饲粮不同能量水平对陕北白绒山羊断奶公羔瘤胃发酵特性和微生物组成的影响

旨在探究饲粮不同能量水平对陕北白绒山羊断奶公羔瘤胃发酵特性和菌群结构的影响。选择40只体重[(13.80±1.60)kg]接近的陕北白绒山羊断奶公羔随机分为4组,饲喂消化能水平分别为9.16(Ⅰ组)、9.66(Ⅱ组)、10.16(Ⅲ组)和10.66 MJ·kg^(-1)(Ⅳ组)4种饲粮,所有饲粮的粗蛋白质水平均为11.8%。饲养试验持续60 d,包括7 d预试期和53 d正试期。试验结束后采集所有动物瘤胃液,测定瘤胃发酵参数,提取瘤胃液总DNA,PCR扩增16S rRNA的V3~V4区进行高通量测序及分析。结果显示:1)随着饲粮能量水平的提高,瘤胃液pH、氨态氮(NH3-N)含量和乙酸/丙酸的比值逐渐降低,总挥发性脂肪酸、乙酸和丙酸含量呈现出先增加后降低的变化趋势,微生物菌体蛋白(MCP)、丁酸和戊酸含量逐渐升高;Ⅳ组pH显著低于其他3组(P<0.05),Ⅰ组丙酸含量显著低于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05),Ⅰ组乙酸/丙酸的比值极显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.01)。2)瘤胃微生物物种多样性结果表明,随着饲粮能量水平的提高,Shannon和Simpson指数逐渐降低,而Chao1、faith_pd和observed_OTUs指数均呈现出先增加后降低的变化趋势,Ⅰ组和Ⅱ组Chao1和observed_OTUs指数均显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05)。3)对瘤胃微生物的物种组成分析发现,拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)是所有试验羊瘤胃优势菌门,且随着饲粮能量水平的提高,拟杆菌门的相对丰度逐渐降低,厚壁菌门和变形菌门的相对丰度逐渐升高。普雷沃氏菌属(Prevotella)和瘤胃球菌属(Ruminococcus)是所有试验羊瘤胃优势菌属,且随着饲粮能量水平的提高,普雷沃氏菌属相对丰度逐渐降低,而瘤胃球菌属相对丰度极显著升高。4)瘤胃微生物的物种差异性方面:门水平上,Ⅳ组变形菌门(Proteobacteria)相对丰度最高,且显著高于其他3组(P<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组TM7相对丰度极显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05),Ⅰ组互氧菌门(Synergistetes)相对丰度显著高于其他3组(P<0.05);属水平上,Ⅰ组瘤胃球菌属(Ruminococcus)相对丰度极显著低于其他3组(P<0.01),Ⅰ组和Ⅱ组颤螺旋菌属(Oscillospira)相对丰度极显著低于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.01),Ⅰ组和Ⅲ组未分类拟杆菌(Unspecified_Bacteroidales)相对丰度显著高于Ⅱ组和Ⅳ组(P<0.05),Ⅰ组和Ⅱ组解琥珀酸菌属(Succiniclasticum)、未分类韦荣氏球菌科(Unspecified_Veillonellaceae)、未分类毛螺菌科(Unspecified_Lachnospiraceae)和未分类梭菌(Unspecified_Clostridiales)相对丰度显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05),Ⅱ组和Ⅳ组Unspecified_RF32相对丰度显著高于Ⅰ组和Ⅲ组(P<0.05),Ⅱ组和Ⅲ组Unspecified_F16相对丰度显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05)。综上所述,饲粮不同能量水平影响陕北白绒山羊断奶公羔瘤胃发酵特性,随着饲粮能量水平的提高,瘤胃微生物的丰富度有逐渐降低的变化趋势,显著改变了变形菌门(Proteobacteria)、互氧菌门(Synergistetes)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)和解琥珀酸菌属(Succiniclasticum)等细菌的相对丰度(P<0.05),且消化能水平为9.66 MJ·kg^(-1)的饲粮能够有效改善陕北白绒山羊断奶公羔瘤胃发酵特性和细菌组成。

