彩色多普勒超声引导无血管化穿刺行经皮肾镜超声弹道碎石术治疗肾结石

目的：通过回顾性分析临床资料,探讨彩色多普勒超声引导下无血管化标准通道经皮肾镜气压弹道联合超声碎石清石术治疗肾结石的疗效。方法：回顾性分析2005年2月-2011年12月笔者所在医院采用彩色多普勒超声引导标准通道经皮肾镜EMS气压弹道联合超声碎石清石系统治疗447例470侧肾结石的资料。在彩色多普勒超声定位下,避开血管建立Fr22的皮肾通道,行标准通道经皮肾镜气压弹道联合超声碎石清石术。结果：手术时间30~180min,平均75min。术中失血量20~200ml,平均50ml。447例均一期穿刺成功并同时碎石。术后复查腹部平片,53例显示残余结石〉4mm,行二期碎石,其中16例需行三期碎石,一期净石率约88.1%。2例因术中急性出血,影响视野,留置造瘘管1周后行二期碎石,术后延迟性大出血7例,6例经保守治疗,血尿消失,1例行高选择性肾动脉栓塞,无死亡病例。结论：彩色多普勒超声引导下无血管化标准肾镜经皮肾穿刺取石术治疗肾结石,具有创伤小、出血少及并发症少的优点,是治疗肾结石的较好方法。

城市轨道交通信号系统分段开通调试探究

聚焦于城市轨道交通信号系统的分段调试,旨在提升工程效率与安全。通过案例分析显示,技术挑战包括高标准的调试要求、紧凑的时间安排和外部干扰,而关键步骤涵盖准备工作、安全措施、设备安装调试等。该系统试运行成功,未出现故障,证明调试有效。建议持续进行技术革新,以加快调试速度,提高质量。

城市轨道交通信号设备故障应急处理措施

为提升城市轨道交通信号设备故障应急处理措施的应用价值,促进交通运行的稳定性,降低出行安全事故发生率,分析了城市轨道交通信号系统应急事件处理流程,从预防、准备、响应、恢复4个阶段入手,制定可行的设备故障应急处理措施。根据常见的城市轨道交通信号设备故障类型及影响,探究如何针对不同故障类型制定科学可行的故障应急处理措施。研究发现,城市轨道交通信号设备运行期间容易受到各类因素的干扰,进而发生故障,因此必须做好日常检修与维护,降低各类设备发生故障的概率,在减少维修成本费用的同时,保障乘客与列车工作人员的生命安全。

3D腹腔镜和2D腹腔镜腹膜后淋巴结清扫术对治疗临床Ⅰ期非精原细胞瘤的初步对比研究

目的:比较3D腹腔镜和2D腹腔镜腹膜后淋巴结清扫术对临床Ⅰ期非精原细胞瘤的治疗效果。方法:回顾性分析2009年1月-2021年7月广东省第二人民医院收治的术前临床分期均为Ⅰ期的27例睾丸癌患者的临床资料,所有患者均经病理学检查确诊为非精原细胞瘤,行腹腔镜下腹膜后淋巴结清扫术的时间为根治术后1~4周。结果:手术均顺利完成。3D腹腔镜组15例,手术操作时间(185.0±27.9)min,术中出血量(165.0±35.3)mL,术后肠道恢复时间(31.0±8.2)h,住院时间(7.0±1.1)d;2D腹腔镜组12例,手术操作时间(230.0±43.8)min,术中出血量(227.0±48.6)mL,术后肠道恢复时间(33.0±7.3)h,住院时间(8.0±0.6)d。平均随访27个月(3~65个月),未发现肿瘤复发或转移的迹象。结论:3D腹腔镜下腹膜后淋巴结清扫应用于Ⅰ期非精原细胞瘤在技术上可行,具有微创、术后恢复快、并发症少的优点。

