TNF-α通过CXCL10/CXCR3信号通路促进结肠癌细胞上皮间质化的相关分子机制

目的 探讨TNF-α通过调控结肠癌SW480细胞CXCL10/CXCR3轴的表达影响上皮间质化(EMT)及其分子机制。方法 培养人结肠癌SW480细胞,分别通过TNF-α、siRNA-CXCR3处理细胞,将细胞分为对照组(NC组)、TNF-α刺激组(TNF-α组)及TNF-α刺激+siRNA-CXCR3沉默组(TNF-α+si-CXCR3组)。通过Real-time PCR检测各组细胞CXCL10、CXCR3及上皮间质化相关基因的mRNA表达量;Western Blot检测各组细胞CXCL10/CXCR3通路蛋白及上皮间质化相关蛋白表达量的影响;免疫组化检测细胞中上EMT上皮标志物上皮细胞钙粘蛋白(E-cad)与EMT间质标志物波形蛋白(Vimentin)的变化情况;划痕实验检测各组细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果 TNF-ɑ组细胞中通路基因CXCL10、CXCR3的m RNA水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞中CXCR3水平低于TNF-α组,差异有统计学意义(P<0.05);TNF-ɑ组细胞中CXCL10、CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量高于NC组,E-cad的蛋白表达量低于NC组,差异有统计学意义;TNF-α+si-CXCR3组细胞CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量低于TNF-ɑ组,E-cad的蛋白水平高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组中Vimentin的表达量高于NC组,E-cad的表达量低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+siCXCR3组中Vimentin的表达量低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05),E-cad的表达量高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组迁移能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞迁移能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-ɑ组细胞的侵袭能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞侵袭能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α能够诱导结肠癌SW480细胞发生上皮间质化,并促进其迁移、侵袭水平,这一过程可能与激活CXCL10/CXCR3信号通路有关。

血清肿瘤标志物联合检测在结肠癌诊断和预后评估中的价值

目的探讨血清肿瘤标志物糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原、糖类抗原199(CA19-9)联合检测在结肠癌诊断和预后评估中的价值。方法选取2017年1月至2018年6月在山东省日照市人民医院首次诊治的116例结肠癌患者作为观察组,另选取同期来医院诊疗的50例结肠良性病变患者作为对照组。检测和比较2组患者血清CA125、癌胚抗原、CA19-9水平。采用多因素Logistic回归方法分析结肠癌的影响因素。采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验进行生存分析。以病理诊断为金标准,用四格表法统计计算单项及联合检查诊断结肠癌的价值。结果观察组血清CA125、癌胚抗原和CA19-9水平均高于对照组[(96±15)kU/L比(24±4)kU/L,(56.8±6.2)μg/L比(2.6±0.6)μg/L,(118±19)kU/L比(25±6)kU/L](t=23.551、62.560、34.712,均P<0.01)。观察组患者临床高分期(Ⅲ~Ⅳ期)、低分化、远处转移患者血清CA125、癌胚抗原、CA19-9水平均明显高于临床低分期(Ⅰ~Ⅱ期)、高分化/中分化、无远处转移患者血清水平(均P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示血清CA125、癌胚抗原、CA19-9水平升高均是发生结肠癌的独立危险因素。随访5年,血清CA125、癌胚抗原、CA19-9高表达组5年无事件生存率均明显低于低表达组(均P<0.01)。血清CA125、癌胚抗原、CA19-9三项联合检测诊断结肠癌的敏感度、准确度、阴性预测值均明显高于单项及两项组合检测(均P<0.05)。结论血清CA125、癌胚抗原、CA19-9均可作为诊断结肠癌的生物学指标,三项联合检测明显提高诊断结肠癌的价值。

医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Spa和SCCmec分型研究

目的对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据。方法采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MRSA,进行药敏试验和同源性分析,并检测毒力基因杀白细胞毒素(pvl)基因和毒性休克综合征(tsst)基因。结果药敏结果显示,80株HA-MRSA对青霉素、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南均耐药,对环丙沙星耐药率为90.0%,对克林霉素耐药率为58.8%,对复方磺胺类耐药率为13.8%,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。SCCmec分型结果显示,80株MRSA中SCCmecⅡ型占73.75%、SCCmecⅢ型(13.75%)、SCCmecⅤ型(12.5%)。Spa分型,28株为t2460型(35%)、9株为t002型(11%)、6株为t030型(8%)、7株为t632型(9%)、5株为t037型(6%),其他Spa型相对分散。pvl基因阳性率为7.5%(6株),tsst基因为阴性。结论 HA-MRSA SCCmec分型以Ⅱ为主,Spa分型以t2460型为主,有较高的同源性;HA-MRSA对多种药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药。

