267例尿路感染病原菌的分布及耐药性分析

目的分析尿路感染病原菌分布及耐药性特点,为临床提供可靠的诊断和治疗依据.方法按照《全国临床检验操作规程》要求操作,对我院2004年1月～2005年11月尿路感染致病菌,采用MicroScan autoSCAN-4型全自动细菌鉴定分析仪作细菌鉴定和药敏试验.用NCCLS推荐的双纸片确证试验法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs).结果在分离的267株病原菌中,革兰阴性菌占77.5%;革兰阳性菌占22.5%.革兰阴性菌以大肠埃希氏菌为主,其次是铜绿假单胞菌;革兰阳性菌以肠球菌为主.非发酵菌属代表菌铜绿假单胞菌对常用抗菌素的耐药性明显比肠杆菌科代表菌大肠埃希氏菌的耐药性高,大肠埃希氏菌检出22株产超广谱β-内酰胺酶,占24.4%.肠球菌的耐药性比较严重,所有检测菌对万古霉素均敏感,但高单位庆大霉素的耐药株有70%.结论尿路感染的病原菌以肠杆菌科细菌为主,但分布非常广泛;某些菌株耐药性很严重,临床医生应根据中段尿培养和药物敏感结果合理使用抗生素.

重组犬IFN-γ的原核表达及生物学活性研究

为了探究犬γ干扰素(canine interferon gamma,CaIFN-γ)的原核可溶性表达方法及其生物学活性,试验首先采用PCR方法扩增优化后的CaIFN-γ基因成熟肽序列,以此构建重组表达质粒pCold-SUMO-10His-CaIFN-γ;然后将重组表达质粒转化至表达菌株Lyophilized BL21(DE3)Chaprone中,并用IPTG进行诱导表达;最后对表达的重组蛋白rCaIFN-γ进行SDS-PAGE分析、Western-blot鉴定、IPTG浓度优化、Ni-IDA亲和层析,以及采用CCK-8法测定重组蛋白rCaIFN-γ的细胞毒性,实时荧光定量PCR(相对定量)法检测凋亡相关基因和干扰素刺激基因(ISGs)转录水平变化,用细胞病变(CPE)法测定抗水疱性口炎病毒(VSV)效价,实时荧光定量PCR(绝对定量)法测定抗犬流感病毒(CIV)H3N2亚型感染的能力。结果表明:优化后的CaIFN-γ基因PCR扩增产物大小为494 bp,且重组表达质粒pCold-SUMO-10His-CaIFN-γ经菌液PCR、双酶切和测序验证构建成功;阳性菌株经诱导后表达的重组蛋白rCaIFN-γ大小为35.1 ku,该蛋白质能以可溶性形式表达,且可以与His Tag和HA Tag的鼠源单克隆抗体发生特异性反应;IPTG最佳诱导表达浓度为0.05 mmol/L;纯化后的重组蛋白rCaIFN-γ最大安全浓度为20μg/mL。以最大安全浓度的重组蛋白rCaIFN-γ分别作用MDCK细胞、MDCK(PB_(2))细胞4 h和6 h后,促凋亡基因p53和Bcl2相关X蛋白(Bax)的相对表达量无显著变化(P>0.05),γ干扰素受体2(IFNGR2)基因相对表达量降低(P<0.01或P>0.05),信号转导及转录激活因子1(STAT1)和干扰素调节因子1(IRF1)基因相对表达量均升高(P<0.05或P<0.01);MDCK细胞中,作用6 h IFNGR2、STAT1和IRF1基因相对表达量略高于4 h,但差异不显著(P>0.05);MDCK(PB_(2))细胞中,作用6 h IFNGR2和IRF1基因相对表达量极显著高于4 h(P<0.01),而STAT1基因相对表达量显著低于4 h(P<0.05)。再以最大安全浓度的重组蛋白rCaIFN-γ分别刺激MDCK和MDCK(PB_(2))细胞24 h,干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1)、抗黏病毒蛋白1(MX1)、干扰素诱导蛋白与四肽重复1(IFIT1)、干扰素刺激基因15(ISG15)、2′-5′寡腺苷酸合成酶1(OAS1)5种ISGs转录水平均升高,且MDCK细胞中的转录水平均极显著高于MDCK(PB_(2))细胞(P<0.01)。该蛋白质在MDCK细胞中抗VSV的病毒活性效价为6.4×10~5 U/mL,并且对H3N2亚型CIV有一定的抑制作用。说明重组蛋白rCaIFN-γ在大肠杆菌中成功地实现了可溶性表达,并且具有良好的生物学活性。

