辐照血小板保存时间对输血反应的影响

目的研究辐照血小板保存时间对输血反应发生率的影响。方法方便选择2020年1月—2023年8月东台市人民医院输血的105例血液病患者为研究对象,根据不同保存时间分组,n1组(35例)保存时间1 d,n2组(35例)保存时间3 d,n3组(35例)保存时间5 d,比较3组患者输血后的有效率、不良反应发生率,输血前、后免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)、免疫球蛋白A(immuno-globulin A,IgA)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的变化。结果n1组输血后的有效率为90.77%(59/65),高于n2组的84.13%(53/63)和n3组的74.60%(47/63),差异有统计学意义(χ^(2)=1.764,P<0.05)。n1组不良反应发生率为5.71%(2/35),低于n2组的14.29%(5/35)和n3组的22.86%(8/35),差异有统计学意义(χ^(2)=4.201,P<0.05)。输血前,3组IgG、IgM、IgA、CRP对比,差异无统计学意义(P均>0.05),输血后,3组IgG、IgM、IgA、CRP均高于输血前,差异有统计学意义(P均<0.05);3组免疫及炎症反应对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论输注辐照血小板在保存期内,储存时间越短,效果越好,输血反应的发生率越低。

宁夏地区奶牛源隐孢子虫分子鉴定与分析

为了明确宁夏地区奶牛隐孢子虫的流行情况及其优势基因型,采集宁夏4个地区10个规模化奶牛养殖场中1174份奶牛粪便样品,基于核糖体小亚基RNA(SSU rRNA)基因通过套式PCR进行检测和分析。结果显示,宁夏地区奶牛隐孢子虫阳性率为28.5%(335/1174);共鉴定出4种虫种,即微小隐孢子虫、牛隐孢子虫、瑞氏隐孢子虫和安氏隐孢子虫,阳性率分别为40.6%(136/335)、36.1%(121/335)、19.4%(65/335)和3.9%(13/335);微小隐孢子虫共鉴定出4种基因亚型,分别为ⅡdA15G1(n=70)、ⅡdA18G1(n=26)、ⅡdA19G1(n=23)和ⅡdA20G1(n=17)。统计学分析显示,在宁夏地区,0~2月龄的犊牛隐孢子虫感染率最高,且奶牛隐孢子虫的感染率与月龄差异显著相关(P<0.001)。表明宁夏地区奶牛存在隐孢子虫感染且存在人畜共患虫种,ⅡdA15G1微小隐孢子虫是宁夏地区奶牛感染的优势亚型。

电沉积制备Ni-Co-Ce复合镀层及其耐蚀性能研究

Ni-Co合金镀层具有较好的耐蚀性,多用于金属防腐,添加Ce可细化该合金镀层晶粒,提高组织致密性及耐蚀性。以船用钢EH40为基体,采用复合电沉积工艺在其表面制备Ni-Co-Ce合金镀层,并在3.5%NaCl溶液中对不同工艺条件下制备的镀层进行动电位极化曲线测试和电化学阻抗测试,评价其耐腐蚀性能。采用扫描电镜和X射线衍射仪对镀层的表面形貌和物相组成进行了分析。结果表明,镀层最佳电沉积工艺条件为硫酸铈浓度0.6 g/L,电流密度0.04 A/cm^(2),电沉积温度50℃;此条件下获得的镀层表面平整,自腐蚀电流和电位(绝对值)均最低,分别为3.694 5×10^(-6) A/cm^(2)和-0.534 V,电荷转移电阻最大,为889.81Ω·cm^(2),耐蚀性能最好。

滑液囊支原体GA组件蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

【目的】体外表达滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)的GA组件蛋白(GA module-containing protein),建立一种MS抗体检测方法,用于血清学检测及MS抗体水平监测。【方法】分析、筛选MS的GA组件蛋白长链保守结构域,合成重组质粒pET30a-ΔGA-L,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达,并优化表达条件;通过SDS-PAGE检测重组蛋白的表达,纯化重组蛋白ΔGA-L并进行Western blotting鉴定;以纯化后的重组蛋白ΔGA-L作为包被抗原,建立MS抗体的间接ELISA检测方法,优化反应条件,确定临界值,对其特异性、敏感性、重复性进行检验,并进行临床样品检测。【结果】重组蛋白ΔGA-L的分子质量大小为45.7 ku,最佳表达条件为25℃、0.2 mmol/L IPTG诱导表达5 h,以包涵体形式表达。Western blotting结果表明,重组蛋白ΔGA-L能与MS抗体发生特异性反应。以ΔGA-L抗原包被浓度为0.5μg/mL,一抗稀释度为1∶400,二抗稀释度为1∶12 000为最佳条件,建立了MS抗体间接ELISA检测方法,其阴阳性临界值为0.283;所建立方法特异性强、灵敏度高,有较高稳定性;与商品化MS抗体检测试剂盒总符合率为96%。【结论】本研究成功表达了MS重组蛋白ΔGA-L,所建立的MS抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,为MS抗体检测提供了有效快捷的方法。

