福建地区猪源葡萄球菌耐药性分析及耐药基因检测

目的对福建地区分离的猪源葡萄球菌进行耐药性分析以及耐药基因分布特征研究。方法采用琼脂稀释法测定196株菌对18种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法检测10种葡萄球菌重要耐药基因的携带情况。结果所有菌株对万古霉素最为敏感,对利奈唑胺和利福平的敏感性下降。对青霉素、四环素、红霉素、氨苄西林、泰乐菌素、阿奇霉素、苯唑西林和克林霉素表现为高水平耐药,耐药率依次是83.2%、75.5%、74.5%、74.0%、68.9%、67.3%、54.1%和52.6%。对替米考星、恩诺沙星、氟苯尼考、泰妙菌素、庆大霉素、环丙沙星和氯霉素表现出中等水平耐药,耐药率分别是48.5%、41.8%、36.2%、32.1%、30.1%、27.6%和25.5%。在196株菌中,187(95.4%)株菌携带有耐药基因,共检出9种重要耐药基因,其中mecA(46.9%)检出率最高,cfr检出率最低(3.1%),其他耐压基因检出率依次为ermC(44.9%)、ermB(38.3%)、tetK(32.1%)、fexA(25.5%)、tetM(23.0%)、tetL(21.9%)和ermA(11.7%)。结论福建地区猪源葡萄球菌对β-内酰胺类、四环素类和大环内酯类均表现出较强的耐药性,并且介导这3类药物耐药基因的携带率较高,因此,在选择抗菌药治疗该病时应尽量避免使用以上药物。

猪源大肠杆菌耐药性及超广谱β-内酰胺酶流行性分析

目的对福建地区分离的猪源大场杆菌进行耐药性测定以及对ESBLs流行性进行分析,以期为临床合理用药科学提供依据。方法采用琼脂稀释法测定373株菌大肠杆菌对12种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法检测ESBLs耐药基因的携带情况以及分析CTX-M阳性菌的种系发育关系。结果分离株对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、萘啶酸、氟苯尼考及氨苄西林耐药率较高,分别为93.8%、82.8%、73.7%和70.0%;对恩诺沙星、四环素、庆大霉素、多西环素、环丙沙星、卡那霉素、头孢噻呋和头孢噻肟的耐药率依次为54.4%、53.1%、52.0%、46.6%、44.0%、41.0%、35.9%和30.8%。在373株大肠杆菌中,共有122株菌携带有ESBLs耐药基因,检出率为32.7%,其中CTX-M、TEM及OXA的检出率分别是18.0%(67)、12.1%(45)和7.5%(28),其中CTX-M的阳性菌中以CTX-M-14最为流行,其次是CTX-M-65和CTX-M-55;其种系发育显示分离株主要分布在A群。结论福建地区猪大肠杆菌对抗菌药表现出较强的耐药性,ESBLs在猪源大肠杆菌中广泛流行,CTX-M是其主要流行的基因型,并且多数菌以共生型大肠杆菌为主。

宠物源大肠杆菌产ESBLs流行性调查与耐药机制研究

目的为了解耐第三代头孢菌素的宠物源大肠杆菌对公共卫生的影响,测定宠物源大肠杆菌耐药性情况、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行性及其分子传播机制,以期对其风险评估提供科学依据。方法2014年从广州市4个动物医院采集92份患病犬猫的肛门拭子,共分离56株大肠杆菌。通过采用琼脂二倍稀释法测定17种抗菌药物的敏感性;采用PCR方法测定ESBLs的流行性及种族系统进化关系;通过接合转移试验获得CTX-M接合子,并对接合子进行复制子分型。结果药敏试验结果表明,除黏菌素(7.1%)、头孢西丁(16.1%)和头孢他啶(10.7%)稍敏感外,有11种抗菌药物的耐药率均达到50%以上,其中动物专用的第三代头孢菌素,头孢噻肟和头孢噻呋耐药率分别为55.4%和57.1%。ESBLs检测结果表明,13株携带有CTX-M,检出率为23.2%(13/56),其中主要流行的亚型依次为CTX-M-14、CTX-M-65和CTX-M-55;7株CTX-M基因阳性菌成功接合转移,主要为FIB型复制子。未检测到TEM、OXA和SHV型。种族系统进化关系显示,分离株主要分布在A组和B1组。结论患病犬猫的肛门拭子分离的大肠杆菌耐药性较为严重,其中以共生型为主。分离株对第三代头孢耐药的机制以产CTX-M-14,CTX-M-65和CTX-M-55酶为主。提示宠物与人之间耐头孢菌素药物的大肠杆菌的互相传递存在风险。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的治疗研究进展