肇庆市G-6-PD缺乏者筛查和基因突变的分析

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏是最常见的人类遗传性代谢病之一,属X连锁不完全显性遗传病.它是引起蚕豆病、药物性溶血、新生儿高胆红素性溶血症、感染性溶血等疾病的遗传基础.G-6-PD缺陷是由于基因突变引起的.国际上已报道的该基因内部不同位点的点突变达50种以上,另外,还发现一个密码子的缺失型突变,其中11种点突变是在中国人体内发现的.

重症监护病房细菌培养与耐药性分析

目的探讨重症监护病房(ICU)分离细菌菌谱及细菌耐药情况,为本院ICU临床防治工作提供一定的参考依据。方法对2006年所分离的细菌菌株、真菌及细菌耐药性进行回顾性分析。结果全年共分离获得菌株366株,分离菌仍以革兰阴性杆菌为主,有266株,占72.68%,主要为绿脓杆菌、肺炎克雷伯菌、不动杆菌、大肠埃希菌和嗜麦芽假单胞菌;革兰阳性球菌占27.32%,主要以金黄色葡萄球菌为主,其次分别为肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和链球菌。体外药敏试验显示主要分离菌多呈多重耐病特性。万古霉素对金黄色葡萄球菌、头孢哌酮/舒巴坦对不动杆菌、亚胺培南对肺炎克雷伯菌、美洛培南对肺炎克雷伯菌,大肠杆菌均有很强抗菌活性,敏感率均达到100%。呋喃妥因和利福平也有较高的敏感率,其余细菌呈多重耐药性。结论本院ICU分离菌以革兰阴性杆菌为主,各种细菌多呈多重耐药特性,尤以对氨苄西林耐药性为高,应予以高度重视。美洛培南和头孢哌酮/舒巴坦对各种细菌有较高的敏感性,临床工作中应注意合理使用这些药物。

CK-MB免疫抑制法和免疫沉淀法的比较

CK-MB的测定已广泛用于心肌损伤的诊断,目前实验室常用的测定方法多为免疫抑制法和免疫沉淀法。免疫抑制法检测CK-MB的活性浓度(U/L),因其操作简单,可在生化仪上检测而得到广泛应用。但有时由于非典型CK成份存在会导致测定CK-MB时出现错误的结果。近几年随着全自动免疫分析仪发展,免疫沉淀法测定CK-MB得到广泛普及,它检测其定量浓度,不受非典型CK成分影响,能更好地反映心肌损伤的程度。本文收集一组标本用两种方法检测并比较分析两者的优缺点及临床应用价值。

47例皮肌炎病人的护理体会

皮肌炎属于自身免疫性疾病，是横纹肌非化脓性炎症过程。临床上以对称性肢带肌、颈肌、咽肌无力和皮肤损害为特征，常累及多种脏器，亦可伴发肿瘤和其他结缔组织病。病人通常隐袭起病，可有晨僵、乏力、食欲不振．体重减轻、发热、关节疼痛，少数病人有雷诺现象。肌无力最为常见。现将我科2003-01—2011-01共收治47例皮肌炎病人的护理体会总结如下。

16例系统性红斑狼疮的护理对策

系统性红斑狼疮 (SL E)是一种自身免疫性结缔组织病 ,累及多系统多器官 ,病程迁延 ,病情反复发作 ,对患者健康危害极大 ,甚至危及生命 ,因此给予及时治疗和加强心理护理、健康教育、口腔护理、出院指导等护理对策。

