miR-148a-3p对软骨细胞炎性和凋亡的影响及其机制

目的研究miR-148a-3p对软骨细胞炎症因子、细胞凋亡和软骨细胞表型的影响。方法2周龄大耳兔处死后提取原代软骨细胞。为了探究炎症对软骨细胞相关标志物及其胞内miR-148a-3p表达水平的影响,建立IL-1β-诱导的OA细胞模型,软骨细胞分为control组和IL-1β组。为了探究miR-148a-3p对软骨细胞相关标志物及细胞凋亡相关因子表达水平的影响,软骨细胞分为blank组、IL-1β组、IL-1β+NC组、IL-1β+mimics组、IL-1β+inhibitor组。qRT-PCR检测IL-1β、SOX9、COL-Ⅱ、ACAN、MMP-13 mRNA水平;采用免疫蛋白印迹法检测软骨相关标志物MMP-13、COL-Ⅱ、ACAN、SOX9以及细胞凋亡相关因子Bax、Caspase-3、Bcl-2蛋白的表达水平。采用ELISA法检测细胞上清中IL-6和IL-10的含量。结果①与control组比较,IL-1β组细胞MMP-13蛋白表达升高(P<0.05),COL-Ⅱ和ACAN蛋白表达降低(P<0.05);miR-148a-3p表达水平升高(P<0.0001);②与blank组比较,IL-1β组细胞上清液IL-6水平升高,IL-10水平降低(P<0.05);MMP-13 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),COL-Ⅱ和ACAN mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与IL-1β组比较,IL-1β+mimics组细胞上清液IL-6水平、MMP-13 mRNA和蛋白、Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05);上清液IL-10水平、SOX9、COL-Ⅱ、ACAN mRNA和蛋白,以及Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。IL-1β+inhibitor组和IL-1β组间上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-1β诱导体外软骨细胞中miR-148a-3p表达上调,可导致软骨细胞炎症性改变、细胞凋亡、软骨细胞表型改变和细胞外基质(ECM)降解。

双侧经皮椎体强化术中不同骨水泥填充量及分布形态的有限元分析

背景:采用双侧经皮椎体强化治疗骨质疏松性椎体压缩骨折中,作者发现当骨水泥注射总量达4 mL及以上时会在X射线片上呈现不同的分布形态,然而关于骨水泥分布形态对骨折椎体生物力学特性的影响鲜有报道。目的:利用有限元法进一步探讨骨水泥填充量及分布形态对骨折椎体生物力学的影响。方法:建立L_1-L_3骨质疏松有限元模型,在L_2节段模拟椎体压缩骨折,在骨质疏松性椎体压缩骨折模型上分别模拟4 mL及6 mL骨水泥注入量及双侧部分融合(FH型)、完全融合(FO型)、对称分离(SA型)、非对称分离(SN型)4种骨水泥分布形态,共获得9组模型。在相同边界条件下进行三维有限元求解,比较L_2骨折椎体的应力及位移。结果与结论:(1)9组模型的最大应力均集中于L_2骨折区域,各骨水泥填充骨折模型的L_2最大应力和最大位移均小于无骨水泥填充骨折模型,说明骨水泥填充治疗骨质疏松性椎体压缩骨折有效;(2)与4 mL骨水泥填充相比,6 mL骨水泥填充在提高骨折椎体稳定性的同时可显著降低骨折椎体应力,增强椎体强度;(3)在相同运动状态下,FH型组骨折椎体应力均为最小,其次为SA型组,该两组接近,FO型组骨折椎体应力最大,在侧弯动作中尤为明显,可能与骨水泥团块形状导致侧方应力集中有关;FH型组骨折椎体位移最小,FO型组骨折椎体位移最大;(4)结果显示,增加骨水泥注入剂量可以降低骨折椎体应力,提高稳定性,但会增加渗漏风险;双侧对称弥散分布骨水泥(FH型、SA型)在恢复椎体强度及稳定性上均优于完全融合、非对称分离骨水泥,因此,临床上行双侧经皮椎体强化治疗骨质疏松性椎体压缩骨折时,首先保证双侧对称弥散分布,优先推荐双侧部分融合型分布,可获得合适的应力刺激及较好的稳定性。

