猪轮状病毒病的鉴别诊断及防控措施

近期,湖南某规模化种猪场持续发生以产房仔猪腹泻为主要特征疾病,根据临床症状及经验,该场一直认为是猪流行性腹泻病毒引起,但经过对母猪产前免疫、返饲等措施进行防控,效果仍较差,为查明原因,采用RT-PCR方法对送检的20份腹泻粪便拭子样品进行猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒病毒检测;结果显示,其中17份为猪轮状病毒核酸阳性,另外两种病原均为核酸阴性,提示该猪场引起仔猪腹泻的病原为猪轮状病毒,加上饲养管理方面存在的不足,导致该病在猪场的持续发生。近年来,由于猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒引起的腹泻较多,从而忽视对其他引起腹泻的病毒性疾病认识,延误了治疗,加大了损失,值得相关从业人员注意和借鉴。

PCV4 Cap抗体ELISA检测方法的建立及血清流行病学调查

旨在建立一种猪圆环病毒4(porcine circovirus type 4, PCV4)Cap蛋白间接ELISA抗体检测方法,对猪群中PCV4抗体进行检测,并与以往的关于PCV4血清流行病学的调查结果进行对比研究,从而更全面地了解PCV4在猪群中的感染和流行情况。本研究利用原核表达系统成功表达PCV4 Cap蛋白,对反应条件进行优化,建立了基于PCV4 Cap蛋白的间接ELISA方法。采用建立的ELISA方法对中国18个省份的不同阶段的2 298份猪血清样本进行检测,以调查中国猪群中PCV4的血清学流行情况。同时将Cap-ELISA检测方法与之前建立的Rep-ELISA进行对比,平行检测845份血清样本。结果显示,在18个省份中,17个省的血清样本中检测到PCV4抗体。PCV4总血清阳性率为34.94%,母猪和育肥猪阳性率分别为59.95%和31.64%,仔猪阳性率为21.14%,保育猪中检出的阳性率最低,为4.20%。两种方法共同检测845份血清样本,符合率为82.84%,其中Cap-ELISA检测总阳性率为31.83%,Rep-ELISA检测总阳性率为35.03%。研究表明,PCV4在中国广泛传播,不同年龄阶段的猪只均能感染。Cap-ELISA和Rep-ELISA两种方法一致性高,从抗体消长规律来分析,两种方法都说明猪群感染PCV4主要在育肥猪和母猪阶段。本研究提供了中国PCV4的最新血清流行病学特征和PCV4在不同阶段猪群中的感染情况,进一步证实了PCV4在我国猪群中有一定的感染率,其危害值得进一步研究和关注。

禽源大肠杆菌荧光定量PCR方法的构建及应用

为建立一种灵敏、准确且快速检测禽源大肠杆菌的方法,根据禽源大肠杆菌uidA基因的一节特异性保守序列设计引物,建立用于禽源大肠杆菌的荧光定量PCR(qPCR)检验方法,并对其各方面进行评价。试验数据表明所建立的qPCR方法的Ct值与标准品在4.69×10^(2)~4.69×10^(9 )copies/μL范围内存在优良的线性关系,线性相关系数为R2=0.993;该方法标准曲线方程为y=-3.2786x+39.032,熔解曲线表现为单峰,不存在非特异性扩增。对重组质粒标准品的最低检测浓度为4.69×10^(2) copies/μL,是普通PCR方法的1000倍。该方法检测临床样本阳性率为68.3%(41/60),普通PCR阳性检出率为23.3%(14/60),阳性检出率高出45%。此次研究建立的检测禽源大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法可用于禽源大肠杆菌的快速诊断,对于禽大肠杆菌病的监测具有重要意义。