输尿管软镜碎石术和经皮肾镜碎石术治疗小于2cm肾结石对机体应激反应的探讨

目的探讨输尿管软镜碎石术(DURL)和经皮肾镜碎石术(PCNL)治疗<2 cm肾结石对机体的应激反应。方法选择80例<2 cm肾结石患者,分为两组:输尿管软镜手术组40例(Ⅰ组),经皮肾镜手术组40例(Ⅱ组)。分别于术前、术后1 h、术后第1、3和5天采取患者外周静脉血,测定白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、皮质醇(Cor)、白细胞(WBC)和C反应蛋白(CRP)含量并进行比较。结果Ⅰ组与Ⅱ组患者围手术期IL-6、IL-10、Cor和WBC均于手术后1 h达高峰,CRP于术后第1天达高峰,较术前均有统计学意义(P<0.05),但前者峰值较低。结论 1手术创伤可引起炎性因子的释放增加,抗炎性细胞因子的分泌也随之增加;2输尿管软镜碎石术较经皮肾镜碎石术治疗肾结石对机体的应激反应小,术后恢复更快。

沉积物中古DNA在古生态、古环境和古气候研究中的应用

随着分子生物学技术的发展,DNA技术的应用逐渐从生物学研究拓展到进化、环境和气候变化等研究领域。因为DNA容易受到水解、氧化、紫外辐射、酶解等过程的破坏,所以人们认为DNA很容易降解,保存时间不长,但是近年来的研究成果显示,古生物和古人类的化石或骨骼、冻土、湖泊海洋沉积物等样品中包含已保存数千年甚至长达数百万年以来的古DNA。古DNA作为重要的信息载体,可以诠释人类、动植物和微生物进化和迁移过程及它们对环境和气候变化的响应。反过来,古DNA在古环境、古气候重建方面也起着重要作用,沉积物样品的古DNA往往保存了历史时期的水体和水体周围环境以及气候变化等信息。通过对沉积物中古DNA的研究,可以获得历史时期的水生生物(包括藻类、水生动植物等)的群落演化,和水体周围岸基生活的动植物群落(植物落叶、动物毛发冲带到水体并沉积下来)演替,进而反演水体和水体周围气候环境以及气候变化信息。通过研究古人类和动物化石中保存的DNA,可以探讨人类的迁徙和进化过程,溯源家畜的驯化历史。本文将介绍环境古DNA的保存和可靠性评价,重点探讨古DNA在古生态以及古环境、古气候重建研究中的优势及应用,并展望古DNA在生物进化和环境研究等领域的应用前景。

腹腔镜肾上腺切除术不同手术入路对机体免疫功能的影响

目的：探讨腹腔镜不同手术入路治疗肾上腺肿瘤的临床疗效，以及其对患者免疫功能的影响。方法对117例采用腹腔镜手术治疗的肾上腺肿瘤患者进行回顾性分析。经腹膜后途径（ RLA组）86例，经腹腔途径（TLA组）31例，术前经B超、CT或MRI等诊断为肾上腺占位，病变位于左侧63例，右侧54例，瘤体最大径1.2～9.8 cm，平均（4.3±1.9） cm，单发。评估两种术式的手术时间、术中出血量、术后禁食时间及术后住院时间，并检测手术前后血液的免疫指标：血白细胞（WBC）、C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和T淋巴细胞亚群（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋）。结果所有患者均顺利完成手术，围术期未出现严重并发症。 RLA组手术时间、术中出血量、术后禁食时间及住院时间依次为（86.2±38.1） min、（43.2±11.4）mL、（1.1±0.6）d、（4.7±2.2）d，TLA组分别为（103.7±54.3）min、（62.9±18.7）mL、（1.9±1.0）d、（6.4±3.1）d；RLA组在减少出血量，缩短手术时间、禁食时间及住院时间均明显优于TLA组（P＜0.05）。 RLA组术后CRP、IL-6水平明显低于TLA组（ P＜0.05）；且RLA组术后CD3^＋、CD4^＋及CD4^＋/CD8^＋明显高于TLA组（ P＜0.05）；两组术后WBC、IgG、IgA、IgM水平差异无统计学意义（P＞0.05）。随访3～35个月，平均（13.4±10.7）个月，3例失访，随访患者无远期并发症，影像学检查未见肿瘤残留及复发。结论与经腹腔途径相比，腹膜后腹腔镜肾上腺切除术具有创伤小、手术时间短、出血少、住院时间短、恢复快、更好地保护免疫功能等优势。在外科医生技术娴熟和选择合适的患者时，腹膜后腹腔镜肾上腺切除术可以成为治疗肾上腺良性肿瘤的首选术式。

