“三全育人”视域下高校实践育人的创新路径探索——以遵义医科大学药学院为例

文章以遵义医科大学药学院的大学生为研究对象,剖析了中医药专业院校实践育人的建设现状以及存在问题与成因,构建了“专业教师—团委与学生会—全校学生共参与”的“三全育人”视域下以课外活动为载体的实践育人创新路径,以期进一步促进中医药专业学生德智体美劳全面发展,并为广大相关教育工作者提供有效借鉴和参考。

绞股蓝中达玛烷型四环三萜皂苷元的波谱学特征

达玛烷型四环三萜皂苷类成分是绞股蓝中主要有效成分,该类化学成分在人参、三七、西洋参等其他药用植物中也有分布,因其具有抗肿瘤、降血脂血糖等广泛的药理活性,一直是中药领域的研究热点。由于达玛烷型四环三萜皂苷元部分在核磁共振波谱中存在大量的亚甲基、次甲基信号叠加,其化学结构鉴定难度较大。本文拟对已报道的绞股蓝中达玛烷型四环三萜皂苷类成分的波谱学数据进行归纳,总结出绞股蓝皂苷元的结构特点及其波谱学特征,为绞股蓝乃至其他药材中达玛烷型四环三萜皂苷类成分的结构解析提供科学依据。

“三全育人”理念下“五个一金种子”组织育人工程的探索与实践——以遵义医科大学药学院为例

共青团是党联系青年团员最牢固的桥梁纽带。为推动高校共青团工作改革创新,努力培养德智体美全面发展的社会主义事业建设者和接班人,遵义医科大学药学院团委探索和实践“五个一金种子”组织育人工程,对青年团员进行思想政治教育的同时,关心学生、服务学生、培养学生,这是学院团委在推进高校思想政治工作改革创新中充分发挥共青团作用的一次大胆创新,旨在有效发挥共青团组织作用,引领青年学子成长成才。

罗格列酮对小鼠高胆固醇血症的治疗作用、肝脏胆汁酸代谢影响及其机制探讨

目的观察罗格列酮对小鼠高胆固醇血症的治疗作用、肝脏胆汁酸代谢影响,并探讨其可能机制。方法36只小鼠随机分为3组各12只,干预组和模型组均制备高胆固醇血症模型,并分别灌胃罗格列酮羧甲基纤维素钠混悬液、空白羧甲基纤维素钠溶液,持续给予高脂饲料;正常组每日灌胃等体积羧甲基纤维素钠溶液,始终给予普通饲料。观察各组组织病理学及血生化指标[血糖、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)]变化。液质联用仪分析肝脏组织中胆汁酸丰度。另检测肝脏或肠组织中Cyp7a1、Cyp8b1、FXR、SHP、Lrh1、Hnf4α、Fgf15、Fgfr4、JNK1/2、ERK1/2基因。结果模型组肝细胞中充斥大量脂肪泡,干预组细胞内脂肪泡接近正常组。与模型组比较,干预组TC、LDL、血糖水平降低,ALT水平升高,P均<0.05。模型组TCA显著下降,但干预组没有能逆转其下降的趋势;模型组DCA无太大变化,但干预组DCA急剧上升,远远超过对照组。与模型组比较,干预组JNK1、Erk2、Cyp7a1、FXR表达升高,SHP表达降低,P均<0.05。结论罗格列酮对小鼠高胆固醇血症有治疗作用,且影响肝脏胆汁代谢,其机制可能为调控胆汁酸代谢通路基因表达,影响胆汁酸组的整体轮廓特征。

天然黄酮类化合物抑制CYP3A4的构效关系研究(英文)

