实时荧光定量聚合酶链反应技术在结核性脑膜炎中的诊断价值

目的用涂片、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测结核分枝杆菌,探讨其临床应用价值。方法对临床确诊的结核性脑膜炎(n=110)、可疑结核性脑膜炎(n=205)和非结核性脑膜炎(n=100)患者的脑脊液标本分别采用涂片、RT-PCR两种方法进行检测,对结果进行对比分析。结果 415例脑脊液标本中,脑脊液涂片检查阳性率为2.4%(10/415),PCR检测阳性率为12.5%(52/415);脑脊液涂片、PCR法检测110例临床确诊的结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为6.4%(7/110)、26.4%(29/110);检测205例临床可疑结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为1.5%(3/205)、11.2%(23/205)。比较两种方法的阳性检测率,差异有统计学意义(P<0.05),检测100例非结核患者脑脊液标本,涂片及PCR检测均为阴性。结论 RT-PCR法检测脑脊液中TB-DNA对结核性脑膜炎的诊断有决定意义,具有较高临床应用价值。

T-SPOT.TB联合ADA和TB-DNA在诊断结核性胸膜炎中的应用价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)技术联合胸水腺苷脱氨酶(ADA)和痰液结核杆菌(TB-DNA)测定对结核性胸膜炎的定性诊断,以达到早期诊断的目的。方法选取唐都医院2014年7月-2015年12月收治的86例结核性胸膜炎患者作为试验组,80例非结核性胸膜炎患者作为对照组,均行T-SPOT.TB检测,同时联合检查患者胸水ADA和痰液TB-DNA,比较T-SPOT.TB、ADA和TB-DNA检测与三者联合检测的应用价值。结果 86例结核性胸膜炎患者,T-SPOT.TB阳性率为84.88%(73/86),ADA阳性率为53.48%(46/86),痰液TB-DNA阳性率为31.40%(27/86),三者联合检测阳性率为93.02%(80/86)。结论 T-SPOT.TB检测联合ADA和痰液TB-DNA检测对结核性胸膜炎的诊断有较高的敏感性,对疑似结核性胸膜炎患者的快速、准确诊断具有重要的辅助诊断价值。

961例呼吸道感染患儿MP-DNA检测结果分析

目的分析肺炎支原体DNA（MP-DNA）阳性患儿的临床和实验室资料,为诊断和治疗MP感染提供依据。方法采用实时荧光定量PCR法对具有呼吸道症状的患儿进行MP-DNA检测,对其中171例MP-DNA阳性患儿的临床资料进行分析。结果 961例患儿的总阳性率为17.79%;2010~2012各年份阳性率比较差异有统计学意义（P〈0.01）;学龄前组感染率最高（P〈0.01）;第3季感染率明显高于其他3个季度（P〈0.05）;痰液和灌洗液有很高的阳性率;171例MP-DNA阳性患儿临床诊断为肺炎支原体肺炎90例,占52.93%。结论本地区MP感染率较高,且呈逐年上升趋势,学龄前儿童为高危人群,实时荧光定量MP-DNA具有快速、简便、敏感性高、特异性强的特点,适宜多种标本类型的检测,是临床上早期诊断肺炎支原体感染的有效方法。

HBV-DNA定量检测应用中的几个理解误区

对实时荧光HBV-DNA 定量检测常见的几个理解误区进行分析探讨,主要涉及HBV血清标志物与DNA定量、DNA定量结果的分析以及诊断与治疗,旨在加强与临床医生沟通、信息反馈,增进相互理解,形成共识,更好地服务于患者.

