猪发酵床垫料二次发酵有机肥微生物群落分析

以猪发酵垫床垫料为研究对象,腐殖酸、过磷酸钙、硫酸亚铁作为保氮剂进行堆肥发酵,分析了发酵产物中微生物群落的组成,从堆肥有益菌角度评价了不同保氮剂的效果,为进一步处理猪床垫料进行高效堆肥提供理论依据。基于高通量测序技术,分析了不同保氮剂处理发酵产物中细菌和真菌在门和属水平上的结构差异。结果表明:在细菌门水平上,发酵产物中主要的细菌有绿弯菌门(Chloroflexi)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteriota)、拟杆菌门(Bacteroidota)、厚壁菌门(Firmicutes);在细菌属水平上,除去未命名与未分类的细菌,发酵产物中主要的细菌有芽孢杆菌(Bacillus)、链霉菌(Streptomyces)、假单胞菌(Pseudomonas);腐殖酸提升了变形菌门、拟杆菌门、假单胞菌的丰度,降低绿弯菌门、放线菌门、芽孢杆菌、链霉菌的丰度;过磷酸钙提升了绿弯菌门的丰度,但降低了变形菌门、厚壁菌门、芽孢杆菌、假单胞菌的丰度;硫酸亚铁提升了拟杆菌门、链霉菌的丰度,但降低了绿弯菌门、厚壁菌门、芽孢杆菌、假单胞菌的丰度。在真菌门水平上,发酵产物中以子囊菌门(Ascomycota)为优势菌;在真菌属水平上,过磷酸钙、硫酸亚铁处理以木霉(Trichoderma)、曲霉(Aspergillus)为优势菌,腐殖酸处理大幅降低了木霉和曲霉的丰度,但其丰度更为均匀,对发酵有益的假拟利希氏菌和假丝酵母菌的丰度具有明显的提升作用。综上,不同保氮剂添加进行发酵垫床垫料二次发酵能改变发酵产物中细菌和真菌群落的多样性及其丰度,其中以腐殖酸影响群落丰度的效果最显著,抑制有益菌的能力弱于过磷酸钙,腐殖酸对丰度的影响大于硫酸亚铁。

添加不同比例玉米秸秆对鸡粪有机肥品质的影响

为高效利用玉米秸秆,提高有机肥品质及效益,本研究通过添加0、5%、10%、15%、20%、25%、30%(质量分数)的干燥玉米秸秆对鸡粪进行好氧发酵,测定鸡粪有机肥的有机质、总养分、pH、电导率、种子发芽率等肥力指标以及重金属含量情况。研究发现:15%玉米秸秆组的发酵周期显著短于5%、10%、20%、25%、30%玉米秸秆组,极显著短于对照组;添加15%(质量分数)以上玉米秸秆显著提高了鸡粪有机肥的总养分含量,添加15%、20%(质量分数)玉米秸秆显著提高了鸡粪有机肥的含量,添加10%、15%(质量分数)玉米秸秆显著提高了鸡粪有机肥种子发芽率;添加20%(质量分数)以上玉米秸秆显著增加了鸡粪有机肥砷含量,添加30%(质量分数)玉米秸秆显著增加了鸡粪有机肥铬含量,添加玉米秸秆显著增加了鸡粪有机肥铅含量,但均未超限。以上结果表明,玉米秸秆可作为发酵鸡粪有机肥的优质生物质原料,并且适宜的添加比例为15%(质量分数)。

贵州本土微生物牛发酵床不同深度微生物组成研究

为了研究贵州本土微生物牛发酵床的微生物多样性及微生物组成情况,推动绿色生态养牛技术及提高养牛粪污综合利用率,本试验采集贵州本土微生物牛发酵床多位点不同深度样本,并对发酵床中所含发酵菌进行宏基因组测序,分析其Shannon、Chao、Ace、Simphan等微生物多样性指数以及微生物在属水平、种水平上的组成。结果发现,贵州本土微生物牛发酵床中层和表层垫料中的微生物多样性显著高于底层垫料中的(P<0.05);属水平上的微生物主要以小单孢菌属、球形杆菌属和链霉菌属的细菌等为主;种水平上的以变形杆菌、类细菌、绿弯菌、放线杆菌、嗜热球形杆菌等为主。研究结果表明,贵州本土微生物牛发酵床表层及中层微生物多样性较高,发酵床底层较表层和中层可能具有更好的抑菌效果和氨基酸合成效率,本研究进一步论述了本土微生物牛发酵床微生物组成情况,以助推绿色生态养殖模式可持续发展。

