猪圆环病毒1型和2型Rep蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化

分别以猪圆环病毒1型基因组和重组质粒pCI-PCV2-ORF1为模板,利用PCR扩增了猪圆环病毒1型和2型的ORF1基因,随后克隆到pET-28a(+)和pET-32a(+)两种原核表达载体上。测序正确的重组质粒分别转化E.coli BL21(DE3),进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明,猪圆环病毒1型和2型的ORF1均能在pET-28a和pET-32a中分别以重组蛋白His-Rep(40 Ku)和Trx-His-Rep(54 Ku)的形式表达。进一步纯化后测定重组蛋白的浓度,推算出猪圆环病毒1型和2型的His-Rep蛋白产量分别为34 mg/L菌液和14 mg/L菌液,Trx-His-Rep蛋白产量则为12 mg/L菌液和10 mg/L菌液。这些纯化的蛋白在Western blot中能够与猪抗猪圆环病毒2型阳性血清发生特异性反应,显示其具有良好的免疫学活性。本研究建立的猪圆环病毒重组Rep蛋白的原核表达系统及其纯化方法,为下一步开展Rep蛋白功能等相关研究奠定了基础。

表面肌电图技术在吞咽障碍诊疗中的应用进展

吞咽障碍可由多种疾病导致,患者极易并发吸入性肺炎、窒息、营养不良等病症,严重影响生存质量。60岁以上正常的老年人中约50%有不同程度的吞咽障碍,尤其在脑血管意外患者中,70%左右的患者存在不同程度的吞咽障碍。吞咽是一种复杂的神经肌肉反射性协同运动,利用表面肌电图技术(surface electromyography,SEMG)观察吞咽过程中相关肌电活动可以为吞咽障碍的诊断提供依据,同时,使用SEMG也可以帮助患者训练正确的吞咽动作,甚至可以利用电刺激完成患者吞咽神经和肌肉的康复训练。

前列腺癌根治性切除术后生化复发的探讨

前列腺癌根治性切除术是治愈局限性前列腺癌最有效的方法之一，但术后约有15％的患者会出现生化复发。目前，判断前列腺癌根治术后生化复发常用的指标为连续两次血清前列腺特异性抗原（PSA）水平≥O．2ng／mL，生化复发的原因可能是前列腺原位局部肿瘤的复发、隐匿性淋巴结的转移或远处转移。

肾移植术后腹痛为首发表现的胃肠道功能障碍1例

肾移植术后腹痛为首发表现胃肠道功能障碍较为少见,在出现胃肠道症状前多有全身性感染如肺部感染、胃肠道感染等,出现进行性腹部胀气、肠鸣音减弱、应激性溃疡,无菌性胆囊炎等胃肠道功能障碍症状,容易误诊,完善相关检查明确腹痛的病因为外科性、内科性同时排除危重急腹症,明确病因及及时有效治疗方式,治疗成功率较高.

前列腺癌根治性放疗后生化复发的应对策略

放疗是局限性前列腺癌较常用的根治性治疗方法。前列腺根治性放疗可选择外放射治疗（externalbeam radiotherapy，EBRT）及近距离照射治疗。根治性外放疗或粒子种植治疗后约20％-50％的病人会出现生化复发^[1]，放疗后前列腺癌局部穿刺所证实的复发率为25％-94％，

抗生素菌渣与煤混合燃烧特性及其动力学分析

以抗生素菌渣、煤为研究对象,利用热重-差示扫描量热仪(TG-DSC)研究两种物质单独以及混合燃烧的燃烧特性,并采用Coats-Redfern法确定混合燃烧的动力学参数。分析菌渣掺混比和粒径对燃烧过程的影响,阐明菌渣与煤混合燃烧的可能以及超细化燃烧的优势。结果表明:抗生素菌渣与煤混合燃烧主要包括3个阶段,添加菌渣能明显改善煤的燃烧特性。随着菌渣掺混比例的增加,着火温度、燃尽温度呈现降低的趋势。超细、非超细混合燃烧燃尽特性指数在菌渣掺混比为30%时最高,分别为5.82×10^(-3)、5.49×10^(-3)。超细混合燃烧活化能均低于非超细混合燃烧,说明超细化燃烧有利于降低活化能。超细、非超细混合燃烧活化能E和指前因子A之间均存在动力学补偿效应。