目的研究天然黄酮类化合物对CYP3A4的抑制活性并通过定性及三维定量分析两种方法挖掘天然黄酮结构中抑制CYP3A4活性的关键因素。方法利用睾酮特征代谢反应表征人肝微粒体中CYP3A4的活性。在此体系中,首先选取较高浓度初筛25种黄酮类化合物的抑制活性。对于抑制活性超过50%的化合物,进行多浓度测试以获得IC50值。最后分别采用定性和三维定量两种方式分析黄酮结构与CYP3A4抑制之间的相关性。结果初筛实验表明,黄酮苷元类化合物中的黄芩素、异鼠李素、山奈酚、白杨素、木犀草素、芹菜素、槲皮素、柚皮素以及豆蔻明9个化合物对CYP3A4表现出最强抑制作用。除了异鼠李素之外,另外8个化合物的抑制百分比高达90%。黄酮类化合物中主要是取代基的类型、羟基的数量和位置以及碳1、2位双键影响对CYP3A4的抑制活性。建立了预测性较好的反映黄酮结构及对CYP3A4抑制活性的定量计算模型。结论本文发现了黄酮类化合物抑制CYP3A4活性的关键结构特征,同时建立了可以用于黄酮类化合物抑制CYP3A4活性的计算化学模型。

高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏胆汁酸代谢调控通路基因的表达影响

目的探讨C57BL/6J小鼠在高脂饮食压力下,肝脏胆汁酸代谢调控通路基因表达的差异研究。方法选取日龄42~56 d SPF级C57BL/6J雄性小鼠22只,随机分为正常对照组、模型组。模型组经高脂饮食饲喂16周后,生化法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)水平,LC-MC进行肝脏胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)含量分析,以肝脏组织为材料提取总RNA进行测序,采用主成分分析(PCA)、热图可视化、火山作图法等方法进行数据挖掘,并找出显著性变化的代表性基因。结果经高脂饮食饲喂16周后,模型组小鼠TC、LDL-C高于对照组(P<0.01,P<0.05),肝脏CA和CDCA显著下降(P<0.05)。胆汁酸代谢调控通路中Cyp3a11、Nr0b2、Hnf4aos和Fgfr4基因表达显著下调,Cyp39a1、Scp2、Hsd17b4基因表达显著上调,P均<0.05。结论高脂饮食对C57BL/6J小鼠胆汁酸代谢调控通路基因表达有显著影响。

睾酮代谢的种属差异研究（英文）

目的研究睾酮在人及小鼠、大鼠、犬、兔、猪、豚鼠、牛、羊等实验动物肝微粒体代谢中的差异。方法睾酮分别于上述种属肝微粒体进行孵育,加入NADP Na、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶等试剂启动体外P450酶反应。样品采用高效液相色谱紫外检测器及高分辨质谱进行分析。代谢轮廓用热图进行可视化,并用主成分分析进行差异研究。结果 6β-羟基化不是睾酮唯一的代谢途径。本研究在不同种属中共发现了18种睾酮的代谢产物。尽管6β-羟基化在不同种属中与睾酮的底物消除基本呈正相关,但该途径无法补偿其他途径造成的底物消除。豚鼠具有最强的睾酮代谢能力,而羊对睾酮的代谢能力最弱。小鼠、犬、兔肝微粒体中,睾酮的代谢轮廓与人最相似。结论 6β羟基化途径的定量不能用作所有物种CYP 3A活性评判的精准依据。如果药物证明由CYP 3A4进行代谢,在临床前期研究中,应结合药理学模型的需要,尽量采用小鼠、犬、兔作为动物模型,以保证药物体内暴露与人体实验尽量接近。

基于UPLC-MS主成分分析的不同树种附生铁皮石斛对比研究

目的建立可区分不同树种附生的铁皮石斛UPLC-MS联用分析方法,为鉴别铁皮石斛的来源及品质评价提供参考。方法采用UPLC-MS联用的方法,色谱柱为Hypersil Gold C18(2.1 mm×150 mm,1.9μm),柱温为40℃,流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱,流动相流速为0.3 mL/min,离子化质谱分析得到1500多个离子峰,以各离子峰为轮廓应用主成分分析的方法对不同树种附生的铁皮石斛进行分析比较。结果不同树种附生栽培的铁皮石斛次生代谢产物具有显著差异。结论以UPLC-MS技术结合主成分分析(PCA)可准确区分不同树种附生的铁皮石斛,为鉴别铁皮石斛的来源及其品质评价提供了科学依据。