贵州山区农业秸秆发酵床养猪模式的技术要点

为探究贵州省喀斯特山区环境下发酵床养猪的模式和技术要求,该文从同位发酵床进行阐述和分析,通过技术要点和普遍问题进行分享,对圈舍设计、饲养密度设计、发酵床垫料控制、饲喂控制等进行详细阐述,为贵州地区发酵床养猪技术提供理论指导,为科学的发展发酵床养殖技术提供参考,促进发酵床养殖模式可持续发展。

巨大右心房使用左室传送导管(6250VIC)行左束支区域起搏1例

给右心房巨大的患者植入心室电极有一定的难度。解决这一问题可采用多种方法:采用右心室主动电极;经冠状静脉窦植入左心室电极;C315鞘引导下使用3830电极行左束支区域起搏。本病例在使用上述几种电极植入失败后,巧妙地在左心室传送导管的引导下将3830电极植入左心室间隔部,完成左束支区域起搏。

复合微生物菌剂堆肥发酵牛粪的效果试验

为筛选出适用于牛粪发酵的微生物菌剂及组合,将12个牛粪堆体平均分成4组(试验1组、试验2组、试验3组、对照组),每组3个重复。试验1组添加0.1%(枯草芽孢杆菌+细黄链霉菌),试验2组添加0.1%(里氏木霉+枯草芽孢杆菌),试验3组添加0.1%(黑曲霉+枯草芽孢杆菌),对照组添加0.1%无菌水,进行21 d发酵试验,测定堆肥的温度、含水率、pH值、种子发芽指数等指标。结果:各试验组堆肥1 d可达到50℃高温,对照组需5 d才能达到;试验1、2、3组最高温度分别为64.1、64.9、62.3℃,对照组最高温度为59.0℃;试验1、2、3组高温持续期分别为15、14、15 d,对照组高温持续期10 d。在堆肥第8 d时,各组pH值均达到最大值,分别为8.1、8.6、8.2、7.8。各组的含水率随着堆肥时间延长逐渐降低,分别降低23.1%、24.6%、26.7%、18.9%。试验1组种子发芽指数最高为94.00%,对照组种子发芽指数最低为54.87%,对照组与3个试验组的种子发芽指数均存在显著差异(P<0.05)。结论:添加复合微生物菌剂有利于提高牛粪堆肥温度并维持高温期,有效降低堆肥含水率,显著提高种子发芽指数,对堆肥pH值影响不明显。综合比较,在牛粪中添加0.1%(枯草芽孢杆菌+细黄链霉菌)效果较好。

不同处理全株玉米饲喂思南牛的增重效果

为研究全株青贮玉米及全株玉米干料对思南牛的增重效果,试验选取思南牛20头,平均分为2组(青贮组10头、干料组10头),分别采用发酵60天全株玉米和全株玉米干料进行饲喂,其他日粮组成及饲养管理一致,每日不限量饲喂,饲养期120天,统计各组平均日采食量、平均总采食量、平均总增重。结果:青贮组思南牛平均日采食量、总采食量、生长体重、平均总增重均显著高于干料组(P<0.05)。结论:与全株玉米干料相比,饲喂全株青贮玉米可显著增加思南牛的采食量和增重,从而提高其生长性能。

不同廉价培养基对青贮玉米秸秆微生物的影响

为研究青贮廉价培养基对青贮微生物的影响情况,从贵州优质青贮全株玉米秸秆发酵饲料中采集样本,进行16S rRNA测序,通过对青贮微生物的分离培养,将复合青贮微生物菌剂分别接种到MRS肉汤培养基、乳清粉培养基、番茄汁培养基、玉米面培养基中37℃厌氧培养48 h,测定其pH变化、生长曲线、活菌数、菌剂产量等。研究表明:青贮玉米秸秆发酵微生物中魏斯氏菌属(Weissella)丰度值为51.2%,假单胞菌属(Pseudomonas)丰度值为34.25%,片球菌(Pediococcus)丰度值为12.75%;MRS肉汤培养基活菌数、吸光值(OD)、pH显著优于其他试验组(P≤0.05),乳清粉培养基发酵青贮微生物的OD值显著高于玉米面培养基组、番茄汁培养基组(P≤0.05)。综上所述,乳清粉培养基可替代MRS肉汤培养基作为更低成本的廉价培养基,进而推动青贮微生物添加剂的高效发展。