结核感染T细胞斑点试验诊断结核性胸膜炎的评价

目的:探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)技术在结核性胸膜炎诊断中的价值。方法:回顾分析78例结核性胸膜炎患者的临床资料及T-SPOT.TB检测结果,并与同期进行的胸水中找抗酸杆菌及影像学检查进行对比分析。结果:78例胸腔积液标本中,T-SPOT.TB阳性率为84.84%(56/66),高于同期的胸腔积液抗酸杆菌检查诊断的9例(阳性率为13.63%,9/66)和影像学检查诊断的64例(阳性率为37.50%,24/64),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:T-SPOT.TB检测对结核性胸膜炎的诊断有较高的敏感性,是一种安全、有效的方法。

结核性胸膜炎诊断方法在临床应用中的对比研究

目的探讨结核性胸膜炎的病理学检查、影像学(CT)特征及试验检测指标特点,以达到早诊断、早治疗的目的。方法选取该院2014年7月至2015年12月收治的86例结核性胸膜炎患者作为试验组,80例非结核性胸膜炎患者作为对照组,均行胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)、结核杆菌DNA(TB-DNA)、抗酸染色,同时联合结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)和影像学检查,并与病理学检查进行对比分析,比较各种检查方法的应用价值。结果 86例结核性胸膜炎患者中,ADA、TB-DNA、抗酸染色、T-SPOT.TB和影像学检查的灵敏度分别为53.48%(46/86)、6.98%(6/86)、11.62%(10/86)、84.88%(73/86)、37.21%(32/86),特异度分别为95.00%(76/80)、100.00%(80/80)、100.00%(80/80)、61.25%(49/80)、98.75%(79/80)。ADA、TB-DNA、T-SPOT.TB和影像学检查与病理检查的符合度分别为83.02%(44/53)、11.32%(6/53)、88.68%(47/53)、60.38%(32/53)。结论影像学和试验检测指标上的差异,对于结核性胸膜炎的的临床诊断具有一定的指导意义,临床上除常规检查外,应尽可能完善其他检查,进行综合分析以提高诊断准确性。

实时荧光定量PCR检测肺炎支原体DNA在小儿肺炎诊断中的应用价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测肺炎支原体（MP）DNA在小儿肺炎诊断中的应用价值。方法采用FQ-PCR对该院742例儿科住院患儿的血清、痰液、胸腔积液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液临床标本进行MPDNA的定量检测。结果742例患儿中MPDNA检测总阳性率为40．3％（299／742）；男、女性患儿MPDNA阳性率的差异无统计学意义（P〉0．05）；4～〈7岁、7～〈10岁、10～〈13岁、13～16岁组，MPDNA阳性率均高于0～〈4岁组（P〈O．05）；不同种类标本的阳性率不同，由高到低依次为支气管灌洗液（96．5％）、肺泡灌洗液（83．7％）、痰液（71．7％）、胸腔积液（38．9％）、血清（6．1％）。结论4岁及4岁以上儿童易感染肺炎支原体，且随着年龄增长感染率逐渐增高；支气管灌洗液标本的MPDNA阳性率较高；FQ-PCR法检测MP DNA用于肺炎支原体感染的诊断有一定价值。

生殖道感染与不孕不育的关系

目的探讨生殖道淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)感染与不孕不育的关系。方法以1 038例不孕不育症患者作为实验组,1 012例正常孕前检查者或健康体检者作为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测各组NG-DNA,CT-DNA及UU-DNA水平。结果实验组UU-DNA核酸扩增平均拷贝数最高(1.11E+08),阳性率为63.2%(317/502),CT感染阳性率为38.1%(177/464),同时感染CT和UU的阳性率为34.9%(109/312)。NG-DNA核酸扩增平均拷贝数为9.81E+05,阳性率为33.3(24/72)。实验组NG、CT、UU和UU+CT的阳性率均明显高于对照组(P<0.05),实验组夫妇间UU和CT感染阳性率均存在相关性(P<0.01)。结论生殖道NG、CT、UU感染是导致不孕的重要因素,对不孕不育夫妇同时进行常规NG、UU、CT检测非常必要。