宁夏部分地区犊牛腹泻样本大肠杆菌分离菌株的毒力因子检测与分析

旨在调查宁夏地区犊牛腹泻性大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)流行情况及毒力因子流行特点。对宁夏地区共采集332份腹泻犊牛直肠粪便进行病原分离,利用PCR方法对156株大肠杆菌分离株进行13种相关毒力基因检测。结果共分离出156株大肠杆菌(46.99%),共检出136株含有毒力因子的大肠杆菌,表明目前宁夏地区腹泻犊牛大肠杆菌阳性率较高,毒力因子组合复杂,优势毒力因子为irp2。

6株禽源滑液囊支原体分离株的分子生物学鉴定及MSPB蛋白原核表达

从分子水平对6株禽源滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)分离株进行鉴定,探讨MS宁夏本地株膜蛋白MSPB的生物学功能。通过PCR技术扩增分离株的16S rRNA和MSPB基因序列,并构建分子进化树,对6株MS分离株进行同源性分析;用生物信息学工具对MSPB在蛋白水平进行分析,预测其亚细胞定位,探究MSPB的理化性质。构建pET-30a-MSPB重组表达载体,在大肠埃希氏菌BL 21(DE3)中进行表达,用镍柱亲和层析纯化并用蛋白质免疫印迹验证其反应原性。结果6株MS分离株在16S rRNA基因序列上与MS参考菌株具有同源性;MSPB等电点低,疏水性氨基酸占比较高;成功对MSPB进行表达,大小约为70 ku,纯化所得MSPB蛋白能与MS阳性血清特异结合。结果表明,6株菌株为MS,而MSPB具有反应原性,可以作为候选抗原应用于MS的诊断或防控。

羊痘病毒与羊口疮病毒双重RPA-LFD检测方法的建立与应用

【目的】旨在建立一种基于重组聚合酶(recombinase polymerase amplification,RPA)检测技术结合测流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)快速鉴别检测羊痘病毒(capripox virus,CaPV)与羊口疮病毒(orf virus,ORFV)的双重RPA-LFD检测方法。【方法】选取CaPV P32基因及ORFV 011基因的保守片段,进行目的片段扩增并构建重组质粒;设计CaPV及ORFV RPA引物各3对,CaPV-HP、ORFV-HP探针各1条;进行单重基础RPA引物筛选试验;对双重RPA-LFD的反应时间及反应温度进行优化;探索双重RPA-LFD最佳引物配比体系及最佳探针配比体系;进行双重RPA-LFD灵敏度、特异性及重复性试验;用所建立的方法对采集的55份临床样品进行检测。【结果】引物筛选试验结果显示,引物对CaPV-RPA-F3/R3、ORFV-RPA-F1/R1的特异性最强、扩增效率最高;该方法在反应温度为39℃、反应时间为11 min的反应条件下扩增效率最佳;CaPV-RPA-F3/R3、ORFV-RPA-F1/R1的最佳引物配比为0.8 μL∶1.6 μL,CaPV-HP、ORFV-HP的最佳探针配比为0.1 μL∶0.9 μL;双重RPA-LFD灵敏性试验最低检出限为CaPV/ORFV 4.65/3.94×10~0 copies/μL;特异性试验结果显示与PPRV、IBRV、Sau、SPN均无交叉反应;临床样品检测结果显示RPA-LFD检测阳性率与PCR检测阳性率相符合。【结论】成功建立了CaPV与ORFV双重RPA-LFD快速检测方法,可用于临床中CaPV与ORFV混合感染的快速鉴别诊断。

