低有效磷饲粮添加植酸酶对肉仔鸡矿物质代谢的影响

10 0只艾维因肉仔鸡随机分为 5组 ,每个组设 4个重复。第 1组喂标准饲粮 ;第 2 ,3,4,5组喂低有效磷(0 .2 0 % )饲粮 ,分别加植酸酶 0 ,35 0 ,5 0 0 ,6 5 0FTU/kg ,饲养试验分两个阶段 :0～ 3周 ,4～ 6周。试验期为 5周 ,观察各组肉鸡的营养物质表观利用率、胫骨质量、血清化学指标的变化 ,研究低有效磷饲粮中添加植酸酶对矿物质代谢的影响及作用机制。试验结果表明 :在低有效磷饲粮中添加植酸酶对矿物代谢有一定积极影响 ,以植酸酶最大添加量 6 5 0FTU/kg组的效果为最佳。

禽流感病毒致病性的分子基础研究进展

禽流感的暴发给畜禽业造成了巨大经济损失,近年来对禽流感病毒的致病性的研究取得了一定进展。禽流感病毒的毒性不但与血凝素裂解位点处的氨基酸序列、神经氨酸酶茎部的氨基酸丢失、非结构蛋白的截短、删除及NS1蛋白C末端的4个氨基酸残基等有关,而且,还发现在病毒基因编码的蛋白中有许多单个氨基酸决定病毒的毒力。这些毒力因子对动物的致病性并不是单独起作用,而是多种基因的毒力因子协同作用的结果。

兽医病理学PBL教学模式的问题创设

从课程教学目标及教学内容的要求、问题的情境性及真实性、问题的复杂性及综合性、问题的系统性与相关性、问题的劣构性等方面探讨了有效的兽医病理学PBL教学模式中的问题应该满足的条件,从选择教学内容、创设问题的背景、问题的阐述、相关资料的提供等阐述了PBL教学模式如何在兽医病理学课程教学中创设出有效的问题及创设问题的过程。

低有效磷饲粮添加植酸酶对肉仔鸡胫骨质量及矿物质代谢的影响

以艾维因肉仔鸡为研究材料 ,通过饲养、代谢试验 ,研究低有效磷饲粮中添加植酸酶对肉仔鸡胫骨质量及矿物代谢的影响。 10 0只艾维因肉仔鸡随机分为 5组 ,每个组设 4个重复。第 1组喂标准饲粮 ;第 2 ,3,4,5组为低有效磷 (质量分数为 0 .0 0 2 )饲粮 ,分别加植酸酶 0 ,35 0 ,5 0 0 ,65 0FTU kg。饲养试验分两个阶段 :0～ 3周、4～ 6周。试验期为 5周 ,观察各组肉仔鸡的胫骨质量、矿物质代谢的变化。结果表明 :在低有效磷饲粮中添加植酸酶对矿物代谢有一定积极影响 ,以植酸酶最大添加量 65 0FTU

低有效磷饲粮添加植酸酶对肉仔鸡生产性能的影响

以艾维因肉仔鸡为试验动物，研究了低有效磷饲粮中添加植酸酶对生产性能的影响。 100只艾维因肉仔鸡随机分为 5组，每个组设 4个重复。第 1组喂标准饲粮，第 2、 3、 4、 5组为低有效磷 (0.20％ )饲粮，分别加植酸酶 0FTU/kg、 350FTU/kg、 500FTU/kg、 650FTU/kg，饲养试验分 0～ 3周、 4～ 6周两个阶段，试验期为 5周。试验结果表明，在低有效磷饲粮中添加植酸酶可提高肉仔鸡生产性能，降低鸡后期单位增重饲料成本，以植酸酶最大添加量 650FTU/kg组的效果为最佳，但生产性能未达到标准饲粮组水平。

双氯芬酸诱导雏鸡痛风的病理学观察

100只13日龄白来航雏鸡随机分为5组,每组20只鸡,第1~4组为试验组,第5组为对照组,通过口腔灌服途径,给试验组鸡不同剂量的双氯芬酸（2.5 mg/kg、3.5 mg/kg、4.5 mg/kg、7.5 mg/kg体重）,喂药后24 h、48 h、72 h观察鸡的临床症状、病理组织学变化及临床病理学指标（血清尿酸（UA）、血清尿素氮（BUN）、血清K＋、Na＋、Ca2＋、Cl-和pH值等）检测,以阐明双氯芬酸的毒性作用。结果表明：给予7.5 mg/kg体重剂量的药物对雏鸡产生毒性作用,20只鸡中有4只鸡发生死亡,剖检发现有明显的内脏型痛风的病理变化,显微镜观察,肾小管内有尿酸盐沉积、肾小管坏死等病理变化,在肾、肝和脾脏中可见痛风石形成。在喂药后24 h,鸡血尿酸水平显著升高,BUN浓度也升高。其他试验组没有明显的变化。结论：双氯芬酸通过对肾脏的损伤作用,诱导鸡发生内脏型痛风。