养猪发酵床及微生物菌剂研究进展

随着我国生猪养殖量的不断增加,其粪污资源化利用不充分、粪污处理压力大等问题日益突显。发酵床养猪作为一种无污染的生态环保养殖技术,有效地解决了中小型养殖户的环境问题,发酵床养猪的核心技术是微生物菌剂的选择、配比等。本文就同位发酵床微生物菌剂选择、组成、最新研究及应用情况进行综合性分析,为微生物发酵畜禽粪污资源化利用提供思路和参考。

不同强化剂对柯乐猪CMAH和GGTA1基因表达的影响

为提升地方猪猪肉品质,开发高端猪肉食品,本实验研究了添加5’-胞苷单磷酸(5’-CMP)、山奈酚(KA)、单宁酸(TA)以及混合强化剂对柯乐猪肝脏和背最长肌CMAH和GGTA1基因表达的影响。实验选取体重相近、日龄相当和免疫水平等外部因素均相同的50头去势柯乐猪,并将其随机分为5组,饲喂不同强化剂60 d,饲喂后随机选择3头进行屠宰,收集肝脏和背最长肌,提取总RNA,并使用实时荧光定量PCR检测CMAH和GGTA1在柯乐猪肝脏和背最长肌中的实际表达量。结果表明:饲料中添加5’-CMP和KA能抑制肝脏和背最长肌CMAH基因表达,添加TA和含有TA的混合组对肝脏CMAH基因抑制效果不显著,但在背最长肌中显著高于KA组和5’-CMP组;TA组和混合组肝脏GGTA1基因表达量差异极显著高于对照组、5’-CMP组、KA组,对照组中GGTA1基因表达量与5’-CMP组和KA组差异不显著,混合组和对照组背最长肌GGTA1基因表达量显著高于5’-CMP组、KA组,与TA组差异不显著。本次研究为开发高端猪肉市场和器官移植、红肉过敏症等研究提供了基础数据。

6MWT、CAT评分在COPD病情评价中的应用意义

慢性阻塞性肺疾病(COPD)的患病率和死亡率逐年上升,是呼吸系统最常见的慢性病之一。在我国,COPD的患病率占40岁以上人群的8.2%。COPD患者的肺功能恶化迅速,运动功能受限,患者的劳动能力、生活质量均受到严重影响。同时,COPD的治疗持续时间长,所造成的费用也给患者家庭带来很大负担。2000年世界卫生组织做的一项调查发现,COPD已经成为全球慢性疾病死亡原因第4名,并有学者预计如果再不加以控制,将在2020年成为第3名,同时成为全球疾病治疗费用第5位[1]。

纯种柯乐猪与巴×柯杂交猪肠道菌群结构的研究

本试验对纯种柯乐猪与巴×柯杂交猪肠道菌群结构特性及差异性进行了研究,旨在从猪肠道微生物的角度揭示纯种柯乐猪耐粗饲特性及巴×柯杂交猪对青绿饲料的适应能力,为后期微生物添加剂的设计、柯乐猪杂交利用及标准化养殖提供依据。纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪在同等条件下养殖,达屠宰体重后(100 kg左右),随机各选3头屠宰,取十二指肠、空肠、回肠、结肠内容物,进行高通量测序和生物学信息分析。结果显示:纯种柯乐猪与巴×柯杂交猪各肠段Alpha多样性指数差异不显著(P>0.05);Beta多样性分析显示,2个品种猪大部分样品交叉聚集到一起;肠道菌群结构分析显示,纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪小肠阶段以厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria)为优势菌门,到了结肠阶段则是以拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门为优势菌门;纯种柯乐猪与巴×柯杂交猪结肠中有大量的纤维分解菌属,巴×柯杂交猪结肠中月形单胞菌属(Selenomonas)和脱硫弧菌属(Desulfovibrio)的相对丰度显著或极显著高于纯种柯乐猪(P<0.05或P<0.01),而消化球菌属(Peptococcus)、聚乙酸菌属(Acetitomaculum)、Leeia的相对丰度则显著低于纯种柯乐猪(P<0.05);LEfSe分析后发现纯种柯乐猪结肠中富集着大量的产短链脂肪酸菌,其中纤维降解菌有聚乙酸菌属、瘤胃球菌科的不可培养瘤胃细菌4C0d_17(uncultured_rumen_bacterium_4C0d_17)、Leeia、拟杆菌纲、拟杆菌目,与纤维降解菌起协同作用的菌群有考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)、考拉杆菌属的uncultured_Veillonellaceae_bacterium;巴×柯杂交猪结肠中富集的纤维降解菌有月形单胞菌属、柔嫩梭菌(Clostridium leptum)。上述结果表明,在整个肠道菌群结构上,纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪的优势菌在类别上非常接近,体现了环境相同效应,纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪的肠道菌群结构相对稳定且相似度高;在属水平上,纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪的结肠中纤维降解菌表现出差异,纯种柯乐猪结肠内纤维降解菌的比例较高,说明引入外源血对肠道菌群结构有一定的影响,巴×柯杂交猪对粗纤维的消化能力较弱于柯乐猪。

