lncRNA UCA1和miRNAs在中枢神经系统疾病中的作用机制研究进展

中枢神经系统疾病的发生率和病死率呈逐年增长趋势,从分子水平层面深入研究中枢神经系统疾病的发病机制显得尤为重要。近年来研究发现,尿路上皮癌胚抗原1(urothelial carcinoma antigen 1,UCA1)在癫痫、神经胶质瘤等中枢神经系统疾病组织或细胞中均有不同程度的表达,参与疾病的潜在机制,包括与微小RNA(microRNAs, miRNAs)之间相互调控,影响相关信号通路,不仅促进中枢神经系统疾病的发生、发展,还增强了常规治疗药物的耐药性。本文回顾近年来UCA1与miRNAs在中枢神经系统疾病(癫痫、神经胶质瘤、帕金森病)的作用机制研究进展,提示UCA1有望成为癫痫治疗靶点和临床检测标志物,以期为与此相关的研究提供参考。

基于脑-肠轴探讨补中益气汤治疗气血亏虚型眩晕的作用机制

肠道与中枢神经系统具有复杂的双向关系,被称为脑肠轴,通过重要的神经递质作为“沟通的桥梁”,相互影响。眩晕作为神经系统疾病之一,发病因素众多,病因复杂,病程迁延难愈。有研究显示具有益气升阳作用的补中益气汤治疗气血亏虚型眩晕疗效较好。补中益气汤已被证明对胃肠动力学障碍有明显的改善作用,推测补中益气汤可能通过改善肠道功能,推动血液运行,营养清窍,达到治疗气血亏虚型眩晕的目的。这正体现了中医“异病同治”的治则。文章以补中益气汤为中介,以脑肠轴为切入点,探讨补中益气汤治疗气血亏虚型眩晕的作用机制,为临床用药提供新的思路。

癫痫患者海马硬化研究的文献计量学和可视化分析

目的通过Cite Space对癫痫患者海马硬化研究现状、热点及趋势进行可视化分析。方法应用Cite Space对2019年1月至2023年8月中国知网及Web of Science核心合集数据库中癫痫患者海马硬化相关文献期刊、国家、机构和关键词等进行可视化分析,并绘制图谱。结果共纳入中文文献95篇,英文文献977篇。国内外发文量最多的杂志为癫痫杂志、EPILPSIA。国内外发文量最多的作者为许尚文、Cendes Fernando。国内外最活跃的机构为浙江大学医学院附属第二医院神经内科和伦敦大学学院。美国是这一领域的主要推动力。热点关键词有海马硬化、癫痫、颞叶癫痫,聚类为海马、颞叶癫痫、海马硬化等。结论相关研究以国外为主,国内各机构有待提高,研究癫痫患者海马硬化的分子生物学方向可能成为近几年的研究热点。

探索急性癫痫肝肾阴虚证病证结合动物模型构建思路

癫痫是最常见的神经系统疾病之一,其反复发作的特点给患者和社会带来了严重的负面影响。肝肾阴虚为癫痫虚证之根本,构建病证结合的急性肝肾阴虚证癫痫的动物模型,对研究中医药在肝肾阴虚证癫痫发生和药物耐药性机制至关重要。然而目前尚未有统一的急性癫痫肝肾阴虚证的动物造模方法。因此,在不断深入的疾病病理变化和中医证候研究的基础上,采用病证结合动物模型的研究方法,探索构建急性癫痫肝肾阴虚证动物模型的最优化组合及评价标准,以阐明中医药的科学内涵。

基于文献计量视角分析癫痫与生酮饮食的相关性研究

目的通过CiteSpace对生酮饮食治疗癫痫相关文献的地区、机构、期刊、作者、被引次数和关键词进行分析,预测该领域研究最新趋势。方法以Web of Science中2002年—2022年8月13日收录的核心合集数据库为文献来源,应用CiteSpace 5.7.R2进行文献可视化分析,并绘制相关可视化图谱。结果筛选后共纳入2193篇文献。目前,生酮饮食治疗癫痫的相关研究处于快速上升阶段。美国是这一领域的主要推动力,提供了34.38%的出版物;中国发文量排第4位。最活跃的机构是约翰霍普金斯大学,引用频率最高的杂志是Cited Journal。共同被引文献最多的是Epilepsia Open杂志的文章。ERIC H KOSSOFF是最多产的作家,也是最常被共同引用的作者。“肠道微生物群”“微生物轴-肠脑轴”“改良阿特金斯饮食”和“基因突变”等为生酮饮食治疗癫痫的研究前沿。研究热点逐渐从局部病变部位扩展到其他部位,如从“大脑”到“微生物轴-肠脑轴”的转变,呈现多学科交叉的发展特点。结论生酮饮食和肠道微生物对癫痫治疗的结合应用是未来必然的发展趋势。