雌激素通过NF-κB信号通路影响肝癌细胞的肿瘤学行为研究

目的探讨雌激素对HepG2和BEL7402两种肝癌细胞增殖及迁移能力的抑制和诱导凋亡的作用及其相应机制。方法利用MTS试验检测不同浓度的雌激素在不同时间点对HepG2和BEL7402两种肝癌细胞增殖能力的影响。Annexin V/PI流式细胞术检测不同浓度的雌激素诱导HepG2和BEL7402细胞凋亡的情况。Transwell迁移实验检测雌激素对HepG2和BEL7402细胞迁移能力的影响。采用Western blotting法检测不同浓度下雌激素对肝癌细胞中NF-κB信号通路的活性及其下游相关基因c-Myc、Cyclin D1、基质金属蛋白酶(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)和Bcl-2表达的影响。结果 MTS试验结果显示,在不同时间点雌激素有效抑制了HepG2和BEL7402细胞的增殖,并随着雌激素浓度的升高其抑制肝癌细胞增殖的效果逐渐增强,与此同时,雌激素也降低了c-Myc、Cyclin D1等增殖相关基因的表达。Annexin V/PI流式细胞术数据显示雌激素诱导HepG2和BEL7402细胞的凋亡并呈明显剂量依赖性,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达出现下降。Transwell迁移实验证明雌激素明显抑制了HepG2和BEL7402细胞的迁移能力并且降低了MMP-9和VEGF的表达。验证了雌激素可有效抑制HepG2和BEL7402肝癌细胞中NF-κB信号通路的活性。结论雌激素通过下调NF-κB信号通路的活性及下游相关分子的表达,而抑制肝癌细胞的增殖与迁移并诱导其凋亡。

DCP、CEA联合VEGF检测对原发性肝癌的诊断价值

目的探讨异常凝血酶原(DCP)、癌胚抗原(CEA)及血管内皮生长因子(VEGF)对原发性肝癌的诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法检测本院收治的114例原发性肝癌、52例慢性乙型病毒性肝炎、42例肝硬化患者及40例健康体检者的血清DCP、CEA及VEGF水平。采用Logistic回归分析筛选具有诊断价值的指标。然后得出回归方程,最后采用ROC曲线评价回归方程的最佳诊断分界值及诊断效能。结果与非肝癌组患者相比,肝癌组患者血清DCP、CEA及VEGF水平明显高升高,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组、肝炎组、肝硬化组及健康对照组血清DCP、CEA及VEGF水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌组患者血清DCP、CEA及VEGF水平明显高于肝炎组、肝硬化组及健康对照组,而健康对照组患者上述血清指标较肝癌组、肝炎组及肝硬化组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析表明,血清DCP、CEA及VEGF水平升高与原发性肝癌发生密切相关。ROC分析结果提示DCP、CEA及VEGF的AUC分别为0.812、0.809、0.742,预测概率AUC为0.909,相较于单个指标显著提升,差异有统计学意义(P<0.05)。DCP、CEA、VEGF及联合预测概率的敏感度分别为83.2%、78.4%、70.2%及96.3%,特异度分别为79.3%、76.6%、75.8%及87.9%。DCP、CEA和VEGF最佳诊断界值分别为78.2 mAu/mL、7.9 ng/mL和182.32 ng/L。结论血清DCP、CEA及VEGF水平对原发性肝细胞癌具有一定的诊断价值,相较于单个指标,联合检测可明显提升诊断效能。