牛支原体可视化重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

为建立一种对牛支原体高效、快捷的可视化重组酶聚合酶扩增(LFD-RPA)临床诊断方法,以牛支原体uvrc基因序列为靶基因,设计特异性引物和探针,通过筛选引物和探针、优化反应条件,并通过灵敏度、特异性、重复性和临床样本检测试验进行验证。结果显示,该试验建立的牛支原体LFD-RPA最佳引物为F2/R2,最佳反应条件为39℃、 25 min;检测灵敏度可达2.08 copies·μL^(-1),是普通PCR灵敏度的100倍;与滑液囊支原体、沙门氏菌、绵羊肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和产气荚膜梭菌之间无交叉反应;重复性稳定;对50份鼻拭子样本进行检测,阳性率为26%,与我国行业标准PCR检测方法的符合率为89.6%。该试验成功建立了牛支原体LFD-RPA检测方法,该方法具有操作简便、快速、高效、敏感等优点,为牛支原体的临床快速诊断提供了技术支撑。

铜结晶器表面双脉冲共沉积制备Co-Ni-Ce防护镀层

为了提高铜结晶器的防护能力,延长其使用寿命,本文利用双脉冲在氨基磺酸体系下共沉积制备Co-Ni-Ce防护镀层,研究Co(SO_(3)NH_(2))2·4H_(2)O质量浓度、脉冲电流密度、电信号控制以及CeCl_(3)·7H_(2)O质量浓度等工艺参数对镀层硬度的影响。实验结果表明,最优工艺参数为Co(SO_(3)NH_(2))2·4H_(2)O质量浓度33.3 g/L,脉冲电流密度4 A/dm^(2),占空比40%,脉冲频率20 kHz,CeCl_(3)·7H_(2)O质量浓度2 g/L;硬度达到559.01 HV;Co-Ni-Ce镀层形貌致密,晶粒分布均匀。添加Ce以后,合金衍射峰择优取向由(111)向(200)转变,无金属单质相生成。

绵羊大肠杆菌与A型产气荚膜梭菌混合感染的病原分离鉴定

试验旨在对宁夏一绵羊场疑似大肠杆菌与A型产气荚膜梭菌混合感染的死亡病例进行确诊并提出相应的防治方案。采用产气荚膜梭菌显色培养基及伊红美蓝固体培养基进行病原分离培养,对分离菌株进行16S rRNA基因序列PCR检测,依据16S rRNA序列构建分离株分子进化树;之后对大肠杆菌分离株毒素因子进行PCR检测,对产气荚膜梭菌分离株进行毒素分型鉴定。结果显示,分离株PCR检测获得了16S rRNA特异性条带;分子进化树结果显示,大肠杆菌分离菌株NXDC001与大肠杆菌在同一分支,产气荚膜梭菌分离菌株NXSJ001与产气荚膜梭菌在同一分支。大肠杆菌分离株检测出毒素因子HPI(irp2)及LEE(eae);产气荚膜梭菌分离株携带毒素因子cpa,证明分离株为A型产气荚膜梭菌。研究表明,试验成功分离鉴定大肠杆菌及A型产气荚膜梭菌各一株,证明病死羊为大肠杆菌及A型产气荚膜梭菌混合感染。

硅钢表面诱导共沉积钴铁软磁合金

针对硅钢的耐蚀性和软磁性能的问题,提出在硅钢表面诱导共沉积制备Co-Fe软磁合金镀层的工艺。采用SEM、XRD与VSM分析镀层微观形貌、相结构及软磁性能,并研究硫酸钴浓度、沉积电流密度、pH以及酒石酸钠浓度等工艺参数对镀层微观结构以及镀层元素含量的影响。结果表明:硫酸钴浓度20 g·L^(-1),酒石酸钠浓度45 g·L^(-1),pH=8,电流密度0.3 A·cm^(-2)为最优工艺参数,且镀层形貌致密,晶粒分布均匀;各个不同工艺参数下得到镀层的相结构均为Co7Fe3,且择优取向无显著差别;当钴含量达到65.11%时,饱和磁化强度达到209 emu·g^(-1)((A·m^(2))/kg),矫顽力低于4 Oe(1 Oe=79.6 A/m),镀层具有最优的软磁性能。在pH=5的酸性溶液中,钴铁合金镀层的腐蚀电位正移了0.012 V,自腐蚀电流密度降低为2.86μA·cm^(-2),具有更好的耐蚀性能。通过对硅钢表面诱导共沉积Co-Fe软磁合金进行研究,为今后的硅钢资源防护利用提供了新思路。