加味柴胡疏肝汤对急性癫痫小鼠海马miR-187/Wnt/β-catenin信号通路表达的影响

目的探讨加味柴胡疏肝汤对急性癫痫小鼠miR-187/Wnt/β-catenin信号通路表达的影响。方法制备匹罗卡品急性癫痫小鼠模型后,将小鼠随机分为模型组、加味柴胡疏肝汤组、卡马西平组、加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组、加味柴胡疏肝汤+miR-187抑制组,每组10只,除模型组之外,其余组别分别给予相应药物灌胃进行干预,2次/d,连续14 d。脑电图检测小鼠痫性波,苏木素-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色法进行正常组与模型组病理组织学观察,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测小鼠海马组β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3 mRNA表达水平,免疫蛋白印迹法(western blot,WB)检测小鼠海马组织β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3蛋白表达水平,免疫荧光检测小鼠海马组织β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3的表达水平。结果脑电图结果显示,与正常组相比,模型组小鼠脑电图观察到连续性痫性放电,表现为棘波、尖波、棘-慢综合波;与模型组比较,加味柴胡疏肝汤组与卡马西平组均能减少癫痫小鼠脑电图痫性波次数;与加味柴胡疏肝汤组比较,加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组小鼠脑电图中痫性放电次数明显减少,加味柴胡疏肝汤+miR-187抑制组小鼠脑电图中痫性放电次数明显增加。RT-PCR结果显示,与正常组相比,模型组β-catenin、cyclin D1、c-myc和wnt3基因表达显著升高;与模型组相比,加味柴胡疏肝汤组和加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组小鼠海马组织中β-catenin、cyclin D1、c-myc和wnt3基因表达均明显减低,且较单纯使用加味柴胡疏肝汤组明显减低;加味柴胡疏肝汤+miR-187抑制组cyclin D1较模型组明显降低;卡马西平组β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3基因表达水平均明显降低。WB结果显示,与正常组相比,模型组β-catenin、cyclin D1、c-myc和wnt3蛋白表达显著升高;与模型组相比,加味柴胡疏肝汤组和卡马西平组小鼠海马组织中β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3蛋白表达量均减低;加味柴胡疏肝汤+miR-187过表达组β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3蛋白表达量较模型组和加味柴胡疏肝汤组均明显减低;加味柴胡疏肝汤+miR-187抑制组c-myc、wnt3蛋白表达量较模型组比均明显降低;免疫荧光结果基本同WB。结论加味柴胡疏肝汤上调miR-187的表达,抑制β-catenin、cyclin D1、c-myc、wnt3的表达,抑制癫痫的发生和发展。

基于网络药理学方法分析柴胡配伍香附治疗癫痫的作用机制

目的:运用网络药理学方法探讨柴胡配伍香附对癫痫靶基因及信号通路的影响。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台筛选柴胡、香附有效成分及靶点,然后采用人类基因数据库、在线孟德尔人类遗传数据库筛选与癫痫相关的基因,通过靶点交集获得中药与疾病的靶点,然后利用cytoscape.3.6.0软件绘制柴胡、香附有效成分与靶基因关系网络图,并对靶基因进行基因本体论功能富集分析、KEGG富集分析。结果:共筛选出柴胡119个、香附40个有效成分作用于癫痫的CHRM2、GABRA1、PRSS140等靶基因。靶基因主要富集在神经递质受体活性、类固醇激素受体、核受体活性、转录因子活性、乙酰胆碱受体活性等生物过程,涉及神经活性配体-受体相互作用、雌激素信号通路、胆碱能突触等信号通路。结论:从网络药理学角度筛选柴胡配伍香附治疗癫痫潜在的有效成分及作用靶基因和信号通路,可为开发柴胡配伍香附治疗癫痫提供理论依据。