两种不同类型猪圆环病毒疫苗临床免疫效果的比较

为了探究不同猪圆环病毒疫苗临床免疫效果,试验通过对85日龄健康仔猪免疫不同类型的圆环病毒疫苗,比较各免疫组间中和抗体表现情况与病原感染情况,来综合评估不同类型圆环疫苗的免疫效力。结果显示:在免疫安全性指标上A组、B组两者差距不大,在阻断猪群圆环病毒野毒的感染与清除感染猪群体内野毒的效果上比较A组明显好于B组,在抗体数值上两者均表现较好。结论:结合三项指标综合比较,A组杆状病毒表达的真核圆环疫苗优于B组大肠杆菌表达的原核圆环疫苗。

浅谈家庭农场粪污处理与利用——以汨罗市柳学付养殖场为例

文章以汨罗市柳学付养殖场为例,介绍了家庭农场养殖粪污处理与利用的实践经验。该养殖场粪污经过干湿分离,干粪打包堆沤处理制成农家肥供油茶园及药材地施用;粪水入地埋式沼气池处理,产生的沼气自用或供周围农户使用,沼液经三级沉淀后由吸粪车运往油茶地和药材基地(玉竹)做肥料,在栏舍外墙和通风口,设置了防臭棚和水帘等设施,减少臭气排放,形成“猪-沼(肥)-油茶园(经济作物)”循环模式,实现了粪污资源化利用。

非洲猪瘟病毒B646L和F778R双基因PCR检测方法的构建

为建立一种能够快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的普通PCR方法,本研究分别以ASFV B646L和F778R基因为靶序列设计了两对特异性引物,建立ASFV B646L和F778R双基因普通PCR方法,并对其特异性、灵敏性及重复性进行检测。结果显示:该PCR体系(25.0μL体系)的最优组合为Pfu酶0.2μL、10×Reaction Buffer 2.5μL、2.5 mmol/L d NTP Mixture 2.5μL、B646L上下游引物各1.5μL、F778R上下游引物各0.5μL、DNA模板1.0μL;退火温度为57℃、退火时间为30 s、72℃延伸2.5 min,30个循环。该方法仅针对ASFV B646L和F778R基因进行特异性扩增,无交叉反应。同时对B646L和F778R阳性质粒的最低检测下限分别为7.2×10^(7)copies/μL、1.5×10^(6)copies/μL,试验重复性良好。本研究对于提高ASFV临床诊断的准确性、特异性和高效性具有重要价值,为其快速检测提供了可靠的技术支撑。

养殖场粪污异位发酵床处理实践经验

异位发酵床技术是一种高效处理养殖粪污的经济实用技术,畜禽粪污通过异位发酵床微生物高效处理后,可作为有机肥原料,实现资源化利用。文章总结了永州市零陵区刘文猪场的异位发酵床处理方式及利用实践经验,为畜禽粪污全量收集处理还田提供参考。

长沙地区禽源mcr-1肠杆菌流行病学调查

为研究湖南长沙地区禽源肠杆菌中黏菌素耐药基因mcr-1的流行情况,试验以湖南长沙某生鲜市场和禽源屠宰场采集的123份禽源泄殖腔拭子和环境样本为研究对象,通过耐药菌株筛选试验、采用PCR方法鉴定mcr-1耐药基因试验和药敏试验,分析禽源粪便及周围环境中大肠杆菌mcr-1阳性细菌耐药率。结果显示:分离到119株大肠杆菌,耐药基因mcr-1检出率13.8%(17/123),并对17株耐药菌株进行药敏试验,其结果显示,耐药率分别为:林可霉素100%,阿莫西林100%,氯霉素94%,庆大环素88%,氧氟沙星76%,噻胞霉素65%,头孢吡肟29%,替加环素0%;对两种药物耐药的菌株为41.2%(n=7),对三种及以上的药物耐药菌株为35.3%(n=6)。此研究为掌握长沙地区禽源mcr-1耐药菌株的耐药情况和耐药特征奠定了研究基础。