改良单孔多通道腹腔镜前列腺癌根治术不同入路对患者免疫功能的影响

目的:探讨改良单孔多通道腹腔镜前列腺癌根治术经腹腔或腹膜外入路治疗前列腺癌的临床疗效,及其对患者免疫功能的影响。方法:回顾性分析2012年1月至2015年12月采用改良单孔多通道腹腔镜手术治疗前列腺癌59例,其中经腹膜外入路(A组,39例),经腹腔入路(B组,20例)。经术前B超、CT或MRI和穿刺病理诊断为前列腺癌,临床分期均为T1-T2c,N0M0。评估两种术式的手术时间、术中出血量、肠功能恢复时间及术后住院时间,并检测患者手术前后血液的免疫指标:前列腺特异性抗原(TPSA、FPSA)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、C3、C4)及T淋巴细胞亚群(CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+)。结果:所有手术均顺利完成,无中转开放手术。A组手术时间、术中出血量、肠功能恢复时间、术后住院时间依次为(133.8±68.6)min、(75.6±51.3)mL、(2.2±0.7)d、(14.7±3.6)d,B组分别为(159.4±78.1)min、(102.2±70.8)mL、(2.9±1.1)d、(15.2±4.1)d;A组在减少出血量,缩短手术时间及肠功能恢复时间明显优于B组(P<0.05)。A组术后IgG、IgA、C3、C4、CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+明显高于B组(P<0.05);两组术后TPSA、FPSA、lg M水平,差异无统计学意义(P>0.05)。随访3~36个月,平均15个月,3例失访,随访患者无远期并发症,影像学检查未见肿瘤复发或转移。结论:与经腹腔入路相比,腹膜外入路改良单孔多通道腹腔镜前列腺癌根治术具有视野清晰,对腹腔器官影响小,手术时间短,术中出血少,术后恢复快等优点,更具有保护免疫功能的优势。

高功率直出绿激光推铲式剜切术治疗大体积前列腺增生的临床疗效评估

目的评估经尿道160 W高功率直出绿激光推铲式剜切术治疗大体积良性前列腺增生症(BPH)(体积>80 ml)的临床疗效及安全性。方法大体积BPH共212例,分别采用高功率直出绿激光推铲式剜切术治疗(PVRP-ST组,n=108例)和经尿道电切术治疗(TURP组,n=104例)。比较两组患者的手术时间、手术前后血红蛋白及血清Na^+变化、术后膀胱冲洗时间、术后留置尿管时间、术后住院时间,术前及术后3个月的国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QoL)、最大尿流率(Qmax)、膀胱残余尿量(PVR)等观察指标,并且记录术中及术后的手术并发症情况。结果两组共212例患者手术均一次顺利完成。PVRP-ST组与TURP组的平均手术时间分别为(66.1±18.2)min和(70.6±15.2)min,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);两组手术前后平均血红蛋白浓度减少分别为(3.2±1.4)g/L和(14.7±5.6)g/L,平均血清Na^+减少分别为(1.78±0.81)mmol/L和(4.24±1.22)mmol/L,术后平均膀胱冲洗时间分别为(25.2±11.5)h和(64.4±18.5)h,术后平均留置尿管时间为(38.9±13.6)h和(82.7±15.4)h,平均术后住院时间(3.3±0.6)天和(7.4±1.2)天,两组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3个月复查,两组患者IPSS、QoL、Qmax、PVR均较术前显著改善(P<0.05),术后改善情况两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。术中、术后并发症方面,PVRP-ST组术后出现轻微排尿不适34例,肉眼血尿8例,逆行射精5例,一过性尿失禁3例,无尿潴留、尿道狭窄等情况的发生;TURP组术后出现轻度排尿不适48例,肉眼血尿15例,一过性尿失禁8例,逆行射精12例,无尿道狭窄,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论160 W高功率直出绿激光推铲式剜切术治疗大体积BPH是一种安全有效的微创治疗方法,与TURP相比较,具有术中出血更少,术后恢复更快,安全性更高等优点,尤其适用于高危、高龄的大体积前列腺增生BPH患者。