2型糖尿病和糖尿病并发肾病患者糖化白蛋白及其相关代谢标志物水平的检测及其意义

目的:检测2型糖尿病及糖尿病并发肾病(DN)患者糖化白蛋白(GA)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血脂和同型半胱氨酸(Hcy)等代谢标志物的表达水平,分析上述指标与尿微量白蛋白/肌酐比值(ACR)的相关性,探讨GA、HbA1c等代谢标志物对糖尿病及DN早期诊断及治疗监测的意义。方法:选取178例糖尿病患者作为病例组(其中70例单纯糖尿病患者,108例DN患者),病例组患者按ACR分为糖尿病无肾病组(正常清蛋白尿组)、早期DN组(微量白蛋白尿组)和临床DN组(大量白蛋白尿组)。另选100名健康人作为对照组。分别记录所有受检者年龄、性别,检测身高、体质量、血压、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、脂蛋白a(Lpa)、Hcy、HbA1c、GA、尿微量清蛋白及尿肌酐,计算ACR并进行比较,分析各项指标水平的改变与糖尿病DN的相关性。结果:与对照组比较,病例组患者的GA、HbA1c、TG、TC、LPa和Hcy水平均有显著升高的趋势(P<0.01);3个病例组间,随着各组患者ACR的升高,其GA、HbA1c、TG、Lpa和Hcy水平均有上升趋势(P<0.05),TC水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05);GA、HbA1c、TG、Lpa、Hcy与ACR的变化具有相关性(GA:r=0.89,HbA1c:r=0.91,TG:r=0.62,Lpa:r=0.78,Hcy:r=0.72,均P<0.05);TG、LPa、Hcy的变化与HbA1c、GA水平的改变无显著的相关性(TG:r=0.31,r=0.41,P>0.05;Lpa:r=0.27,r=0.42,P>0.05;Hcy:r=0.24,r=0.33,均P>0.05)。结论:GA及其相关标志物在2型糖尿病和DN患者中表达异常,并与病程密切相关。联合检测GA及糖尿病相关标志物对糖尿病及其并发症的早期诊断、治疗和预后有一定的临床指导意义。

HCV-RNA阳性236例临床与实验室特征分析

目的:对HCV-RNA阳性患者血清中抗-HCV、ALT、AST、AFP、ALP、GGT定量指标与HCV-RNA含量进行比较分析,探讨其相关性及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR检测236例肝病患者血清标本HCV-RNA含量,生化定量指标用生化自动分析仪检测,抗-HCV定量采用时间分辨法检测,AFP采用电化学发光法检测。结果:HCV-RNA含量与抗-HCV、ALT、AST、AFP、ALP、GGT各指标的异常率呈正相关,但与各指标含量无相关性。结论:抗-HCV异常率和HCV-RNA含量呈正相关,提示在丙型肝炎的诊断和预后判断中具有重要意义,二者同时检测可以提高临床对丙型肝炎的诊断效率;将抗-HCV、HCV-RNA、ALT、AST、AFP、ALP、GGT等多项指标有机结合起来,在正确诊断和预测肝脏损伤及疗效观察中具有重要的临床意义。

尿液结核分支杆菌检测方法在泌尿系结核诊断中的应用研究

目的采用涂片法及实时荧光定量PCR法检测尿液中的结核分支杆菌,探讨不同检测方法对泌尿系结核诊断及鉴别的应用价值。方法 141例临床确诊或可疑的泌尿系结核患者尿液标本经涂片及RT-PCR两种方法进行检测,同期选取60例非泌尿系结核患者为对照组,不同组间检测结果进行比对分析。结果经涂片、RT-PCR法检测尿液标本,51例临床确诊的泌尿系结核患者阳性率分别为7.84%(4/51)、70.59%(36/51);90例临床可疑泌尿系结核患者阳性率分别为5.56%(5/90)、36.67%(33/90);60例非泌尿系结核患者尿液标本涂片及PCR检测均为阴性,两种方法阳性检测率存在明显差异且有统计学意义(P<0.01);实时荧光定量PCR具有高的灵敏度(70.59%)和特异度(100%)。结论实时荧光定量PCR法检测尿液中TB-DNA对泌尿系结核的诊断和鉴别具有较高的临床应用价值。