《类证治裁》治疗癫痫的用药规律探讨

目的:该研究旨在利用数据挖掘技术,深入分析《类证治裁》中治疗癫痫的用药规律。方法:收集整理《类证治裁》中治疗癫痫的处方,通过Microsoft Excel 2019软件统计药性、药味、归经、功效及核心药物使用频次,并利用SPSS Modeler 18.0软件进行关联规则分析,以及SPSS Statistics 23软件进行聚类分析。结果:《类证治裁》中共收录了45首治疗癫痫的方剂,其中134味中药,大部分药性为寒、温、平;大部分药味为甘、辛、苦;主入肝、肺、心经;功能为补虚类、安神类、清热类;其中,有12味中药出现次数超过7次,有9味中药出现次数超过9次;此外,通过关联规则分析,得出了22条药对;通过进行聚类分析,得到了4个聚类组合。结论:在治疗癫痫方面,《类证治裁》一直秉承着“开窍豁痰,镇静安神,清热泻火,健脾补虚”的理念,为现代中医学诊疗癫痫提供了充分的理论依据。

Mechanism of modified Chaihu Shugan formula in the treatment of epilepsy based on IncRNA-UCA1/miR-187/MAPK8 pathway

Objective To observe the effects of Modified Chaihu Shugan Formula (MCSF) on the behavior of epileptic mice and their regulatory effects on long noncoding RNAUCA1(lncRNA-UCA1),microRNA-187(miR-187) and recombinant mitogen activated protein kinase 8(MAPK8).Methods Totally 80 mice were randomly divided into normal group,model group (pilocarpine hydrochloride 180 mg/kg).

基于lncRNA-UCA1/miR-187/MAPK8通路探讨加味柴胡疏肝汤治疗癫痫作用机制

目的观察加味柴胡疏肝汤(MCSF)对癫痫小鼠行为学的影响及其对长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(lnc RNA-UCA1)、微小RNA 187(mi R-187)和丝裂原激活蛋白激酶8(MAPK8)的调控作用。方法将80只小鼠随机分为正常组、模型组(盐酸匹罗卡品180 mg/kg)、MCSF组[7 g/(kg·d)]、MCSF[7 g/(kg·d)]+mi R-187模拟剂组(2μL)、MCSF[7 g/(kg·d)]+miR-187抑制剂组(2μL)、MCSF[7 g/(kg·d)]+lnc RNA-UCA1模拟剂组(2μL)、MCSF[7 g/(kg·d)]+lncRNAUCA1抑制剂组(2μL)、卡马西平(CBZ)组[30 mg/(kg·d)]。采用匹罗卡品(180 mg/kg)诱导建立癫痫小鼠模型,抑制及过表达lncRNA-UCA1(2μL)和miR-187(2μL)后,给予对应药物:MCSF[7 g/(kg·d)]、卡马西平混悬液[30 mg/(kg·d)]或生理盐水[20 mL/(kg·d)]灌胃2周,观察小鼠一般情况;行脑电图和水迷宫行为学实验;苏木精-伊红(HE)染色法观察造模前后海马病理学变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测小鼠海马lncRNA-UCA1、miR-187和MAPK8 mRNA表达量;蛋白质免疫印迹法检测小鼠海马MAPK8及磷酸化水平变化。结果与正常组比较,模型组小鼠体重减少,脑电图可观察到明显连续性痫性放电波,平台逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数和目标象限停留时间减少(P<0.01,P<0.05),海马组织神经元疏松紊乱,模型组miR-187的表达水平降低,lncRNA-UCA1和MAPK8基因表达水平升高(P<0.01),p-MAPK8蛋白表达量明显增加(P<0.01);与模型组比较,给药组干预2周后,小鼠体重增加,各组脑电波痫性放电波频率和强度明显减少,MCSF组、MCSF+miR-187模拟剂组、MCSF+lncRNA-UCA1抑制剂组和CBZ组平台逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多(P<0.01,P<0.05),海马组织miR-187的表达水平升高,lncRNA-UCA1和MAPK8基因表达水平降低(P<0.01),p-MAPK8蛋白表达量均明显减少(P<0.01),MCSF+miR-187抑制剂组lncRNA-UCA1基因水平表达量降低(P<0.05);MCSF+lncRNA-UCA1模拟剂组miR-187升高(P<0.05)。结论MCSF可以减少癫痫小鼠痫性波,改善小鼠癫痫行为,发挥抗癫痫作用,其作用机制可能与通过抑制lncRNA-UCA1表达从而激活miR-187,降低MAPK8水平有关。