N-氨甲酰谷氨酸在牛、羊生产中的应用研究进展

N-氨甲酰谷氨酸(NCG)作为一种新型的饲料添加剂,在牛、羊的营养调控中具有重要作用,主要表现在提高奶牛血浆一氧化氮(NO)含量、增加瘤胃微生物多样性、改善乳品质,增强奶牛机体抗氧化能力;改善公牛肉品质、降低尿氮和血液中尿素氮和氨的浓度,促进氨的排出和氨基酸的合成;提高绵羊的产羔率、改善限饲湖羊胎儿的肝脏炎症;促进哺乳山羊羔羊生长发育等方面。本文综述了饲粮中添加NCG对牛、羊生长性能、繁殖性能、免疫调节、泌乳性能和机体抗氧化影响的研究进展,讨论了基于牛、羊不同生产性能需求添加NCG的剂量选择策略,为应用NCG提高牛、羊的生产性能提供参考。

N-氨甲酰谷氨酸对不同生理阶段湖羊母羊生长性能、血常规指标及血浆抗氧化、免疫指标的影响

本试验旨在研究妊娠期、哺乳期和空怀期饲粮中添加不同水平N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对湖羊母羊生长性能、血常规指标及血浆抗氧化、免疫指标的影响,为NCG在湖羊母羊整个生产周期不同生理阶段中的应用提供依据。选择300只9月龄、体重[(33.6±1.2)kg]相近、健康的湖羊初产母羊,随机分为4组,每组5个重复,每个重复15只。采用本交方式配种1个月后,通过B超检测每组选择40只妊娠母羊,每组4个重复,每个重复10只。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加1.0(Ⅰ组)、1.5(Ⅱ组)和2.0 g/d(Ⅲ组)的NCG。试验从母羊配种前开始至羔羊断奶7 d后结束。分别在妊娠前期(公羊配种结束后28 d)、妊娠后期(预产期前15 d)、哺乳期(产后7 d)、空怀期(羔羊断奶后7 d)采集不同生理阶段的母羊血液,测定血常规指标及血浆抗氧化、免疫指标。结果表明:1)在妊娠前期,试验Ⅱ组血液单核细胞数量、平均血红蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组血液平均血红蛋白浓度显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组血浆总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05)。2)在妊娠后期,试验Ⅲ组血液血小板平均体积显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅲ组血浆丙二醛含量极显著低于对照组(P<0.01),试验Ⅲ组血浆白细胞介素-10含量显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组血浆肿瘤坏死因子-α含量显著低于对照组(P<0.05)。3)在哺乳期,试验Ⅱ组血浆超氧化物歧化酶活性显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅲ组血浆丙二醛含量显著低于对照组(P<0.05),试验Ⅲ组血浆总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组血浆肿瘤坏死因子-α含量显著低于对照组(P<0.05)。4)在空怀期,试验Ⅰ组血液红细胞体积显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血液平均血红蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组血浆肿瘤坏死因子-α含量极显著低于对照组(P<0.01)。综上所述,饲粮中添加2.0 g/d的NCG能够提高不同生理阶段初产湖羊母羊的免疫功能和抗氧化能力,改善母羊的健康程度。

饲料中添加高羊毛氨酸硒对陕北白绒山羊羯羊瘤胃古菌结构与组成的影响

为明确不同剂量高羊毛氨酸硒(SeHLan)对陕北白绒山羊羯羊瘤胃古菌结构与组成的影响,本研究选取发育一致的陕北白绒山羊羯羊32只,均分为4组,分别饲喂硒含量为0.016 mg/kg(CK)、0.300 mg/kg、0.600 mg/kg和1.200 mg/kg的饲料,饲养70 d后,采集羯羊瘤胃液,提取DNA并利用古菌特异性引物进行PCR扩增,对古菌V4-V5区进行高通量测序和羯羊瘤胃液古菌结构与组成分析。结果表明:随着SeHLan添加量增加,各处理瘤胃液古菌α多样性指数呈现出先降低后增高的变化趋势,但处理间瘤胃液古菌α多样性指数差异均不显著。各处理瘤胃液,在门水平上广古菌门(Euryarchaeota)古菌,在科水平上甲烷短杆菌科(Methanobacteriaceae)古菌,在属水平上甲烷短杆菌属(Methanobrevibacter)古菌的相对丰度均接近80%,且随着饲料中SeHLan添加量增加,相对丰度呈现先降低后升高的变化趋势。0.600 mg/kg硒含量饲料处理的羯羊瘤胃液在门水平上广古菌门(Euryarchaeota)古菌,在科水平上甲烷杆菌科(Methanobacteriaceae)古菌,在属水平上甲烷短杆菌属(Methanobrevibacter)古菌,相对丰度显著低于其他3个处理。综上所述,饲料中添加SeHLan显著影响陕北白绒山羊羯羊瘤胃液古菌组成及结构,0.600 mg/kg硒含量饲料处理的羯羊瘤胃产甲烷菌丰度显著低于其他处理。

