核酸染色方法的改进

目的采用GV核酸染料取代溴化乙锭(EB)进行核酸染色,观察DNA染色结果,证实采用改进的核酸染色方法可替代EB进行常规核酸染色。方法提取小鼠肝组织DNA,采用GV与EB分别进行染色和电泳,在紫外凝胶成像仪下观察和记录结果。结果在紫外凝胶成像仪下,可观察到经两种方法染色的DNA条带清晰,亮度相当。结论GV是一种安全灵敏的核酸染料,可替代EB进行常规核酸染色。

生物信息学方法解析食管鳞状细胞癌中的配体-受体相互作用图谱和预后影响

目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)的作用及关键的LR对及其对预后的影响,以深入理解ESCC的预后机制。方法基于TCGA-ESCC数据集,通过对单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)数据的分析,研究了ESCC样本中的关键基因表达和细胞类型相互作用。研究基于16种LR的表达,将79个ESCC样本分为两组,并通过Lasso分析识别出关键基因。进一步,本研究通过分析GSE154763数据集,揭示了ESCC的细胞类型和相互作用。结果通过Lasso分析,识别出IL1A、LAMA3、TMEM45A和IGF2BP2四个关键基因,这些基因对ESCC生存有显著影响,并据此构建了有效的预后模型。通过进一步分析GSE154763数据集,鉴定出19个簇和10种细胞类型,发现4种细胞群体在ESCC与正常组织中的表达差异显著。结论本研究通过分析单细胞RNA和TCGA-ESCC数据,揭示了ESCC中关键的LR和细胞亚群。我们构建的基于四个基因的预后模型显示出优异的预测能力,为ESCC的治疗提供了新的生物标志物和潜在治疗靶点。

EBV相关消化系统疾病研究进展

EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)引起的消化系统疾病范围广泛,包括病毒性食管炎、EBV相关胃癌、EBV+黏膜皮肤溃疡、慢性肝炎及移植术后淋巴组织增生性疾病等,并促进炎症性肠病临床病程恶化,本文针对与EBV相关的消化系统疾病的最新进展进行综述。

161例缺血性结肠炎的临床分析

目的分析探讨及对比分析不同年龄患者缺血性结肠炎的临床病理特征及临床转归,以增强对该病的认识。方法回顾性分析2017年1月至2022年12月我院161例结肠镜确诊为缺血性结肠炎患者的临床特点、危险因素、实验室检查、影像学、结肠镜和病理组织学、缺血程度及临床转归,同时根据年龄分为中青年组(<60岁,68例)和老年组(≥60岁,93例),并进行对比分析不同年龄间相关因素的差异。结果161例缺血性结肠炎患者年龄(62.19±11.22)岁,以女性为主(58.4%),老年组占57.8%,多合并高血压、腹部手术史、恶性肿瘤病史等危险因素,两组在合并高血压上差异有统计学意义(P<0.05)。主要临床表现为腹痛,其次为血便、腹泻。不同年龄组在临床表现上差异无统计学意义。实验室检查以大便潜血阳性、D-二聚体升高及CRP升高为主。影像学检查超声阳性率较低,CT表现主要为肠壁炎症性改变。内镜下病变主要累及左半结肠(73.3%),其中以乙状结肠(72.7%)为主,两组在累及右半结肠和广泛结肠上差异有统计学意义(P<0.05)。结肠镜下表现分期均为Ⅰ期或Ⅱ期,两组在分期上的差异无统计学意义(P>0.05)。内镜下主要表现为黏膜充血水肿、糜烂及多发溃疡形成,组织病理学多为黏膜急慢性炎症,不同年龄组在缺血程度方面差异有统计学意义(P<0.05)。159例(98.8%)患者治疗后好转。结论缺血性结肠炎好发于老年,多合并高血压、腹部手术史、恶性肿瘤病史等危险因素。老年患者缺血程度更重,更多累及右半结肠,中青年患者缺血程度轻,更多累及广泛结肠。缺血性肠炎为自限性疾病,治疗及时预后良好。