PRRSV河北地方分离株ORF5基因序列分析

为了分析河北秦皇岛和唐山部分地区流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因变异情况,对采集自秦唐部分地区在2009年的临床发病猪肺组织,提取其RNA,通过RT-PCR扩增样本中PRRSV的ORF5全序列,并对其进行生物信息学分析。应用DNA Star软件分析序列,系统进化分析表明,它们与国内2006年-2007年间的分离的JXA1、HUB1、HEB1等高致病毒株亲缘关系较近,而与更早的分离株和疫苗MLV株亲缘关系较远。

猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株NSP2基因的序列分析

为了分析河北省流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)NSP2基因的变异情况,试验对2009年采自秦唐部分地区和廊坊地区的临床发病猪肺组织提取RNA,通过RT-PCR扩增样本中PRRSV的NSP2全序列,并对其进行生物信息学分析,应用DNAStar软件将其与VR-2332、CH-la、MLV、BJ-4、HB-1、HB-2、JXA1、HUB1、HEB1等毒株进行序列比对。结果表明:河北地方株NSP2基因全长2 850 bp,编码的氨基酸均缺失30个不连续的氨基酸;其与国内2006—2007年间分离的JXA1、HUB1、HEB1等高致病毒株亲缘关系较近,而与更早的分离株和疫苗MLV株亲缘关系较远。

仔银狐小肠绒毛发育研究

本试验从同一养殖场选择发育正常、健康的1d、7d、14d、21d、28d、35d和42d的仔银狐各4只（公、母各半），通过测量银狐十二指肠、空肠和回肠的肠绒毛高度、宽度、密度，观察不同日龄各段小肠的肠绒毛发育。结果表明：1～21日龄仔银狐各段小肠的肠绒毛高度随着日龄增加呈增加趋势，而小肠绒毛宽度没有明显的变化；28日龄以后小肠的绒毛长度和宽度均有显著的增长；42日龄时达到最高值。仔银狐十二指肠绒毛密度随着日龄的增加而降低，空肠和回肠绒毛密度则在14日龄达到最大，然后随日龄增加而减少。

猪源肠外致病性大肠杆菌的分离与鉴定

目的检测猪源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的血清型与毒力基因。方法对2013-2014年间秦皇岛地区30份组织病料采用细菌形态观察、培养特性试验、生化试验鉴定出8株肠外致病性大肠杆菌。采用玻片凝集法测定这些大肠杆菌病的血清型,并用PCR扩增法检测9种毒力基因。结果定型菌株5株,分别属于O53、O93和O157 3个血清型,9种毒力基因PCR检测结果表明ler、iutA、irp2、fyuA、astA 5种基因检出率分别为100%、75.0%、50.0%、50.0%、25.0%。结论所检测的猪源肠外致病性大肠杆菌以O53、O93和O157为主要流行血清型,同时携带fyuA、ler和iutA基因的菌株致病性较强。

貂源伪狂犬病病毒的分离鉴定及gE基因分子特征

2014年以来,我国多个毛皮动物养殖场不同日龄的貂出现神经症状、腹泻和急性死亡等,采集昌黎县病死貂的脑组织通过细胞培养、病毒蚀斑纯化、病毒的形态结构观察、动物接种试验分离到1株伪狂犬病病毒,命名为Mink 1。病料接种MDCK细胞能够产生典型的细胞病变,病毒粒子在电镜下呈圆形、有囊膜、直径约为150nm,病毒悬液接种家兔能引起家兔奇痒、麻痹死亡。利用PCR方法从病死动物脑组织中扩增PRVgE基因,gE基因序列分析表明,从貂的病料中扩增的gE基因与2012年猪伪狂犬分离株的相似性高达99.4%,进化树位于一个相对独立的分支。与经典毒株相比,在142—144位和1 487—1 490位两处同时存在GAC和ACG连续碱基的插入。以上试验结果证实该病例是由伪狂犬病病毒感染所引致。

中草药对鸡法氏囊和胸腺淋巴细胞的组织学观察

[目的]为探讨中草药对中枢免疫器官的作用机理。[方法]将120只1日龄的海兰褐公雏养至37日龄,随机分为4组,A、B、C组为试验组,分别每天灌服高剂量(9.0 mg/ml)、中剂量(6.5 mg/ml)和低剂量(4.5 mg/ml)的中草药,D组为对照组。运用组织学常规切片技术和H.E染色法,观察了试验组和对照组在55、66和73日龄的鸡法氏囊和胸腺中淋巴细胞的数量。[结果]试验组鸡法氏囊和胸腺内的淋巴细胞数量与对照组相比差异极显著。[结论]中草药对鸡法氏囊、胸腺内淋巴细胞数量有增多作用。

