孟德尔随机化在糖尿病视网膜病变研究中的应用与展望

糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病患者常见的眼部并发症,也是导致成人失明的主要原因之一。由于DR的复杂病理机制及其与其他代谢紊乱的紧密联系,探索其病因并开发有效的预防和治疗手段成为公共卫生领域的紧迫需求。孟德尔随机化作为一种新兴的因果推断方法,通过利用遗传变异来推断暴露与疾病之间的因果关系,能够有效控制混杂因素和逆因果关系的影响。本述评旨在介绍孟德尔随机化及其在DR病因探索中的应用和研究进展,同时分析当前研究的局限性与未来发展方向。

糖尿病氧化应激环境中α-Klotho对巨噬细胞-血管内皮细胞串扰的影响

目的:探讨糖尿病氧化应激环境中过表达α-Klotho(KL)的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增生、迁移、管腔形成以及紧密连接的影响。方法:将RAW264.7细胞分为对照组、4-羟壬二酸酯(4HNE)组、4HNE+KL组,采用免疫荧光实验检测RAW264.7细胞F4/80的表达。制备3组细胞的条件培养基用于培养HUVECs,分为M-NC组、M-4HNE组和M-4HNE+KL组。采用CCK8实验检测血管内皮细胞增生,采用划痕实验和Transwell实验检测迁移,采用管腔形成实验检测管腔形成,采用Western blot实验检测闭合蛋白5(Claudin 5)、咬合蛋白(Occludin)、带状闭合蛋白1(ZO 1)表达水平。结果:免疫荧光实验结果显示,4HNE组RAW264.7细胞F4/80荧光强度较对照组明显增强,而4HNE+KL组F4/80荧光强度较4HNE组明显减弱(均P<0.05)。CCK8实验结果显示,相比于M-NC组,M-4HNE组HUVECs增生显著增加,而M-4HNE+KL组HUVECs增生较M-4HNE组显著下降(均P<0.01)。划痕实验和Transwell实验结果显示,相比于M-NC组,M-4HNE组HUVECs迁移显著增强,而M-4HNE+KL组HUVECs迁移较M-4HNE组显著减弱(均P<0.01)。管腔形成实验结果显示,相比于M-NC组,M-4HNE组HUVECs管腔数显著增加,而M-4HNE+KL组管腔数较M-4HNE组显著下降(均P<0.01)。Western blot实验结果显示,相比于M-NC组,M-4HNE组HUVECs中Claudin 5、Occludin、ZO 1蛋白的相对表达量明显减少,而M-4HNE+KL组Claudin 5、Occludin、ZO 1蛋白的相对表达量较M-4HNE组明显增加(均P<0.01)。结论:KL通过改变糖尿病氧化应激环境中巨噬细胞激活状态抑制了HUVECs的增生、迁移、管腔形成,并增强了HUVECs的紧密连接。

THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF抑制炎症过程中关键基因的鉴别

目的鉴别人单核细胞白血病细胞THP1过表达腺病毒介导的色素上皮衍生因子(PEDF)抑制炎症过程中的关键基因。方法对THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF进行蛋白质组学分析。将THP1细胞分为GFP组和PEDF组,分别用GFP腺病毒和PEDF腺病毒感染细胞;将THP1细胞分为甘露醇组、高糖组、高糖+GFP组和高糖+PEDF组,分别用D-甘露醇、D-无水葡萄糖、GFP腺病毒和PEDF腺病毒培养4、4、3和3 d;将Pedf^(-/-)小鼠采用随机数表法分为Pedf^(-/-)组和Pedf^(-/-)糖尿病组,每组12只,另取10只C57BL/6小鼠为对照组,取小鼠视网膜进行实验。采用实时荧光定量PCR验证差异表达基因(DEGs)的mRNA在视网膜组织和THP1细胞系中的表达水平。与GSE5504数据集进行DEGs交集,使用String数据库构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,Cytoscape软件及MCODE应用程序提取PPI网络模块,与Set1数据集取交集并找到关键基因。采用Western blot在THP1细胞和Pedf^(-/-)小鼠中验证关键基因的表达水平。结果通过蛋白质组学和生物信息学分析,筛选出Set1数据集中的105个差异蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,PEDF组细胞中ARF5、TCF25和KCTD9 mRNA相对表达量明显高于GFP组,RNPS1、CSF1R、OGA、IBA57和MGST2 mRNA相对表达量明显低于GFP组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。对照组、Pedf^(-/-)组和Pedf^(-/-)糖尿病组视网膜组织中表达显著下调的TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA和表达显著上调的CSF1R、RNPS1、IBA57 mRNA相对表达量总体比较,差异均有统计学意义(F=64.057、27.561、37.179、65.757、44.024、34.248,均P<0.001);与对照组相比,Pedf^(-/-)组TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);Pedf^(-/-)糖尿病组TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1、IBA57 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与Pedf^(-/-)组相比,Pedf^(-/-)糖尿病组TCF25 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1和IBA57 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Set1数据集与GSE5504数据集交集后得到20个差异蛋白,主要富集于基因表达的正向调控、ERK1和ERK2级联的正向调节、胰岛素分泌的正向调节参与细胞对葡萄糖刺激的反应和抗原加工与递呈通路上。通过构建PPI网络和Cytoscape软件中MCODE插件筛选出关键基因CSF 1 R。Western blot结果显示,高糖组和高糖+GFP组中细胞CSF1R相对表达量分别为1.961±0.085和1.000±0.069,分别高于甘露醇组的1.000±0.072和高糖+PEDF组的0.469±0.079,差异均有统计学意义(t=14.940、8.765,均P<0.01);Pedf^(-/-)糖尿病组中视网膜CSF1R相对表达量为1.633±0.192,高于Pedf^(-/-)组的1.000±0.050,差异有统计学意义(t=5.537,P<0.01)。结论CSF 1 R可能为THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF抑制炎症过程中的关键基因和治疗靶点。

大语言模型在糖尿病视网膜病变患者健康教育中的应用

目的评价国内开源大语言模型(LLM)回答糖尿病视网膜病变(DR)患者常见诊疗问题时的准确性、完整性及可重复性,探讨其作为DR患者健康教育智能助手的可行性。方法收集41个与DR诊疗相关的问题及答案,问题涉及危险因素、筛查及检查、症状及分期、疾病诊断、治疗及预后5个方面。将所有问题采用“新对话”形式重复输入2次到LLM,记录所有答案。由3位高年资眼底病医师独立对回答进行评价,准确性评价采用1~6级李克特量表,完整性和重复性评价采用1~3级李克特量表。对于每个应答,评估者须在LLM回答和人工答案中给出推荐。选择5个研究者公认难度较低的题目对文心一言3.5、通义千问和Kimi chat 3个开源LLM进行测评,选择综合最优的LLM在完整题库中进一步评价。结果在3个LLM中,Kimi chat表现最佳,5个问题中准确性6分、完整性3分和重复性3分的比例依次为90%、90%和100%。在全部题目中,人工回复字数为106(70,202)个,明显少于Kimi chat的应答字数505(386,600)个,差异有统计学意义(Z=-7.866,P<0.001)。Kimi chat应答字数与准确性评分无明显相关性(r_(s)=-0.044,P=0.492),与完整性评分呈正相关(r_(s)=0.239,P<0.001)。3位评估者对2次应答准确性和完整性评分的组内相关系数均高于0.700,其中重复性评分的一致性最高,为0.853;其次为第1次回答的完整性,为0.771。应答准确性≥5分的比例为87.0%(214/246),完整性≥2分的比例为98.0%(241/246),2次回答间重复性在70%以上的比例为78.5%(193/246)。Kimi chat回答疾病定义、分期、筛查频率、常见危险因素等疾病基础性问题时表现优异,但在涉及治疗选择等需要临床医师专业判断的问题上表现欠佳。评估者推荐Kimi chat回答的比例为69.5%(171/246),未选择的原因包括缺少特征性答案、包含过多无关信息、对医疗专业度要求较高的问题回答欠缺等。结论Kimi chat回答DR相关诊疗问题较详细且条理清晰,具有较高的准确性、完整性和可重复性。