小儿肺炎痰细菌培养的检测及意义

目的 为取得小儿肺炎病原菌流行情况和敏感抗生素的经验。方法 对 13 2例肺炎的住院患儿的痰细菌培养及药物敏感试验结果进行统计分析。结果 该组患者共培养出致病菌 13种 ,菌株 141株 ,其中革兰阳性菌(G+菌 )占 12 .0 6% ,革兰阴性菌 (G- 菌 )占 83 .68% ,白色念珠菌占 4.2 6% ;药物敏感试验显示 ,致病菌对亚胺培南、美罗培南 (美能 )、第三代头孢菌素、喹喏酮类显示出较好的敏感率 ,G+菌并对氨苄西林 ,第一及第二代头孢菌素大多敏感 ,G- 菌并对氨基糖苷类多敏感。结论 本组结果显示小儿肺炎 G- 菌感染发生率较高 ,这与区域、病情较重有关 ,抗生素治疗应依据细菌学指导选择敏感抗生素 ,在未获明确病原菌之前 ,应根据感染的流行趋势 。

论新形势下档案管理现代化

近年来,随着经济的发展和科学技术的进步,档案管理的现代化发展需求日益显得迫切。本文主要从档案管理现代化的重要性、我国现阶段的档案管理现代化发展中存在的问题、以及实现档案管理现代化的基本措施这三个方面来分析新形势下档案管理现代化的内容,以期为后来的企业档案管理工作的现代化研究提供一些参考和建议。

VFP在更新造林“两率”汇总中的应用

通过一个VFP典型开发实例关键环节的解决方法,为营林技术人员在程序语言的学习以及软件开发中提供参考。

PCT与hs-CRP在新生儿炎症性疾病中的比较

目的评价血清降钙素原(PCT)与超敏C反应蛋白(hs-CRP)在新生儿全身细菌感染与病毒感染等疾病中的诊断价值,及在临床监测的应用。方法120例新生儿患者分为细菌感染组、病毒感染组和非感染性疾病组,采用电化学发光免疫分析测定血清中的PCT,微粒增强免疫透射比浊法测定hs-CRP;细菌感染组治疗后两天再次检测PCT。结果以血清PCT>0.5ng/ml为阳性标准,细菌感染组阳性率为98%,病毒感染组为10%,非感染性疾病组为10%,细菌感染组与其他两组比较有显著性差异(P<0.01)。以hs-CRP>10mg/L为阳性标准,细菌感染组阳性率为58%,病毒感染组为48%,非感染性疾病组为35%,细菌感染组与病毒感染组无显著性差异(P>0.05);细菌感染组治疗后PCT显著下降(P<0.05)。结论血清PCT检测可用于新生儿细菌感染诊断与鉴别诊断,对于细菌感染的疗效监测也非常有效。

冠心病患者血清同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白、脂蛋白(a)和D-二聚体的水平变化分析

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、脂蛋白(a)[LP(a)]和D-二聚体(DD)与冠心病的关系。方法检测160例冠心病患者血清tHcy、hsCRP、LP(a)和血浆DD的浓度,另外选择健康人群80例作为对照组。结果冠心病患者血清tHcy、hsCRP、LP(a)和血浆DD的浓度显著高于正常对照组(P<0.05)。结论联合监测血清tHcy、hsCRP、LP(a)和血浆DD的浓度变化对冠心病的预防和早期诊断及动态监测有着十分重要的临床价值。

介入联合肿瘤间质治疗肝癌患者免疫功能变化及其与预后的关系

目的通过观察介入联合肿瘤间质治疗肝癌患者外周血细胞免疫指标的变化,评价该方法对机体免疫功能的影响及其与预后的关系。方法筛选40例符合条件的肝癌患者分为两组,A组20例行单纯经肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗,B组20例行TACE联合经皮肝瘤内注射碘油化疗药物进行肿瘤间质治疗,另选健康体检正常者为对照组(C组)20例。分别采用流式细胞技术及ELISA法测定A组患者术前1周及术后第4周、B组患者术前1周及术后第1、2、3、4周外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)和血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)水平。结果 (1)A、B组肝癌患者术前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明显低于C组(P<0.01),而SIL-2R、CD8+高于C组(P<0.05,P<0.01);(2)术后4周B组肝癌患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+高于A组(P<0.05),SIL-2R低于A组(P<0.05);(3)B组肝癌患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+术后1、2、3周逐渐显著升高(P<0.05),而血清SIL-2R则显著降低(P<0.05),第4周呈稳定趋势(P>0.05)。结论 TACE联合肿瘤间质治疗能改善肝细胞癌患者免疫抑制,使患者免疫功能提升并趋向稳定水平,更有利于机体的恢复。检测T淋巴细胞亚群及血清SIL-2R时间以术后第2周开始为宜。

