N-甲基小檗胺对豚鼠单一心肌细胞慢内向离子电流的作用

N-甲基小檗胺（N-methyl berbamine,NMB）是从陕西省凤县产小檗属植物中提取的一种双苄基异喹啉生物碱,结构与小檗胺（berbamine）相似,为黄连素的同系物,动物实验表明,黄连素及小檗胺具有抗心律失常作用,大剂量可抑制心肌收缩,本文用膜片钳术（patch clamp technique）全细胞记录（whole cell recording）方法,观察了NMB对豚鼠单一心肌细胞慢内向离子电流(Ⅰsi的影响,从离子通道水平对NMB的抗心律失常作用机理进行了初步探讨。

N-甲基小檗胺对豚鼠单一心室肌细胞ATP敏感钾电流的影响

目的 研究Ｎ甲基小檗胺对豚鼠单一心室肌细胞ＡＴＰ敏感钾电流的作用。方法 膜片钳制技术全细胞记录模式。结果 Ｎ甲基小檗胺抑制心室肌细胞ＡＴＰ敏感钾电流（ＩＫＡＴＰ）且具浓度依赖关系。指令电位为０ｍＶ时，３种浓度Ｎ甲基小檗胺（０－１，１，１０μｍｏｌ·Ｌ－１）可使ＩＫＡＴＰ分别由给药前的（０－４６±０－０９）ｎＡ，（０－４３±０－１５）ｎＡ和（０－４７±０－１０）ｎＡ减少至给药后的（０－３７±０－０７）ｎＡ（ｎ＝４，Ｐ＜０－０５），（０－２９±０－１８）ｎＡ（ｎ＝５，Ｐ＜０－０５）和（０－２１±０－０７）ｎＡ（ｎ＝４，Ｐ＜０－０５）。其抑制率分别为１８－８１％±６－１６％（Ｐ＜０－０５），４１－４７％±２４－０５％（Ｐ＜０－０５）和５５－００％±１２－９４％（Ｐ＜０－０５）。其它指令电位下的ＩＫＡＴＰ的改变也符合此趋势。结论 Ｎ甲基小檗胺阻断豚鼠心肌细胞ＡＴＰ敏感Ｋ＋钾通道。

壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞延迟外向钾电流的作用

研究壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞延迟外向钾电流(I_k)的作用,从离子通道角度初步探讨其作用机理。应用膜片钳全细胞记录方式,设保持电位为-40mV,指令电位为-60～+70mV,步阶脉冲10mV,刺激频率1Hz,波宽300ms,刺激间隔6s的方波钳制方案。结果表明壳聚糖能抑制I_k,并具有浓度依赖关系,能抑制豚鼠单一心室肌细胞延迟外向K^+电流。

低温保存大鼠肝细胞外向钾电流的变化

应用全细胞膜片钳制技术观察了低温保存的大鼠肝细胞外向钾电流（Ｉｋ）的变化。结果表明，低温保存大鼠肝细胞的外向钾电流为５．０４±０．８２ｎＡ（ｎ＝１８），大于对照组肝细胞膜电流２．８５±１．２１ｎＡ（ｎ＝３２）（Ｐ＜０．０１）。

灯盏花素对豚鼠单一心室肌细胞ICa的抑制作用

目的 :观察灯盏花素对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流 (ICa)的影响。方法 :应用全细胞膜片钳制技术。结果 :灯盏花素能明显抑制心室肌细胞的Ca2 +通道 ,使ICa减小。此作用有明显的电压依赖性 ,在峰电流电压下作用最明显 ,而对其反转电位无明显影响。在指令电位 0mV时 ,0 .5mg %灯盏花素使ICa减小 5.4 % ,1mg %灯盏花素使ICa减小 2 2 .9% (P <0 .0 1 ) ,2mg %灯盏花素使ICa减小 4 5.0 % (P <0 .0 1 )。此作用有明显的剂量依赖性和可复性。结论 :ICa灯盏花素能抑制豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流ICa。

白花前胡甲素对豚鼠单一心室肌细胞钙电流的频率依赖性阻断作用

本文利用全细胞膜片钳制技术，观察了白花前胡有效成分Ｐｒａ－Ａ对豚鼠单一心室肌细胞钙电流的影响．结果表明：１，１０，１００μｍｏｌ·Ｌ－１Ｐｒａ－Ａ可使钙电流峰值变小，随浓度增加，作用加强；１０μｍｏｌ·Ｌ－１Ｐｒａ－Ａ对钙电流的抑制具使用依赖性和频率依赖性．结果提示Ｐｒａ－Ａ对钙电流的阻断作用可能是白花前胡抗心律失常作用的机理之一；Ｐｒａ－Ａ可能对快速型心律失常有防治作用．