玻璃体切割术联合视网膜下注射组织型纤溶酶原激活剂对黄斑下出血的疗效观察

目的观察玻璃体切割术(PPV)联合视网膜下注射组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)治疗黄斑下出血(SMH)的疗效。方法采用系列病例观察研究方法,纳入2022年2—11月于天津医科大学眼科医院确诊的SMH患者12例12眼,其中息肉样脉络膜血管病变(PCV)11例11眼,视网膜大动脉瘤1例1眼;男5例,女7例;年龄为56~78岁,平均(65.67±8.09)岁;人工晶状体眼2眼,合并白内障10眼;高血压9例,糖尿病2例。SMH持续时间为2~25 d,平均(14.67±8.03)d。患眼均行PPV联合视网膜下注射t-PA。术前和术后1、3、6个月,患眼均行最佳矫正视力(BCVA)、眼压、裂隙灯显微镜、间接检眼镜、光学相干断层扫描(OCT)以及超广角眼底成像检查。采用OCT测量中央视网膜厚度(CRT)。观察患者手术后眼部情况以及不良反应发生情况。结果患眼术前及术后1、3、6个月平均BCVA(LogMAR)分别为1.58±0.63、1.12±0.49、1.07±0.44和0.59±0.19,不同时间点患眼BCVA总体比较,差异有统计学意义(F=14.435,P<0.001),其中术后6个月患眼BCVA较术前明显提高,差异有统计学意义(P<0.001)。患眼术前及术后1、3、6个月平均CRT分别为(606.25±204.67)、(379.83±92.05)、(313.75±60.87)和(267.75±73.07)μm,不同时间点患眼CRT总体比较,差异有统计学意义(F=27.720,P<0.001),其中术后1、3、6个月患眼CRT较术前均明显变薄,差异均有统计学意义(均P<0.001)。1眼于术后3个月出现脉络膜上腔出血;随访期间6眼因PCV复发行玻璃体腔注射抗血管内皮生长因子(VEGF)药物,共注射给药16次。术后1、3、6个月内平均抗VEGF注射次数分别为(0.3±0.5)、(1.3±1.4)和(2.7±2.0)次。结论在SMH的治疗中,PPV联合视网膜下注射t-PA可提高患眼BCVA,降低CRT,减轻血凝块对视网膜的损伤,促进患眼术后早期视力恢复,是一种安全、有效的手术方式。

超声乳化、囊袋内人工晶状体植入联合玻璃体切割术治疗增殖性糖尿病视网膜病变

目的:评价晶状体超声乳化、囊袋内人工晶状体植入联合玻璃体切割术治疗增殖性糖尿病视网膜病变的临床效果。方法:回顾性分析了33例(41眼)行晶状体超声乳化、后房型人工晶状体植入、玻璃体切割联合手术治疗增殖性糖尿病视网膜病变患者的病程、视力及手术并发症等临床资料。结果:41眼均为囊袋内植入人工晶状体,后囊膜完整。41眼中36眼(88%)视力提高,视力>0.05者占73%(30/41),>0.2者占46%(19/41),平均随访时间9mo。31眼术前未接受过眼内激光治疗,术中行全视网膜光凝。5眼术后玻璃体再次出血,1眼术后视网膜脱离复发,其中4眼再次行玻璃体视网膜手术。结论:晶状体超声乳化、囊袋内人工晶状体植入联合玻璃体切割术治疗增殖性糖尿病视网膜病变是安全有效的,有利于保持血—房水屏障,减少术后虹膜红变,早期恢复患者视力,避免再次白内障手术或二期人工晶状体植入。

从VEGF在湿性年龄相关性黄斑变性发病过程中的作用机制看抗VEGF药物治疗

年龄相关性黄斑变性（AMD）的发病机制较复杂，其中湿性AMD对视力的威胁更为严重，其主要病理特征是黄斑区脉络膜的新生血管形成，血管内皮细胞生长因子（VEGF）在发病和新生血管的发展过程中发挥着重要作用。湿性AMD的物理治疗方法较多，但均无法改善患者的视力，近年来拮抗VEGF作用的药物疗法成为湿性AMD治疗的新途径。抗VEGF单克隆抗体是目前临床上应用较多的药物，能够消除新生血管，改善患者视力。针对VEGF其他环节的药物，如VEGF捕获剂、小分子干扰RNA及酪氨酸激酶抑制剂等，正处于试验阶段，其治疗效果值得期待。由于这些药物均为抗VEGF的制剂，因此充分了解VEGF在湿性AMD发病和发展过程中的作用机制有助于合理使用这些药物。