抗IBV中药的筛选

采用气管环组织培养法通过3种加药方式对贯众、黄芩等10种中药及复方组合进行了抗鸡传染性支气管炎病毒的筛选试验,并采用滴鼻法对SPF鸡攻毒建立鸡传染性支气管炎感染模型,应用筛选出的中药复方制剂对其进行预防和治疗试验,并进行病毒毒力测定。不同给药方式显示:将中药与病毒体外作用后接种TOC,除黄芪外,各单味中药和复方组合对IBV均具有不同程度的直接灭活作用,最小有效浓度均达到1/128以上,其中贯众达到1/4 096;在接种IBV前2 h以及接种IBV后2 h给药,黄芩、贯众、板蓝根、鱼腥草及复方中药均能明显抑制IBV的繁殖,最小有效浓度均达到1/256以上,其中贯众效果显著,达到1/2 048。人工感染防治试验显示:治疗组和预防组所分离到的病毒毒力均低于感染组,复方中药对感染传染性支气管炎病毒鸡的保护率为93.33%,治愈率为75%。表明该复方中药对鸡传染性支气管炎具有良好的预防作用和治疗作用,且预防效果强于治疗效果。

复方中药对人工感染IBV雏鸡免疫指标的影响

采用滴鼻法对SPF鸡攻毒建立鸡传染性支气管炎感染模型,使用MTT法、流式细胞仪技术、气管环中和试验法等,从细胞免疫和体液免疫角度研究复方中药防治鸡传染性支气管炎的可能性。结果显示,与感染不给药组相比,复方中药组能显著增加病鸡的体质量(P<0.05),促进免疫器官生长发育,提高淋巴细胞转化率和血清中和抗体效价(P<0.05),极显著提高CD4+/CD8+比值(P<0.01)。结果表明,复方中药能明显改善传染性支气管炎感染鸡细胞免疫和体液免疫功能低下的状态,具有提高机体抗病毒感染的作用。

热应激下中草药对鸡法氏囊、胸腺淋巴细胞组织学的影响

为了探讨热应激下中草药对鸡中枢免疫器官的作用机制,进行了鸡法氏囊、胸腺内淋巴细胞数量的动态观察。选择88日龄健康伊莎褐商品代蛋用雏鸡120只,随机分成6个组:3个试验组为中草药高(7.5mg/d)、中(5mg/d)、低(2.5mg/d)剂量组和3个对照组〔高温对照组、正常室温对照组、维生素C(5mg/d)对照组〕。运用组织学常规切片技术和HE染色法,观察了试验组和对照组在88、91、95、97日龄的鸡法氏囊、胸腺中淋巴细胞的数量。结果显示:在400μm×300μm的观察面积内,97日龄时,中草药高剂量组与高温对照组鸡法氏囊淋巴细胞数分别为84.33、69.81个,二者差异达极显著水平(P<0.01),中剂量组淋巴细胞数为81.61个,与高温对照组差异显著(P<0.05)。97日龄时,中草药高剂量组、中剂量组胸腺淋巴细胞数分别为95.85、91.40个,与高温对照组的淋巴细胞数(72.65个)差异达极显著水平(P<0.01)。表明在热应激状态下,中草药可增加鸡法氏囊、胸腺内淋巴细胞数量,且剂量越高效果越好,由此说明该中草药对于缓解蛋鸡的热应激有较好的效果。

猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

应用ELISA方法对河北省及北京、天津地区部分规模猪场和散养猪群共398份猪血清样品进行猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)抗体检测,结果抗体阳性率为90.9%,血清样品抗体总阳性率为84.2%,其中种母猪抗体阳性率86%,种公猪88.2%,育肥猪85.2%,断奶仔猪76.7%,初步表明PCV2感染在被检地区猪群中普遍存在。对阳性的血清样品中随机抽取14份,用PCR方法进行PCV2 ORF1基因的检测,结果从6份血清中扩增到了特异性目的基因片段,检出率为42.9%,进一步证实了PCV2感染在上述地区规模猪场和散养猪群中存在。

驴生长激素基因的克隆与分析

【目的】克隆驴生长激素基因DNA和cDNA的全序列,分析其序列和cDNA编码的蛋白序列特征及其在不同物种中的遗传差异。【方法】根据不同物种同一基因序列的同源性比对结果设计引物,应用RT-PCR和PCR技术克隆基因,用生物信息学方法对获得的DNA和cDNA及推定的氨基酸序列进行分析。【结果】从驴肝组织和血液中分别得到驴GH基因全序列1 928 bp和包括完整的编码区的cDNA序列706 bp,两者序列比对后证明驴GH基因DNA序列由5个外显子和4个内含子组成,编码216个氨基酸的GH前体蛋白,其中包括26个氨基酸的信号肽和190个氨基酸的成熟肽。序列比较结果表明,驴GH基因的序列与马同源性最高,启动子不是哺乳动物的典型TATA盒,而是CATA盒,该基因在进化过程中是保守的。【结论】从驴肝组织和血液中克隆了GH基因DNA和cDNA,DNA序列在1 267位的C→G可能影响到驴和马生长发育的差异,为下一步驴GH基因的表达调控、进化和多态性分析奠定了基础。