TSG 101基因敲低对猪伪狂犬病病毒体外增殖的影响

本研究旨在使用慢病毒包装敲低技术构建敲低肿瘤易感基因(tumor susceptibility gene 101,TSG 101)的慢病毒质粒及稳转PK15细胞系,并验证该敲低细胞系对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染的影响。针对TSG 101基因构建并筛选,成功获得重组慢病毒,用获得的重组慢病毒感染PK15细胞,并使用嘌呤霉素进行筛选,获得稳转敲低TSG 101基因的PK15细胞系。通过Real-time PCR以及Western blot方法对所构建的细胞系进行编辑效率检测;使用CCK-8法对筛选出的细胞系进行细胞活力及生长状况检测;通过流式细胞术、Real-time PCR、Western blot以及子代病毒滴度方法验证该细胞系对PRV复制的影响;最后对PRV的吸附、进入以及复制阶段的试验探究敲低TSG 101基因对于PRV感染有影响的阶段。结果表明,1)本研究所构建的细胞系中TSG101的表达明显降低,并将该细胞系命名为sh-TSG101细胞系;2)细胞活性检测结果显示,敲低TSG 101基因对细胞活性及生长情况无显著影响;3)使用PRV-GFP、PRV-QXX感染sh-TSG101,体外试验证明敲低TSG 101对PRV的增殖有显著的抑制作用。4)病毒的吸附、进入以及复制试验证明,敲低TSG 101在PRV的复制阶段有明显的抑制作用。综上,本研究成功构建TSG 101基因敲低的PK15细胞系,体外敲低TSG101能够显著抑制PRV增殖,为PRV等DNA病毒性疾病的防控提供了新思路,并为进一步探究TSG101调控PRV感染的分子机制奠定了基础。

锰纳米佐剂的制备及生物学效应

锰作为生命活动中重要微量元素参与了多种生理过程。对于能量代谢、神经系统发育和免疫系统正常运行至关重要。与可溶性锰离子相比,纳米锰可维持锰离子在注射部位持续释放,以诱导局部的免疫应答,并增强树突状细胞(dendritic cells,DCs)对抗原的摄取,促进DCs在体内活化与成熟。本文从纳米锰作用机制、制备方法、功能表征、纳米佐剂存在的问题和解决策略等方面进行综述,重点介绍了纳米锰作为疫苗佐剂的应用,并提出存在问题及解决策略。

轻质泡沫混凝土技术在公路桥台台背回填中的应用研究

本研究旨在探讨轻质泡沫混凝土技术在公路桥台台背回填中的应用意义。通过对轻质泡沫混凝土在桥梁工程中的特点和优势进行分析,结合实际案例和工程经验,探讨了轻质泡沫混凝土在公路桥台台背回填中的减轻自重负荷、减少地基固结沉降、提高施工效率、环保节能和提升桥梁整体性能等方面的应用价值。研究结果表明,轻质泡沫混凝土技术在公路桥梁工程中具有重要的应用意义,为桥梁结构的设计、施工和使用提供更好的技术支持和保障。

脂噬对奶牛乳腺上皮细胞脂滴大小的调控研究

脂噬是一种新的自噬形式,可以选择性识别脂滴并将其降解,在维持细胞内脂质稳态等过程中发挥着重要的作用。本研究旨在探讨奶牛乳腺上皮细胞经饥饿诱导脂噬后对细胞脂滴大小的调控作用。试验用100μmol·L^(-1)的亚油酸处理细胞24 h,刺激细胞脂滴蓄积,然后分别饥饿诱导细胞0、6、12、24、48 h,油红O染色观察细胞内脂滴的尺寸和数量随饥饿时间的变化情况,随后饥饿诱导24 h通过免疫荧光观察脂滴和自噬蛋白LC3的共定位,蛋白免疫印迹检测细胞内自噬蛋白LC3和P62的表达,透射电镜观察脂滴自噬情况。结果发现:随着饥饿处理时间的延长,脂滴直径从1.57μm显著增加到2.12μm,每个细胞的脂滴数量显著减少,从39个·cell^(-1)减少到24个·cell^(-1),大脂滴比例显著增加,小脂滴比例显著减少(P<0.05),免疫荧光发现LC3与脂滴发生共定位,透射电镜观察发现自噬溶酶体包裹着脂滴,饥饿处理24 h后LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的比值显著增加1倍,P62蛋白表达显著下降(P<0.05)。以上结果表明,脂噬对奶牛乳腺上皮细胞脂滴的大小发挥调控作用。

