刺葡萄VdERD6L15基因克隆及功能分析

【目的】探究VdERD6L15在刺葡萄果实生长发育中的功能,从湘刺1号中克隆VdERD6L15基因及其启动子,进行基因功能研究和启动子活性分析。【方法】克隆VdERD6L15基因CDS序列,并对CDS进行生物信息学分析;构建VdERD6L15表达载体,并通过瞬时转化烟草确定VdERD6L15基因编码蛋白的亚细胞定位;同时,通过在己糖缺陷型酵母菌株EBY.VW4000中异源表达VdERD6L15探究其功能;此外,通过启动子截短试验确定VdERD6L15启动子的核心区域。【结果】成功克隆刺葡萄VdERD6L15基因编码序列,该编码序列长1461 bp,可编码486个氨基酸,具有膜蛋白特征,属于单糖转运蛋白家族。亚细胞定位试验确认VdERD6L15蛋白主要定位于液泡膜上。通过在酵母菌株EBY.VW4000中进行异源表达,验证了VdERD6L15具有转运葡萄糖的能力。利用PlantCARE数据库对VdERD6L15启动子顺式作用元件进行分析,发现其主要包含光响应元件、干旱胁迫和激素响应元件。通过GUS染色分析,进一步确定候选基因VdERD6L15启动子的关键调控区域位于-500 bp到-1000 bp之间。【结论】VdERD6L15是一个定位在液泡膜上的糖转运蛋白,具有转运葡萄糖的功能;VdERD6L15启动子的核心元件位于ATG上游500~1000 bp之间。

农业大学园艺专业本科实习与毕业论文教学改革探讨

在农业大学园艺专业本科教育中,完成实习课程和毕业论文是培养学生综合素质和实践能力的关键环节。现行的园艺专业本科教学模式存在实习时间固定且集中、教与学存在一定脱节、考核方式单一和经费不足等问题,导致教学效果不佳,毕业的本科生质量较难满足乡村振兴和研究生人才选拔需求。文章通过实地调研、文献查阅、实际案例分析和实习课程教改项目实施,探讨园艺方向本科实习与毕业论文传统教学模式中理论和实践教学存在问题,分析本科毕业论文教学要求与社会工作需要专业类型人才间的联系,进而优化调整教学内容与毕业论文完成形式,强化实践教学,改革和创新本科毕业论文完成方式,为提高农业大学园艺专业本科学生的园艺理论和实践水平及培养适应现代农业生产的优秀园艺专业人才提供参考。

刺葡萄新品种湘刺3号的选育

湘刺3号是从怀化市中方县桐木镇通过实生选种得到的一个极晚熟刺葡萄新品种。果穗多呈圆柱形,少部分有副穗,松紧适中,成熟时果皮呈蓝黑色,果粉薄,果皮厚,平均穗质量163 g,平均单粒质量3.4 g,果形指数1.1(纵径/横径),每颗果实中含种子2~3粒,多为3粒,种子颜色黑褐色。可溶性固形物含量(w,后同)15.2%,可滴定酸含量0.28%。果实发育期130 d左右,3月下旬至4月初萌芽,4月底至5月上旬开花,9月下旬果实成熟。该品种抗旱性强,极抗多湿土壤;抗黑痘病、白粉病、炭疽病、灰霉病能力强,但不抗霜霉病;抗虫性强,但不抗根瘤蚜。适宜在湖南、贵州、四川、江西、福建、湖北、云南、广东、广西、重庆等省份的葡萄产区春、秋两季种植。