233例患者多项实验室检测指标分析

目的分析丙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清丙型肝炎病毒(HCV)-RNA载量、抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甲胎蛋白(AFP)相关实验室指标变化情况,探讨HCV感染后不同疾病阶段患者检测指标间的相关性及其在疾病进展过程中的变化,为疾病的诊治提供依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测患者血清HCV-RNA载量,时间分辨荧光定量法检测抗-HCV水平,全自动生化分析仪检测ALT、AST水平,化学发光法检测AFP水平。结果丙型肝炎、肝硬化及肝癌3组患者HCV-RNA载量对数值分别为5.96±1.61、5.54±1.26、5.19±1.38,丙型肝炎组明显高于肝硬化组及肝癌组,差异均有统计学意义(t=2.677、1.771,P<0.05),肝硬化组与肝癌组差异无统计学意义(t=1.612,P>0.05)。随着HCV-RNA载量升高,抗-HCV阳性率在丙型肝炎(r=0.729)、肝硬化(r=0.900)和肝癌(r=0.737)阶段均升高,呈正相关,但与抗体水平无明显相关性。肝硬化和肝癌阶段抗体水平均较丙型肝炎组低,抗体阳性率均较丙型肝炎组高,但差异均无统计学意义(P>0.05)。丙型肝炎、肝硬化及肝癌3个阶段病毒载量与AST、ALT、AFP异常率均呈正相关,但与检测水平无明显相关性。结论 HCV-RNA载量在疾病进展中有逐渐下降的趋势,提示在疾病的诊治过程中监测HCV-RNA对判断疾病的转归有重要作用;病毒载量与抗体、AST、ALT、AFP异常率均呈正相关,但与其水平无明显相关性,将抗-HCV和HCV-RNA结果有机结合是临床诊断HCV感染的最佳选择,联合检测各项生化免疫指标在正确诊断和预测疾病进展及疗效观察中具有重要临床意义。

8种血液病患者人巨细胞病毒感染情况分析

目的探讨不同血液病患者人巨细胞病毒(HCMV)感染情况。方法选取该院8种血液病患者共274例,采用实时荧光定量PCR法对患者血液或尿液进行HCMV DNA检测。结果血液病患者感染率由高到低依次为急性淋巴细胞白血病(ALL,39.47%)、急性混合型白血病(AL,28.57%)、急性非淋巴细胞白血病(ANLL,26.15%)、再生障碍性贫血(AA,20.34%)、骨髓异常增生综合征(MDS,14.29%)、慢性粒细胞白血病(CML,13.64%)、三系血细胞减少(0.40%),19例非霍奇金淋巴瘤(NHL)未检出HCMV感染。274例患者总阳性率达13.87%,其中AL阳性率最高(23.02%)。肿瘤患者HCMV感染率高于非肿瘤患者,感染率分别为24.85%和13.76%,差异有统计学意义(χ2=4.339,P<0.05)。8种血液病患者HCMV DNA载量均值为5.00×103 IU/mL,最高达1.29×106 IU/mL。结论 8种血液病患者存在不同程度的HCMV感染,且肿瘤患者较非肿瘤患者感染率更高。

大型火电机组协调控制方案探讨

介绍了大型火电厂协调控制方案的原理,列举和利时自动化有限公司的HOLLIAS-MACS分散控制系统(DCS)在300MW火电厂机组运行控制中协调方案的实际应用,反映了协调控制系统在电厂运行中的重要性并对机炉负荷协调模式进行了探讨。