猪圆环病毒2型ORF4基因编码蛋白的体外表达

为了探讨猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF4基因结构及其所编码蛋白在PK15细胞中的表达特性,以PCV-2杭州株病毒DNA为模板进行PCR,结果扩增出了ORF4基因,并分别构建了pGEX-4T-1-ORF4原核表达载体和pEGFP-C2-ORF4真核表达载体。序列分析、SDS-PAGE分析和Western-blot检测表明,PCV-2 ORF4基因长180 bp,共编码60个氨基酸;其编码蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式存在,分子质量大小约为6.685 ku。真核PK15细胞的转染试验显示,ORF4重组蛋白在PK15细胞的细胞核和细胞浆中均有表达,但对其有一定的毒性。

添加剂对煤粉-污泥混合燃烧特性的影响及动力学

采用热重分析法考察污泥、煤粉以及两者混合样品的燃烧特性,通过着火温度(Ti)、燃尽温度(Tb)以及综合燃烧特性指数(S)的变化,进一步研究添加剂对污泥-煤粉混合燃烧特性的影响,并探讨催化燃烧机理。结果表明:添加污泥能够降低煤粉的Ti,加速煤粉热解燃烧,改善煤粉的燃烧性能;但当污泥掺混比>10%时,混合样品的最大失重速率降低,Tb升高,综合燃烧性能S变差。CaO,Na_2CO_3能够促进挥发分析出燃烧,并带动后续固定碳的燃烧,因此混合样品的燃烧速率提高,燃烧时间缩短,综合燃烧性能改善;MnO_2,Fe_2O_3对混合样品的无明显催化作用,且降低了混合样品的最大燃烧速率。同时,动力学分析表明添加CaO,Na_2CO_3能够减小燃烧体系的活化能,而添加MnO_2和Fe_2O_3对混合样品的表观活化能无明显影响。

热解温度对土霉素菌渣焦炭化学性质的影响

研究了热解温度对土霉素菌渣化学性质的影响.采用电子自旋共振(ESR)波谱、X射线光电子能谱(XPS)和碳-13核磁共振(13C NMR)波谱分析了土霉素菌渣及热解焦碳中自由基、碳官能团的变化.结果表明,土霉素菌渣中含有大量自由基,自由基浓度随热解温度的升高显著变化.热解温度为320℃时,焦碳中自由基浓度最高,为1.239×10^(19)spins/g.热解过程中,随着挥发分分解析出、缩聚反应加剧,土霉素菌渣及其热解焦碳中的自由基由含氧自由基、烃基自由基、含氮自由基向芳香碳自由基转化.土霉素菌渣的碳结构在热解中发生明显改变,甲氧基CH_3—O—、脂肪族C—C键、脂肪族C—O键以及羰基(C=O)基团断键,产生大量的芳香族C—C键、芳香族C—O键.热解温度为600℃时,焦碳中芳香族碳官能团(芳香族C—H、C—C、C—O键)的比例达到94.14%.

土壤芽孢杆菌产胞外聚合物对Pb^(2+)吸附特性研究

根据与细菌菌体结合的紧密程度,胞外聚合物(EPS)可以分为粘液层EPS(S-EPS)、松散附着EPS(LB-EPS)、紧密附着EPS(TB-EPS),以土壤芽孢杆菌作为实验菌株,研究了各层EPS在不同温度、pH值条件下对Pb^(2+)的吸附特性,建立了EPS的吸附动力学模型和吸附等温线模型,并采用扫描电子显微镜(SEM)观察各层EPS吸附Pb^(2+)前后的表观形态的变化.当吸附温度为35℃、pH值为5.5时,S-EPS、LB-EPS、TB-EPS对Pb^(2+)的吸附量分别为91.35、100.61和90.28mg/g,表明LB-EPS对Pb^(2+)的吸附能力更强.各层EPS吸附Pb^(2+)的吸附动力学模型和吸附等温线模型均符合准二级动力学模型和Langmuir等温吸附模型,表明吸附过程分别受化学吸附机理控制和单分子层吸附控制,并通过Langmuir模型计算得到,S-EPS、LB-EPS、TB-EPS对Pb^(2+)的最大吸附量分别为124.224、127.389和119.760mg/g.同时,扫描电镜结果表明吸附前后各层EPS表观形态均差异明显,其中LB-EPS呈肺泡状,具有更大的比表面积,因此更多的Pb^(2+)吸附在其表面.