肠白塞病的临床特征分析及文献复习

目的总结肠白塞病(白塞病累及消化系统)的临床特征,为该病的诊断提供参考。方法回顾性分析2015年1月1日至2021年12月31日于河南省人民医院住院并诊断为肠白塞病的37例患者的临床资料,包括消化系统症状、并发症、消化道受累部位;血沉,C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、补体C3、补体C4、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M;同时比较临床表现的性别差异。采用Fisher确切概率法进行统计学分析。结果37例肠白塞病患者中,消化系统症状以腹痛最常见,发生率为45.9%;并发症以消化道出血、肠梗阻、穿孔为主,发生率分别为5.4%、5.4%、2.7%;52.8%CRP升高,52.9%血沉升高;消化道受累部位主要为回肠末端和升结肠,分别占46.4%、39.3%;34例(91.9%)均出现口腔溃疡,男性肠白塞病患者的关节炎发生率高于女性肠白塞病患者,差异有统计学意义(P<0.05);女性与男性肠白塞病患者的其他临床表现发生率比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论肠白塞病常见的临床症状依次为口腔溃疡、生殖器溃疡、腹痛等,男性肠白塞病患者较女性患者更容易发生关节炎;好发部位以回肠末端最多见,内镜下表现有一定特点,临床工作中应加强对肠白塞病的认识。

高速公路收费站计量衡器动态计量检定方法

随着我国交通基础设施的不断发展,全面促进了交通行业对国民经济发展的影响,避免各个地区出现不平衡发展。在公路建设期间也需要尽量做好地区差异性的消除工作,在此期间最大的问题就是高速公路收费站计量衡器动态计量工作存在较大难度。主要探讨、分析高速公路收费站计量衡器动态计量检定方法,希望能够对收费站工作起到一定的参考性价值。

门脉高压性胃肠病研究进展

门脉高压性胃肠病是指继发于门静脉高压的胃肠道黏膜血管病变。其发病机制尚未明确。主要依赖内镜诊断,内镜下描述差异较大,诊断标准尚未统一,且临床表现缺乏特异性,常与其他疾病混淆。治疗相对困难,需要根据患者的具体表现来确定,主要包括药物治疗、内镜治疗及外科手术治疗。

肠道菌群及其代谢产物对非酒精性脂肪性肝病发病及治疗影响的研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)已成为最常见的肝病,在治疗方面尚无特效药。肠道菌群紊乱及内环境失调可以导致肠道黏膜通透性改变,进而通过肠-肝轴使移位的肠道菌群及其内毒素对肝脏产生慢性炎症作用。肠道菌群代谢产物及益生菌、益生元、合生元、粪菌移植均能使NAFLD的症状得到改善。本综述通过查阅国内外文献,总结了肠道菌群影响NAFLD的相关机制,归纳靶向肠道菌群及其代谢产物对相关疾病的作用,为临床治疗NAFLD提供理论基础。

MAFLD不同病变阶段动物模型中肠道菌群的多态性

目的研究代谢(紊乱)相关脂肪性肝病(MAFLD)不同病变阶段, 即单纯性脂肪肝和脂肪性肝炎病变阶段中肠道菌群的具体差异, 为MAFLD相关的肠道菌群移植及靶向肠道菌群治疗提供新的方向。方法分别以正常饮食、蛋氨酸-胆碱缺乏饮食(MCD)和高脂高果糖饮食(HFHF)喂养小鼠12周, 构建单纯性脂肪肝和脂肪性肝炎模型;通过肝脏HE染色和天狼猩红染色观察其病理改变, 应用qPCR方法对炎症和肝纤维化因子进行评估, 全自动生化仪检测转氨酶及血脂变化, 同时用16S rRNA测序观察各组小鼠粪便中肠道菌群的差异。两组间均数比较采用t检验, 多组间均数比较采用单因素方差分析, 非正态分布数据采用Kruskal-Wallis秩和检验。结果通过小鼠肝脏HE病理切片和天狼猩红染色进行非酒精性脂肪性肝病活动度评分可知, MCD和HFHF组的炎症评分分别为2.12±0.18和1.06±0.24, 肝纤维化评分为2.22±0.16和0.46±0.10, MCD饮食组小鼠肝脏炎症及纤维化程度明显重于HFHF饮食组(P < 0.001及P < 0.01);HFHF组的脂质沉积重于MCD饮食组(P < 0.001), 其评分值分别为2.36±0.17和1.60±0.24。同时炎症指标肿瘤坏死因子-a、趋化因子-2和肝纤维化指标血管平滑肌肌动蛋白、结缔组织生长因子在转录水平上对上述结果得到了验证。除此之外, 相对于HFHF组, MCD组小鼠肠道菌群多样性降低(P < 0.05), 其Simpson指数分别为0.31±0.10和0.42±0.05, Shannon指数为2.03±0.33和1.70±0.28, 不同分组间菌群存在明显差异。相对于MCD饮食组, HFHF组中Desulfovibrio、Odoribacter、Roseburia菌群水平明显升高;相对于HFHF组, MCD饮食组小鼠Faecalibaculum、Parasutterella、Alistipes、Butyricimonas;irosa、Turicibacter;p、Romboutsia;lealis菌群水平升高, 差异具有统计学意义(P < 0.05)。结论单纯性脂肪肝和脂肪性肝炎模型中肠道菌群差别显著, 明确两者差异可能为分阶段治疗MAFLD提供新的方向。

