目的探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白1(cAMP-response element binding protein 1,CREB1)基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法针对人CREB1的基因序列设计并构建2条短发夹RNA(short hairpin RNA,...目的探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白1(cAMP-response element binding protein 1,CREB1)基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法针对人CREB1的基因序列设计并构建2条短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),采用慢病毒转染shRNA至人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞系抑制其CREB1的表达。将实验组分为shCREB1#1组和shCREB1#2组,同时将shSCR空载质粒转染至上述细胞系作为阴性对照组。采用实时定量PCR和Western印迹法检测转染效率;CCK-8法检测细胞增殖能力;集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western印迹法检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达。结果相较于阴性对照组,shCREB1#1和shCREB1#2组MCF-7和MDA-MB-231细胞CREB1基因的mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.001)。沉默CREB1后,MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖能力、集落形成能力、迁移和侵袭能力减弱,且凋亡率升高(P<0.05)。沉默CREB1使细胞周期蛋白CDK2、CDK4、CDK6、Cyclin D1以及抗凋亡蛋白Bcl-2、Survivin的表达下调,而使促凋亡蛋白Caspase 3和Bax的表达上调(P<0.05)。结论沉默CREB1可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并诱导其凋亡。展开更多
目的 :探索乳腺癌骨转移骨相关事件(skeletal-related event,SRE)的危险因素,为早期预防和减少SRE提供临床理论依据。方法::检索2000年1月1日至2017年10月31日,Pubmed、Web of Science、中国知网(CNKI)、维普数据库(VIP)及万方数据库中...目的 :探索乳腺癌骨转移骨相关事件(skeletal-related event,SRE)的危险因素,为早期预防和减少SRE提供临床理论依据。方法::检索2000年1月1日至2017年10月31日,Pubmed、Web of Science、中国知网(CNKI)、维普数据库(VIP)及万方数据库中对乳腺癌骨转移SRE危险因素进行分析的中英文文献,提取相关信息和结论。对2004年4月至2016年12月间复旦大学附属中山医院和上海市黄浦区中心医院收治的104例乳腺癌骨转移病人随访并记录SRE的发生,分析SRE危险因素。结果:系统复习的文献最终纳入6篇。SRE危险因素包括病人年龄、ER/PR/HER2、组织/核分级、临床分期、骨转移持续时间、骨转移部位数、手术方式等。对这些因素行单因素和(或)多因素分析。6篇文献结论略有差异,多数结论支持临床分期晚、骨转移持续时间长、骨转移部位数多为SRE危险因素。104例乳腺癌骨转移病人中位随访60个月,58例发生SRE。单因素和多因素分析的结果是,初诊远处转移(P=0.017)和多发骨转移灶(P=0.008)为SRE的独立危险因素。回顾分析的结果与系统复习结论较一致。结论:文献系统复习和104例回顾分析显示,临床分期越晚、骨转移持续时间长、骨转移部位数目越多可能是SRE危险因素,而年龄、乳腺癌分子分型、组织/核分级、手术方式等并非SRE危险因素。展开更多
基金financially supported by the Natural Science Foundation of Hunan Province,China(Nos.2020JJ4114,2016JJ3151)the National Natural Science Foundation of China(No.51601229)+2 种基金the Young Elite Scientist Sponsorship Program by CAST,China(No.2015QNRC001)the Hunan Province Innovation Platform and Talent Plan,China(No.2015RS4001)the Open-End Fund for the Valuable and Precision Instruments of Central South University,China(No.CSUZC201815)。
文摘目的探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白1(cAMP-response element binding protein 1,CREB1)基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法针对人CREB1的基因序列设计并构建2条短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),采用慢病毒转染shRNA至人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞系抑制其CREB1的表达。将实验组分为shCREB1#1组和shCREB1#2组,同时将shSCR空载质粒转染至上述细胞系作为阴性对照组。采用实时定量PCR和Western印迹法检测转染效率;CCK-8法检测细胞增殖能力;集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western印迹法检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达。结果相较于阴性对照组,shCREB1#1和shCREB1#2组MCF-7和MDA-MB-231细胞CREB1基因的mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.001)。沉默CREB1后,MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖能力、集落形成能力、迁移和侵袭能力减弱,且凋亡率升高(P<0.05)。沉默CREB1使细胞周期蛋白CDK2、CDK4、CDK6、Cyclin D1以及抗凋亡蛋白Bcl-2、Survivin的表达下调,而使促凋亡蛋白Caspase 3和Bax的表达上调(P<0.05)。结论沉默CREB1可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并诱导其凋亡。
文摘目的 :探索乳腺癌骨转移骨相关事件(skeletal-related event,SRE)的危险因素,为早期预防和减少SRE提供临床理论依据。方法::检索2000年1月1日至2017年10月31日,Pubmed、Web of Science、中国知网(CNKI)、维普数据库(VIP)及万方数据库中对乳腺癌骨转移SRE危险因素进行分析的中英文文献,提取相关信息和结论。对2004年4月至2016年12月间复旦大学附属中山医院和上海市黄浦区中心医院收治的104例乳腺癌骨转移病人随访并记录SRE的发生,分析SRE危险因素。结果:系统复习的文献最终纳入6篇。SRE危险因素包括病人年龄、ER/PR/HER2、组织/核分级、临床分期、骨转移持续时间、骨转移部位数、手术方式等。对这些因素行单因素和(或)多因素分析。6篇文献结论略有差异,多数结论支持临床分期晚、骨转移持续时间长、骨转移部位数多为SRE危险因素。104例乳腺癌骨转移病人中位随访60个月,58例发生SRE。单因素和多因素分析的结果是,初诊远处转移(P=0.017)和多发骨转移灶(P=0.008)为SRE的独立危险因素。回顾分析的结果与系统复习结论较一致。结论:文献系统复习和104例回顾分析显示,临床分期越晚、骨转移持续时间长、骨转移部位数目越多可能是SRE危险因素,而年龄、乳腺癌分子分型、组织/核分级、手术方式等并非SRE危险因素。