壁虎不同提取工艺成分抗肿瘤作用的研究

目的比较壁虎不同提取工艺成分对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及免疫器官的影响。方法以肉瘤S180、肝癌H22荷瘤小鼠作为动物模型,以抑瘤率及胸腺、脾脏指数为指标比较壁虎原粉及水煎煮、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解、仿生酶解等不同工艺成分的抗肿瘤作用。结果 3种酶解工艺成分对肉瘤S180和H22肝癌抑瘤率均明显高于原粉与水煎煮液,相比模型组有显著性差异(P<0.05),但对荷瘤小鼠的胸腺指数、脾脏指数无明显影响。结论壁虎酶解工艺成分对S180、H22荷瘤小鼠均有明显抗肿瘤作用。

均匀设计法优选复方天麻钩藤口腔崩解片的半仿生提取工艺

目的均匀设计法优选复方天麻钩藤口腔崩解片半仿生提取(SBE)的最佳工艺条件。方法采用均匀设计,以天麻素、钩藤总碱、芍药苷、阿魏酸的量及干浸膏得率为指标,综合评判,优选半仿生提取的工艺条件。结果两次提取用水的pH分别为2.0、8.5,加水倍量为12倍,提取时间为2 h。结论优选出的半仿生工艺条件稳定、可行,适合工业生产。

复方天麻钩藤口腔崩解片质量标准研究

目的建立复方天麻钩藤口腔崩解片的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中的天麻、钩藤、当归、白芍进行定性鉴别，采用高效液相色谱法测定制剂中的天麻素。结果薄层鉴别图谱清晰，阴性对照无干扰。天麻素进样量在0．1912～1．1472μg范围内线性关系良好（n=0．9999），平均回收率为97．72％（RSD=1．40％，n=6）。结论本方法简便、重复性好，可有效控制制剂的质量。

HPLC法同时测定复方天麻钩藤口腔崩解片中3种成分

目的采用HPLC法同时测定复方天麻钩藤口腔崩解片（天麻、钩藤、白芍、当归）中天麻素、芍药苷和阿魏酸的含有量。方法该药物50%甲醇提取物的分析采用C18反相色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为230 nm（天麻素、芍药苷）和320 nm（阿魏酸）。结果天麻素、芍药苷、阿魏酸分别在0.153~1.377μg、0.298 6~2.687 4μg、0.022 68~0.204 12μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.4%、97.9%、97.4%。结论该方法可用于复方天麻钩藤口腔崩解片的质量控制。

口腔崩解片的研究进展

口腔崩解片是非常有特点且很有开发利用前景的口腔用固体制剂,为更好的促进口腔崩解片的发展,给临床用药提供参考,通过查阅文献,从口腔崩解片的特点、辅料选择、制备方法、技术要求及质量控制方面进行综述。

白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的研究白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫器官的影响。方法应用肉瘤S180、肝癌H22荷瘤小鼠作为动物模型,连续灌胃给药10 d后脱颈椎处死,剥离肿瘤、胸腺、脾脏,称质量,计算抑瘤率及胸腺、脾脏指数。结果分别以30,20和10 mg.kg-1剂量的白花蛇舌草多糖灌胃,对肉瘤S180的抑制率分别为36.09%,28.66%和17.54%,对肝癌H22的抑制率分别为49.68%,40.47%和27.19%,相比模型组有显著性差异(P<0.05),对荷瘤小鼠的胸腺指数、脾脏指数无明显影响。结论白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠均有抗肿瘤作用,并呈现一定的量效关系。

白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞生长的影响

目的研究白花蛇舌草多糖对体外培养的人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞生长的影响。方法常规法体外培养人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞,设空白对照组、阳性对照组和供试药物组(大、中、小剂量),分别采用MTT法和流式细胞仪检测白花蛇舌草多糖对人宫颈癌Hela细胞和人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制率和凋亡率;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果白花蛇舌草多糖可抑制人肝癌Bel-7402细胞和人宫颈癌Hela细胞的生长,并促进其凋亡,其作用效果与其浓度正相关,与空白对照组相比具均有显著性差异(P﹤0.01)。结论本研究结果提示,白花蛇舌草多糖具有较好的抗肿瘤活性。

半仿生提取法应用的研究进展

半仿生提取法是模仿口服给药在胃肠道的转运过程，采用选定的pH值的水提取，以提取“活性混合体”。该方法将中药或复方的药效物质最大限度地提取出来，能保持原中药或复方中药原有的功效。由于中药进入消化道内在各种酶的作用下发挥其药理作用，因此在半仿生提取法（SBE）基础上发展了半仿生一酶提取法。本文对SBE法的应用进展进行了综述，为中药及其复方的提取工艺研究提供借鉴。