急性髓系白血病M_6长期生存9年后转为M_2 1例

患者，男，42岁。因乏力及低热7d于2014年8月18日就诊于我院。患者曾于9年前因乏力第1次就诊于我院，血常规示：红细胞计数5．3×109·L-1，血红蛋白89g/L，血小板47×10 9·L-1，骨髓象：增生极度活跃，原粒细胞44％，早幼粒细胞0．5％，早幼红细胞21．5％，中幼红细胞30％，晚幼红细胞10％。红系可见巨幼变畸形核红细胞，巨核细胞偶见。后患者携相关病历资料前往北京上级医院确诊，最终诊断考虑急性髓系白血病M6。

医院获得性尿路感染肠球菌耐药性与毒力基因型相关研究

目的研究医院获得性尿路感染肠球菌毒力因子和耐药分布,以及两者间的关系,为临床合理使用抗菌药物和控制感染提供依据。方法分离出临床尿路感染标本中74株肠球菌进行菌株鉴定,采用纸片扩散法(KB法)做药物敏感试验;PCR检测cylL-L、cylL-S、cylL-A、esp、acm、gelE、asa-I、cpd、ace毒力基因。结果 74株肠球菌中有粪肠球菌45株(60.8%),屎肠球菌29株(39.2%)。屎肠球菌对青霉素G、氨苄西林、环丙沙星耐药率分别为89.66%、89.66%、79.31%,明显高于粪肠球菌。粪肠球菌对庆大霉素120、四环素耐药率分别为46.67%、53.33%,略高于屎肠球菌。cylL-L、cylL-S、cylL-A、esp、acm、gelE、asa-I、cpd、ace毒力基因的阳性率分别为24.32%、44.59%、22.97%、44.59%、60.81%、22.97%、25.67%、22.97%、9.46%。屎肠球菌毒力基因分布与耐药性间差异有统计学意义(P<0.05)。结论粪肠球菌是医院获得性尿路感染的主要肠球菌,屎肠球菌表现为多重耐药,粪肠球菌携带更多的毒力因子,屎肠球菌毒力基因数与耐药性之间密切相关,临床应注意抗菌药物的合理应用,防止肠球菌耐药性的产生和传播。

阿尔茨海默病中Tau蛋白与相关分子作用的探究

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种致死性神经退行性脑病,细胞外间隙β淀粉样蛋白(Aβ)沉积形成的老年斑以及细胞内过度磷酸化Tau蛋白聚集形成的神经原纤维缠结(NFTs)是其主要特征性病变。Tau蛋白的异常与阿尔茨海默病的神经变性和记忆认知减退密切相关。而Tau蛋白与相关分子的相互作用进一步促进了阿尔茨海默病的发生发展。本文综述了Tau蛋白与Aβ、14-3-3ζ、p62在阿尔茨海默病中的相互联系和作用。

脑胶质瘤环磷腺苷效应元件结合蛋白的表达

目的探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)在不同级别脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测CREB在5例颅脑损伤减压术后脑组织切片,55例不同分化程度脑胶质瘤组织切片中的表达,并采用Western blot、RT-PCR检测CREB在10例颅脑损伤减压术后脑组织标本,30例不同分化程度脑胶质瘤组织中的表达。结果免疫组化法测得CREB的阳性表达率分别为对照组2/5,Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤10/15,Ⅲ级胶质瘤11/12,Ⅳ级胶质瘤28/28,免疫组化显示数据总体上有统计学差异(H=28.183,P<0.05)。RT-PCR法检测2^(-ΔΔCt)值,对照组:1.00±0.00,Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤:1.35±0.07,Ⅲ级胶质瘤:2.88±0.11,Ⅳ级胶质瘤:3.75±0.20。脑胶质瘤组织中CREB的表达均高于对照组脑组织,且各级别癌组织间有统计学意义(F=1.208,P<0.05)。Western blot法测得对照组:0.311±0.014,Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤:0.469±0.026,Ⅲ级胶质瘤:0.641±0.028,Ⅳ级胶质瘤:0.896±0.024,各组间有统计学差异(F=1.123,P<0.05)。结论 CREB在不同分化程度脑胶质瘤组织中均存在过表达现象,与肿瘤的分化程度呈正相关,可能在胶质瘤发生发展过程中起着重要的调节作用。