3D打印骨折外固定支具高分子材料的研究进展

骨折固定是治疗骨折的重要步骤,固定材料的选择是其关键。近年来随着3D打印技术的发展,在骨折外固定支具领域,研究人员对用于3D打印的高分子材料的物理性能和化学性能、可降解性、生物相容性及综合改性等方面进行了大量研究,并在材料选择对最终成品支具各项指标的影响方面取得了重要的进展和成果,本文就近年来用于3D打印骨折外固定支具的几种常用高分子材料及其改性复合物的研究进展进行综述。

两组入路全髋关节置换术治疗老年股骨颈骨折的疗效对比

目的比较后外侧入路与直接前入路的全髋关节置换术治疗老年GardenⅢ型股骨颈骨折的临床疗效。方法回顾性分析2022年1月至2023年1月武汉市第三医院收治的102例老年GardenⅢ型股骨颈骨折患者资料,均行全髋关节置换术。其中直接前入路组48例,男27例,女21例;年龄65~81岁,平均(70.34±5.92)岁。后外侧入路组54例,男24例,女30例;年龄65~80岁,平均(69.27±4.96)岁。比较两组患者疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、Harris髋关节功能评分及并发症发生率。结果两组切口长度、术中出血量、手术时间及住院时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。患者术后均随访1年以上。两组术前及术后3 d、7 d的VAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组术前及术后3个月、1年的Harris评分比较差异无统计学意义(P>0.05);术后6周直接前入路组患者Harris评分优于后外侧入路组(P<0.05)。两组各有1例患者术后发生并发症,并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论后外侧入路与直接前入路的全髋关节置换术治疗老年GardenⅢ型股骨颈骨折,直接前入路患者术后6周Harris髋关节功能更优,但术后更长时间两种入路方式疗效相当。

双棒桥接组合内固定系统治疗锁骨中段骨折的疗效

目的探讨双棒桥接组合内固定系统治疗锁骨中段骨折的疗效。方法将63例锁骨中段骨折患者按照内固定方式不同分为观察组(采用双棒桥接组合内固定系统治疗,29例)和对照组(采用锁定单钢板内固定治疗,34例)。记录两组术中出血量、手术时间、骨折愈合时间、术后并发症发生情况及肩关节活动度。采用Constant-Murley评分评价肩关节功能恢复情况。结果患者均获得随访,时间12~18个月。术中出血量、手术时间观察组多(长)于对照组(P<0.01);骨折愈合时间观察组短于对照组(P<0.05)。术后并发症发生率两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。肩关节活动度、Constant-Murley评分:术后12周观察组均大于对照组(P<0.05);术后1年两组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论双棒桥接组合内固定系统治疗锁骨中段骨折固定强度大、稳定性高,可对骨折断端持续动态加压,促进骨折愈合,更利于患者早期进行康复锻炼及肩关节功能的恢复。

骨折愈合过程中胶原纤维类型分布的动态变化

目的 :寻找一种简便、快捷、灵敏的观察骨折愈合过程中胶原类型、分布动态变化的方法。方法 :在健康中国绵羊左跖骨中段制造一个 1cm长的骨缺损。分别在术后 1、 3、 6个月取材 ,苦味酸天狼星红染色 ,偏振光显微镜观察。结果 :术后 1个月 ,骨折局部Ⅲ型胶原纤维占大多数 ;术后 3个月 ,骨折处Ⅰ型胶原纤维明显增加 ,但排列尚未有序 ;术后 6个月 ,Ⅰ型胶原纤维增粗、增多 ,呈斜行螺旋状交叉排列。结论 :苦味酸天狼星红偏振光不仅能区分Ⅰ、Ⅲ型胶原的类型还能清晰地显示Ⅰ、Ⅲ型胶原的形态、分布和比例关系 ,具有操作简单、省时、花费少 ,而且特异性强、灵敏度高。