HPLC测定湿毒清胶囊中苦参碱的含量

目的建立湿毒清胶囊中苦参碱含量的HPLC测定法。方法 C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈-0.02%三乙胺溶液(25:75),流速为1 mL·min-1,检测波长为220 nm。结果测得线性范围0.300 2μg^2.401 6μg(r=0.999 9),平均回收率为97.79%,RSD为1.69%(n=5)。结论本方法简便可行,重现性好,结果可靠,可用于湿毒清胶囊的质量控制。

文冠果油神经酸乙酯对脱髓鞘小鼠脂肪酸、血脂的影响

目的探究文冠果油神经酸乙酯对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的脱髓鞘小鼠脂肪酸、血脂的影响。方法SPF级雌性昆明小鼠50只,除空白组(KO)外,通过在饲料中加入0.25%CPZ饲喂雌性昆明小鼠造模并分为模型组(CPZ)、神经酸乙酯低剂量组(NA-L,0.001912 mL/g)、神经酸乙酯中剂量组(NA-M,0.003824 mL/g)、神经酸乙酯高剂量组(NA-H,0.007648 mL/g),持续5周至实验结束。于造模2周后开始给药至第5周结束后取材,并通过气相色谱仪、血脂仪分别检测文冠果油神经酸乙酯对CPZ诱导的脱髓鞘小鼠脑组织、肝脏、心脏、血清、粪便里的脂肪酸含量及血液中血脂水平的影响。结果与KO组相比,CPZ组脱髓鞘小鼠脑组织、肝脏、心脏中神经酸、芥酸含量显著下降(P<0.05);与CPZ组相比,NA-L、NA-M、NA-H组小鼠脑组织、肝脏、心脏、血清、粪便中的神经酸含量均显著增加(P<0.05),其中KO、CPZ组小鼠血清、粪便中未检测到神经酸和芥酸,NA-L、NA-M、NA-H组小鼠血清、粪便中含有一定量的神经酸和芥酸;与KO组相比,CPZ组血脂升高;与CPZ组相比,NA-L、NA-M、NA-H组均可降低血液中的甘油三酯(triglyceride,TG)含量,升高高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量。结论在饲料中添加0.25%CPZ诱导小鼠脱髓鞘会导致小鼠血脂升高,降低小鼠体内神经酸、芥酸含量,脱髓鞘疾病与神经酸的积累有关,脱髓鞘疾病会导致神经酸的供应受损。在这种情况下,文冠果油神经酸乙酯提取物能够增加脱髓鞘小鼠体内神经酸及芥酸含量,提高脑组织不饱和脂肪酸含量,调节脱髓鞘小鼠血脂水平。此外,神经酸、芥酸参与脱髓鞘小鼠体内代谢,并在小鼠体内共存,文冠果油神经酸乙酯提取物可作为脱髓鞘小鼠补充神经酸的外源性物质。

地黄饮子通过PI3K/Akt和MAPK信号通路双重调节db/db小鼠视网膜胰岛素抵抗和糖代谢异常的机制研究

目的探讨地黄饮子通过磷脂酰肌醇三激酶-蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)和丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路双重调节db/db小鼠视网膜胰岛素抵抗和糖代谢异常,探究地黄饮子多途径发挥治疗糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)作用的分子机制。方法10只db/m小鼠作为空白组,30只db/db小鼠随机分为模型组、地黄饮子组(地黄饮子,30.03 g/kg)、阳性对照组(二甲双胍,0.61 g/kg)。药物干预4周,每周检测小鼠体质量、空腹血糖。末次给药后进行口服糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)及胰岛素耐量试验(insulin tolerance test,ITT)并计算曲线下面积(area under the curve,AUC);葡萄糖氧化酶法检测小鼠视网膜葡萄糖含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠视网膜胰岛素含量;苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠视网膜组织病理改变;免疫组化法检测视网膜组织胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS1)、葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测视网膜PI3K、Akt、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated kinase,ERK)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal protein kainse,JNK)、丝裂原活化蛋白激酶p38抗体(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)mRNA表达量。结果与空白对照组相比,模型组小鼠空腹血糖显著升高(P<0.01);OGTT、ITT试验各时间点血糖均升高(P<0.05,P<0.01);视网膜组织水肿,新生血管生成;视网膜葡萄糖、胰岛素含量升高(P<0.01);IRS1蛋白表达量显著升高而GLUT4蛋白表达量显著降低(P<0.01);PI3K、Akt mRNA表达量降低(P<0.05,P<0.01)、ERK、JNK、p38MAPK mRNA表达量升高(P<0.05,P<0.01)。地黄饮子和阳性对照药物均可降低小鼠OGTT、ITT试验AUC(P<0.01);改善视网膜水肿,减少新生血管;降低视网膜葡萄糖、胰岛素含量(P<0.05,P<0.05);降低小鼠视网膜IRS1蛋白表达,提高GLUT4蛋白表达(P<0.05,P<0.01)、升高PI3K、Akt mRNA表达量,降低ERK、JNK、p38MAPK mRNA表达量(P<0.05,P<0.01)。结论地黄饮子可通过激活PI3K/Akt信号通路和抑制MAPK信号通路双重调节GLUT4表达从而改善db/db小鼠视网膜胰岛素抵抗和糖代谢异常。