输尿管镜钬激光碎石治疗双侧输尿管结石合并急性梗阻性肾功能不全19例报告

目的探讨输尿管镜钬激光碎石治疗双侧输尿管结石合并急性梗阻性’肾功能不全的疗效。方法回顾性分析19例双侧输尿管结石患者资料，均采用输尿管镜下钬激光碎石解除梗阻，术中留置双J管，并比较手术前及术后血Scr、BUN的变化，观察肾功能恢复及出院时间情况。结果19例均一期行输尿管镜钬激光碎石术，术前Scr（243～834）μmol／L，平均（458．34-59．1）μmol／L，术前BUN（16．3～26．1）mmol，平均（20．7±3．4）mmol；Scr、BUN于术后ld开始下降，平均Scr为（217．36±28．3）p,mol／L，平均BUN（13．8±3．2）mmol；术后1周Scr（58～131）μmol/L，平均（86．2±16．9）μmol／L，BUN（3．5～7．0）mmol/L，平均（5．5±1．1）mmol，差异有统计学意义（P=0．000）。术后3～6天出院，平均（5．0±2．2），随访3—6个月，结石无残留，肾功能正常。结论输尿管镜钬激光碎石、取石是治疗双侧输尿管结石合并肾功能不全安全有效的方法，具有创伤小、恢复快等优点。

不同方式绿激光汽化术治疗老年良性前列腺增生的比较

目的比较绿激光直出推铲式汽化术与绿激光侧出汽化术治疗老年良性前列腺增生的临床疗效。方法选择2012年4月~2014年10月期间收治并确诊为良性前列腺增生的108例老年患者为研究对象,根据患者接受的手术方式将患者分为对照组58例（绿激光侧出汽化术）和研究组50例（绿激光直出推铲式汽化术）。比较手术时间、手术出血量、术后尿管留置时间和住院时间,比较手术前、术后1个月和术后1年的排尿情况（夜尿次数、残余尿及最大尿流量）及国际前列腺症状评分（IPSS）和生活质量评分（QOL）。比较两组患者的术后恢复情况。结果研究组手术时间和术后留置尿管时间短于对照组,而术后1年因尿频而再次就诊的人数明显少于对照组,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。术后1个月和术后1年,研究组夜尿次数、残余尿量明显少于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。研究组IPSS评分明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组患者术后1个月和术后1年最大尿流量和QOL评分比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论良性前列腺增生患者接受绿激光直出推铲式汽化术治疗,疗效优于绿激光侧出汽化术。绿激光直出推铲式汽化术具有手术创伤小、出血少、术后并发症发生率低、手术风险低、安全性高的优点,对于老年患者是更安全的选择。