湖南特色刺葡萄果皮中优势次生代谢物质分析

以‘夏黑’葡萄和‘阳光玫瑰’葡萄为对照,利用超高效液相色谱质谱联用技术广泛靶向代谢组学的方法,对果皮中的次生代谢产物进行组学分析,结合统计学方法筛选出湖南省3个刺葡萄品种果皮中的差异代谢物质。结果表明:本试验共检测到737种代谢物质,其中‘湘刺1号’检测出的代谢物质有711种,‘湘刺2号’检出666种,‘湘刺4号’检出710种;不同刺葡萄品种果皮的代谢物质有较大差异,主要表现为类黄酮化合物含量的差异,其中‘湘刺2号’的原花青素相对含量较高,‘湘刺4号’的花色苷和类黄酮物质相对含量较高,‘湘刺1号’果皮中含有较多的槲皮素-3-O-桑布双糖苷、丁香亭-3-O-(6″-乙酰)葡萄糖苷、柠檬素-3-O-葡萄糖苷、芍药花素-3-O-芸香糖苷和锦葵色素-3-O-(6″-O-乙酰)葡萄糖苷-5-O-葡萄糖苷,且香豆酰阿魏酰酒石酸和紫丁香苷仅在‘湘刺1’号中检出。

刺葡萄新品种湘刺2号的选育

湘刺2号是从怀化市中方县桐木镇通过实生选种得到的一个中熟刺葡萄新品种。果穗多呈圆柱形,果粒着生较松散,大多无副穗;果粉中等厚,果皮厚,成熟果实为黄绿色;平均果穗质量136g,平均单粒质量2.2g,果形指数1.1(纵径/横径),每粒果实中含种子2~3粒,种子颜色褐色。平均可溶性固形物含量(w,后同)18.5%,平均可滴定酸含量0.20%。在湖南地区果实发育期105d左右,4月初萌芽,5月上旬开花,8月下旬果实成熟。适应高温多湿气候,抗旱能力强。对葡萄常见病虫害均表现出良好的抗性,但不抗霜霉病,且不耐受根瘤蚜侵害。在种植区域方面,具有广泛的适应性,适合在湖南、江西、云南、广西等多个省份的葡萄主产区推广种植。

夏黑葡萄一次果和延后果果实香气及关键基因表达分析

【目的】分析夏黑葡萄常规栽培一次果和延后果果实香气及关键基因表达,为提高湖南地区葡萄果实品质,延长葡萄上市时间及葡萄延后栽培技术提升提供参考依据。【方法】以9年生夏黑葡萄为试验材料,设常规一次果栽培为对照组(T1),分别于2022年5月26日(T2)、6月5日(T3)和6月15日(T4)3个时期对主梢第4节位短截,记录不同处理各阶段物候期,测定葡萄成熟期果实生理指标,包括果实单粒重、明度值(L^(*))、颜色指数、纵径、横径、硬度、可溶性固形物(TSS)和总酸(TA)含量等指标;利用气相色谱—质谱联用法测定不同处理夏黑葡萄果实挥发性香气成分,分析香气物质差异及化合物气味活性值(OAV),并绘制香气特征轮廓;通过对4个处理果实进行转录组测序(RNA-Seq),以|log2 Fold Change|≥1且P<0.05为筛选标准,采用DEGSeq筛选组间差异表达基因(DEG),并分析调控夏黑葡萄花香和玫瑰香的磷酸甲基赤藓醇(MEP)途径和类胡萝卜素代谢途径的关键基因表达量。【结果】T1夏黑葡萄从萌芽至成熟期所需天数较T2、T3和T4多30~39 d,T1成熟期果实单粒重(8.57 g)显著高于T2、T3和T4(P<0.05,下同),T1果实TSS含量最高,显著高于T2和T4,与T3无显著差异(P>0.05),T3果实中TA含量最低,固酸比排序为T3>T1>T4>T2。T1、T2、T3、T4果实中检测出的香气物质种类分别有25、25、24和24种,其中乙酸乙酯、己醛、反式-2-己烯基醛、丙酸酐和苯乙醇为优势化合物,含量占化合物总量95%以上,T3果实中萜烯类化合物的含量相对较高。乙酸异戊酯仅在T1和T3果实中被检测出;T3果实中橙花醇(16.30μg/kg)、香叶醇(8.74μg/kg)和柠檬烯(7.31μg/kg)含量在4个处理中最高。香气物质OAV与香气特征轮廓分析结果显示,T1、T2、T3、T4葡萄果实中分别检出OAV≥1的化合物种类为9、10、10和9种,果香和甜香气味强度最大的为T1,其次为T3,最小的为T4。RNA-Seq结果显示,T1 vs T3、T3 vs T2、T3 vs T4分别有2532、781和1113个上调DEGs,1397、703和426个下调DEGs。与萜类化合物合成有关的GPPS基因和与类胡萝卜素合成有关的PSY和CCD1基因在T3果实中的表达量最高。【结论】于6月5日左右对葡萄主梢第4节位进行短截的葡萄果实高糖低酸,果香和花香风味浓郁,果实品质较好。