鸡毒支原体和滑液囊支原体双重LFD-RPA快速检测方法的建立

【目的】鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是对家禽危害最大的两种支原体,MG、MS的早期诊断是预防和控制禽支原体的关键环节。通过将重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)和测流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立一种操作便捷、反应快速、结果可视化、可同时检测MG、MS两种病原的快速检测方法。【方法】基于MG的mgc2基因、MS的vlhA基因设计特异性引物和探针,优化反应时间、反应温度及引物配比建立双重LFD-RPA快速检测方法,评价其灵敏度、特异性、稳定性,同时对120份临床样品进行检测。【结果】双重LFD-RPA检测方法在37℃下反应5-10min即可完成扩增,其RPA-MG-F2/R2、RPA-MS-F1/R1最佳引物配比为0.6∶1.4。MG、MS的最低检出限分别为3.75 copies/μL、3.46 copies/μL。用该方法与OIE推荐的PCR方法对120份样品进行检测,二者符合率为93.3%。【结论】MG、MS双重LFD-RPA检测方法在恒温条件下即可完成扩增,其操作简单、反应快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好,无需使用任何仪器即可观察到结果,适用于基层MG、MS单独感染或混合感染的现场快速检测。

3D打印技术对口腔种植牙精度、种植成功率及患者满意度的影响研究

目的探讨并分析3D打印技术对口腔种植牙精度、种植成功率及患者满意度的影响。方法选取我院2022年8月至2023年7月期间接收的种植牙患者32例(共140颗牙)进行研究,采用随机数字表法将患者分为参照组(14例,60颗)与实验组(18例,80颗),参照组采用常规治疗,实验组采用3D打印技术。观察两组术后口腔种植牙精度、种植成功率、满意度以及治疗时间、恢复周期、舒适度。结果参照组颈部偏离距离以及根尖部偏离距离均在1mm以上,而实验组颈部偏离距离以及根尖部偏离距离均在1mm以下,且参照组偏离角度在4°以上,而实验组偏离角度低于3°,组间数据差异显著(P<0.05)。实验组治疗时间、恢复周期更短,舒适度更高,组间数据差异显著(P<0.05)。实验组口腔种植成功率97.50%,高于参照组口腔种植成功率83.33%,组间差异显著(P<0.05)。实验组满意度100.00%,高于参照组满意度64.29%,组间差异显著(P<0.05)。结论在种植牙中采用3D打印技术减少了误差,使患者手术时间减少,创伤更小,也利于患者的恢复,提高满意度和舒适度,推动了种植牙项目更好的发展。

移栽期间胁迫对苗木影响的研究进展

自起苗到栽植后的一段时间内,苗木会受到多种不利因素如失水、极端温度、根损伤的影响,其效应均不利于苗木的生长发育,据此提出移栽胁迫的概念,并对构成移栽胁迫的主要因素如失水、机械伤害、温度与多因子共同作用对苗木及栽植后的影响进行综述,在此基础上对该领域今后的研究方向和重点进行展望。

国产奈达铂联合吉西他滨治疗晚期非小细胞肺癌

目的:观察国产奈达铂联合吉西他滨治疗中晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副反应。方法:27例不能手术的Ⅲ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者,应用奈达铂80～100mg/m2,静脉滴注,d1,吉西他滨1000mg/m2,静脉滴注,d1、d8、d15,28d为1个周期,用药3个周期后进行评价,并观察同期采用顺铂联合吉西他滨化疗的Ⅲ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者35例作为对照。结果:奈达铂组27例,CR1例,PR10例,NC11例,PD5例,总有效率(CR+PR)为41%(11/27),顺铂组总有效率43%(15/35);中位生存时间奈达铂组6.6个月,顺铂组6.7个月,差异无显著性(P>0.05);奈达铂主要毒副反应为骨髓抑制,白细胞下降74%,但Ⅲ～Ⅳ度下降为30%,其次是消化道反应,未发现明显的肝肾毒性、周围神经毒性等。结论:国产奈达铂联合吉西他滨治疗中晚期非小细胞肺癌疗效与顺铂联合吉西他滨疗效相当,但毒副反应减轻,耐受性好。