产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的多重PCR检测方法构建

为了建立一种可同时检测禽产肠毒素大肠杆菌(ETEC)和沙门氏菌(Salmonella)的多重PCR方法,针对产肠毒素大肠杆菌致病基因Hly E、沙门氏菌特异基因inv A的基因保守区域合成两对特异性引物(目的片段为550 bp和825 bp),通过优化反应条件建立多重PCR检测方法,并反复验证分析其特异性、灵敏性和重复性,同时应用该方法对临床样本进行初步应用。结果显示:该方法可从同一样品中同时特异性扩增产肠毒素大肠杆菌Hly E基因、沙门氏菌inv A基因目的条带,对其他菌株均不能扩增出目的条带;检测沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌的灵敏度分别为0.078 ng/μL和0.78 ng/μL,且重复性良好。用建立的多重PCR方法对采集的59份粪便样品进行检测,分别检出产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的样本为13份和7份,同时携带产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的样本检出7份。该方法特异性、灵敏性、重复性良好,为鉴别诊断这两种细菌所致鸡腹泻病提供了一种快速准确的检测途径。

禽源耐碳青霉烯大肠杆菌耐药基因的鉴定及其耐药性分析

为了解湖南省长沙地区禽源碳青霉烯耐药大肠杆菌携带基因blaNDM及耐药情况,试验通过PCR方法对不同来源的大肠杆菌进行耐药基因检测。结果显示,采集的152份样本中分离出84株耐碳青霉烯大肠杆菌,其中24株携带耐药基因以blaNDM-1为主。同时应用肉汤稀释法分析24株大肠杆菌对8种抗菌药物的敏感性。结果显示,24株大肠杆菌对阿莫西林的耐药率高达83.3%,对其他抗生素的耐药率分别为林可霉素70.8%、氯霉素37.5%、噻孢霉素37.5%、庆大霉素33.3%、氧氟沙星12.5%、头孢吡肟8.3%、替加环素4.2%,且50%(n=12)的菌株至少3种药物耐药,表现为多重耐药表型。试验结果为了解该地区禽源耐碳青霉烯类药物情况及临床上用药提供参考依据。

湖南省部分猪场种猪群弓形虫感染情况及其对生产成绩的影响

为了了解湖南省部分猪场种猪群弓形虫感染情况及弓形虫感染对病毒疫苗(猪瘟、蓝耳病、口蹄疫)抗体和生产成绩的影响,试验采用ELISA抗体检测方法对湖南省7个市14个猪场(分别来自3个不同种源)送检的184份种猪血清进行猪弓形虫抗体的检测,同时又进行了猪瘟病毒抗体、猪蓝耳病病毒抗体和O型猪口蹄疫病毒抗体检测,同时结合生产成绩进行分析。结果表明:各地区猪场猪均有弓形虫感染,平均抗体阳性率为58. 7%,其中常德市最高,达到90. 0%。从14个猪场的种猪来源分析,种源不同,弓形虫抗体阳性率存在差异(47. 1%~69. 0%),就算是同一种源的不同猪场,弓形虫感染情况也相差比较大。弓形虫的感染情况与猪群的健康状况有关,猪群弓形虫抗体OD450值平均值越高,猪瘟病毒的免疫抗体越低,弓形虫抗体OD450值平均值在2. 000以上的猪群,蓝耳病病毒抗体水平则有明显下降趋势;猪场生产成绩与弓形虫的感染情况无明显关联。说明该地区猪弓形虫感染较普遍,在猪群健康度较好的情况下,猪场生产成绩与弓形虫的感染情况无明显关联,但弓形虫的感染程度对其他病毒的免疫抗体水平有间接的影响。

猪繁殖与呼吸综合征致病机理的研究进展

PRRS(猪繁殖与呼吸综合征)复杂的发病机制包括抗体依赖性增强、引起机体免疫抑制和在机体内持续性感染等现象,以及病毒遗传多样性;这些是该病难以防控的主要原因,本文就近年有关进展进行综述。