随着耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染率不断增加,并成为全球院内感染的首要致病菌。因其高感染率、高致死率以及多重耐药株的出现,使临床治疗面临极大的挑战。本文将从药物治疗、噬菌体疗法和免疫防治等方法对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的治疗进行综述,以期对该病原菌临床治疗提供一定的参考。

猪源CTX-M型超广谱β-内酰胺酶阳性大肠杆菌耐药基因的流行性分析

为了解福建地区猪源CTX-M阳性大肠杆菌耐药性、耐药基因流行情况以及耐药质粒特征,本研究采用琼脂二倍稀释法测定福建地区分离的67株猪源CTX-M型超广谱β-内酰胺酶阳性大肠杆菌对13种抗菌药物的敏感性,通过PCR检测其重要的耐药基因;通过供体菌与受体菌(C600)的接合转移试验,检测携带CTX-M耐药基因耐药质粒的水平转移情况,并测定接合子的药物敏感性变化以及耐药质粒的复制子类型。结果显示,分离菌株对头孢噻呋(100%)、头孢噻肟(100%)和四环素(94.0%,63/67)耐药性较高,对阿米卡星相对敏感,耐药菌株仅占7.5%(5/67)。耐药基因检测结果显示,53.7%(36/67)的分离株携带3个以上耐药基因,黏菌素耐药基因mcr-1(49.3%,33/67)和氟苯尼考耐药基因floR(37.3%,25/67)的检出率较高,氟喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr和oqxAB、四环素类耐药基因tetA、酰胺醇类耐药基因cmlA和磷霉素耐药基因fosA3的检出率在10.4%~19.4%,氨基糖苷类耐药基因rmtB(4.5%,3/67)的检出率最低;其中以CTX-M+mcr-1+floR耐药基因的组成模式流行为主,检出率为25.4%(17/67)。通过接合转移试验共获得21株接合子,与受体菌C600相比,其对受试药物,如头孢噻呋、头孢噻肟和庆大霉素等的最小抑菌浓度(MIC)提高了2~32倍。复制子分型结果显示17株分离菌分型成功,4株分离菌未能分型,其中以IncF型质粒为主。福建地区猪源CTX-M阳性大肠杆菌对抗菌药物呈较为严重的耐药性,耐药基因的携带率普遍较高且以mcr-1和floR基因流行为主,耐药质粒以IncF型为主。本研究为福建地区猪源大肠杆菌耐药性的风险评估与抗菌药的合理应用提供科学依据。

比较教学法在动物生物化学教学改革中的应用

动物生物化学是动物医学专业重要基础课程。为了提高该课程的教学质量,文章从概念,化学结构,反应过程和反应场所等方面举例分析了比较教学法在动物生物化学教学改革中的应用。比较教学法不仅丰富教学形式,增强学生的学习积极性,还培养学生自己独立思考和分析能力,经过多年的实践,收到了良好的效果。

犬胰腺炎临床特征调查与治疗

为了了解福州某宠物医院2017年7月份—2018年4月份期间收治的11例犬胰腺炎病例的发病特点、诊断和治疗方法,笔者对收集的临床资料进行整理,对病例的基本信息进行归纳,同时对11例病例的临床症状、血常规指标、血液生化指标、血气、影像学检查结果进行分析,比较不同用药方案治疗效果。结果表明:患犬胰腺炎主要临床症状为食欲不振、呕吐、腹痛、腹泻、精神沉郁等。2岁以下的犬占27.3%(3/11),2~6岁的犬占27.3%(3/11),7~14岁的犬占45.5%(5/11)。幼年、中年和老年犬均可发病。63.6%的病例白细胞数和中性粒细胞数增多,81.8%的病例碱性磷酸酶活性升高,72.7%的病例尿素氮含量增加,42.9%~57.1%的病例出现低钠、低钙以及低氯血症,部分病例还表现出代谢性酸中毒,腹部密度增加,腹部内组织器官的辨别度降低。通过犬胰腺炎(cPL)测试板,结合临床症状和实验室检查结果可确诊该病。在治疗上,以乌司他丁和奥美拉唑联合用药,配合肠外营养补充,维持机体水盐平衡,一般可取得良好的治疗效果,比单独用乌司他丁治疗效果好。