熔盐电解法制备铝锂中间合金

研究在LiCl-LiF-Li2CO3纯锂盐体系中下沉式铝液阴极槽结构电解生成铝锂中间合金的工艺过程,尤其是以Li2CO3为原料代替LiCl的电解过程。采用熔盐电解监控仪测量电解过程中的反电动势、槽电压、电流等工艺参数及电解波形图,通过电位控制法调节Li2CO3的加料周期,同时根据得到的合金产品中的锂含量探讨影响电流效率的因素。结果表明,反电动势随电流密度增加而增大,加入2%的Li2CO3可使反电动势降低0.5V;通过控制电位法测得加料周期为15min;在680℃、电流密度为0.62A/cm2的条件下持续电解3h,最终制得了锂含量高达7.93%的铝锂合金,电流效率可达74.1%。

纤维支气管镜引导下经鼻气管插管治疗慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭临床应用

目的探讨纤维支气管镜引导下经鼻气管插管治疗慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭的效果及安全性。方法慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭患者分别采用经口气管插管和纤维支气管镜引导下经鼻气管插管建立人工气道,机械通气。结果纤维支气管镜引导下经鼻气管插管治疗33例,成功27例,经口气管插管15例,成功10例。结论纤维支气管镜引导下经鼻气管插管治疗慢性阻塞性肺疾病并呼吸衰竭抢救率成功率高,并发症轻,具有重要的临床应用价值。

4株滑液囊支原体分离株P80脂蛋白的基因克隆及序列分析

为研究滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)P80家族脂蛋白的功能及其异同,通过PCR方法从4株滑液囊支原体分离株中分别扩增P80-1,P80-2,P80-3蛋白的基因序列并进行测序,通过生物信息学方法对P80家族脂蛋白的蛋白序列进行分析,寻找保守结构域、抗原表位,并预测功能.结果表明,P80家族脂蛋白均为碱性亲水性稳定蛋白,在N端具有较强疏水性,只有P80-2蛋白具有跨膜螺旋区;P80家族脂蛋白信号肽的位置与疏水区结果相一致;3条P80蛋白具有12个相同的保守结构域及2~4个不同的结构域;有31~32个抗原表位;二级结构均以α-螺旋和无规则卷曲为主;三级结构预测显示,P80-1蛋白具有ABC转运蛋白的功能,P80-2蛋白为周质结合蛋白Ⅱ型,P80-3蛋白具有细胞黏附功能.研究结果可为MS P80家族脂蛋白功能的深入研究以及MS致病机制、病原诊断和疫苗研制提供参考.

人和动物重要传染病mRNA疫苗研究进展

根据已有研究数据显示,mRNA疫苗具有免疫效果好、安全性高、研究周期短等特点,发展前景广阔。近年来,无论是面对新冠疫情,还是其他重大动物疫病,mRNA疫苗逐渐发挥重要作用。论文就mRNA疫苗的发展、分类及结构、作用机制、给药方式及在人和重大动物疫病预防中的应用等方面对mRNA疫苗进行综述,并分析了现阶段mRNA疫苗的优势与不足,以期为新型mRNA疫苗的研制提供参考。从已报道的数据来看,mRNA疫苗在流感、狂犬病、弓形虫病等人兽共患病上已经进入临床试验阶段且表现出较好的预防效果,但在畜禽传染病方面的mRNA疫苗研究较为缺乏,可见mRNA疫苗在畜禽传染病的防控中也极具发展潜力。

东濮凹陷胡古2气藏成藏条件分析

文中在胡古2气藏油气成因识别的基础上,分析了气藏成藏条件,建立了油气成藏模式,指出了有利的勘探方向。研究认为,胡古2气藏油气主要来自上古生界煤系源岩,是自生自储煤成气藏。其自身煤系烃源岩处于生烃高峰期内,为气藏提供了充足的资源保证;上古生界石千峰组及石盒子组储层发育,储层物性较好,有效储层较厚,为气藏提供了有效的储集空间;石千峰组上段、中生界底部及上石盒子组上段泥岩稳定发育,为气藏提供了良好的盖层条件;该气藏圈闭类型为反向断块圈闭,形成于沙三上沉积前,西倾反向断层起到了很好的封堵作用,后期发育的石家集断层及长垣断层没有对圈闭形成破坏。该区油气大规模运移期在东营期,构造与油气的生成运移具有较好的时空配置关系,油气也得到了很好的保存。上古生界烃源岩镜质体反射率大于1.5%的区域是寻找上古生界自生自储油气藏的有利区带,该区带中具有一定构造背景的洼中隆起是有利的钻探目标。