羧甲基甲壳胺对豚鼠单—心室肌细胞钙离子电流的作用

应用全细胞膜片钳制技术观察了羧甲基甲壳胺对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流（Ｉ_（ｃａ））的作用。实验结果显示：羧甲基甲壳胺能抑制心室肌细胞的Ｃａ^（２＋）内流，使Ｉ_（ｃａ）减小。此作用具有明显的电压依赖性，对其反转电位无明显影响。羧甲基甲壳胺对Ｉ_（ｃａ）的作用也具有明显的浓度依赖关系，浓度为０．０５％、０．１％、０．２％的羧甲基甲壳胺使Ｉ_（ｃａ）分别减小１１． ８％、３０％和 ４８．１％，最大效应浓度接近 ０． ２５％。此外，停止给予羧甲基甲壳胺后，其对Ｉ_（ｃａ）的作用减小直至消失，Ｉ_（ｃａ）可基本恢复至给药前的水平。上述结果提示，羧甲基甲壳胺减小Ｃａ^（２＋）内流的作用可能与其杭心律失常作用有关。

中药白花前胡防治心律失常作用的实验研究Ⅱ——对大鼠冠脉结扎诱发心律失常的影响

预先静注白花前胡水醇提取液(1 g/kg),再结扎大鼠左冠状动脉,可大大减少室性心律失常的发作程度和持续时间。总发作率由对照组的100%降至70%(P<0.01)。结扎后对照组均发生程度渐重的T波高耸、ST段上移等ECG异常,死亡率较高。而实验组却少见上述现象。

白花前胡甲素对豚鼠心室肌单细胞迟发性外向钾电流的影响

用全细胞膜片钳制方法观察了中药白花前胡有效成分白花前胡甲素（Ｐｄ一Ｉａ）对豚鼠·Ｃ室肌单细胞迟发性外向钾电流（Ｉｋ）的影响。Ｐｄ一Ｉａ以剂量依赖的方式增加Ｉｋ，其阈浓度接近ｌｎｍｏｌ·Ｌ－１，ＥＣ５０约０．２μｍｏｌ·Ｌ－１，最大效应浓度约１μｍｏｌ·Ｌ－１增加Ｉｋ２．５±０．５倍（Ｐ＜０．０１），Ｐｄ一１３的此种作用通过冲洗可部分消退。从电流一电压关系可知：人的激活电压接近４０ｍＶ，ｌｐｍｏｌ·Ｌ－１ｐｄ一Ｉａ使Ｖ１／２最大左移７ｍＶ，曲线的斜率改变－０．６５ｍＶ，经比较无统计学意义，提示Ｐｄ一Ｉａ对Ｉｋ的激活动力学过程无明显影响。以上结果表明，Ｐｄ一Ｉａ能促进Ｋ＋通道开放。

牛磺酸对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流的作用

应用全细胞膜片钳制技术观察了牛磷酸对豚鼠单一心室肌细胞慢内向钙离子电流(Ica)的作用。实验结果显示:牛磺酸能减少心室肌细胞的Ca^(2+)内流。此作用具有明显的电压依赖性,对其反转电位无明显影响。牛磺酸减少Ica的作用也具有剂量依赖关系,0.1μmol·L^(-1)牛磺酸减小Ica约17％,最大效应浓度接近100μmol·L^(-1)。在停止刺激休息后,首次给予刺激,10μmol·L^(-1)牛磺酸则使Ica减小47％。通过增加刺激频率,牛磺酸能促进Ica的减小。上述结果表明,牛磺酸以电压和使用依赖的方式减少心室肌细胞的钙离子内流。

中药白花前胡防治心律失常作用的实验研究Ⅰ——对氯化钡诱发大鼠心律失常的影响

采用多导记录仪同步连续观测的方法,记录中药白花前胡水醇提取液(Pd-wa)对氯化钡诱发大鼠心律失常、血压、心肌收缩最大上升速率及心率等指标的影响。结果:Pd-wa 1g/kg iv后5 min,给BaCl_2 4mg/kg iv,可使诱发的心律失常持续时间,由15.22±6.11min(对照组)降至6.94±4.40 min(P<0.01);BaCl_24 mg/kg iv诱发心律失常后,给Pd-wa,可立即制止心律失常的发作,持续时间约5 min,与对照组比较差别有统计学意义(P<0.05)。该药抗心律失常作用出现的同时,还对心脏有一定抑制作用。