三氧化二砷在慢性粒细胞白血病治疗中的作用机制研究进展

目前，慢性粒细胞白血病（ CML）治疗以传统治疗及酪氨酸激酶抑制剂为主，但因出现多药耐药等多种不利因素致部分患者治疗效果较差，故越来越多的学者开始探索治疗CML的二线用药。近年发现，三氧化二砷（ As2 O3）治疗急性早幼粒细胞白血病疗效显著。另有实验报道，As2 O3对CML亦有一定的诱导凋亡作用，并且其治疗机制涉及干预骨髓微环境、抑制VEGF、作用于BCR／ABL融合基因、去甲基化等多个途径，故As2 O3能否作为CML的二线用药开始引起越来越多的国内外学者关注。现将As2 O3在CML治疗中的作用机制研究进展综述如下。

基质金属蛋白酶组织抑制因子-1在2型糖尿病患者中的表达变化

目的探讨未发生并发症的2型糖尿病患者基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的变化及其与空腹血糖的关系。方法选取无并发症的2型糖尿病患者41例,门诊体检正常者30例为对照。采用实时荧光定量RT-PCR的方法检测外周血单个核细胞中TIMP-1 mRNA的量,采用ELISA的方法检测血浆中TIMP-1的量。结果 (1)2型糖尿病患者外周血单个核细胞中TIMP-1 mRNA的表达量[(6.13±1.59)copies/mL]明显高于正常者[(5.29±1.56)copies/mL]。(2)2型糖尿病患者血浆中TIMP-1蛋白的表达量[(246 334.83±82 567.858)pg/mL]明显高于正常者[(105 498.00±21 554.324)pg/mL]。(3)2型糖尿病患者血浆中TIMP-1与空腹血糖呈负相关(r=-0.490 1,P<0.01)。结论无并发症的2型糖尿病患者TIMP-1无论是mRNA的表达量还是蛋白的表达量均较正常者偏高,并且血浆中蛋白的表达量与空腹血糖负相关。

3个携带HJV E3D变异的遗传性血色病家系临床表型分析

目的了解3个携带HJV E3D变异的遗传性血色病家系基因变异及临床表型特点。方法 3个遗传性血色病家系中的先证者均完成了病史采集、铁指标、肝功能、腹部核磁检查、肝活检,排除铁过载的继发性原因,临床考虑为遗传性血色病。先证者及其一级亲属分别检测目前已知的遗传性血色病相关的5个基因(HFE、HAMP、HJV、TFR2和SLC40A1)。结果 3个携带HJV E3D变异的遗传性血色病先证者均具有明确的铁过载表现,家系1和家系2中各有1个成员具有铁过载。2例携带HJV E3D变异的先证者还同时携带其他类型血色病基因变异。结论 HJV基因E3D变异可能为我国遗传性血色病的热点变异,可能需要同时伴随其他位点变异才会出现表型,且男性、年龄增加更容易出现血色病表型。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性对不同剂量叶酸治疗高同型半胱氨酸血症效果的影响

目的评价亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性对不同剂量叶酸治疗高同型半胱氨酸血症(HHcy)效果的影响。方法选择2019年1—11月于山东省日照市人民医院体检部体检的年龄大于60岁伴HHcy的患者319例为研究对象,进行MTHFR C677T基因检测。按照MTHFR基因型分为CC组、CT组、TT组,每组患者完全随机分为3个亚组,分别给予低剂量(0.4 mg/d)、中剂量(0.8 mg/d)及高剂量(1.2 mg/d)叶酸治疗。治疗6周后复查血同型半胱氨酸(Hcy)水平,比较各组患者Hcy水平变化情况。结果CC组患者口服3种剂量叶酸治疗后Hcy水平及下降幅度差异均有统计学意义(均P<0.001)。CT组、TT组患者口服3种剂量叶酸治疗后,Hcy水平差异均无统计学意义(均P>0.05),下降幅度差异均有统计学意义(均P<0.05)。TT组患者各剂量叶酸亚组Hcy水平下降幅度均大于CC组和CT组[低剂量叶酸亚组:(51.1±3.2)%比(19.0±1.0)%、(21.0±1.8)%,中剂量叶酸亚组:(55.1±3.2)%比(24.5±1.9)%、(22.5±1.8)%;高剂量叶酸亚组:(58.5±3.1)%比(22.5±1.5)%、(20.6±1.5)%],差异均有统计学意义(均P<0.05);CT组和CC组中应用中剂量叶酸亚组下降幅度最大,与其他剂量亚组差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论对于MTHFR 677TT型的HHcy患者,低剂量(0.4 mg/d)叶酸即可有效降低Hcy水平。对于MTHFR 677CT/CC型的HHcy患者,则应用中剂量(0.8 mg/d)叶酸可降低Hcy水平且下降幅度最大。