榆林部分地区湖羊乳房炎病原菌的分离鉴定及耐药性和毒力基因检测

【目的】明确规模化湖羊场乳房炎的主要病原菌种类及其耐药性和毒力基因分布情况,指导临床治疗湖羊乳房炎合理用药。【方法】在6个规模化羊场采集临床型乳房炎乳样43份,采用细菌形态学鉴定、生化鉴定及16S rDNA序列分析的方法确定引起湖羊乳房炎的主要病原菌,采用纸片扩散法检测其耐药性,并通过PCR方法检测相关毒力基因。【结果】革兰染色镜检显示获得了革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌。革兰阳性球菌在Baird-Parker琼脂平板上呈现出边缘圆润,中间呈黑色的菌落;生化试验鉴定结果显示,分离株对甘露醇、过氧化氢和兔血浆凝固试验为阳性;经16S rDNA测序比对,与金黄色葡萄球菌高度相似的分离株共31株。革兰阴性杆菌在伊红-美蓝琼脂平板上呈现出黑紫色泛有金属光泽的菌落,在麦康凯琼脂平板上呈现出粉红色的菌落;生化试验鉴定显示,分离株对吲哚试验和甲基红试验为阳性,对VP试验和枸橼酸盐利用试验呈阴性;经16S rDNA测序比对,与大肠杆菌高度相似的分离株共12株。药敏试验结果显示,分离的金黄色葡萄球菌对环丙沙星、左氧氟沙星和头孢噻肟具有较高的敏感性,对青霉素、红霉素和链霉素耐药;分离的大肠杆菌对环丙沙星和左氧氟沙星亦有较高的敏感性,对青霉素和红霉素耐药。在金黄色葡萄球菌中检测出7种毒力基因,分别为PVL、Hlb、seb、clfA、clfB、fnbB和icaD基因,未检测到Hla、sea和fnbA基因;在大肠杆菌中检测出6种毒力基因,分别为hlyA、etrA、fasA、eaeA a、exhA a和stx 1基因,未检测到cnf 1、aer、estA和stx 2基因。【结论】引起该规模化湖羊场乳房炎的主要病原菌为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,且携带丰富的毒力基因,建议优先使用环丙沙星和左氧氟沙星治疗,本研究结果为临床治疗该病提供了科学依据。

陕北白绒山羊Notch2基因多态性与绒毛和生长性状的相关性分析

【目的】探究陕北白绒山羊Notch2基因插入/缺失(insertion/deletion, InDel)遗传多态性及其与绒毛和生长性状的相关性,为陕北白绒山羊分子辅助育种提供理论依据。【方法】采集1 469只成年雌性陕北白绒山羊耳组织,提取基因组DNA,并测定绒长、毛长、体长、体高等绒毛与生长性状数据。参考GenBank和Ensembl数据库提供的山羊Notch2基因InDel遗传变异信息设计引物,利用PCR扩增和直接测序法检测Notch2基因17个InDels突变的多态性,并分析其与陕北白绒山羊绒毛和生长性状的相关性。【结果】陕北白绒山羊Notch2基因分别在第15内含子区的12 bp InDel(rs665021370)和第25内含子区的21 bp InDel(rs653705114)存在多态性,且2个InDels位点均存在插入/插入型(II)、杂合型(ID)和缺失/缺失型(DD)3种基因型,这2个位点均属于低度多态(P<0.25),且处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。关联分析结果表明,Notch2基因rs665021370位点突变与陕北白绒山羊体高或体长呈显著或极显著相关(P<0.05;P<0.01);rs653705114位点突变与陕北白绒山羊毛长、胸宽和体高呈显著或极显著相关(P<0.05;P<0.01)。2个InDels位点不属于强连锁关系。【结论】Notch2基因rs665021370和rs653705114位点突变对陕北白绒山羊绒毛或生长性状有显著影响,可作为陕北白绒山羊优良性状选育的分子标记。