胰岛素样生长因子-1对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝细胞衰老的干预作用

目的探讨在肝纤维化形成过程中肝细胞衰老的发生情况和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对肝细胞衰老和肝纤维化的作用及可能机制。方法选取42只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠:18只通过四氯化碳(CCl4)诱导建立肝纤维化大鼠模型,分别于造模第0、6、28天各处死6只,分析CCl4诱导肝纤维化大鼠肝纤维化和肝细胞衰老情况;24只大鼠分入对照组、CCl4组、CCl4+空病毒载体(LV-CTR)组、CCl4+IGF-1慢病毒载体(LV-IGF-1)组,每组6只,于造模第28天处死大鼠,留取肝脏组织,采集下腔静脉血,分析IGF-1过表达对肝纤维化和肝细胞衰老的影响。统计学方法采用方差分析、最小显著差异法和Dunnett T3法。结果在造模第6天形成脂肪性肝炎,在造模第28天形成早期肝纤维化,提示造模成功。造模第28天,与对照组比较,CCl4组、CCl4+LV-CTR组和CCl4+LV-IGF-1组大鼠肝脏组织的Ishak肝脏炎症坏死评分[分别为0、(14.55±1.94)、(15.43±2.19)和(10.29±1.47)分]和肝纤维化评分[分别为0、(3.51±0.51)、(3.21±0.79)和(1.32±0.40)分]均升高,肝脏组织Masson染色(分别为0.45±0.40、5.62±1.08、6.03±0.65和2.88±1.54)、β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色(分别为1.75±0.80、4.28±1.19、4.92±1.14和3.11±0.79)、p53(分别为2.02±0.81、4.36±1.02、4.72±0.72和3.58±0.70)和早衰蛋白(分别为0.72±0.40、4.52±1.01、4.01±1.25和2.66±0.80)区域面积均增加,血IGF-1水平[分别为(632.00±6.04)、(503.00±40.42)、(508.00±21.94)和(572.40±5.94)ng/L]均降低,ALT水平[分别为(11.20±5.97)、(214.00±73.90)、(245.00±76.06)和(30.00±5.00)U/L]均升高,原代肝细胞中p53(分别为0.58±0.06、1.78±0.18、1.72±0.10和1.23±0.22)、早衰蛋白(分别为0.12±0.02、0.78±0.15、1.32±0.20和0.81±0.16)相对表达量均升高,差异均有统计学意义(F=91.674、90.778、32.982、9.726、10.640、17.029、103.910、30.059、64.707、97.457,P均<0.05)。与CCl4+LV-CTR组比较,CCl4+LV-IGF-1组大鼠肝脏组织的Ishak肝脏炎症坏死和肝纤维化评分均降低,肝脏组织中Masson、SA-β-Gal、p53、早衰蛋白染色区域面积均缩小,血IGF-1水平升高,ALT水平降低,原代肝细胞中p53和早衰蛋白相对表达量均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论CCl4诱导肝纤维化过程中,肝细胞衰老增加;过表达IGF-1可能通过调节核内p53/早衰蛋白通路减轻肝损伤,缓解肝细胞衰老和肝纤维化。

胰岛素样生长因子-1通过调控核内p53-progerin通路减轻肝细胞衰老

H_(2)O_(2)刺激原代肝细胞构建细胞衰老模型,采用p53 siRNA、早衰蛋白(pmgerin)siRNA或胰岛素样生长因子(IGF)-1腺病毒载体转染原代肝细胞,检测β-半乳糖背酶染色阳性细胞数及p53、progerin的表达。结果显示,p53 siRNA和progerin siRNA敲低p53和progerin的表达,肝细胞衰老减轻;转染IGF-1腺病毒载体至原代肝细胞过表达IGF-1,β-半乳糖背酶阳性细胞数减少,细胞核中p53和progerin表达下调、细胞质中p53表达上调;p53与progerin共沉淀及共定位于肝细胞核区减少。过表达IGF-1可通过抑制p53核转位,减少核内p53-progerin相互作用,减轻肝细胞衰老。