论高职计算机教学中学生创新能力的培养

创新能力是现代人的一种基本能力。计算机教学是一门实验科学,其特殊性决定了在高职计算机教学中要合理设计教学目标,科学采用授课模式,同时教师要敢于创新,凭借＂放＂的教学策略,培养和提高学生的创新能力。

英语教学方法改革初探

初步探讨了英语教学改革,尤其是教学方法的改革,也就是摒弃以前的注入式、满堂灌的教学方法,转向以学生为主体的快乐教学法。

急性髓系白血病合并Sweet综合征1例并文献复习

Sweet综合征（Sweet’s Syndrome，SS），于1964年由RobertSweet首先报道，又称急性发热性嗜中性粒细胞性皮病，目前发病机制尚不明确，约20％的患者合并恶性肿瘤，报道l例急性髓系白疵病并发Sweet综合征患者并进行文献复习，以资加深对恶性血液病合并Sweet综合征的认识。

肺炎克雷伯菌分离株的耐药性与毒力基因分布及相互关系研究

目的研究肺炎克雷伯菌的耐药性与毒力基因的分布及二者间的关系,为临床合理使用抗菌药物和控制感染提供依据。方法分离出172株肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法(K-B法)做药物敏感试验;聚合酶链反应(PCR)检测rmpA、aer-1、aer-2、magA、gyrB-2、ybt、wcaG毒力基因。结果 172株肺炎克雷伯菌分离株对头孢菌素类头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟与头孢曲松的耐药率分别为38.4%、34.9%、33.1%、32.0%。rmpA、aer-1、aer-2、magA、gyrB-2、ybt、wcaG毒力基因的阳性率分别为49.4%、55.8%、42.4%、16.3%、51.7%、53.5%、20.9%。肺炎克雷伯菌毒力基因分布与耐药性呈负相关,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肺炎克雷伯菌毒力基因数与耐药性密切相关,临床应注意抗菌药物的合理应用,防止肺炎克雷伯菌耐药性的产生和传播。

计算机病毒的危害及补救措施

目前,计算机病毒对经济及工作已构成相当大的危害,受计算机病毒破坏的计算机主要在屏幕显示、计算机系统、文件及打印机等诸多方面出现异常,我们主要采取更新杀毒软件、网上杀毒等方法杀毒,但也要积极预防,正确使用好防火墙并要注意备份资料、定期查杀。

Human Nature: A Reflection of “The Minister’s Black Veil: A Parable”

According to Hawthorne’s "The Minister’s Black Veil: A Parable", we can know that the author thinks human nature is evil. This paper discusses the following questions: what is human nature? Whether human nature exists? And how to realize human nature?

血液病患者呼吸道感染病原谱及耐药性分析

目的了解血液病患者呼吸道感染病原谱特点及耐药性。方法对苏州大学附属第一医院血液科2011-2013年血液病患者呼吸道分泌物标本分离的病原性细菌分布及耐药性进行分析。结果共分离到1 434株病原菌,其中革兰阴性菌947株（66.0%）,肺炎克雷伯菌是居首位的病原菌,占20.0%,产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为89.3%、70.4%。肠杆菌科对头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮耐药率均大于70.0%;表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌对甲氧西林的耐药率分别为97.8%和98.4%;粪肠球菌对高浓度庆大霉素、四环素和环丙沙星耐药率分别为46.4%、55.4%和50.0%;屎肠球菌对青霉素G、氨苄西林和环丙沙星耐药率均为71.9%。结论血液病患者呼吸道感染主要病原菌以革兰阴性菌为主,表现为呼吸道感染产ESBLs肠杆菌科非常严重;革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主,耐甲氧西林严重;粪肠球菌与屎肠球菌间表现出不同的耐药类型;应引起重视,根据敏感性试验选择合理抗菌药物治疗呼吸道感染。