肉桂醛对炎性IPEC-J2细胞AQP4和NHE3基因表达的影响

本试验旨在探讨肉桂醛(CA)对炎性猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)和钠-氢交换蛋白3(Na+-H+Exchanger3,NHE3)表达的影响,以揭示肉桂醛抗炎止泻的分子作用机制。将IPEC-J2细胞随机分为对照组、脂多糖组(5.00μg/mL LPS)和LPS+CA组(5.00μg/mL LPS+0.05μL/mLCA)组,各组按剂量孵育12h后,每组3个重复。采用CCK-8法检测细胞活力,RT-qPCR检测IL-1α、TNF-α、AQP4及NHE3 mRNA的相对表达水平,ELISA检测细胞中IL-6、TNF-α、IL-1α含量,Western blotting检测AQP4及NHE3蛋白表达。结果显示:与对照组相比,5μg/mL LPS能显著提高IPEC-J2细胞中IL-1α和TNF-α mRNA丰度及IL-6、TNF-α、IL-1α含量,说明5μg/mL LPS能诱导IPEC-J2细胞的炎症反应;与LPS组相比,0.05μL/mL CA与LPS共处理后,IPEC-J2细胞中IL-1α和TNF-α mRNA的表达水平显著下降,IL-6、TNF-α、IL-1α含量也明显降低,提示0.05μL/mL CA能缓解细胞炎症反应。与对照组相比,5μg/mL LPS能下调细胞中AQP4和NHE3的mRNA和蛋白表达;与LPS组相比,0.05μL/mL CA与LPS共处理后,IPEC-J2细胞中AQP4和NHE3的mRNA和蛋白表达均升高。综上,CA能抑制猪小肠上皮细胞的炎症反应,在炎症状态下激活AQP4和NHE3的表达发挥止泻作用。

共轭亚油酸(CLA)对乳脂肪球粒径和磷脂酰胆碱含量的影响

随机选取16头处于泌乳中期的荷斯坦奶牛,分为2组。对照组仅饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加400 g/d共轭亚油酸(CLA)微囊粉,试验为期8 d,对第8天采集乳样进行乳成分分析,重力法分层后分析牛乳脂肪球粒径大小,液相色谱串联质谱测定大粒径和小粒径乳脂肪球的磷脂酰胆碱(PC)含量。结果发现,与对照组相比,饲喂CLA可降低牛乳的乳脂肪含量(P<0.05)。牛乳经重力分层后,CLA处理组平均粒径参数D[3,2]、D[4,3]、DV(10)、DV(50)、DV(90)在F1~F6层均显著降低(P<0.05),比表面积(SSA)则显著升高(P<0.05)。磷脂含量分析发现与CON组相比,CLA组在F1层中的PC(28∶0)、PC(30∶0)、PC(31∶0)、PC(32∶0)、PC(30∶1)含量显著下降(P<0.05)。在F6层中21种PC化合物含量都显著降低(P<0.05)。这些结果表明CLA处理可降低牛乳脂肪、脂肪球粒径和磷脂酰胆碱的含量,增加乳脂肪球比表面积,从而为生产不同粒度的乳脂肪球打下基础。

肌肽对小鼠抗疲劳作用的试验研究

研究了肌肽对小鼠抗疲劳的作用.每个试验中小鼠分为4组,分别以0,50,100,200mg·kg-1肌肽连续灌胃30d后,观察小鼠负重游泳时间,测定抗疲劳相关生化指标.试验结果表明,中、高剂量组(100,200mg·kg-1)肌肽均能延长小鼠负重游泳时间;小鼠运动后产生的乳酸量、肝糖原消耗量、血清尿素氮、肌肉组织SOD,GSH消耗量和MDA产生量,与对照组相比均有不同程度减少;说明肌肽具有不同程度的抗疲劳作用,并可能与其抗氧化功能有关.