鹿瓜多肽注射液对骨折愈合过程中生长因子表达的影响

目的观察鹿瓜多肽注射液对骨折愈合过程中骨形态发生蛋白2(BMP-2)、转化生长因子(TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGF)等生长因子表达的影响,了解鹿瓜多肽注射液促进骨折愈合的分子生物学机制。方法60只新西兰大白兔随机分为三组,制成双侧桡骨中段3mm骨缺损,三组术后每日分别予以肌肉注射0.1ml/kg、0.2ml/kg鹿瓜多肽注射液和0.2ml/kg生理盐水。术后1、2、4、6周分批处死动物,行组织学免疫组织化学观察。结果①不同剂量的鹿瓜多肽注射液均能使骨折处的BMP-2、TGF-β1和VEGF表达量在各时间段较生理盐水组明显增高(P<0.05);②随着使用剂量的增加,BMP-2、TGF-β1和VEGF的表达量也增加,且表达的高峰期提早。结论鹿瓜多肽注射液能调节骨折愈合过程中BMP-2、TGF-β1和VEGF的合成和分泌,进而调节骨原细胞的增殖和成骨细胞、软骨细胞的分化。

间充质干细胞体内成骨的实验研究

[目的]探讨间充质干细胞在体内的成骨能力。[方法]从羊髂嵴处抽取10～15ml骨髓组织，用Pereoll分离液按梯度离心法分离出间充质干细胞，培养、增殖后种植在多孔β-磷酸三钙上，构建组织工程化骨，植入8只羊的左后肢跖骨缺损区（长21mm）作为实验组；单纯植入多孔β-磷酸三钙陶瓷材料的8只羊作为对照组；分别在术后6、12、24周处死动物行放射学、组织学和生物力学检测。[结果]放射学和组织学检测，术后6周实验组即可见有新骨生成，对照组则无明显新骨生成；骨缺损部位新生骨样组织、编织骨和板状骨出现的时间实验组也都较对照组早，并且不经软骨介导即能直接成骨，而对照组从两端以“爬行替代”方式成骨。术后24周，放射学和生物力学检测显示实验组骨缺损几乎完全修复，对照组只有部分愈合。[结论]间充质干细胞不仅在体外具有良好的增殖能力，回植人体内后仍然具有良好的成骨能力，不需经过软骨过程就能直接形成新骨，显示了间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞良好的应用前景。

松梅乐注射液对腰椎退行性滑脱症植骨融合疗效的影响

目的探讨松梅乐注射液对腰椎退行性滑脱症植骨融合疗效的影响。方法30例腰椎滑脱患者分为三组,分别在术前、术后应用或不应用松梅乐注射液,术后12个月观察患者的主观感觉、骨质密度及植骨融合率。结果随访3个月～10年,平均12.5个月。X线显示A、B组植骨均融合,C组有2例未融合,融合率80.0%。A、B组骨质密度明显高于C组,差异有显著性。结论松梅乐注射液能有效提高植骨融合率,增强骨密度,提高骨容量,进而提高了腰椎退行性滑脱症的手术疗效。

组织工程化骨构建及其修复羊跖骨标准性骨缺损的放射学评估

目的:从放射学角度探讨用多孔β-磷酸三钙和自体骨髓间充质干细胞(MSC)复合植入绵羊体内修复标准性骨缺损的效果.方法:从羊髂嵴处抽取10～15ml骨髓组织,用Percoll分离液按梯度离心法分离出间充质干细胞,培养、增殖后种植在多孔β-磷酸三钙上,构建组织工程化骨,植入8只羊的左后肢跖骨缺损区(21mm)作为实验组:单纯植入多孔β-磷酸三钙陶瓷材料的8只羊作为对照组:另取3只羊在同样部位制造同样大小的骨缺损,但不做处理,作为空白对照组.分别在术后即刻及1、3、6个月摄片观察,用放射影像学评分和图像分析X线阻射影比较骨缺损的修复情况.空白对照组6个月取材.结果:实验组骨缺损放射影像学评分以及新生骨痂的密度在1、3、6个月均优于对照组.空白组术后6个月骨缺损均无愈合.结论:多孔β-磷酸三钙和自体MSC复合植入羊体内,可使大节段骨缺损较快修复;放射学评分及骨缺损密度测量是一种简便易行的观察骨缺损修复情况的方法.