逍遥散对肝郁气滞证视神经炎大鼠视路NR1表达研究

目的:研究逍遥散对肝郁气滞证视神经炎大鼠视路外侧膝状体、视皮质NR1表达的影响。方法:将60只大鼠按RAND函数随机分为正常组、肝郁气滞证视神经炎组(病证结合组)、逍遥散加肝郁气滞证视神经炎组(给药组)3组。采用EAE动物模型方法建立视神经炎大鼠模型,同时应用慢性束缚应激方法增加肝郁气滞因素,最终形成肝郁气滞证视神经炎大鼠模型。观察大鼠行为学,记录旷场实验,利用上述指标评价模型造模成功后,免疫组化法检测各组大鼠外侧膝状体、视皮质NR1的动态变化。结果:逍遥散能降低EAE神经功能评分,旷场实验总分降低,病证结合组外侧膝状体、视皮质NR1表达增高,给药组表达降低。结论:逍遥散可以降低肝郁气滞证视神经炎大鼠视路NR1的表达,可调节肝郁气滞证视神经炎大鼠的功能紊乱。

基于网络药理学探讨女贞子治疗糖尿病肾病作用机制

目的 探究女贞子治疗糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法 通过网络药理学数据库筛选女贞子和DN作用靶点,进行蛋白互作(PPI)、基因本体论(GO)数据库和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库分析。结果 得到女贞子作用于DN的关键靶点18个,分别与细胞转录、生长、信号转导、炎症等相关;KEGG富集分析发现,女贞子与晚期糖基化产物、动脉粥样硬化、炎症因子等通路密切相关。结论 初步探究了女贞子治疗DN的作用机制,为后续实验提供理论基础。

基于HIF-1α/VEGF信号通路探讨大黄䗪虫丸抑制KM小鼠肿瘤血管的机制研究

目的 研究大黄䗪虫丸对昆明(KM)小鼠移植瘤的抑瘤率、体积、质量、缺氧诱导因子(Hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)、肿瘤血管密度(Microvascular density, MVD)的影响,探讨大黄䗪虫丸是否是通过HIF-1α/VEGF信号通路达到抑制肿瘤血管生成进而控制肿瘤生长的作用。方法 将H22人肝癌细胞注射到KM小鼠进行小鼠皮下移植瘤造模,造模成功后按照随机数字表法分为空白组、模型组、大黄䗪虫丸低剂量组、大黄䗪虫丸中剂量组、大黄䗪虫丸高剂量组和索拉非尼组,每组各15只,实验干预1次/d,连续干预2周。大黄䗪虫丸低剂量组、中剂量组、高剂量组和索拉非尼组均给予相应药物灌胃,模型组给予生理盐水灌胃。实验干预结束后取瘤体,对各组瘤体长、短径进行测量,计算瘤体的抑瘤率、体积及体质量并记录;采用苏木精-伊红染色法检测各组肿瘤组织形态学的病理变化;实时荧光定量聚合酶链反应法检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平;蛋白印记法检测HIF-1α和VEGF蛋白表达水平;采用免疫组织化法检测肿瘤组织检测反映MVD的表达。结果 体积抑瘤率比较,大黄䗪虫丸低、中、高剂量组的抑瘤率分别为17.11%、21.73%和37.09%,索拉非尼组的抑瘤率为46.75%;HE染色结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸高剂量组可使肿瘤组织出现大面积的坏死区域;PCR和WB结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸各治疗组均可不同程度的显著降低肿瘤组织HIF-1α、VEGF mRNA蛋白水平表达(P<0.05,P<0.01);CD31-MVD结果显示:与模型组比较,大黄䗪虫丸高剂量组MVD明显减少(P<0.05)。结论 大黄䗪虫丸可能是通过HIF-1α/VEGF信号通路达到抑制肿瘤血管生成进而控制肿瘤的生长。