图文式术前健康教育在慢性鼻窦炎手术患者中的应用评价

目的探讨图文式健康教育对慢性鼻窦炎术前手术患者的影响,为临床实践提供依据。方法选取南京军区总医院耳鼻喉科2012年1—12月住院治疗的120例慢性鼻窦炎患者,按照入院时间随机分为对照组和观察组,每组60例,观察组采取图文式健康教育,对照组采取常规口头健康教育,在患者在入院时和术前进行自填式问卷调查。结果干预后,观察组患者的平均住院天数(6.52±1.31)d、平均住院费用(7317±342)元,均低于对照组(P<0.05),观察组患者术后并发症护理方法 (78.33%)、出院后的合理服药(86.67%)、复查时间(83.33%)、日常预防(78.33%)、合理饮食(81.67%)、健康心理(76.67%)等知识知晓率均高于对照组(P<0.01),观察组患者术前焦虑得分为(30.14±0.65)分低于入院时及对照组得分(P<0.01)。结论采用图文式健康教育可以降低术前患者的焦虑状况,缩短患者的住院天数、降低患者的住院费用,提高患者的疾病相关知识,值得临床推荐。

不同粒度CuO及与乙基黄原酸钾复合污染对土壤脲酶和微生物多样性的影响

纳米氧化铜不同于常规的氧化铜,纳米氧化铜的尺寸小,比表面积大,对生态环境存在潜在危害.本次通过向土壤中加入不同比例的纳米氧化铜(N CuO)和微米氧化铜(M Cu0)(0,50,200,800,1600mg/kg干土)观察它们对土壤脲酶活性和細菌群落的影响.同吋,进一步研究了N CuO和M CuO分別与乙基黄原酸钾(PEX)复合污染对土壤微生物的影响.N CuO较M CuO对脲酶活性有更强的抑制作用,只有M CuO浓度为1600mg/kg对脲酶的影响较明显.N CuO对脲酶活性的抑制可能与破坏细菌的細胞膜或刺激细菌产生活性氧,造成細菌細胞的衰退有关,N CuO对细菌群落结构的影响也较大.N CuO与PEX复合污染加剧了N CuO对土壤微生物的毒性,使脲酶的活性大幅度降低,细菌的群落结构也发生了较大的变化.N CuO及其复合污染对土壤微生物的作用机制需进一歩研究.通过比较研究N CuO和M CuO的生态毒性,纳米颗粒的生态毒性更需要引起足够的重视.

应用羟甲唑啉鼻喷剂观察鼻阻塞对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者的影响

目的探讨羟甲唑啉鼻喷剂对伴鼻阻塞的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者的影响,明确鼻阻塞在OSAHS发病中的意义。方法 53例存在鼻阻塞性病变的OSAHS患者,采用鼻声反射比较羟甲唑啉喷雾鼻腔前、后的差异性,PSG监测比较羟甲唑啉喷雾鼻腔前、后的主要指标差异。结果伴鼻阻塞的OSAHS患者羟甲唑啉喷雾鼻腔前、后鼻声反射检测指标:鼻腔最小横截面积(nasal minimal cross-sectional area,NMCA)和鼻阻力(nasal airway resistance,NAR),包括NMCA(L)、NMCA(R)、NAR(L)、NAR(R),差异有显著统计学意义,PSG监测指标中最长呼吸暂停时间、平均脉搏血氧饱和度差异有统计学意义,AHI、最低动脉血氧饱和度差异无统计学意义。结论羟甲唑啉鼻喷剂对伴鼻阻塞的OSAHS患者有一定疗效,证实鼻阻塞在OSAHS发病中起一定作用;对存在鼻阻塞性病变的OSAHS患者,鼻通气手术应纳入整个OSAHS治疗计划中。

合作性学习在网络化护理技能考核中的应用

目的护理技能考核方法单一,国内外尚无较好的护理技能考核方法。研究合作性学习在网络化护理技能考核中的应用效果,探讨更加合理的护理技能考核办法。方法在文献分析、专家咨询的基础上,对648名参加护理技能考核的护士分别采用普通网络化护理技能考核和合作性学习网络化护理考核,考核结束调查合作性网络化考试与普通网络化考试的优缺点,并对调查结果进行分析。结果合作性网络化考试形式更受欢迎,相比于普通网络化考试可减轻考试压力,体现团队合作,提高掌握知识点的广度和深度,但不能完全体现个体水平。结论合作性学习在网络化护理技能考核中的应用可显著提高临床护理人员的团队协作能力,节约考核成本,值得推广应用。