3D腹腔镜下顺行腹股沟淋巴结清扫术治疗阴茎癌10例

目的探讨3D腹腔镜顺行腹股沟淋巴结清扫术治疗阴茎癌的临床效果。方法 2016年5月~2018年6月我院行3D腹腔镜下顺行腹股沟淋巴结清扫术治疗10例阴茎癌。全身麻醉,平卧位,双下肢呈八字状分开,脚高头低位,3D腹腔镜放于病人两腿之间,脐下缘1 cm做切口1.5 cm深达腹膜外,置入10 mm Trocar,分别在左、右麦氏点置入5 mm Trocar直达腹膜术野腔隙,浅筋膜层(Scarpa筋膜)与腹外斜肌腱膜之间钝性分离,人工自制球囊建立皮下空间,进行腹股沟淋巴结清扫,先一侧,再对侧。结果手术时间(106.0±15.2)分钟,术中出血量(40.5±6.8)ml。术中冰冻病检提示2例单侧腹股沟淋巴结阳性≥2枚,行盆腔淋巴结清扫术。住院时间(8.5±1.1)天。术后均无股血管损伤,皮肤坏死、感染等严重并发症发生。随访12~36个月,9例无原位复发及转移,1例于术后9个月因意外车祸死亡。结论 3D腹腔镜下顺行性双侧腹股沟淋巴结清扫术治疗阴茎癌安全、有效。

负载紫杉醇CSNRDARRC-PCL-PGA/TPGS多肽纳米颗粒调控膀胱癌RT112细胞增生及促凋亡

目的探讨双靶向多肽CSNRDARRC-PCL-PGA/TPGS同时负载紫杉醇的纳米颗粒(多肽紫杉醇NP)对膀胱癌RT112细胞的生长抑制及促凋亡作用。方法通过CSNRDARRCPCL-PGA与聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)形成共混胶束再负载紫杉醇(多肽紫杉醇NP),其后通过MTT检测细胞存活、DAPI及Annex V/PI染色分析细胞凋亡、JC-1腺粒体膜电位分析检测多肽紫杉醇NP对膀胱癌RT112细胞的影响。结果多肽紫杉醇NP能够抑制RT112细胞生长,并且有时间依赖性;细胞周期分析显示RT112细胞停滞在G2期,DAPI及Annex V/PI染色均可见细胞凋亡;JC-1染色发现多肽紫杉醇NP是通过腺粒体膜电位下降引起细胞凋亡。所有结果均显示多肽紫杉醇NP优于紫杉醇NP。结论 CSNRDARRC多肽修饰的TPGS-b-(PCLran-PGA)负载紫杉醇纳米颗粒(多肽紫杉醇NP)抑制膀胱癌RT112细胞增生及促进凋亡,为临床治疗膀胱癌提供了一个新手段。