猪源大肠杆菌氨基糖苷类药物敏感性测定及rmtB耐药基因流行性分析

为了解闽西地区规模化猪场大肠杆菌对临床常见氨基糖苷类药物的敏感性及rmt B耐药基因流行情况,试验对从11个规模化猪场采集的237份猪肛门拭子进行菌株分离与鉴定,采用琼脂二倍稀释法测定分离得到的菌株对氨基糖苷类药物的最低抑菌浓度（MIC）,并通过PCR方法检测rmt B耐药基因流行情况。结果表明：通过分离培养得到230株大肠杆菌,经生化鉴定和16S rRNA分析符合大肠杆菌特征;分离菌株对链霉素的耐药率最高为61.3%（141/230）,阿米卡星耐药率最低为22.2%（51/230）,庆大霉素和卡那霉素的耐药率分别为56.1%（129/230）和42.6%（98/230）;PCR检测显示,有36株大肠杆菌携带rmt B耐药基因,检出率为15.7%（36/230）。说明闽西地区大肠杆菌对氨基糖苷类药物耐药性较为严重,rmt B基因在菌群中流行较广。

加系母猪生产性能的测定与分析

为了解加系母猪经过国内饲养管理后,其后代的采食行为和生产性能情况,对其采食行为和饲料转化率进行测定。利用全自动种猪生产性能测定系统(FIRE),对加系杜洛克(5头)、大白(32头)和长白(10头)进行日采食量、日采食次数、每次采食时间、体重、平均日增重和料重比等数据进行测定和分析。结果表明:体重在30~100kg,日龄在63~158d范围,杜洛克、大白和长白平均日增重分别是0.99kg、0.95kg和0.97kg;料重比分别是2.34、2.33和2.42。不同品种母猪及个体间的采食行为存在差异,每次采食时间主要分布在3-8min,日采食次数在7~21次,每次采食时间与日采食次数呈反比。每次采食时间、日采食次数及日采食量对平均日增重和料重比具有一定的影响。

《兽医药理学》课程教学改革探讨

《兽医药理学》是高校动物医学专业的重要基础课程。针对该课程教学效果不佳的问题,探讨了设问式预习、案例教学、使用社交软件、互动教学和参与社会实践等教学方式在《兽医药理学》课程教学中的运用,同时根据畜牧业发展的需要适时调整教学重点,将最新科研成果引入课堂,并进一步完善考评机制。采取上述改革措施后,提高了学生的学习积极性,明显改善了课程教学效果。

福建地区猪源大肠杆菌耐药基因oqxAB流行性分析

目的调查福建地区猪源大肠杆菌耐药基因oqxAB流行性及阳性菌中其重要耐药基因的流行情况,以期为本地区抗菌药的合理应用提供依据。方法采集腹泻仔猪肛门拭子分离大肠杆菌,通过琼脂二倍稀释法测定分离株的药物敏感性,并用PCR法检测PMQR(包括oqxAB)、ESBLs及其他耐药基因;对oqxAB阳性菌进行接合转移试验,测定接合子的药物敏感性变化;对阳性菌的种系发育及毒力基因分布进行测定。结果本研究共分离鉴定大肠杆菌133株,分离株对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率最高(90.2%),对多粘菌素的耐药率最低(24.8%),其余药物的耐药率在26.3%~85.7%;耐药基因检测结果显示,oqxAB基因检出率为29.3%(39/133),在oqxAB阳性菌中还检测出floR(76.9%)、qnrS(71.8%)、CTX-M-1G(59.0%)、mcr-1(56.4%)、fosA3(28.2%)和acc(6′)-Ib-cr(23.1%)等耐药基因,其中59.0%携带6种以上耐药基因,以oqxA+oqxB+qnrS+CTX-M-1G+mcr-1+floR基因型最为流行(38.5%);种系发育显示分离株主要分布在A组(46.2%),毒力基因主要分布在B2和D组,其毒力基因平均个数分别为3.43和2.64。69.2%(27/39)oqxAB阳性菌成功将耐药质粒传给受体菌(C600),其接合子的MIC值较受体菌均有不同程度的提高。结论福建地区猪源大肠杆菌中oqxAB耐药基因携带率较高,在oqxAB阳性菌中携带多种耐药基因,种系发育主要分布在共生型(A组),毒力基因主要分布在B2和D群;携带oqxAB基因的阳性质粒可通过接合转移的方式进行水平传播。