四乙铵对正常及肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞外向钾电流作用的比较

以全细胞膜片钳制技术观察了正常及慢性常压低氧肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞外向钾电流，并进行了四乙铵（ＴＥＡ）对两种动脉外向钾电流作用的量效关系比较．结果表明：将细胞膜电位钳制在－５０ｍＶ，当指令电位大于－５０ｍＶ时，可以记录到电压依赖性的外向钾电流，且慢性常压低氧肺动脉高压时该电流较正常时为小；当指令电位为＋７０ｍＶ。

羧甲基壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞延迟外向钾电流的作用

研究羧甲基壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞延迟外向钾电流 (IK)的作用 ,从离子通道角度初步探讨其作用机理。应用膜片钳全细胞记录方式 ,设保持电位为 - 50 m V,指令电位为 - 50～ +70 m V,步阶脉冲 1 0 m V,刺激频率 1 Hz,波宽 1 0 0 0 ms,刺激间隔 5s的方波钳制方案。羧甲基壳聚糖能抑制 IK,并呈浓度依赖关系。选择指令电位 +70 m V时给药前后 IK 的变化进行统计 ,当浓度为 0 .1 %时 ,IK由给药前的 1 .1 6± 0 .30 n A减少至药后的 0 .96± 0 .2 7n A(n=4,P<0 .0 1 ) ,其抑制率是 1 7.70± 0 .0 5%。当浓度为 0 .2 %时 ,IK 由给药前的 1 .46±0 .62 n A减少至给药后的 1 .0 6± 0 .49n A(n=4,P<0 .0 1 ) ,抑制率是 2 8.66± 0 .0 6%。其它指令电位下的 IK 的改变也符合此趋势。羧甲基壳聚糖抑制豚鼠单一心室肌细胞延迟外向 K+ 电流。

白花前胡甲素对豚鼠单一心室肌细胞Ⅰ_K通道作用机制的初步探讨

目的通过比较白花前胡甲素（Pd－Ia）与异丙肾上腺素对豚鼠单一心室肌细胞迟发性外向钾电流（IK）的影响，初步探讨Pd－Ia开放钾通道作用的可能机制。方法；应用全细胞膜片钳制技术。结果与结论：Pd－Ia对IK通道作用的最大效应与异丙肾上腺素相近，均使IK增加2～2．5倍，对IK的激活动力学过程均无明显影响，而且两药的作用不具有相加性。另外，乙酰胆碱对Pd－Ia增加IK作用的影响也与对异丙肾上腺素的影响相似，提示Pd－Ia对IK的作用可能是通过激活PKA而产生的。其确切机制还有待进一步实验研究。

羧甲基壳聚糖对大鼠单一心房肌细胞超速激活延迟整流钾电流的作用

目的 探讨羧甲基壳聚糖 (CMCS)对心血管作用的机制。方法 利用膜片钳全细胞记录方式 ,双脉冲方波刺激 ,首先给一个时程为 2 0 0ms ,保持电位 - 6 0mV ,去极化到 +30mV的条件脉冲 ,间隔 2 0ms后 ,再给予波宽 12 0 0ms的方波刺激 ,保持电位- 6 0mV ,刺激电压从 - 40mV～ +5 0mV ,步阶电压10mV。结果 CMCS抑制IKur,当其浓度为 1和 2g·L- 1时 ,指令电位 +5 0mV的电流值分别由给药前的 ( 1.8± 0 .7)和 ( 2 .0± 0 .6 )nA下降到 ( 1.6± 0 .6 )(n =12 ,P <0 .0 1)和 ( 1.5± 0 .5 )nA (n =7,P <0 .0 1)。其他指令电位下的IKur的改变也符合此趋势。增加刺激频率及指令电压IKur的变化均不显著 ,提示CMCS对IKur的抑制作用不具有电压依赖性和频率依赖性。结论 CMCS可抑制大鼠单一心房肌细胞IKur。