成骨细胞特异性转录因子Cbfa1重组腺病毒质粒的构建与鉴定

目的:构建成骨细胞特异性转录因子——核心结合因子α1(Cbfa1)重组腺病毒载体,为后期应用Cbfa1基因治疗股骨头坏死、骨折和骨缺损等疾病奠定基础。方法:以目的基因Cbfa1全长cDNA为模板进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pShuttle-CMV载体的相应酶切位点,获得目的基因载体pShuttle-CMV-Cbfa1,在大肠杆菌BJ5183中和pAdEasy-1同源重组,筛选阳性克隆,经酶切、PCR及测序鉴定,线性化后用脂质体法转染HEK293细胞进行包装、扩增,用报告基因GFP对病毒滴度和感染效率进行监测,酚氯仿抽提纯化病毒,AdEasy1/Cbfa1感染间充质干细胞(MSC)后检测Cbfa1的表达。结果:测序、酶切及PCR证实Cbfa1基因重组腺病毒载体构建成功,AdEasy1/Cbfa1感染MSC后Cbfa1的表达显著升高。结论:构建了含Cbfa1基因的重组腺病毒载体,该基因能促进MSC向成骨细胞分化,预示其可作为治疗基因应用于股骨头坏死、骨折和骨缺损的治疗。

原子力显微镜观察间充质干细胞向成骨细胞系分化过程中的表征变化

目的 通过对骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcell,MSC)向成骨细胞系转化过程中表征变化进行观察 ,以期更全面地了解MSC在体外的成骨分化过程。方法 将羊MSC进行体外诱导分化 ,进行组织学、免疫组化、X线衍射分析等检测及原子力显微镜观察。结果 诱导后的MSC碱性磷酸酶染色阳性率达 90 %以上 ,Ⅰ型胶原免疫组化和钙结节染色均呈阳性 ;诱导后细胞形成的结节样物中主要由羟基磷灰石组成 ;原子力显微镜观察见诱导后的MSC具有成熟的成骨细胞特性。结论 体外培养的MSC能被诱导成骨 ;运用原子力显微镜可以清晰地看到MSC在向成骨细胞分化过程中表征的变化。

骨组织工程支架材料在临床中的应用

应用于临床的骨组织工程支架材料有何特点？ 骨组织工程包括3个关键因素：信号分子、支架材料和种子细胞。其中支架材料的选择是骨组织工程的核心问题，而应用于临床是骨组织工程的最终目的。理想的骨组织工程支架材料应具备以下条件：①良好的组织相容性和良好的表面活性，有利于细胞的黏附，并为细胞在其表面生长、增殖和基质分泌提供良好的微环境。②具有可塑性，

腰椎退行性滑脱不同治疗方法的疗效分析

目的 探讨五种不同方法治疗腰椎退行性滑脱症的疗效。方法 6 3例患者中采用保守治疗 (A) 3例 ,椎管减压术 (B) 2 5例 ,椎管减压加Hartshill框架复位固定“H”型植骨融合术 (C) 12例 ,椎管减压加Dick钉复位固定横突间植骨融合术 (D) 10例 ,椎管减压加Steffee钢板复位固定椎体间植骨融合术 (E) 13例。结果 随访 3个月至 10年 ,平均 12 5个月 ,根据疗效评定标准 ,A、B、C、D、E五种方法的优良率分别为 6 6 7% ,92 0 % ,41 7% ,70 0 %和 92 3%。结论 保守治疗对大多数患者有效 ;稳定型患者在彻底减压的基础上应尽可能地保留脊柱后柱的稳定结构 ;

偏振光显微观察不同胶原纤维在骨折愈合过程中的动态变化(英文)