白内障摘出人工晶状体植入后眼内炎临床分析

目的探讨白内障术后眼内炎的发病原因及手术效果.方法回顾性分析2000年1月～2004年8月收治的白内障摘出联合人工晶状体植入术后眼内炎5例(5眼),其中3例为糖尿病.5例均行细菌培养及药敏实验,根据病情4例行玻璃体切除联合玻璃体腔抗生素注射,1例单纯玻璃体腔注药.结果本组5例中4例眼内炎细菌培养呈阳性:2例为表皮葡萄球菌,1例粪肠球菌,1例醋酸钙不动杆菌.5例眼内炎均得到控制,除1例外,4例恢复良好视功能.结论糖尿病患者白内障术后感染性眼内炎的发生机率较大,积极采取玻璃体切除联合玻璃体腔注药对恢复有用视力是必要的.白内障术后急性眼内炎预后较差.

重视高度近视合并闭角型青光眼

目前,国内外不同人种、不同地区的流行病学调查和临床研究均显示近视(尤其是高度近视)是青光眼独立于眼压之外的危险因素。虽然开角型青光眼是高度近视合并青光眼的主要类型,但是近些年却不断有高度近视合并闭角型青光眼的报道。本文对高度近视合并青光眼的类型以及高度近视合并闭角型青光眼的发病机制进行讨论分析,目的是提醒眼科医师在临床工作中重视高度近视合并闭角型青光眼,以免误诊漏诊。

重视糖尿病眼部并发症的诊断和治疗

糖尿病是糖代谢紊乱导致的全身性慢性疾病，高血糖、高血脂和高血压是糖尿病患者的主要特征，长期的高血糖环境引起人体组织和器官的微血管和大血管相关并发症，是目前全球劳动力人口致残率和致死率较高的疾病之一。糖尿病已经成为发展中国家严重的公共卫生问题，而糖尿病患者眼部并发症发病风险增加，发病率也逐年升高，成为不容忽视的致盲眼病。常见的糖尿病眼部并发症包括糖尿病视网膜病变（DR）、糖尿病性视神经病变（DN）、青光眼、白内障、糖尿病眼表疾病等，治疗棘手，因此糖尿病眼部并发症的预防、早期诊断和及时治疗是眼科医师面临的主要挑战。眼科医师在临床工作中应对糖尿病患者及其眼部并发症给予足够的重视，实时跟踪国内外关于糖尿病眼部并发症诊疗指南的更新和研究现状，对相关疾病做到早期发现、合理管理和及时治疗，降低糖尿病眼部并发症的致盲率和经济负担。

超声乳化人工晶状体植入术后泪膜和眼表结构的变化

目的观察晶状体超声乳化联合人工晶状体植入术后患眼的泪膜、眼表结构及眼干燥症发生的情况。方法选取我院住院的单纯老年性白内障20例(20眼),观察术前、术后2周、1月、2月的主诉、泪液分泌试验、泪膜破裂时间及角结膜荧光素染色。结果患者的主诉、泪液分泌试验、泪膜破裂时间在术前、术后2周、1月、2月均无统计学意义,角结膜荧光素染色术前、术后2周、1月、2月具有统计学意义。结论晶状体超声乳化联合人工晶状体植入术只会引起术后早期的轻微不适,不会加重或引起患者的眼干燥症状。

美国眼科学会《糖尿病视网膜病变临床指南》解读

世界糖尿病患病人数逐年升高,中国糖尿病的患病率居于首位。糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)作为糖尿病的重要微血管并发症,已经成为当今工作年龄人群中主要的致盲眼病之一,对社会和家庭带来了极大的负担。近年来,多项基础及临床研究都在进行DR发病及治疗的探讨。美国眼科学会于2019年发布了最新版DR临床指南,该版指南对上一版本指南进行了补充及修订,对DR的定义、流行病学、分类、检查以及诊断治疗等方面进行了详细的介绍。本文将对2019版指南进行全面的解读,以期规范眼科医师对DR的认识、诊断和治疗,从而更好地减轻患者家庭和社会负担。