经尿道直出绿激光膀胱壁网状内切开联合水扩张术治疗氯胺酮相关性挛缩膀胱的2年随访研究

目的总结经尿道直出绿激光膀胱壁网状内切开联合水扩张术治疗氯胺酮相关性挛缩膀胱(KBC)2年临床随访结果,并评价其疗效。方法回顾性分析2013年10月至2015年10月我院收治的KBC患者12例,均创新性行经尿道直出绿激光膀胱壁网状内切开联合水扩张术。主要监测指标有O'Leary-Sant评分、尿动力学指标、影像学检查结果。将术后第2年数据分别与术前、术后2周、术后3个月、术后6个月和术后1年的临床资料数据进行比较,评估该术式的疗效。结果全部手术均顺利完成,术中无膀胱穿孔、周围脏器副损伤、闭孔神经反射、局部大出血等,术后1周内无明显手术相关感染症状,无发热。均顺利出院。术后随访至少2年,术后2年监测指标的平均值:O’Leary-Sant问题指数评分(ICPI)为(4.33±1.67)分,O'Leary-Sant症状指数评分(ICSI)为(6.50±2.32)分,最大膀胱容量(MBC)为(193.42±64.37)mL,最大排尿压(MVP)为(38.83±4.67)cmH2O,残余尿量(PVR)为(6.83±1.85)mL,最大尿流率(Qmax)为(17.25±2.80)mL/s,平均尿流率(Qave)为(11.50±1.88)mL/s,有效膀胱容量(EBC)为(186.58±64.13)mL。术后2年的结果分别与术前比较,ICPI、ICSI、MBC、MVP、Qmax、Qave和EBC差异有统计学意义(P均<0.05),PVR差异无统计学意义(P均>0.05);与术后2周、术后3个月结果比较,ICPI、ICSI、MBC、Qmax、Qave和EBC差异均有统计学意义(P均<0.05),MVP和PVR差异均无统计学意义(P均>0.05);而与术后6个月比较,ICSI和Qmax差异均有统计学意义(P均<0.05),ICPI、MBC、MVP、PVR、Qave和EBC差异均无统计学意义(P均>0.05);与术后1年的结果比较,ICPI和ICSI差异均有统计学意义(P均<0.05),而MBC、MVP、PVR、Qmax、Qave和EBC差异均无统计学意义(P均>0.05)。影像学检查结果显示绝大部分患者较术前明显好转。2例术后复吸而致症状复发。结论经尿道直出绿激光膀胱壁网状内切开联合水扩张术治疗KBC,可以改善患者的症状,能有效增加膀胱顺应性和膀胱容量,术后半年左右疗效相对稳定。

荧光原位杂交技术诊断上尿路上皮癌的临床研究

目的评价荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测尿液脱落细胞对诊断上尿路上皮癌(upper urinary tract urothelial carcinoma,UUT-UC)的临床意义及价值。方法对26例临床可疑UUT-UC患者和20例健康对照者的尿液标本行FISH检测和尿脱落细胞学分析,再将22例临床病理确诊为UUT-UC患者的结果与4例临床病理为良性泌尿系疾病和20例健康对照者的结果进行比较。FISH检测使用荧光标记DNA探针混合物与细胞核上3、7、17号染色体着丝粒和p16基因(9p21)位点进行杂交,并分别计算其在UUT-UC患者尿脱落细胞中的畸变率。结果 FISH和细胞学检测UUT-UC总的敏感度分别为90.9%(20/22)和59.1%(13/22),FISH敏感度较高(P<0.05);特异度分别为100%(24/24)和95.8%(23/24),两者差异无统计学意义(P>0.05)。UUT-UC的3、7、17号染色体着丝粒和p16基因(9p21)位点的畸变率分别为90.9%(20/22)、86.4%(19/22)、63.6%(14/22)和68.2%(15/22)。结论 FISH技术对诊断UUT-UC有较高的敏感度和特异度,其敏感度明显高于尿脱落细胞形态学检测,而特异度则与之相近。作为一种无创检测方法,该技术有着很好的临床应用前景。

从图书馆藏书与读者的相互关系及我国的现状谈我们的对策

从图书馆藏书与读者的相互关系及我国的现状谈我们的对策李高远（云南省图书馆）书是图书馆存在的基础与根本，读者是图书馆发展的动力和润滑剂，图书馆以其悠久的发展史铁证书与读者是图书馆事业永恒研讨的主题。不同的历史时期，有不同的社会环境，对图书馆的藏书和读者...

双汇股利政策对企业价值的影响

自股利无关论提出之后,关于股利支付的问题一直是众说纷纭,学者们提出了许多理论来解释公司为何支付现金股利,主要的代表理论有信号传递理论和代理成本理论。文章从双汇集团股利支付的特点出发,根据双汇集团的相关财务数据、股利支付的情况及企业价值进行最小二乘法的回归分析的实证研究,得出实证结论:双汇集团发放现金股利的多少对企业价值的提升有显著的影响,并且呈正相关关系;发放股票股利与企业价值的提升呈正相关关系,但影响很小。