基于胆汁酸代谢网络分析绞股蓝总皂苷降脂作用的机制

绞股蓝总皂苷具有显著的降低血脂的作用,然而其机制尚未明确。课题组在前期研究的基础上,将33只C57BL/6J雄性小鼠随机分为3组,对照组(ND组)、模型组(HFD组)和绞股蓝皂苷组(HFD+GP组),分别给予维持饲料和高脂饲料,从16周开始,每日分别灌胃给予绞股蓝总皂250 mg/kg和等体积的空白溶剂,至38周,收集小鼠的血清和肝脏样本。通过HE染色观察肝脏组织的病理变化,检测血清总胆固醇和低密度脂蛋白水平,利用UPLC-MS/MS技术对小鼠肝脏14种胆汁酸含量进行分析,采用实时荧光定量PCR检测Cyp7a1、Cyp8b1、Fxr、Shp、Lrh1、Hnf4α基因表达水平。与对照组比较,模型组有明显的脂肪泡结构,给予绞股蓝总皂苷可以明显减轻肝脏组织的病理改变。与模型组比较,绞股蓝总皂苷可以显著降低血清中TC和LDL-C含量,显著降低肝脏中牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)、甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA)和甘氨脱氧胆酸(GDCA)含量,显著升高肝脏中鹅去氧胆酸(CDCA)、脱氧胆酸(DCA)和牛磺脱氧胆酸(TDCA)含量,并在上调肝脏Cyp7a1、Cyp8b1、Fxr和Lrh1基因表达的同时下调Shp的基因表达。绞股蓝总皂苷降脂作用的潜在靶点可能与FXR介导的胆汁酸代谢通路有关,为进一步深入探讨绞股蓝总皂苷降脂作用及其机制提供了参考。

金钗石斛在SD大鼠体内的药代动力学研究

目的通过UPLC-MS方法检测大鼠血浆中石斛碱的含量,探讨金钗石斛细粉灌胃给药后在大鼠体内药代动力学的特征。方法建立血浆样品中石斛碱的分析方法,大鼠经灌胃给予金钗石斛细粉0.8 g/kg,分别于0、2、6、10、15、20、30、40、60、90、120、180、240、480、720、1 440 min收集大鼠血浆,样品处理后采用Thermo Q Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统分析,Hypersil Gold C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.9μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,体积流量0.3m L/min,ESI源正离子检测石斛碱含量,盐酸伪麻黄碱为内标。结果大鼠血浆样品中内源性物质对石斛碱含量测定无干扰,方法学考察符合要求,所建立的分析方法能够满足临床前药代动力学的研究。药动学结果显示,给药后血浆中石斛碱浓度平均达峰时间为11.71 min,最大血药浓度平均值为212.17μg/L,平均半衰期为351.95 min。结论以石斛碱为检测指标,研究了金钗石斛细粉灌胃给药后在大鼠体内药代动力学的特征,为其进一步的研究与开发提供了参考。

不同栽培方式铁皮石斛多糖含量的对比分析

目的分析不同栽培方式铁皮石斛中多糖含量。方法分别采集高、中、低海拔的大棚种植、附石种植和附板栗树、木荷树和青杠树栽培的铁皮石斛,参照2015版《中国药典》,采用苯酚-硫酸法,在488 nm处测定铁皮石斛中的多糖含量。结果铁皮石斛多糖含量受海拔因素影响显著,低海拔铁皮石斛样品多糖含量显著高于中、高海拔样品;不同栽培方式铁皮石斛多糖含量依次为大棚>附树>附石。结论栽培条件对铁皮石斛多糖含量的影响主要体现在海拔因素。

长期高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏免疫相关基因的mRNA变化

目的探讨长期高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏免疫相关基因表达的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠分别高脂饲料喂养16周和38周,对照组给予普通饲料,测量体质量与血糖, HE染色检查肝组织病变情况。提取RNA,由华大基因北京基因组学研究所BGISEQ-500测序平台进行测序,原始序列数据参照GRCm38/mm10小鼠基因组进行比对和注释。利用火山图进行mRNA数据矩阵分析,找出显著调控的肝脏免疫相关基因,采用实时荧光定量PCR验证部分改变显著基因的数据。结果高脂饮食显著增加小鼠的体质量和血糖, HE染色显示高脂饮食小鼠肝脏脂质积聚。转录组学火山图显示,高脂饮食16周,在795个免疫相关基因中有157个免疫相关基因的表达水平显著变化。高脂饮食38周有235个免疫相关基因显著变化,然而大多数基因呈上调趋势。在发生显著变化的基因中,选择了6个基因来验证转录组的数据。高脂饮食16周时, CD36和PR结构域蛋白1(PRDM1)显著上调, CD276显著下调。高脂饮食38周, CXC趋化因子配体1(CXCL1)、 CD40、甲酰肽受体1(FPR1)均呈现显著上调。实时荧光定量PCR数据一般都遵循转录组数据的趋势。结论长期高脂饮食的小鼠肝脏免疫相关基因表达水平发生显著变化。