副猪嗜血杆菌同一质粒携带blaROB-1和aacA-aphD耐药基因

探讨1株副猪嗜血杆菌携带介导β-内酰胺类药物耐药基因bla_(ROB-1)耐药质粒的基因环境。抽提阳性菌的耐药质粒,采用电转法将耐药质粒转入DH5α,运用Southern blot确定耐药基因bla_(ROB-1)的位置,通过测序获得耐药质粒的基因组成结构。结果表明,该菌携带有2个质粒,其中1个质粒(p QY431-1)携带有耐药基因bla_(ROB-1),该质粒成功转入受体菌DH5α,转化子较受体菌对阿莫西林、头孢克洛、庆大霉素、卡那霉素以及阿米卡星的MIC分别提高了64倍、16倍、32倍、64倍和2倍。该质粒全长为7 777 bp,其基因环境由潜在的移动和复制区、一个截断的ISApl1插入序列、耐药基因aac A-aph D和bla_(ROB-1)组成。

鳗鲡肌肉冻干粉中呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-噁唑烷酮残留标准物质的研制

建立了鳗鲡肌肉冻干粉中3-氨基-2-噁唑烷酮(AOZ)残留分析标准物质的研制和定值方法。以约0.16mg/L呋喃唑酮对鳗鲡进行药浴给药,使呋喃唑酮在鱼体中代谢,从而使鳗鲡肌肉中含有一定浓度的呋喃唑酮代谢物AOZ。经冻干、真空包装及辐照等处理后获得1批400个独立包装的肌肉冻干粉样本。经过均匀性与稳定性检验,由11家实验室采用同位素稀释液相色谱-串联质谱法进行协同定值,并进行了不确定度评估,已被国家质检总局批准确为国家二级标准物质。

超高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱联用法检测茶叶中阿维菌素类药物残留

建立了采用超高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱同时检测茶叶中爱比菌素、甲胺基阿维菌素、乙酰胺基阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素、莫西丁克残留的方法。试样经饱和氯化钠溶液浸润后,用乙腈提取,C18固相萃取小柱净化,超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法（UPLC/ESI-MS/MS）测定。对流动相、监测离子、校正曲线等进行了优化和探讨。6种分析物在2.0～50μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.992 0。莫西丁克在5,10,20μg/kg,其余分析物在2,5,10μg/kg加标水平的平均回收率为61.7%～85.4%,相对标准偏差为9.37%～17.19%。该方法可靠、稳定,可满足茶叶中阿维菌素类药物残留检测与确证的需要。

中草药免疫增强剂对仔猪生长性能及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

将54头每头体重约20 kg的“杜长大”三元杂交猪,分为对照组、抗生素组、中草药免疫增强剂组3个处理,每个处理3个重复,研究中草药免疫增强剂对仔猪生长性能、血液生化指标和小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响.结果表明:中草药免疫增强剂组、抗生素组的日增重分别比对照组提高19.87%(P<0.05)和18.25%(P<0.05),中草药免疫增强剂组和抗生素组的日增重差异不显著;中草药免疫增强剂组的血清总蛋白含量分别比抗生素组和对照组增加了17.60%(P<0.05)和12.32%(P<0.05),抗生素组比对照组增加4.7%(P>0.05),差异不显著.中草药免疫增强剂能改善仔猪的生长性能、提高饲料利用率,增加血清中总蛋白、白蛋白的含量,促进免疫球蛋白(IgG、IgM)的生成,增强小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能.

华南虎疑似感染猫细小病毒的PCR鉴定与病理组织学检查

对1例疑似感染猫细小病毒的死亡华南虎幼虎进行病理剖检、病原PCR检测和病理组织切片观察。结果表明,死亡幼虎的肠道组织中能检测出猫细小病毒核酸;病理组织切片镜检结果显示,死亡幼虎胃、肠粘膜出血,大量粘膜上皮细胞坏死、脱落,严重部位粘膜层基本消失,并伴有大量炎性细胞浸润;心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑等组织也均有较为严重的病理损伤。以上结果提示,该死亡幼虎感染了猫细小病毒,且该病毒对幼虎多种主要器官造成了严重的损伤。