肾移植受者肺部侵袭性真菌感染的诊治经验

目的总结肾移植后肺部侵袭性真菌感染的诊断和治疗经验。方法回顾分析昆明医科大学第一附属医院2012年1月-2015年12月期间诊治的36例肾移植术后侵袭性真菌感染患者的临床资料。结果 26例患者感染发生在术后6月之内,10例患者发生在术后6月以上,并发上消化道出血1例,死亡1例,使用呼吸机辅助呼吸2例,调整或停用免疫抑制剂,采用综合治疗方案,其中治愈35例患者。结论肾移植术后肺部侵袭性真菌感染多发生在术后6月内,需采用综合治疗方案,联合使用抗真菌药物,及时调整免疫抑制方案,加强全身支持治疗等是救治成功的关键。

脂肪肝影响因素与防控措施的研究进展

脂肪肝作为临床常见疾病之一,其发病率逐年递增,因此受到学界的广泛重视。就有关资料显示,多数患者均缺乏体育锻炼和无规范的生活作息习惯,并且饮食以高脂食物为主,加上工作劳累等因素,显著提高了脂肪肝的发病率。本组探究则通过对脂肪肝的临床资料进行比较分析,从而分析造成脂肪肝的影响因素,进而提出具有针对性的防控措施,以此为临床治疗提供有效依据。而且随着科学研究的进一步深入,相信脂肪肝会得到更为科学、有效的预防及质量,以全面提高人口素质。

1例经鼻内镜鼻窦眼眶金属异物取出术患者的护理

对1例右侧鼻窦眼眶金属异物患者经鼻内镜鼻窦手术取出异物。结果术后1周,患者复查视力无明显改善,内镜检查双侧鼻腔通气良好,伤愈出院。提示术前准确定位,详细地给患者及其家属介绍病情,术后密切观察鼻腔渗血,做好气道湿化及口腔护理,可降低患者因失明所致的焦虑,促进患者康复。

骨髓间充质干细胞在肝纤维化中的作用

探讨骨髓间充质干细胞在肝纤维化中的作用。骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)在不同诱导条件下可分化成软骨、脂肪、神经等多种细胞,易分离,遗传背景相对稳定,可在体外大量扩增,体内植入反应较弱,为肝硬化的治疗开辟了新的途径,随着BM-MSCs定向分化条件和纯化技术等研究的不断深入,BM-MSCs作为基因和细胞治疗将在临床安全有效的应用。本组探究则通过对骨髓间充质干细胞的临床应用价值进行简要分析,以此为提高肝脏疾病临床治疗效果提供有效依据。

个人所得税的收入调节功能分析

个人所得税的重要功效之一是调理收入分派、缩小贫富差距。这有助于社会安定团结、提高国民的生活水平,以及促进市场经济的可持续性发展。目前我国的收入差别相对较大,中低收入者已成为个人所得税的纳税主体,这对靠国民消费拉动内需的经济手段的实行造成了一定的阻力,个人所得税的法律制度和立法思想仍有待完善。本文将从不同的个体、收入阶层、时间变化和不同地区之间,以及国外个人所得税情况进行对比,分析个人所得税对收入调节的影响。

传染性支气管炎病毒S1蛋白在Vero细胞的表达与分布

将传染性支气管炎病毒(IBV)ZJ971 S1基因亚克隆到绿色荧光蛋白(GFP)表达载体pEGFP-C2中,成功构建重组表达质粒pEGFP-ZJ971-S1。重组质粒在脂质体的介导下转染Vero细胞,借助荧光显微镜在转染后4h观察到S1-GFP融合蛋白的瞬时表达。免疫细胞化学染色(ICC)结果显示,抗ZJ971 S1D蛋白单克隆抗体和鸡抗IBV ZJ971全病毒血清特异性识别了S1基因转染细胞,表明S1蛋白在Vero细胞中得到有效表达。荧光显微镜观察和ICC均表明,S1表达蛋白主要分布在转染细胞的胞浆内,而胞核中未见分布,提示IBV S1蛋白内可能存在与病毒装配相关的细胞定位信号。