有尾噬菌体的结构及其受体研究进展

随着“超级耐药”细菌的不断出现和快速传播,噬菌体(细菌病毒)成为抗生素替代品研究的热点,是解决抗生素耐药难题、促进养殖业健康发展的新途径。噬菌体能够特异性裂解宿主菌是其发挥治疗功效的关键,然而噬菌体裂解细菌的特异性又取决于噬菌体受体结合蛋白与受体的识别与吸附。有尾噬菌体利用其受体结合蛋白(尾部纤维、尾钉和基板结构等)识别细菌表面受体(脂多糖、外膜蛋白、荚膜、鞭毛和菌毛等),最终将细菌裂解。本文综述了有尾噬菌体及其受体结合蛋白的类型和结构,以及噬菌体受体方面的研究进展,讨论了基于噬菌体与宿主菌互作研究基础上的噬菌体治疗制剂的选择策略,为后续深入研究噬菌体与其宿主菌互作机理、改造噬菌体和创制噬菌体生物杀菌制剂提供坚实的理论基础。

高羊毛氨酸硒对湖羊生长性能、屠宰性能及肉品质的影响

在湖羊饲粮中添加不同浓度的高羊毛氨酸硒(Selenohomolanthionine,SeHLan),研究其对湖羊生长性能、屠宰性能和肉品质的影响。选择4月龄、体重相近(31.34±1.00)kg的健康湖羊40只,随机分为4组,饲喂80 d,4组试验羊分别饲喂基础饲粮(含硒1.17 mg/kg DM,I组),以及在基础饲粮中分别添加0.30(Ⅱ组)、0.60(Ⅲ组)和1.20(Ⅳ组)mg/kg SeHLan;饲喂期间2 d测一次采食量,15 d秤一次体重,饲喂结束后采集血液,测定血常规;每组挑选3只羊进行屠宰,测定屠宰性能,采集肌肉、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、十二指肠、盲肠和结肠样品,检测硒含量及肉品质。结果显示:与Ⅰ组相比,Ⅱ组血小板平均体积显著降低(P<0.05);Ⅲ组和Ⅳ组宰前活重和胴体重显著升高(P<0.05);Ⅲ组和Ⅳ组肾脏、肝脏、脾脏、心脏、结肠、盲肠和背肌硒含量极显著升高(P<0.01);十二指肠硒含量显著升高(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组亮度L*值显著升高(P<0.01),剪切力极显著降低(P<0.01),Ⅲ组红度a*和黄度b*值显著升高(P<0.05)。研究结果表明,饲粮添加SeHLan能够显著提高生长期湖羊的屠宰性能和硒沉积,改善肉品质,以SeHLan形式硒的适宜添加量为1.20 mg/kg。

