化能分别为13.86,34.05 kJ/mol。

日光温室无公害瓜类蔬菜病虫害综合防治技术

随着人们生活水平的不断提高，消费者对蔬菜不仅要求多样、新鲜，而且要求卫生、安全、营养，蔬菜的质量安全已成为人们关注的重要问题。因此，发展无公害蔬菜生产势在必行。无公害蔬菜生产的关键是病虫害的防治，应坚持“农业防治、物理防治、生物防治为主，化学防治为辅”的无公害防治原则，达到少用农药或不用农药来发展无公害蔬菜生产的目的。

一个椭圆特征问题解对参数的连续性(英文)

用变分方法证明了一个限制在球面上的椭圆特征问题解对参数(球面半径)的连续性.从而得到相应的不带限制的椭圆特征问题的解分枝.

家兔可复性输卵管硅橡胶塞绝育术后输卵管的形态学观察Ⅰ.输卵管的组织学及组织化学的观察

对曾接受输卵管硅橡胶塞绝育术的家兔输卵管组织，在堵塞期和取塞后的恢复期应用活体组织解剖、组织学、组织化学（Ｐ．Ａ．Ｓ反应）等方法进行观察．结果发现，堵塞期输卵管组织的粘膜层的萎缩性退变是显著的，平滑肌层受累较轻；而在取塞后的恢复期，输卵管组织基本上恢复正常．本实验证明了可复性输卵管硅橡胶塞绝育术是安全的，可复的．