Logistic回归和人工神经网络在鉴别诊断肺癌性胸腔积液中的应用研究

目的应用Logistic回归分析方法和人工神经网络(artificial neural network,ANN)技术,评估血清(serum,S-)和胸腔积液(pleural effusion,P-)中的癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(FRT)、神经元特异性稀醇化酶(NSE)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC)、糖类抗原50(CA50)、糖类抗原125(CA125)和细胞角蛋白19片段(CY21-1)在鉴别肺癌性胸腔积液(malignant pleural effusion of lung cancer,LC-MPE)与良性胸腔积液(benign pleural effusion,BPE)中的应用价值,建立通过肿瘤标志物诊断LC-MPE的诊断模型。方法对临床初诊的LC-MPE和BPE患者的血清和胸腔积液肿瘤标志物结果进行分析,应用Logistic回归分析和ANN技术分别建立诊断LC-MPE的诊断模型。结果S-NSE、S-CY21-1、P-CEA和P-NSE4项指标被筛选出并用于建模,研究建立的诊断LC-MPE的Logistic回归模型的灵敏度为93.23%,特异度为97.46%,ROC曲线下面积为0.992。建立的ANN模型的灵敏度为95.35%,特异度为97.22%,ROC曲线下面积为0.990(P<0.05)。结论在通过肿瘤标志物诊断LCMPE方面,建立的Logistic回归模型和ANN模型均有较好的诊断性能,上述2个模型均可辅助临床医生提高诊断准确率。

基于标准曲线的两台PCR仪检测结果的可比性分析

目的分析同一实验室2台实时荧光定量PCR仪标准曲线相关参数的可比性。方法常规条件下,使用同一批号试剂,将HBV DNA检测标准品与待测标本、室内质控在2台实时荧光定量PCR仪上同时进行扩增,比较标准曲线的斜率、截距及Ct值,分析检测结果的一致性。结果作为单一检测系统,相同批号标准品在同一批号检测试剂的多批次实验中,2台仪器均有良好重复性,2台实时荧光定量PCR仪之间的测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论实验室存在多台实时荧光定量PCR仪时,可通过分析标准曲线的相关参数来监测不同仪器间检测结果的一致性,保证检测结果的准确可靠。

国华盘山输煤系统PLC改造为DCS控制

天津国华盘山发电有限责任公司输煤系统采用的是PLC控制系统,于1999年改造,已经运行超过18年,I/O模块以及网络通讯等故障多发,为保证系统安全运行,将该输煤控制系统更换为DCS系统控制。本次输煤控制系统改造为“在线”升级改造方式。本文通过该项目系统设计及调试过程中遇到的问题处理进行介绍,为后续类似改造项目提供借鉴。

狼疮性肾炎患者肾组织差异表达基因筛选及功能分析

目的筛选狼疮性肾炎(LN)患者肾组织中差异表达基因(DEGs)并对其进行功能分析。方法GSE32591和GSE112943数据集分别包括LN肾小管间质、LN肾小球、LN肾组织及其各自的正常对照组织的转录组数据;GSE81622包含LN患者及健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)转录组数据。利用GEO2R在线分析工具筛选DEGs。利用DAVID对筛选的DEGs进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。利用STRING数据库进行蛋白互作网络(PPI)分析,并筛选核心DEGs。分析LN肾组织中核心DEGs在LN患者PBMC中的表达变化情况。结果LN肾组织中共筛选出37个表达上调基因和8个表达下调基因。GO分析显示,DEGs主要参与和病毒防御相关的生物过程,如病毒的响应、Ⅰ型干扰素信号通路等,分子功能包括RNA结合、GTP结合及解旋酶活性等。KEGG通路分析显示DEGs主要参与病毒感染相关通路。PPI分析筛选出12个核心DEGs:EGR1、FOSB、IFI27、IFI6、IFIT2、IFIT3、IFITM1、IFITM3、MX1、MX2、OAS1、XAF1,其中除EGR1表达下调外(P<0.01),其余DEGs均表达升高(P<0.01)。然而,在LN的PBMC中,EGR1表达上调(P<0.01),FOSB和IFITM1的表达变化差异无统计学意义(P>0.05),其他9个核心DEGs表达上调(P<0.01),与在LN肾组织中变化一致。结论LN患者肾组织中关键DEGs主要与干扰素信号通路相关。