饲粮不同消化能水平对25~35 kg陕北白绒山羊公羔生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮不同消化能水平对25~35 kg陕北白绒山羊公羔生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响。选取体况良好、体重为(26.27±1.49)kg的6月龄陕北白绒山羊公羔32只,采用单因子随机区组设计分为4组,每组8只羊。各组试验羊饲喂粗蛋白质水平为11.06%,消化能水平分别为9.28(Ⅰ组)、9.77(Ⅱ组)、10.27(Ⅲ组)和10.77 MJ/kg(Ⅳ组)的饲粮,饲养试验预试期15 d,正试期60 d,当试验羊平均体重达到35 kg时,每组选择3只羊进行为期13 d的消化代谢试验,其中预试期7 d,正试期6 d。结果表明:1)Ⅱ组试验羊平均干物质日采食量和平均日增重最高,料重比最低,但各组之间差异不显著(P>0.05)。2)试验羊增重收益和经济效益以Ⅱ组最高,Ⅰ组次之,Ⅳ组最低,各组之间差异不显著(P>0.05)。3)Ⅱ组摄入总能、消化能和能量表观消化率均最高,摄入总能极显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.01),消化能显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05),能量表观消化率显著高于Ⅳ组(P<0.05);Ⅰ组粪能最高,Ⅱ组次之,Ⅲ组最低,Ⅰ组极显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.01)。4)干物质、有机物、粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和粗纤维表观消化率均以Ⅱ组最高,且呈现出随着消化能水平的提高表现出先升高后降低的趋势;其中,干物质表观消化率极显著高于Ⅰ组(P<0.01),显著高于Ⅳ组(P<0.05),有机物表观消化率显著高于Ⅳ组(P<0.05),中性洗涤纤维表观消化率极显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05),酸性洗涤纤维表观消化率极显著高于其他3组(P<0.01),粗纤维表观消化率极显著高于Ⅳ组(P<0.01),显著高于Ⅰ组(P<0.05),粗蛋白质表观消化率极显著高于Ⅳ组(P<0.01)。粗脂肪表观消化率Ⅱ组最低,极显著低于Ⅳ组(P<0.01),且表现出随着消化能水平的提高而逐渐升高的趋势。5)饲粮不同消化能水平对试验羊血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和总蛋白含量均无显著影响(P>0.05)。试验羊血清游离脂肪酸、β-羟基丁酸和甘油三酯含量均随着饲粮消化能水平的提高而逐渐降低;其中,血清游离脂肪酸含量Ⅰ组显著高于Ⅳ组(P<0.05);Ⅰ组和Ⅱ组血清β-羟基丁酸和甘油三酯含量显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P<0.05)。试验羊血清葡萄糖、白蛋白和低密度脂蛋白含量随着饲粮消化能水平提高呈现出先升高后降低的趋势,Ⅱ组葡萄糖和白蛋白含量显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ组低密度脂蛋白含量显著高于Ⅲ组(P<0.05),极显著高于Ⅳ组(P<0.01)。试验羊血清尿素氮含量Ⅰ组最高,极显著高于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.01)。由以上结果并考虑饲养成本及养殖效益,25~35 kg陕北白绒山羊公羔最佳饲粮消化能水平为9.77 MJ/kg。

陕北白绒山羊断奶公羔的消化能需求量研究

【目的】研究饲粮消化能水平对陕北白绒山羊断奶公羔生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响,确定饲粮适宜的能量水平。【方法】选取40只体质量(13.80±1.60)kg的3月龄陕北白绒山羊断奶公羔,随机分为4组,分别饲喂粗蛋白质含量均为118 g/kg、消化能分别为9.16(Ⅰ组)、9.66(Ⅱ组)、10.16(Ⅲ组)和10.66 MJ/kg(Ⅳ组)的4种饲粮,进行为期60 d的饲养试验,测算试验羊全期干物质采食量(DMI60)、平均日增重(ADG_(60))、料重比(F/G_(60))及每隔15 d的平均干物质采食量(DMI15)、平均日增重(ADG_(15)),并测定血清生化指标。饲养试验结束后,每组选择3只羊进行消化代谢试验,预试期7 d,正试期4 d。【结果】①饲粮消化能水平对DMI60有极显著影响(P<0.01),对ADG_(60)有显著影响(P<0.05),但对F/G_(60)影响不显著(P>0.05);各组试验羊DMI60和ADG_(60)从高到低依次均为Ⅱ组>Ⅳ组>Ⅰ组>Ⅲ组,且Ⅱ组显著高于其他各组(P<0.05)。②各组试验羊的DMI15均随着饲养时间的增加而逐渐增大,且各组1~15,16~30,31~45和46~60 d的DMI15差异均达显著或极显著水平;各组试验羊ADG_(15)均随着饲养时间的增加呈现出先增高后降低的变化趋势,其中31~45 d的ADG_(15)最高。③Ⅱ组试验羊血清尿素氮含量最低,葡萄糖、白蛋白、总蛋白、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量最高;随着饲粮消化能水平的提高,试验羊血清游离脂肪酸、β-羟基丁酸和甘油三酯含量逐渐降低,总胆固醇含量逐渐升高。④Ⅱ组试验羊摄入总能和消化能显著高于Ⅰ组(P<0.05),粪能极显著高于Ⅳ组(P<0.01),Ⅱ、Ⅳ组试验羊总能表观消化率极显著高于Ⅰ组(P<0.01)。⑤随着饲粮消化能水平的提高,干物质、有机物、粗蛋白质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率呈现出先升高后降低的变化趋势,且均以Ⅱ组最高;粗脂肪表观消化率逐渐降低。【结论】陕北白绒山羊公羔断奶后45 d的饲粮最佳消化能水平为9.66 MJ/kg。