不同破眠处理对阳光玫瑰葡萄冬芽萌发的影响

【目的】寻找阳光玫瑰葡萄理想安全的破眠方法以及探究其破眠机制。【方法】以阳光玫瑰葡萄冬芽为试材,通过研究类休眠阶段和生理休眠阶段不同破眠处理对葡萄萌芽率、成花率和花穗质量的影响,并通过转录组测序筛选可能影响葡萄冬芽萌发的关键基因。【结果】在萌芽前1个月对阳光玫瑰葡萄冬芽进行单氰胺处理、石硫合剂+1-氨基环丙烷羧酸(ACC)处理,均能使萌芽提前,显著提高萌芽率,不影响成花率及花穗质量。通过分析转录组数据,筛选了PYL4、PP2C24、PP2C8、PP2C37、PP2C25、SAPK2等差异表达基因,这些基因可能通过参与激素信号传导、氧化应激等途径影响葡萄芽的萌发。【结论】5°Bé石硫合剂+0.25 mg·mL-1ACC是阳光玫瑰葡萄打破休眠的一种安全、有效的处理方法。

‘阳光玫瑰’葡萄病毒病症状差异及其对品质的影响

针对‘阳光玫瑰’葡萄病毒病普遍发生的情况,检测了田间植株的病毒种类及其对葡萄产量和品质的影响。结果显示,在显症叶片和健康叶片中均检测到葡萄卷叶相关病毒3(GLRaV-3)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄病毒B(GVB)和沙地葡萄茎痘病毒(GRSPaV)4种病毒。对重症、轻症和无症植株的产量和果实品质进行分析发现,重症植株的产量显著低于无症和轻症植株。玫瑰香味有关的橙花醇和香叶醇2种香气物质在3类不同症状表现的植株果实中无显著性差异,而重症植株果实中芳樟醇含量显著高于无症和轻症植株果实。针对病毒病对‘阳光玫瑰’生产造成的严重危害,根据生产经验总结出了两种缓解病毒病的方法可用于指导生产。

野酿2号毛葡萄果实发育进程中苹果酸代谢规律及相关基因表达分析

【目的】分析野酿2号毛葡萄果实发育进程中苹果酸代谢规律及相关基因表达情况,为提高野酿2号毛葡萄的酿造品质及优质葡萄酒生产提供参考依据。【方法】以5年生野酿2号毛葡萄为试验材料,于盛花后5~17周采集不同生长发育阶段果实,测定果实单粒重、pH、可溶性固形物和可滴定酸含量,采用高效液相色谱法测定果实中苹果酸、柠檬酸和酒石酸含量;使用酶标仪测定苹果酸代谢关键酶[苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)、NADP-苹果酸酶(NADP-ME)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)]活性;采用实时荧光定量PCR检测苹果酸代谢相关基因PEPC、MDH和ME的相对表达量,并分析3个基因与苹果酸含量的相关性。【结果】野酿2号毛葡萄果实单粒重在转色期前增长较快,转色期的果实pH、可溶性固形物、苹果酸含量分别是盛花后5周的1.03、1.36和2.38倍,盛花后11周可滴定酸含量达峰值,为35.68 mg/g。盛花后5~17周,野酿2号毛葡萄果实中酒石酸和柠檬酸含量变化不明显,而苹果酸含量变化幅度较大。盛花后8周,NAD-MDH和NADP-ME活性最高,分别为736.06和453.50 nmol/(g·min),幼果期PEPC活性较高。转色期果实中MDH基因的相对表达量是盛花后5周的1.62倍,而PEPC和ME基因的相对表达量均低于盛花后5周。相关分析结果表明,苹果酸含量与MDH基因呈极显著正相关(P<0.01),与PEPC基因呈显著正相关(P<0.05,下同),与ME基因呈显著负相关。【结论】野酿2号毛葡萄苹果酸含量变化是影响总酸变化趋势的主要因素,转色期是苹果酸含量由积累到降低的转折期,苹果酸含量受相关基因MDH、PEPC和ME表达调控。