组合式输尿管软镜与电子输尿管软镜治疗10～20mm肾下盏结石的临床疗效比较

目的比较组合式输尿管软镜与电子输尿管软镜联合钬激光治疗10~20mm肾下盏结石的临床疗效。方法回顾性纳入2017年8月至2018年7月符合标准的87例经输尿管软镜联合钬激光治疗10~20mm肾下盏结石患者。其中经组合式输尿管软镜治疗的患者41例(组合式输尿管软镜组,本文称为PolyScope组),经电子输尿管软镜治疗的患者46例(电子输尿管软镜组,称为URF-V组)。比较2组患者在寻石成功率、结石清除率、手术时间、并发症及住院费用等方面的差异性。结果术后3月时,本组患者总的结石清除率为88.5%(77/87),PolyScope组结石清除率为85.4%(35/41),URF-V组为91.3%(42/46,P>0.05);PolyScope组和URF-V组的平均手术时间分别为(71.8±11.8)min、(57.8±12.5)min;住院费用分别为(35 489.9±2 394.7)元、(28 190.1±5 677.8)元,组间差异均有统计学意义(P<0.05);2组的寻石成功率、住院天数及并发症等比较,其差异均无统计学意义(P>0.05)。术后Ⅱ级并发症4例(4.6%),Ⅰ级16例(18.4%)。结论组合式输尿管软镜治疗10~20mm肾下盏结石能取得与电子输尿管软镜相当的治疗效果,值得临床推广。

TEAD1基因敲除对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

目的利用CRISPR/Cas9技术敲除糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMCs)中TEAD1基因,探讨TEAD1基因对糖尿病性ED大鼠CCSMCs表型转化的影响。方法利用链脲佐菌素建立糖尿病性ED大鼠模型。原代及传代培养CCSMCs,并进行免疫荧光染色鉴定。根据CRISPR/Cas9靶点设计规则设计了3组特异性sgRNA(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3),构建表达载体并转染293T细胞,包装并收集慢病毒,将其感染糖尿病性ED大鼠CCSMCs,嘌呤霉素筛选阳性细胞,Western blot检测TEAD1蛋白的表达水平。然后将实验分3组:敲除TEAD1基因的糖尿病性ED大鼠CCSMCs为实验组(CCSMCs-sgRNA-2)、空载体病毒感染组为阴性对照组(CCSMCs-sgRNA-NC)、不感染病毒组为空白对照组(CCSMCs-CK),分别使用qRT-PCR和Western blot检测各组细胞表型标志物平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)、碱性调宁蛋白(Calponin)和增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA和蛋白水平的表达。结果原代培养的糖尿病性ED大鼠CCSMCsα-SMA阳性细胞率达95%以上。成功包装了含有TEAD1-sgRNA的重组慢病毒,筛选得到了稳定低表达TEAD1基因的糖尿病性ED大鼠CCSMCs细胞系。Western blot结果显示感染TEAD1-sgRNA-2的糖尿病性ED大鼠CCSMCs中TEAD1蛋白水平最低(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot结果显示,敲除TEAD1基因的糖尿病性ED大鼠CCSMCs,SMMHC和Calponin mRNA和蛋白水平的表达均显著上调(P<0.05),而PCNAmRNA和蛋白水平的表达均显著减少(P<0.05)。结论利用CRISPR/Cas9基因技术成功构建了定向敲除TEAD1基因的慢病毒载体,TEAD1基因的缺失可使糖尿病性ED大鼠CCSMCs表型从合成型向收缩型转化。

云南省图书馆今昔叙事

云南省图书馆创建于清宣统元年(1909年)，定名为云南图书馆，由当时的经正书院、育才书院、五华书院和学务公所的图书馆共同组合而成，馆址系翠湖公园北侧的原经正书院旧址。初成立的图书馆内设书库、阅览室、阅报室。宣统三年(1911年)开办博物馆业务，是年改名为云南省图书博物馆。1929年改名为省立国学图书馆；1931年再次改名为省立昆华图书馆。到1936年，仅有藏书约11万册，人员8人；