华南虎源禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及其生物学特性研究

【目的】对福建梅花山华南虎繁育研究所一例华南虎幼虎急性死亡病例的致病菌进行分离鉴定及生物学特性研究,为圈养华南虎疫病防控提供科学依据。【方法】无菌采取死亡幼虎的肺、肝、脾、肠道等组织病料,进行细菌分离培养,根据形态特征、培养特性、生化试验、16SrRNA PCR扩增结果进行病菌鉴定;并对该分离菌进行16S rRNA系统进化分析、禽致病性大肠杆菌PCR鉴定、药敏试验、动物致病性试验和毒力基因检测。【结果】从幼虎肝脏及肠道组织中分离得到1株大肠杆菌(E.coli),命名为FJ/Tiger2016。16SrRNA系统进化分析显示,该分离菌与大肠杆菌人源分离株(NZCP016497)、鼠源分离株(NZMBNX01000003)、鸭源分离株(EF620926)及禽源分离株(AB272358)的遗传距离较近,形成一个相对独立的小遗传分支,其中与禽源分离株(AB272358)的同源性高达99.7%。PCR鉴定及药敏试验结果表明,该分离菌为禽致病性大肠杆菌(APEC),对选用的15种抗菌药均表现敏感。动物致病性试验结果显示,经腹腔接种时该菌株对试验小鼠具有较强的致病力,小鼠攻毒后5h内全部死亡。病理剖检及组织病理切片观察结果表明,该菌株对死亡小鼠的心脏、肝脏和脾脏等多个重要组织器官均造成了较为严重的病理损伤,而经灌胃接种时试验小鼠均未出现明显的临床症状。毒力基因检测结果显示,该菌株含有10种毒力基因,暗示其可能具有很强的致病性。【结论】从死亡幼虎肝脏及肠道组织中分离到1株具有较强致病力、肠道外致病的禽致病性大肠杆菌,表明禽致病性大肠杆菌已对我国圈养华南虎造成了一定威胁,应引起重视。

铁皮石斛对免疫抑制模型小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

为了探究不同浓度的铁皮石斛对环磷酰胺(Cyclophosphamide,Cy)所致免疫抑制模型小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响,选取6周龄清洁级KM小鼠50只,体重18~22 g,全为雌性,随机分为对照组、免疫抑制组。每组各设5个重复,每个重复5只小鼠。免疫抑制组给予腹腔注射环磷酰胺(100 mg/kg·bw),对照组给予腹腔注射等量的生理盐水。1日1次,隔天注射,连续15 d。结果:铁皮石斛在终质量浓度5~135μg/mL范围内促进效果显著,其中作用48 h增殖幅度明显。对于小鼠脾脏T淋巴细胞而言,铁皮石斛浓度为20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL均能促进免疫抑制小鼠T淋巴细胞的增殖(P<0.05),尤以浓度为20μg/mL时最佳。铁皮石斛浓度为80μg/mL时对于正常小鼠脾脏T淋巴细胞分裂增殖显著(P<0.05)。对于小鼠脾脏B淋巴细胞而言,铁皮石斛浓度为40μg/mL时对免疫抑制小鼠脾脏B淋巴细胞增殖效果最佳。各浓度铁皮石斛OD值均高于单纯LPS刺激,且细胞增殖情况差异显著(P<0.05),但对照组中3个铁皮石斛浓度差异不显著(P>0.05)。结论:铁皮石斛浓度在40μg/mL、80μg/mL时能有效协同Con A、LPS刺激小鼠脾脏T、B淋巴细胞的增殖。

地方本科院校《兽医内科学》课程教学改革探讨

随着现代畜牧业的不断发展,动物饲养模式发生了变化,动物发病的形式和特点也随之改变。《兽医内科学》作为动物医学专业的临床主干课程,其传统教学内容和教学方法难以适应当代畜牧业发展的需要。针对《兽医内科学》课程教学中存在的问题,提出了具体改革措施:修订教学大纲、调整教学内容、改进教学方法 (包括PBL与案例相结合、充分利用互联网平台、将生产实践与理论教学深度结合)及考核方式,以提高《兽医内科学》课程教学质量。

华南虎源大肠杆菌耐药性与致病性研究

为了解华南虎源大肠杆菌的耐药性与致病性情况,采集龙岩梅花山虎园老虎粪便分离大肠杆菌,并对分离株进行药敏试验、动物毒力试验以及毒力基因检测。结果表明,分离株对复方新诺明(100%)、多西环素(75%)和阿莫西林/克拉维酸(75%)产生耐药;对庆大霉素的敏感性较好;对头孢呋辛和头孢噻呋敏感性下降。动物毒力试验显示,分离株具有较强的致病性,同时毒力基因aat A的检出率为100%,irp2检出率为75%;papC、iucD、vat和iss检出率均为50%,tsh和cva/cvi未检出。虎源大肠杆菌对常用药物具有一定的耐药性,同时表现出较强的致病性,其毒力基因的携带率较高。该结果为兽医临床合理用药提供一定的科学依据。