金黄色葡萄球菌烈性噬菌体的分离鉴定和最佳保存方法研究

基于细菌rRNA区域序列的PCR技术,通过设计特异性引物从奶样中快速、准确地鉴定奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌。采用金黄色葡萄球菌与挤奶前从奶牛乳房上洗刷下来的污水经过3次富集的方法,通过双层琼脂平板法,分离纯化得到了强裂解性的奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌的噬菌体。本试验分离的是可收缩尾的噬菌体,其头部为二十面体,约50 nm×62.5 nm,尾部长约187.5 nm,尾宽约37.5 nm,有尾鞘、基板等结构。纯化后在双层琼脂平板上形成的噬菌斑大而整齐,边缘光滑,透明,直径约2 mm,具有明显的强裂解性噬菌体特性,通过测定,该噬菌体的最佳感染复数为0.01,效价大于109PFU/mL。对噬菌体的不同保存方法进行比较,结果表明,将噬菌体置于-80℃加入7%DMSO冷藏是较好的保存方法。

一株绒山羊源大肠杆菌噬菌体φPTK的分离鉴定及生物学特性分析

以从患羔羊痢疾的羔羊粪便中分离的1株大肠杆菌为宿主菌,从污水中分离纯化1株烈性大肠杆菌特异性噬菌体φPTK,并对其生物学特性进行研究,为研制一种替代抗生素的有效生物防治方法提供资源。双层琼脂平板培养后,噬菌斑呈现清晰透明、边缘光滑的圆形,直径2~3 mm。噬菌体φPTK生物学特性试验结果表明:φPTK对大肠杆菌的最佳感染复数为0.000 1;φPTK吸附和感染宿主菌的潜伏期为15 min,裂解期约195 min,裂解量93;噬菌体浓缩液经SDS-PAGE分析可以观察到至少6条蛋白质条带,相对分子质量为2.5×10~4~1.8×10~5,说明其蛋白质外壳至少含有6个结构蛋白;在30~90℃范围内φPTK的裂解活性均较强,30~40℃时活性最高,90℃处理90 min后仍然具有较强的活性;对酸碱的耐受力较强,p H值在5至9范围内均有较强的裂解活性,当p H值超过9后活性较低;对紫外线的耐受能力较强,经紫外线照射8 h后仍然具有较强的裂解能力。这株烈性大肠杆菌特异性噬菌体φPTK最佳感染复数较小,吸附和感染宿主菌的潜伏期短,裂解能力强,杀菌效果好,有较强的环境适应能力,具有研发成为有效防治羔羊大肠杆菌病的生物杀菌制剂的潜力。

四种牛源益生菌的分离鉴定

为了确定牛奶中的益生菌种类,给奶牛微生态制剂益生菌菌种的选择提供参考,试验选取体况良好、无乳房炎、产奶性能优良的荷斯坦奶牛和新生犊牛,采集其新鲜奶样和粪样,应用MRS溴甲酚紫选择性培养基和革兰氏染色对分离株进行初步鉴定,提取菌株DNA检测16S rRNA基因并测序,对分离株进行分子生物学鉴定。结果表明:所得菌株中有球菌和杆菌,革兰氏染色呈阳性,得到的12株菌株分别为约氏乳杆菌2株、布氏乳杆菌4株、粪肠球菌5株和屎肠球菌1株。这些牛源益生菌可用于研制益生菌微生态制剂。