肝宁胶囊的质量标准研究

目的:对肝宁胶囊质量标准进行研究。方法:采用薄层色谱法对处方中的紫草进行定性鉴别;采用气相色谱法对处方中的斑蝥素进行含量测定。结果:在薄层色谱中可检出紫草的特征斑点;斑蝥素在0.013 8μg^0.124 2μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,回收率为98.466%(RSD=1.92%,n=5)。结论:本方法简便可行、重复性好,能有效控制该制剂的质量。

“目系属肝”辨析

目系是中医眼科的重要解剖结构之一,《内经》中已有记载,但在往后日臻完善的各种眼科辨证理论体系中,未见系统论及目系;目系的脏腑归属也一直没有形成学说。通过探讨目系的解剖结构,目系的生理功能、病理特点,目系与肝的生理联系、病理影响以及目系疾病的临床征象,来论证目系与肝的关系,提出目系属肝的理论,以期完善目前的藏象学说。

高效液相色谱法同时测定复方藿枝颗粒中淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ、甘草苷和甘草酸铵的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定复方藿枝颗粒中淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ、甘草苷和甘草酸铵含量的方法。方法采用Waters C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~10 min,20%A;10~60 min,45%A);流速:1 mL·min^-1;检测波长:265 nm;柱温:30℃。结果淫羊藿苷、甘草苷、宝藿苷I和甘草酸铵分别在92.25~922.5 ng,4.9~49 ng,84.75~847.5 ng,144~1 440 ng范围内线性关系良好;平均加样回收率(RSD)分别为98.72%(1.74%)、98.95%(1.67%)、98.66%(1.88%)、98.53%(1.42%)。结论该方法简便、稳定、重现性好,可用于复方藿枝颗粒的质量控制。

HPLC法同时测定心脑康胶囊中3种成分

目的建立HPLC法同时测定心脑康胶囊(丹参、赤芍、葛根等)中3种成分的含有量。方法该药物50%乙醇提取液的分析采用Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-水(含0.2%磷酸),梯度洗脱;检测波长241 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃。结果葛根素、芍药苷、甘草酸铵分别在2.47~41.99μg/mL (r=0.999 7)、4.83~82.14μg/mL(r=0.999 9)、2.49~42.43μg/mL(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率(RSD)分别为98.58%(1.6%)、96.06%(1.4%)、97.61%(1.7%)。结论该方法稳定可靠,可用于心脑康胶囊的质量控制。

提高中药药剂学实验教学培养质量的思考

中药药剂学是中药学类专业的一门核心课程,具有综合性、创造性、实用性的特点,其实验教学在中药学类专业人才的实践动手能力方面,以及培养综合应用知识能力方面都具有十分重要的作用。本文主要对如何提高中药药剂学的实验教学质量,发挥其在人才培养中的积极作用进行了思考与探索,以期与各位同仁交流与学习,促进中药药剂学的实验课教育教学质量的不断提高。

党参-茯苓-甘草水提物对学习记忆障碍小鼠的抗氧化及免疫调节功效评价

本文旨在研究药食两用中药党参、茯苓、甘草水提物对学习记忆障碍小鼠的改善作用,评价其抗氧化活性及免疫调节功效。腹腔注射氢溴酸东莨菪碱建立学习记忆障碍模型,新物体识别实验评价水提物对学习记忆障碍小鼠的行为学改善作用;ELISA检测小鼠脑海马组织中SOD、GSH-Px酶活性及MDA含量,血清IL-2、TNF-α水平,脾脏NK细胞活性。负重游泳实验评价水提物对正常小鼠的抗疲劳作用;比重法测定胸腺指数与脾脏指数。结果发现,水提物高剂量组(40 g/kg·d)的效果最佳,在不影响小鼠自主活动的前提下,能够使记忆障碍小鼠的新物体识别指数提高18.35%;SOD、GSH-Px分别提高了65.56 U/mg、437.00 U/mg,MDA降低了6.30 nmol/mg;IL-2、TNF-α分别降低了78.43 pg/mL、160.20 pg/mL,NK细胞的活性提高了2488.81 U/g。还能够使正常小鼠的负重游泳时间比正常组增加60.12 s;胸腺指数与脾脏指数分别增加了0.06%与0.10%,SOD、GSH-Px分别提高了79.52 U/mg、345.30U/mg,MDA降低了1.05 nmol/mg,NK细胞活性提高了1816.31 U/g。这表明党参-茯苓-甘草水提物能够发挥其抗氧化、免疫调节功能,对学习记忆障碍小鼠起到改善作用,并且具有一定抗疲劳功效。