雄性水牛瘤胃内睾酮的检测及变化规律的研究

采用高压液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定了雄性水牛瘤胃液中的睾酮。结果表明，瘤胃上清液及瘤胃细菌菌体中均有睾酮存在。放射免疫分析表明，瘤胃上清液睾酮样免疫活性物质的平均浓度为６３．９±２６．５ｆｍｏｌ／ｍＬ，且春季含量高于夏季（６６．１±３１．０ｖｓ２３．２±１６．５ｆｍｏｌ／ｍＬ，Ｐ＜０．０５）；瘤胃细菌菌体内睾酮样免疫活性物质为２６３．５±１２９．０ｆｍｏｌ／ｍｇ，春夏两季之间无明显的季节性变化（２９８．２±１５８．７ｖｓ３３９．５±２１３．０ｆｍｏｌ／ｍｇ，Ｐ＞０．０５）。３头雄性水牛去势后，瘤胃液中睾酮样免疫活物质含量降低（９．０４±１．５８ｖｓ７．５５±１．２４ｐｍｏｌ／ｍＬ，Ｐ＜０．０５）；去势水牛注射睾酮，其含量又有上升（８．１５±０．９９ｖｓ８．８８±０．６７ｐｍｏｌ／ｍＬ，Ｐ＞０．０５）。试验结果提示瘤胃液中存在睾酮，其浓度变化与机体状况密切相关。

雄性水牛去势对瘤胃消化代谢的影响

选用装有永久性瘤胃瘘管、十二指肠瘘管和临时性颈静脉插管的雄性水牛３头（１．５岁、２５０ｋｇ），研究去势对瘤胃微生物消化代谢的作用。结果表明，动物去势后１２ｄ，瘤胃细菌蛋白下降１９．０８％（Ｐ＜０．０５），ＴＶＦＡ下降８．０７％（Ｐ＜０．０５），且丙酸比例下降；而瘤胃液中ＮＨ３—Ｎ水平增加１５．２４％（Ｐ＜０．０５）。去势后皱胃进入十二指肠食糜流量下降３３．６％，１ｄ内进入十二指肠总Ｎ量减少３２．０％；含Ｎ组分中，细菌蛋白Ｎ量、过瘤胃蛋白Ｎ量、氨态Ｎ量分别下降４２．７％，２５．５％和２８．２％。说明去势能明显影响瘤胃的消化代谢。

肌肽在维生素C-亚铁离子系统中对DNA损伤的保护作用

目的研究肌肽在维生素C-亚铁离子系统中对DNA氧化损伤的作用。方法采用硫代巴比妥酸法在脱氧核糖水平上检测肌肽对DNA氧化损伤的保护作用。设咪唑、L-组氨酸、β-丙氨酸、甘露醇、苯甲酸钠、二甲基亚砜为对照,比较其抗氧化能力的强弱,并对其抗氧化机制做初步探讨。结果在此实验条件下肌肽的抗氧化能力明显优于苯甲酸钠等常用抗氧化剂,其抗氧化动力学曲线与咪唑相似。结论肌肽在维生素C-亚铁离子系统中对DNA氧化损伤有明显的保护作用,其抗氧化机制可能与其所含的咪唑环有关。

瘤胃真菌对植物纤维的降解作用

瘤胃真菌对植物纤维的降解作用杨国宇李宏基（河南农业大学畜牧兽医工程学院，郑州４５０００２）朱东亮（焦作市农业局）１瘤胃真菌纤维降解酶类瘤胃真菌在其生长过程中可产生广泛的降解酶类，其酶活性依赖于供其生长的碳水化合物的来源。瘤胃中一些酶类如内葡聚糖酶、外...