应用Pentacam三维眼前节分析仪评价玻璃体切割联合白内障超声乳化术后人工晶状体在眼内的稳定性

目的采用Pentacam三维眼前节分析仪研究玻璃体切割联合白内障超声乳化术后前房深度(ACD)、人工晶状体(IOL)倾斜度及偏心度的变化情况,及不同玻璃体腔填充物对IOL在眼内稳定性的影响。方法采用临床前瞻性研究,对玻璃体视网膜疾病合并白内障患者42例46眼行1期玻璃体切割联合白内障超声乳化IOL(AcrySofSA60)植入术,根据眼底情况选择灌注液、惰性气体及硅油填充,采用Pentacam三维眼前节分析仪测量术后1周、1个月、3个月IOL的位置。结果手术前后不同时间点间ACD值的差异有统计学意义(F=64.239,P=0.000),术后各时间点ACD值均较术前增加(P<0.05),但术后3个月达到稳定。术后不同时间点间IOL偏心度差异有统计学意义(F=26.459,P=0.000),术后3个月硅油填充组与术后1周、1个月相比IOL偏心量均明显增加(P<0.05);不同玻璃体填充物组IOL偏心量的差异无统计学意义(F=2.282,P=0.114)。在术后各个随访时间点,IOL倾斜度的差异无统计学意义(F=0.977,P=0.401),不同玻璃体填充物组的IOL倾斜度差异无统计学意义(F=1.413,P=0.254)。结论 Pentacam三维眼前节分析仪可动态观察并评价IOL在眼内的稳定性;惰性气体填充对眼内IOL的影响较灌注液填充和硅油填充明显,但总体而言各种玻璃体腔填充眼术后IOL在眼内的位置基本稳定。

用Pentacam三维前房分析仪研究玻璃体切割术后眼的屈光改变

目的:研究玻璃体切割手术以及气体、硅油等眼内填充物对眼的屈光状态改变的影响。方法:使用A型超声和Pentacam三维前房分析仪对我院30例行玻璃体切割手术的患者于手术前和术后2mo分别对眼轴长度、角膜曲率、角膜厚度、前房容量、前房角和前房深度等进行测量。结果:将所有受检者30例31眼进行术前术后的对比,术后比术前房角增大7.97°,眼轴缩短0.49mm;对单纯玻璃体切割手术的23例24眼进行分析,术后比术前眼轴缩短0.51mm;根据眼内填充物的不同进行数据分析:硅油组前房容量术后比术前增大24.83mm3,眼轴长度术后比术前缩短1.92mm。结论:玻璃体切割手术会引起眼轴不同程度的缩短,可能会对前房产生一定的影响,而对角膜曲率、角膜厚度无明显的影响。

正常人全视野视网膜电图

根据国际标准化方案,采用暗视弱蓝光、暗视白光、明视白光和30Hz闪烁光四种刺激条件对54例正常人(103眼)进行了ERG检测。得出了该条件下的ERG正常值范围,并讨论了年龄、性别等对ERG的影响及两种光感受器系统ERG反应的分离。

黄斑中心凹无血管区在眼部疾病中的临床意义

随着眼科影像技术的发展,黄斑中心凹无血管区(foveal avascular zone,FAZ)越来越被深入研究,在许多研究工具中,光学相干断层扫描血管成像的优势尤为突出,被广泛应用。研究发现,FAZ受黄斑中心凹结构、眼轴长度、年龄、种族、性别及不同的研究方法影响。FAZ与临床许多疾病有着密不可分的联系,其可被称为视网膜血管疾病中黄斑缺血的生物标志物,对临床诊断及治疗疾病具有重要意义。目前,检测结果缺乏统一的评判标准,使得不同仪器测量数据不可替换,今后仍需做进一步研究,从而更好地辅助临床诊断及治疗工作。

碱性成纤维细胞生长因子及其对晶体上皮细胞增殖的促进作用

本文介绍了碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）的分布和来源，阐述其基本特性及主要的生物学功能。探讨ｂＦＧＦ对眼晶体上皮细胞的增殖促进作用和后囊混浊的发病机理以及ｂＦＧＦ的作用机制。

白内障手术前结膜囊及睑缘抗生素及安尔碘消毒的效果分析

目的了解术前局部消毒对细菌的抑制作用。方法白内障住院手术者104例，结膜囊及睑缘细菌培养共4次，分别取自：手术前一日做术眼清洗妥布霉素滴眼处理前；手术当日应用5％安尔碘冲洗结膜囊前；手术当日无醇型安尔碘冲洗结膜囊及眼局部皮肤消毒后；以及手术结束时。