背景:天狼星红是一种强酸性阴离子染料,染色后不褪色且具特异性,是目前胶原染色的最佳染料。胶原作为细胞外基质的主要成分之一,具有许多特殊的生理功能,机体通过胶原的合成和改建使骨折修复得以完善。目的:采用苦味酸天狼星红偏振光显微观察骨折愈合过程各型胶原的比例、分布的动态变化过程。设计:观察对比实验。单位:武汉大学人民医院骨外科,天津医院创伤骨科,北京大学医学部积水潭医院创伤骨科,解放军军事医学科学院基础医学研究所组织工程中心。材料:实验于2002-03/2003-09在解放军军事医学科学院基础医学研究所组织工程中心完成。选取健康成年中国绵羊3只,雄性,体质量25～35kg。方法:全部动物麻醉消毒后在跖骨干中段截取1cm长的骨缺损,骨折端用6孔加压钢板固定。术后1,3,6个月取骨折部位标本,乙二胺四乙酸脱钙制备切片,苦味酸天狼星红染色,偏振光显微镜观察胶原的类型和分布。主要观察指标:骨折愈合不同时期骨缺损区胶原的类型及其分布。结果:实验纳入3只绵羊,全部进入结果分析。①术后不同胶原纤维偏振光显微镜下的形态学表现:Ⅰ型胶原纤维紧密排列,显示很强的双折光性,呈黄色、橙色和红色的粗纤维;Ⅱ型胶原纤维显示弱的双折光,呈各种不同颜色的疏松网状;Ⅲ型胶原纤维疏网状,显示弱的双折光,呈绿色的细纤维。②术后不同胶原纤维偏振光显微镜下的数量观察:术后1个月,骨折处红色和黄色的Ⅰ型胶原极少见,绿色的Ⅲ型胶原纤维占大多数,胶原排列杂乱;术后3个月,骨折处红色和黄色的Ⅰ型胶原纤维明显增加,Ⅲ型胶原纤维的比例下降,胶原纤维的排列方向开始向有序的方向发展;术后6个月,粗大而鲜艳的红黄色Ⅰ型胶原成分占据了绝大部分,细小的绿色Ⅲ型胶原纤维的数量急剧减少,呈现明显的斜行螺旋性交叉的三维排列。结论:苦味酸天狼星红偏振光显微观察不仅能区分骨折局部Ⅰ、Ⅲ型胶原的类型,还可以清晰显示Ⅰ、Ⅲ型胶原的形态、分布和比例关系,具有操作简便、特异性强、灵敏度高的特点。

模糊集重心法在综合评价中的应用

模糊综合评价是各类宏观管理的重要手段 ,但是实践中存在下述困难 :1)按决策集最大隶属度定级常和采用其他方法的排序结果产生矛盾 ,说明现有的数学模型存在缺陷 ;2 )模糊数学等级划分的模糊性和人们的习惯认识上的绝对性发生冲突 ,如何取得统一 ?模糊决策集重心定级法可以从根本上解决这些问题。

顾客满意度理论及其在住宅市场中的应用

顾客满意度是近年国外迅速发展、广泛流行的新质量管理理论。将住宅金融和政府住宅政策引入模型,使之由评价住宅品质扩展为分析住宅市场现状并预测其发展前景,是有创意的应用突破。在河南洛阳市进行了一次抽样调查,证明了其可行性,初步结果说明用顾客满意度模型研究一些与群众评价有关的社会经济问题是卓有成效的。

工业产品质量的宏观综合评价

本文根据新的目标管理体系提出了科学的质量评价方法。分级和排序是解决这一问题的关键。采用这种方法可以得到地区以至全国产品质量状况的清晰图景，计算结果表明模糊算法不仅简明而且实用。

北京住户满意度调查

采用顾客满意度理论及其软件分析了北京居民的住宅需求和商品房的质量状况。针对住宅的特有性质,对一般的顾客满意度模型进行了改造,引入住房金融及政府住宅政策因素作为满意度指数的可测变量。2002～2003年进行了两次住户满意度调查,抽样调查结果指出了住宅品质的改进方向,并且阐明了北京住宅市场的现实和潜在需求。