补益、扶正类中药在肿瘤治疗中的药理研究及应用现状

补法中的扶正固本是中医治疗肿瘤的重要法则,近年来研究者对扶正补益药在肿瘤治疗中的研究越来越多。本文选取扶正补益药中的人参,灵芝,黄芪,金钗石斛四味药材近几年来在肿瘤治疗中的研究进行简要综述,以期为扶正补益药的应用提供参考。

金钗石斛居群内石斛碱的含量差异比较

目的测定金钗石斛居群内不同丛和不同年生枝条中石斛碱的含量,并对其进行比较与分析。方法采用气相色谱法,DB-1毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm),火焰离子化检测仪(FID)为检测器测定不同丛和不同年生枝条石斛碱的含量。结果金钗石斛居群内不同丛和不同年生枝条中石斛碱含量均有差异,最高含量为0.94%,最低含量为0.13%。生长年限是影响同一丛中不同枝条石斛碱含量的主要因素,1年生>2年生>3年生。在生长年限相同的条件下,地势是石斛碱含量差异的主要因素,高地势金钗石斛中石斛碱含量显著高于低地势。结论金钗石斛居群内样本中的石斛碱含量差异显著,可以为金钗石斛的种植、采收提供参考。

基于网络药理学探讨铁皮石斛治疗2型糖尿病的作用机制

目的基于网络药理学方法探讨铁皮石斛治疗2型糖尿病(T2DM)的潜在活性成分及相关作用靶点与信号通路。方法基于文献及数据库收集铁皮石斛化学成分,根据Veber原则以及LO5原则预测化学成分的口服吸收活性,随后利用Swiss Target Prediction和SEA数据库预测活性成分潜在作用的T2DM相关靶点;构建并分析靶点的PPI网络,以发现铁皮石斛作用T2DM的重要靶点。对潜在靶点进行KEGG通路富集,构建“成分-靶点-通路”网络筛选铁皮石斛的重要成分。结果铁皮石斛140个潜在口服吸收活性成分,可作用于396个潜在靶点和82条信号通路;“成分-靶点-通路”网络分析发现,铁皮石斛素A、穆坪马兜铃酰胺、顺式-N-阿魏酰基酪胺、3',4-二羟基-3,5'-二甲氧基联苄等可能是铁皮石斛主要的潜在活性成分,可作用于PIK3CG、MMP9、HMGCR、NFKB1、PIK3CA、PTGS2、CDK2、PTPN1、FOS、MTOR等靶点,从而对HIF-1、胰岛素抵抗、TNF、Toll样受体、T2DM等信号通路进行调节,起到治疗T2DM的作用。结论本研究探讨了铁皮石斛治疗T2DM的潜在活性成分及其作用机制,为深入研究铁皮石斛治疗T2DM的药效物质基础及分子机制提供理论依据。