天冬酰胺酶-吴茱萸碱核壳型脂质纳米粒的药动学研究

目的考察天冬酰胺酶-吴茱萸碱核壳型脂质纳米粒(asparaginase-evodiamine core-shell lipidic nanoparticles,AELNs)在大鼠体内的药动学行为,比较AELNs与游离天冬酰胺酶(asparaginase,ASNase)/吴茱萸碱(evodiamine,EVO)的生物利用度。方法取18只SD大鼠,分别尾静脉注射AELNs、游离ASNase和游离EVO,给药后于不同时间点大鼠眼眶取血,分别采用Nessler试剂比色法和HPLC法测定血浆样品中ASNase和EVO的浓度,采用DAS(2.1.1版)软件计算药动学参数。结果将游离ASNase制备成AELNs后,其药时曲线下面积和平均滞留时间分别提高了1.83倍和1.94倍。AELNs中EVO的药时曲线下面积约为游离EVO的28.94倍。结论AELNs提高了ASNase和EVO在大鼠体内的生物利用度。

放牧和圈养对柯乐猪的屠宰性能及肉质性能的影响

为探讨柯乐猪在不同养殖条件下的屠宰性能及肉质性能,本研究选取圈养组(6头)和放牧组(6头)共12头38日龄保育小猪(公母各半),每头体重均在10 kg左右。圈养组舍饲育肥,饲养期间任其自由采食;放牧组日常补饲日粮,补料营养水平与圈养组相同。2个处理组饲养至10月龄,且体重在100 kg左右屠宰,进行胴体性能及肉品质测定。结果表明:放牧组小肠(翻后)重、小排部肉重占小排比例显著高于圈养组,左胴体重、前颈部皮重占前颈比例显著低于圈养组,背腰部骨重极显著高于圈养组,右胴体重、脾重方面极显著低于圈养组;放牧组的肉色L*值、滴水损失方面显著低于圈养组;其他指标差异不显著;活重与瘦肉率呈显著正相关,瘦肉率与pH呈极显著负相关;2组柯乐猪肉质均为优质猪肉,无PSE肉和DFD肉。综上表明,圈养可以提高柯乐猪脾重、前颈部皮重占前颈比例、个体体重和胴体重,提高屠宰率。

Ⅺ型胶原α1蛋白调节蛋白激酶通路促进人肺腺癌原代细胞迁移和侵袭

目的探讨Ⅺ型胶原α1蛋白(COL11A1)在肺腺癌迁移和侵袭中的作用和机制。方法采用2020年9至11月贵州医科大学附属医院收治的4例肺腺癌患者手术病理组织,经免疫组织化学方法鉴定肺腺癌组织及癌旁组织并行转录组测序,使用TCGA和GTEx数据库行单基因预后分析。用Western blot法检测肺腺癌组织和癌旁组织中COL11A1基因表达水平。提取及培养人肺腺癌原代细胞。COL11A1 siRNA转染人肺腺癌原代细胞后转录组测序,差异基因做KEGG富集分析,分析差异基因富集的通路,Western blot法检测该通路各关键位点蛋白表达及磷酸化水平变化,划痕愈合实验检测细胞迁移、CCK8法检测细胞增殖、Transwell检测侵袭能力。结果肺腺癌组织转录测序筛选差异表达较高的10个基因,单基因预后分析发现COL11A1基因表达水平与生存率相关(P<0.001);Western blot法检发现COL11A1在肺腺癌组织中表达较癌旁组织高(P<0.001);COL11A1 siRNA转染人肺腺癌原代细胞后转录组测序发现差异基因集中在PI3K-akt通路上,Western blot检测发现抑癌基因PTEN在siRNA转染组中表达显著高于对照组和阴性转染组,而Akt、p-Akt 473、p-Akt 308、p-PTEN、p-PDK1、p-c-Raf、p-GSK-3β基因表达均显著下调(均P<0.05),siRNA转染组相较于阴性对照组人肺腺癌原代细胞迁移、增殖、侵袭能力均降低(均P<0.05)。结论COL11A1调节PI3K/Akt/GSK-3β通路促进人肺腺癌原代细胞迁移和侵袭。