植物生长调节剂对板栗花芽性别分化及结果枝生长的影响

为提高板栗雌花分化率 ,以 8年生铁粒头为试材 ,在花芽分化期叶面喷施 GA3 ,6 - BA ,乙烯利 ,测定结果枝长、枝基部直径、枝中部叶长和宽、该枝雄花数、雄花序长和雌花数 .结果表明 ,GA3 5 0 ,10 0 m g/L 和 6 - BA10 0 m g/L 能显著地提高板栗雌花分化率 ,降低雄花与雌花的比值 ,乙烯利对板栗雌花分化具有极明显的抑制作用 ,3个质量浓度处理没有雌花生成 ,低浓度处理具有促雄作用 .

柑橘果实着色机理研究进展(英文)

类胡萝卜素是柑橘果实呈色的主要色素.类胡萝卜素的含量和组成决定着柑橘果实的色泽,也影响到柑橘果实的营养价值.目前关于柑橘中类胡萝卜素代谢的研究已进入分子水平.根据最新报道的研究成果,介绍了柑橘果实色泽测定的原理,类胡萝卜素的测定方法、合成途径及柑橘果实成熟过程中类胡萝卜素代谢的相关基因表达,并对其研究前景进行了探讨.

多胺与脱落酸对辣椒子叶再生的影响

以‘中椒 5号’甜椒和‘湘研 10号’辣椒为试材 ,探讨了Spm (精胺 )、Spd (亚精胺 )和ABA(脱落酸 )的不同浓度与不同添加时期对子叶再生的影响。结果表明 :在不定芽分化期和伸长期添加 10 0μmol·L-1 的精胺能显著提高中椒 5号和湘研 10号不定芽的伸长率 ,分别较对照提高 78%和 73% ;在不定芽分化期添加 0 3mg·L-1 的ABA能促进不定芽分化 ,两品种分别较对照提高 52 8%和 71 6 %。

应用绿色荧光蛋白报告基因优化辣椒的遗传转化体系

以‘中椒5号’甜椒和‘湘研10号’辣椒子叶外植体为试料,绿色荧光蛋白GFP基因为报告基因,通过观察检测愈伤组织的荧光表达与特异PCR扩增鉴定,分析了工程菌液pH值、共培养基中乙酰丁香酮(AS)的浓度、共培养时的温度与共培养时间对农杆菌转化辣椒效率的影响。结果表明,在pH5.2、共培养基中加入AS200μmol·L-1、23℃黑暗条件下,农杆菌与辣椒子叶共培养5d,有利于辣椒子叶的遗传转化,‘中椒5号’、‘湘研10号’愈伤组织荧光表达率均达到了40%。

湖南主要李品种花粉生活力的研究

以布朗李 5个品种 (玫瑰皇后、黑宝石、日本大紫、澳得罗达、蜜思李 )为试材 ,测定花粉发芽率和花粉管长度 ,确定花粉生活力 ,并研究了不同培养温度、不同质量浓度的硼、2 ,4- D,GA3对黑宝石花粉生活力的影响 .结果表明 :不同品种间花粉生活力有差异 ,其中以黑宝石花粉生活力最强 ,培养 15 h花粉发芽率和花粉管长分别为5 5 .2 1% ,5 .6 5μm ;温度对黑宝石花粉生活力有显著影响 ,培养 15 h时 ,2 4,16 ,8℃培养条件下发芽率分别为5 5 .2 1% ,45 .6 2 % ,2 9.2 8% ,花粉管长分别为 5 .6 5 ,5 .2 0 ,3.5 2μm;一定质量浓度的硼对黑宝石花粉萌发很重要 ,10 m g/ L能明显提高花粉发芽率 .2 .5～ 5 .0 m g/ L的 2 ,4- D能提高黑宝石花粉生活力 ;5 0 0 m g/ L的 GA3能促进黑宝石花粉管的伸长 。

湖南草莓引种研究

以引进的12个国内外良种草莓为试材,观察研究其物候期、生长结果特性、单果重、单株产量与抗逆性,并测定果实硬度、可溶性固形物、含糖量与VC含量,以筛选出适合湖南栽培的优良品种.结果表明:丰香、硕露、硕蜜、梯旦、长丰、硕丰、索菲亚等品种适合于湖南生产发展.