细绒型和粗绒型陕北白绒山羊瘤胃细菌结构及组成

本研究旨在利用16S rRNA高通量测序技术分析细绒型和粗绒型陕北白绒山羊母羊瘤胃细菌结构与组成,为细绒型陕北白绒山羊的饲养提供理论基础。选择相同饲喂条件下6只细绒型和7只粗绒型陕北白绒山羊2岁母羊,采集瘤胃液并提取总DNA,经过PCR扩增后对16S rDNA的V3~V4区进行高通量测序分析。结果表明:1)2组间Faith’s PD指数、Chao1指数、Shannon指数和Observed_OTU指数差异均不显著(P>0.05),且均有细绒组低于粗绒组的趋势。2)门水平上,2组绒山羊瘤胃优势菌门均为厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),次级优势菌门依次为TM7、放线菌门(Actinobacteria)、蓝藻细菌门(Cyanobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)、互氧菌门(Synergistetes)、螺旋体门(Spirochaetes)、软壁菌门(Tenericutes)和疣微菌门(Verrucomicrobia);属水平上,2组绒山羊瘤胃的优势菌属均为瘤胃球菌属(Ruminococcus)、普雷沃氏菌属(Prevotella)、拟杆菌目未明确分类属(Unspecified_Bacteroidales)和疣微菌科未明确分类属(Unspecified_Ruminococcaceae)。3)门水平上相对丰度前10位的优势菌门中,除了细绒组Proteobacteria的相对丰度显著低于粗绒组(P<0.05)和TM7的相对丰度显著高于粗绒组(P<0.05)外,其余菌门的相对丰度2组之间均差异不显著(P>0.05);次级优势菌门中,细绒组迷踪菌门(Elusimicrobia)、黏胶球形菌门(Lentisphaerae)和Verrucomicrobia的相对丰度均显著低于粗绒组(P<0.05),而细绒组WPS_2的相对丰度显著高于粗绒组(P<0.05)。4)相对丰度大于10%的优势菌属中,除了细绒组Prevotella的相对丰度极显著高于粗绒组(P<0.01)以外,其他优势菌属的相对丰度2组之间均差异不显著(P>0.05);相对丰度低于10%的次要优势菌属中,细绒组解琥珀酸菌属(Succiniclasticum)、颤螺旋菌属(Oscillospira)、Dehalobacterium、Blautia、梭菌属(Clostridium)和欧文氏菌属(Erwinia)的相对丰度均显著低于粗绒组(P<0.05)。5)物种相关性网络分析结果显示,2组绒山羊瘤胃菌群之间的相关性和紧密性呈现出细绒组强于粗绒组。综上所述,细绒型绒山羊瘤胃菌群数量和菌属相对丰度低于粗绒型绒山羊,且存在一些特征菌属,细绒型绒山羊瘤胃菌群间互作关系和结构紧密性高于粗绒型绒山羊,提示绒山羊瘤胃菌群互作和结构稳定性可能对产绒性能产生影响。

中西医结合治疗慢性硬膜下血肿研究进展

慢性硬膜下血肿确诊后有临床症状者原则上都应尽早手术治疗,颅骨钻孔免冲洗引流术和YL-1型血肿粉碎针微创清除术具有突出优势,应被广泛推广于基层。神经内镜技术是未来治疗慢性硬膜下血肿的趋势,应该大力发展。尽管手术治疗方式多样,但是术后常常发生大部分血肿被清除而脑组织不能完全复位,存在术后血肿复发以及再次手术治疗等问题,成为临床治疗中急于解决的难题。中医药结合外科手术治疗对这一问题的解决具有明显的优势,可进一步提高临床疗效,因此应成为今后的研究重点,对于指导临床治疗具有重要的意义。

转VEGF和转Tβ4基因陕北白绒山羊粪便中菌群分析

以转VEGF基因和转Tβ4基因陕北白绒山羊与野生型陕北白绒山羊为研究对象,采集其新鲜粪便样品,用灭菌生理盐水进行梯度稀释后,分别接种LB固体培养基、TPY琼脂、胆硫乳琼脂、肠球菌琼脂、伊红美蓝琼脂和甘露醇盐琼脂培养基,37℃恒温过夜培养,再分别对平板上生长的所有需氧菌、双歧杆菌、沙门氏菌、肠球菌、大肠菌群和金黄色葡萄球菌进行菌落计数,并做显著性检验分析。结果表明,转VEGF基因和转Tβ4基因陕北白绒山羊与野生型陕北白绒山羊粪便中的需氧菌菌群结构之间不存在显著性差异。研究结果为转VEGF基因和转Tβ4基因陕北白绒山羊安全性评价研究提供了试验数据和研究基础。