免疫球蛋白资源开发的有效途径

免疫球蛋白资源开发的有效途径杨国宇李宏基（河南农业大学牧医工程学院，郑州４５０００２）程伟（郑州牧业工程高等专科学校）郭启祥（郑州动植物检疫局）免疫球蛋白是动物机体天然存在的或由外源性抗原（如细菌、病毒）等刺激动物机体产生的一类特异性抗体，是机体抵抗...

日粮中添加α-硫辛酸对肉鸡脂肪代谢的影响

选用200只AA肉鸡,分为4组,日粮中分别添加α-硫辛酸0,20,60,100mg·kg-1,试验期49d。试验结果表明,日粮中添加适宜水平α-硫辛酸(60,100mg·kg-1)可降低血清胆固醇、甘油三酯浓度,而升高游离脂肪酸浓度,降低肝脂肪含量。

脂肪组织甘油三酯酯酶研究进展

脂肪组织甘油三酯酯酶(ATGL)是新近发现的调节脂肪分解的关键酶,含有经典酯酶的Gly-X-Ser-X-Gly模序和α/β水解酶折叠子结构,其主要功能是催化甘油三酯水解的起始步骤,其信号传导途径也可能不同于激素敏感酯酶(HSL)。文章就ATGL的近年研究进展进行了概述。

功能性饲料添加剂复方制剂对肉鸡生产性能和脂肪代谢的影响

本试验观察了一种功能性饲料添加剂复方制剂对肉鸡生产性能和脂肪代谢的影响。试验结果表明,在基础日粮中添加该复方制剂500mg·Kg-1可使49日龄肉鸡体重提高5.83%,料重比降低8.48%,成活率提高7.03个百分点;并同时降低肉鸡血清总胆固醇含量、血清甘油三酯含量、腹脂率和肝脏粗脂肪含量,而对胸肌粗脂肪含量无明显影响。

ghrelin对生殖系统的调节作用

ghrelin是新近发现的一个含有28个氨基酸残基的多肽,是生长激素促分泌素受体(GHS-R)的天然配体,除具有调节GH分泌和能量平衡的功能之外,尚有其他许多功能。近年来体外或体内试验研究表明,ghrelin对生殖激素如LH、PRL具有一定的调节作用;另外,ghrelin及其受体系统广泛存在于生殖系统中。提示这一新发现的激素可能对生殖系统具有重要的调节作用。文章就ghrelin对生殖系统调节作用的研究进展加以综述。

解剖开心网,解读SNS

40年前，哈佛大学心理学教授米尔格兰姆提出了“六度分割”理论，认为“人与人之间所间隔的人不会超过6个，即最多通过6个人你就能认识任何一个陌生人。”依此理论，个人的社交圈将不断放大，最终成为一个大型网络。基于该理论，SNS网络应运而生，并成为互联网新的关注点。

浅析出版文化的两个维度

作为一项文化事业,出版要讲究文化内涵,追求文化品位,故而有必要对出版进行文化研究。出版文化中精英与大众的分野,造就了出版活动多方面的差异,但在"和而不同,求同存异"的理念下,二者各取所长,相互学习,在对出版使命的履行上终是殊途同归。

α-硫辛酸对CCl_4致小鼠急性肝损伤的保护作用

试验目的在于探讨α-硫辛酸对肝损伤保护作用及可能的机理。小鼠染毒后(0.01%CCl45mL·kg-1)分别于0h、12h、24h给予α-硫辛酸(100mg·kg-1),末次给药12h后,测定相关生化指标。试验结果表明,α-硫辛酸可降低小鼠血清ACT、AST和胆红素水平,降低肝脏MDA水平,而使肝脏GSH、SOD水平升高。结果提示,α-硫辛酸对CCl4所致的小鼠急性肝损伤有明显保护作用,其机理可能与其抗氧化功能有关。