胸腔积液与血清中的癌胚抗原及其比值对结核性与肺癌性胸腔积液的诊断价值

目的探讨联合检测胸腔积液癌胚抗原(PCEA)和血清癌胚抗原(SCEA)以及二者比值(PCEA/SCEA,P/S)在鉴别结核性与肺癌性胸腔积液中的临床诊断价值。方法选取并收集我院2016年4月～2018年3月收治的临床确诊的82例结核性胸腔积液液患者(对照组)和120例肺癌性胸腔积患者(试验组)的胸腔积液和血清进行CEA水平检测,计算出P/S值,再将试验组按照不同病理类型分成鳞癌、腺癌和小细胞癌3个亚组进行组间和组内比较,以测得各组间检测指标的水平差异。创建受试者工作特征曲线(ROC曲线)进行分析以确定诊断肺癌性胸腔积液的最佳临界值,以其为诊断标准,计算出单项检测以及联合检测的诊断性能。结果肺癌组和3个亚组的PCEA、SCEA以及P/S水平均高于结核组(P<0.05);3项指标的ROC曲线下面积分别为0.925、0.866和0.796,以PCEA为最高,其灵敏度、特异度、准确率、最佳临界值分别为:83.33%、96.34%、88.61%、3.26 ng/mL;SCEA诊断性能最低,但具有取材简便、无创伤的优点;P/S诊断性能高于SCEA、低于PCEA,但与SCEA联合诊断后可大大提高诊断性能,减少误诊和漏诊;并联试验中的三者联合检测的敏感度均高于单项和两两联合检测(P<0.05),特异度无统计学差异;三者联合诊断肺癌性胸腔积液的曲线下面积为0.941,均高于单项和两两联合检测。结论在肯定PCEA诊断优势的同时,也要考虑到SCEA和P/S的不可或缺性。PCEA、SCEA和P/S三者联合检测对肺癌性胸腔积液的诊断有较高的敏感性,对疑似病例的快速、准确的鉴别诊断具有重要的辅助价值。

胸腔积液中B7-H4蛋白联合ADA和CEA水平检测在胸腔积液鉴别诊断中的应用价值

目的:检测肺癌性胸腔积液(LC-MPE)和结核性胸腔积液(TPE)中B7-H4蛋白、腺苷脱氨酶(ADA)和癌胚抗原(CEA)水平,评价其单独或联合检测对LC-MPE与TPE的鉴别诊断价值。方法:收集120例肺癌患者(LC-MPE组)和82例结核性胸膜炎患者(TPE组)共202例胸腔积液(PE)样本。采用酶速率法、电化学发光法和ELISA法检测2组患者PE中ADA、CEA和B7-H4蛋白水平,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析以确定单项指标以及联合模式的诊断效能指标[灵敏度、特异度、约登指数(YI)和ROC曲线下面积(AUC)]。结果:TPE组患者PE中ADA水平高于LC-MPE组(P<0.05);LC-MPE组患者PE中B7-H4蛋白和CEA水平高于TPE组(P<0.05);ROC曲线分析,ADA、CEA和B7-H4蛋白单项检测的灵敏度分别为93.30%、83.33%和79.90%,特异度分别为86.59%、96.34%和72.50%,AUC分别为0.927、0.925和0.836;平行试验检测,3项指标联合模式有最高的诊断价值,灵敏度为93.90%,特异度为97.50%,YI为0.914,AUC为0.989。结论:联合检测PE中ADA、CEA和B7-H4蛋白水平的诊断效能优于各指标单项评估,联合检测可提高LC-MPE和TPE的鉴别诊断效能。