CRISPR/Cas9介导的MSTN/FGF5基因编辑陕北白绒山羊粪便菌群分析

为了从绒山羊粪便微生物群落变化的角度对MSTN/FGF5基因编辑陕北白羊绒山的自身健康和环境安全性进行研究,利用6种不同培养基分别对MSTN/FGF5基因编辑和野生型陕北白绒山羊粪便中的微生物进行培养、计数,并做菌群结构的显著性检验分析。结果表明:FGF5/MSTN基因编辑和野生型陕北白绒山羊F0代和F1代公羊和母羊新鲜粪样经LB琼脂、伊红美蓝琼脂、TPY琼脂、胆硫乳琼脂、肠球菌琼脂和甘露醇盐琼脂培养后微生物计数分别为,F0代:公羊6.35±0.68,5.89±0.25;5.32±0.10,5.27±0.34;6.64±0.57,6.71±0.35;5.03±0.53,5.32±0.14;4.12±0.13,4.15±0.21;5.34±0.18,5.25±0.25;母羊6.62±0.45,6.64±0.31;4.80±0.51,4.75±0.45;7.20±0.30,7.15±0.55;4.30±0.52,4.42±0.62;5.83±0.51,5.73±0.86;6.24±0.28,6.24±0.21。F1代:公羊6.92±0.12,7.08±0.04;4.02±0.64,3.99±0.51;6.32±0.15,6.25±0.30;5.21±0.28,5.17±0.20;3.66±0.50,3.88±0.67;4.06±0.50,3.97±0.46;母羊7.12±0.24,6.96±0.19;4.15±0.19,4.25±0.24;6.45±0.30,6.56±0.45;4.97±0.42,4.87±0.38;4.04±0.96,3.96±0.57;4.10±0.28,3.85±0.37。F0和F1代MSTN/FGF5基因编辑陕北白绒山羊与野生型陕北白绒山羊粪便中菌群结构之间不存在显著性差异(P>0.05)。本研究为FGF5/MSTN基因编辑陕北白绒山羊的安全性评价研究提供了试验数据和研究基础。

裂解酶对食源性病原菌的生物防治研究及应用

噬菌体裂解酶能够高效消化细菌细胞壁,对多重耐药病原菌表现出独特的裂解能力,是一种新型抗菌分子,具有重要的应用潜力和研究价值。本文对裂解酶在食品生产中的研究进展进行了概述,重点综述了裂解酶及其嵌合体对食源性病原菌的生物防治研究以及裂解酶作用于革兰氏阴性菌的研究进展。

反刍动物瘤胃噬菌体研究进展

近年来,反刍动物瘤胃病毒组功能的研究日益受到关注,其中瘤胃噬菌体作为瘤胃病毒组中数量最多、功能最重要的组成部分,成为研究热点。瘤胃噬菌体是反刍动物瘤胃病毒中研究最深入的一大类,它是反刍动物瘤胃微生态系统的固有组成部分,与原生动物、细菌、古生菌、真菌等共同维持着瘤胃微生态平衡,决定着瘤胃对植物性饲料的发酵和利用。瘤胃噬菌体在维持瘤胃微生物种群平衡、瘤胃内微生物裂解、纤维分解、营养物质循环和遗传物质转移等方面发挥重要作用。本文综述了反刍动物瘤胃噬菌体的形态学、分子生物学和组学研究进展,重点阐述了瘤胃噬菌体的作用及功能。

地黄饮子干预自发性脑出血术后恢复期的作用

目的观察地黄饮子对自发性脑出血患者术后恢复期的临床疗效。方法将45例自发性脑出血术后恢复期中医辨证属于肝肾亏虚证患者随机分为治疗组(23例)和对照组(22例),术后对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上3周后开始服用中药地黄饮子加减治疗,3周后比较两组临床恢复情况、神经功能缺损评分(SSS量表)和日常生活能力评分(ADL量表)。结果治疗组临床疗效有优于对照组的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),治疗组SSS评分和ADL评分明显优于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论地黄饮子在自发性脑出血术后恢复期中医辨证属于肝肾亏虚证的临床应用,能明显提高患者神经功能的恢复及日常生活能力。