血细胞分析仪的校准与质控

目的建立实验室内部不同血细胞分析仪校准与室内质控系统。方法取同血型的常规体检的健康人的混合新鲜全血,分别在贝克曼库尔特和雅培两种血细胞分析仪上检测,以贝克曼库尔特血细胞分析仪作为溯源目标系统,计算雅培血细胞分析仪各参数的偏差,根据判断标准决定是否需要对雅培血细胞仪进行校准,再以此次校准后两仪器的偏差作为雅培血细胞分析仪比对室内质控的靶值,每日进行比对室内质控。结果红细胞计数和M CV均超出范围,需对雅培血细胞仪进行校准,当月雅培血细胞仪各参数比对室内质控的平均值与靶值接近,变异系数均在允许范围之内。讨论建立一个完善的校准与室内质控系统,可保证每日实验室内部不同血细胞分析仪结果的统一性,确保病人标本的结果可溯源到同一个测量基准。

HBV相关原发性肝癌患者血清B7-H3与IL-21的表达及其临床意义

目的:探讨血清B7-H3与IL-21在HBV相关原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法:收集HBV相关肝病121例,其中原发性肝癌50例作为肝癌组,良性组71例包括急性肝炎12例、慢性中至重度肝炎21例,肝硬化代偿期20例,肝硬化失代偿期18例;同期20例体检健康人员作为正常组。B7-H3和IL-21采用ELISA法检测,HBV-DNA定量运用实时荧光PCR检测。结果:肝癌患者血清B7-H3和IL-21含量分别为(207.60±57.16)ng/ml和(2 357.28±805.01)pg/ml,均高于正常组(P<0.001)。相对正常对照而言,良性组中不同临床类型患者二者含量均升高明显(P<0.001)。在HBV相关肝病患者血清中,B7-H3与IL-21呈正相关;B7-H3与HBV DNA无相关性,而IL-21与HBV DNA是否复制有关,但与其复制水平高低无关。结论:B7-H3、IL-21在HBV相关肝癌患者血清中表达水平高。机体B7-H3、IL-21持续地高表达可能与患者疾病的发展、预后有关。

同型半胱氨酸、超敏C反应蛋白、脂蛋白(a)和D-二聚体对冠心病的临床意义

目的了解同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、脂蛋白(a)[LP(a)]和D-二聚体(DD)对冠心病的临床意义。方法检测120例冠心病患者及40例健康人(对照组)血清总同型半胱氨酸(tHcy)、hsCRP、LP(a)和血浆DD的水平。结果冠心病患者血清tHcy、hsCRP、LP(a)和血浆DD的水平显著高于对照组(p<0.01),急性心肌梗死患者的上述4项指标高于不稳定型心绞痛患者,不稳定型心绞痛患者高于稳定型心绞痛患者,组间比较差异均具统计学意义(p<0.01)。结论冠心病患者血清tHcy、LP(a)、hsCRP和血浆DD水平随着病情发展不断升高,密切监测其变化,对冠心病的预防、早期诊断及动态监测有着重要的临床。

单核细胞趋化蛋白-1与动脉粥样硬化形成机制研究进展

动脉粥样硬化（AS）是一组动脉硬化血管病中常见的、最重要的一种[1],其特点是受累动脉病变从内膜开始,一般先有脂质和复合糖类积聚、出血及血栓形成,纤维组织增生及钙质沉着,并有动脉中层的逐渐蜕变和钙化等[2],近年来随着人们生活水平的提高患病率有明显增加的趋势[3]。研究证明MCP-1具有趋化作用,在特殊的环境下内皮细胞、