绞股蓝总皂苷对高胆固醇血症模型小鼠主要尿蛋白基因表达的影响研究

目的:探讨绞股蓝总皂苷(GPs)对高胆固醇血症模型小鼠肝组织中主要尿蛋白(Mups)基因表达的影响。方法:将C57BL/6J小鼠按体质量(BW)分为对照(ND)组、模型(HFD)组和GPs治疗(GP)组,每组11只。除ND组外,其余各组小鼠均给予高脂饲料以复制高胆固醇血症模型。于饲养的第17周起时,ND组和HFD组小鼠均灌胃等体积0.1%羧甲基纤维素钠溶液,GP组小鼠灌胃GPs混悬液(250 mg/kg),每日1次,连续22周。在检测各组小鼠BW、血糖(BG)、血脂[总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]水平的基础上,提取其肝组织总RNA,构建逆转录文库并进行RNA-seq测序;采用主成分分析(PCA)、火山图、散点图等方法筛选差异基因;采用实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)对差异基因进行验证;通过双变量分析评价差异基因表达量与上述药效学指标的相关性。结果:与ND组比较,HFD组小鼠BW和血清BG、TC、LDL-C水平均显著升高(P<0.05);与HFD组比较,GP组小鼠除BW外上述指标均显著降低(P<0.05)。PCA结果显示,ND组和HFD组数据分布于不同象限,GP组数据分布介于上述两组之间。经高脂饮食诱导后,小鼠肝组织中Mup4、Mup5、Mup11、Mup15、Mup21基因mRNA均显著上调(P<0.05);经GPs干预后,Mup3、Mup4、Mup5、Mup8、Mup12、Mup21基因mRNA均显著下调(P<0.05)。在ND组与HFD组、HFD组与GP组中表达发生显著改变且趋势相反的基因为Mup4、Mup5、Mup21。RT-qPCR验证结果显示,与ND组比较,HFD组小鼠Mup4、Mup5、Mup21基因mRNA的相对表达量均显著升高(P<0.05)。相关性分析结果显示,小鼠Mup5基因mRNA表达量与血清TC、BG水平(r分别为0.727 1、0.670 6)以及Mup4、Mup21基因mRNA表达量与血清BG水平(r分别为0.737 8、0.721 5)均成正相关(P<0.05)。结论:GPs对高胆固醇血症模型小鼠肝组织中Mups基因的表达具有一定的调控作用,可通过回调Mup4、Mup5、Mup21基因mRNA的过表达来降低模型小鼠的糖脂水平。

清胰Ⅱ号颗粒对急性胰腺炎小鼠的作用及其机制

目的探讨清胰Ⅱ号颗粒对急性胰腺炎小鼠的作用及其机制。方法采用无胆碱乙硫氨酸饲料诱导小鼠急性胰腺炎模型,检测血清淀粉酶水平,观察胰腺组织病理损伤情况,采用qRT-PCR检测胆汁酸通路关键蛋白编码基因表达,并对其进行聚类分析、主成分分析。结果与模型组比较,清胰Ⅱ号颗粒不同剂量组小鼠血清淀粉酶水平降低,的胰腺组织病理形态改善,并呈剂量依赖性,同时可显著下调Mapk1、Slco1a1基因表达。结论清胰Ⅱ号颗粒对急性胰腺炎小鼠的作用机制可能与改善胆汁酸代谢有关。

三种细茎类石斛药材的分子生物学鉴别

目的针对目前细茎类石斛的植物分类较为困难,商品药材来源鉴别难度大,建立3种常用细茎类石斛的分子生物学鉴别方法。方法采用PCR扩增的方法对3种细茎类石斛样品进行ITS序列的扩增并经单向测序,进行聚类、亲缘关系分析。结果9个石斛样本明显分为三类,罗河石斛(1、2、3)聚为一类,铁皮石斛(4、5、6)聚为一类,细茎石斛(7、8、9)聚为一类。细茎石斛与铁皮石斛的亲缘关系较近,与罗河石斛的亲缘关系较远,罗河石斛与铁皮石斛的亲缘关系最远。结论以ITS序列为DNA条形码可以快速准确地鉴别3种细茎类石斛来源,为解决细茎类石斛的分类异议提供参考,并保障石斛药材的来源准确。

苯酚硫酸法测定苗药艾纳香中多糖含量

目的:建立艾纳香中多糖含量的测定方法。方法:采用分光光度法,以葡萄糖为对照品,苯酚-硫酸溶液为显色剂,在490nm处法测定艾纳香中的多糖含量。结果:葡萄糖在0.011~0.108mg/mL范围内呈良好的线性关系,回归方程式为y=7.1971x+0.0174,R^2=0.9967,平均加样回收率为89.3%,RSD为2.19%。结论:该方法结果准确,重现性好,可用于艾纳香中多糖的含量测定。

以铁皮石斛为例浅谈单一成分定量标准的局限性

中药材是生产中药饮片的原料,中药饮片是临床汤剂和中成药生产的原料,是保障中医临床用药和中药产业健康发展的基础,中药材质量标准直接影响到市场流通药材的质量。本文以铁皮石斛为例探讨现有标准中品质评价结果与传统用药经验不一致情况,以供在该类药材标准修订过程参考。