猪伪狂犬病的研究进展

近年来,猪伪狂犬病发病率逐年上升,对我国规模化养猪场造成了巨大的经济损失。由于该病在猪群中具有传播速度快、传播途径多、流行范围广以及死亡率高等特点,为此,本文从猪伪狂犬病的病原学、流行病学、病理变化、临床症状、诊断方法和防控建议进行综述,旨在为该病的进一步研究提供理论参考。

废水生物脱氮除磷工艺研究进展

由于水体富营养化日益严重,研发高效、经济的脱氮除磷工艺已成为水污染治理领域的热点。文中阐述了传统脱氮除磷工艺原理且分析了传统工艺的不足,并对近年来研发出的几种典型脱氮除磷新工艺进行综述。以期为研发出高效,经济,环保的脱氮除磷工艺提供借鉴与参考,同时也是今后污水处理的发展方向。

松乳菇菌种分离及菌丝生长特性的研究

以野生松乳菇子实体为材料,分别取不同组织进行菌种分离。用PDA培养基培养纯化,筛选出8株菌株,取生长快的菌丝体用不同固体平板培养研究其人工培养特性。结果表明:菌盖与菌柄联接处间分离到的菌丝生长最快;葡萄糖为最佳碳源;乙酸铵为最佳氮源,其次是玉米浆和蛋白胨;不同培养基的最适pH分别是:配方①pH5.0～5.5,配方②pH5.5～6.0,配方③pH6.0～6.5。

酵母硒抗病毒感染研究进展

微量元素硒在抗病毒感染疾病中,与宿主抗氧化能力和免疫应答的改变有关。一系列的研究表明,硒缺乏的人或动物更有容易受到病毒的入侵,甚至引起病毒毒力的增强和病毒基因的变异。营养与病毒感染的关系已成为目前研究的热点。文章就酵母硒抗病毒感染、促进机体的免疫功能等方面做一综述,为酵母硒的应用以及营养与病毒感染的关系研究提供借鉴。

猪胚胎死亡原因分析及防治措施

在现代养猪业中．猪繁殖障碍严重影响着养猪生产．母猪胚胎死亡给养猪户带来了很大损失。据报道，母猪在妊娠期间约有25％。40％胚胎死亡，因此，了解胚胎死亡原因，分析并解决（降低）胚胎死亡率．提高母猪每窝产仔数显得日益重要。本文结合笔者在实际生产中遇到的情况．将猪胚胎死亡的原因及防治措施加以综述。

影响猪肉品质的因素及提高肉质的措施

通过了解目前国内测定猪肉肉质的指标,参考各种提高肉质的方法及其作用机理,其中包括仔猪使用激素(GnRH,促性腺激素释放激素)去势,国内猪种的改良,宰杀前后对猪的处理,以及通过营养的调控,饲养的管理方法和手段的运用,来寻找一套提高猪肉肉质的综合措施。

抗菌肽在仔猪生产中的应用研究进展

抗菌肽是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原体的肽类物质,具有抗菌谱广、抗菌活性强、不易产生耐药性等特点,近年来,作为一种替代抗生素的新型饲料添加剂在畜牧生产中得到越来越广泛的应用。该文主要就抗菌肽的来源、分类、作用机理及在仔猪生产中的应用研究进展进行了综述。

副猪嗜血杆菌的分离鉴定与药敏试验

为了研究湖南省内副猪嗜血杆菌流行情况,从湖南省内岳阳、湘阴、娄底、郴州等10个规模化猪场送检的210份患呼吸道或关节病变的病猪组织样进行细菌分离。试验采用HPS16SrRNA的基因序列对可疑菌落PCR扩增,得到2株细菌基因序列与预期目的片段相符。细菌学试验证明2株细菌均符合HPS形态、培养与生化特性,药敏试验。结果表明,对头孢噻肟、环丙沙星和先锋Ⅳ高度敏感,对强力霉素、壮观霉素和呋喃妥因中度敏感,对新霉素、青霉素、林可霉素和庆大霉素等多种抗生素严重耐药。