葡萄叶片中POX及其同工酶与抗黑痘病的关系

选用对葡萄黑痘病抗性不同的３种类型（高抗、中抗、感病）葡萄，研究其正常功能叶、幼叶（感病前期、初期、后期）ＰＯＸ活性及其同工酶谱变化情况。结果表明，叶片ＰＯＸ活性与葡萄抗黑痘病呈正相关。高抗类型ＰＯＸ活性明显高于中抗和感病类型，正常功能叶ＰＯＸ活性高于幼叶；高抗类型与中抗类型ＰＯＸ活性在幼叶感病前后呈上升趋势，而感病类型则呈先升后降趋势。

高温高湿对比一般环境耐力运动对运动员肌肉疲劳的影响及相关机制

目的调查高温高湿应激对耐力运动、神经肌肉调节的单独和联合效应。方法简单随机抽样方法选取11名研究对象在气温/湿度适宜(对照组),高温度/湿度适宜(高温组),气温适宜/高湿度(高湿组)和高温度/高湿度[(高温+高湿)组]4个不同环境条件下,恒负荷骑车至精疲力竭。分别在运动前、后5min记录电刺激胫神经后的扭矩和肌电图反应。结果高温和高湿均缩短了运动至力竭的时间,高温高湿协同作用下的运动至力竭时间均分别低于高温或高湿组(P<0.05)。与对照组比较,高温条件下心率和皮肤温度均有升高[(9±5)次/min、和(5±1)℃,P<0.05],高湿条件下血氧饱和度明显降低[自(96±2)%降低至(88±4)%,P<0.05]。高温和高湿对运动员的核心温度或感知运动量均无显著影响(P>0.05)。高温下运动,M波、V波的振幅以及比目鱼肌或胫骨前均方根均较温和环境显著降低(P<0.05)。结论高温或高湿环境影响运动员的耐力运动能力,且两者的作用协同增加;在不同的环境条件下,肌肉疲劳的程度和特征是相似的。

垂直防渗单价初析

垂直防渗作为一种近年来兴起的新方法、新工艺 ,它广泛应用于水利工程基础防渗中 ,其特点是防渗效果好、造价低。本文介绍了垂直防渗工程施工工艺 ,测算了垂直防渗中人工、材料、机械消耗 ,并作垂直防渗工程单价分析 ,与其他防渗方法作了对比分析 。

对上海中小学校长专业化问题的思考

校长专业化问题巳成为世界各国教育研究与探讨的重要问题。从我国传统的教育管理制度来看，校长的“官本位”，是影响和阻碍我国校长专业化的深层原因。上海市于20世纪90年代中期实行了中小学校长职级制度的改革，这是我国加快探索和研究校长专业化的重要实践。那么，

农村留守儿童体育教育现状调查与分析

留守儿童体育教育作为教育的组成部分,对留守儿童的健康成长有着重要的意义.通过对河南省留守儿童体育教育情况进行调查,旨在促进留守儿童健康成长,为农村中小学体育教育改革提供有益参考.结果表明:1)体育教学方面:农村中小学均能开设体育课,但开课量严重不足,存在严重的"挤课"现象;学生学习最多的项目依次是广播操、踢毽子、跑步、篮球、跳绳、跳远等;非留守儿童体育兴趣和体育态度明显好于留守儿童.2)课外活动方面:留守儿童的动机首先是找到玩伴;非留守儿童锻炼次数和锻炼持续时间明显好于留守儿童;90%以上的农村中小学没有早操和课间操.3)训练和比赛方面:农村中小学学生组织校级运动会较少,能代表本乡镇去县城参加体育比赛机会更少.