多西紫杉醇对MCF-7人乳腺癌细胞延迟外向钾电流的作用

目的:探讨多西紫杉醇对MCF-7人乳腺癌细胞延迟外向钾电流(IK)的作用。方法:采用全细胞膜片钳记录方式,设保持电位-90mV,刺激电位为-60～+60mV,步阶脉冲10mV,波宽200ms,刺激间隔3s,刺激频率为2Hz。结果:随着多西紫杉醇的浓度增加,MCF-7细胞IK电流电压曲线斜率减少,多西紫杉醇对IK通道具有关闭作用;在同一指令电压下,IK随着多西紫杉醇浓度的增加而减少,具有剂量依赖性,当指令电压为+60mv时,多西紫杉醇浓度从1×10-7mol·L-1增加到1×10-5mol·L-1时,IK从(124.03±8.43)pA/pF,减少到(75.16±9.10)pA/pF,每个浓度的IK与给药前相比,差异显著(P<0.01)。结论:多西紫杉醇对MCF-7人乳腺癌细胞的延迟整流K+通道具有关闭作用,能够抑制乳腺癌细胞的增殖。

人乳腺癌细胞RECK基因的表达及检测

目的:研究人乳腺癌细胞株RECK基因的表达,阐明RECK基因表达水平与乳腺癌细胞侵袭力的关系。方法:采用transwell法,测定HBL-100,MCF-7和MDA-MB-435S三株人乳腺(癌)细胞的体外侵袭能力,同时应用免疫细胞化学技术,Westernblotting和RT-PCR技术分别检测三株细胞株MMP-2,MMP-9和RECK基因蛋白表达水平,及RECK基因mRNA转录丰度。结果:三株细胞中,MDA-MB-435S侵袭力最高(425.20±54.09),HBL-100最低(101.00±63.88),MCF-7居中,为(239.00±91.39),三组细胞的侵袭力比较差异均有显著性(P<0.01)。RECK基因在HBL-100细胞株中蛋白表达水平最高(免疫细胞化学值:3188.24±894.86;Westernblotting值:3.32±0.25),在MDA-MB-435S细胞株中不表达,MCF-7为(免疫细胞化学值:1058.92±336.53,P<0.01;Westernblotting值:2.23±0.59,P<0.05)。且在免疫细胞化学中,RECK基因的蛋白表达与MMP-2,MMP-9的表达水平成负相关。RECK基因在HBL-100细胞株中mRNA水平最高(2.32±0.02),在MDA-MB-435S细胞株中不表达(P<0.001)。结论:RECK基因表达水平与乳腺癌细胞体外侵袭力及MMP-2,MMP-9的表达水平成明显负相关。

扩张状态观测器在无人机纵向飞行控制中的应用

针对在设计无人机控制律时存在未建模动态和不确定扰动的特点,将未建模动态和不确定扰动视为综合扰动,引入扩张状态观测器对综合扰动项进行估计并补偿,设计出不依赖对象模型的改进PID控制器。仿真结果表明,该控制器在控制量品质、动态性能、稳态精度等方面都优于常规PID控制器。

促甲状腺素释放素增敏失血性休克大鼠心脏肾上腺素受体及其机理

采用失血性休克大鼠离体心脏观察了促甲状腺素释放素（ＴＲＨ）对肾上腺素受体激动剂正性肌力作用的影响及对肾上腺素受体数量和亲和力的影响，并用全细胞记录式膜片钳技术研究了ＴＲＨ对豚鼠单一心肌细胞慢钙内流及其对肾上腺素受体激动剂促钙内流作用的影响。结果表明，ＴＲＨ可上调失血性休克大鼠β肾上腺素和多巴胺受体数量，并增加β肾上腺素受体的亲和力。ＴＲＨ可延长心肌细胞膜钙通道开放时间，增加异丙肾上腺素和多巴胶的促钙内流作用，ＴＲＨ的这一作用可能是其增敏心脏肾上腺素受体，增强其激动剂正性肌力作用的重要原因。

灯盏花素对豚鼠心室肌细胞迟发性外向钾电流的影响

目的 观察灯盏花素对心室肌细胞迟发性外向钾离子电流的影响。方法 应用全细胞膜片钳制技术。结果 灯盏花素以剂量依赖的方式增加Ik,0 0 1g·L-1灯盏花素使Ik 增大 4 4 6 % (0 0 1<P <0 0 5 ) ,0 0 2 g·L-1灯盏花素使Ik增大 6 0 3% (P <0 0 1) ,灯盏花素此作用经冲洗可部分消退。结论 灯盏花素能促进K+ 通道开放 ,促进K+