毛足棒角蝗对高效氯氰菊酯、印楝素和苦参碱的敏感性监测及解毒酶活性分析

为明确毛足棒角蝗Dasyhippus barbipes田间种群对高效氯氰菊酯、印楝素和苦参碱的药物敏感性现状及代谢抗性机制。采用点滴法测定了四子王旗、锡林浩特、正镶白旗、扎鲁特旗和新巴尔虎左旗蝗虫高发地区毛足棒角蝗3龄蝗蝻对3种杀虫剂的抗药性;检测了不同田间种群毛足棒角蝗体内羧酸酯酶(Carboxylesterase, CarE)、谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferase, GST)、多功能氧化酶(Multifunctional oxidase, MFO)和细胞色素P450(CytochromeP450,CYP450)的活性,并分析了毛足棒角蝗的抗性水平与不同解毒酶活性之间的相关性。结果表明:毛足棒角蝗5个种群对高效氯氰菊酯敏感性明显降低,3龄蝗蝻的抗性倍数依次为5.91倍、5.28倍、4.69倍、3.18倍和4.06倍;四子王旗、正镶白旗和扎鲁特旗种群对苦参碱敏感性变化明显,5个毛足棒角蝗种群对印楝素敏感性无明显变化。不同田间种群的解毒酶活性均显著高于敏感种群,其中CarE、GST和CYP450活性与敏感种群差异显著,MFO活性升高不显著。相关分析表明,毛足棒角蝗体内的GST、CYP450活性对印楝素和苦参碱抗性水平存在正相关,相关系数分别为0.672、0.533和0.891、0.845;CarE、GST酶活性对高效氯氰菊酯抗性水平存在极显著正相关,相关系数为0.908和0.842,CYP450酶活性对高效氯氰菊酯抗性水平存在显著正相关,相关系数为0.704。通径分析表明,GST、CYP450活性对印楝素和苦参碱抗性起正向效应,CarE、MFO起间接效应;CarE、GST对高效氯氰菊酯抗性呈现正向效应,发挥直接作用,CYP450则发挥间接作用。毛足棒角蝗的解毒酶与抗药性水平关系密切,多种解毒酶协同发挥作用可降低杀虫剂的毒力,在抗性发展中起到了促进作用,为草原蝗虫治理科学选用杀虫剂、提高防治效率提供科学依据。

基于“互联网+”医养结合智慧养老模式的探究

我国正加速步入老龄化社会,但当前养老产业尚未完全成熟,互联网技术的迅猛发展为“银发浪潮”下的现代养老服务业发展提供了新机遇。作为应对老龄化社会而产生的新型社会养老服务模式,“互联网+”医养结合智慧养老模式集大数据、云计算、物联网等现代信息技术手段于一体,打造技术赋能和服务优化的双保障。围绕医养结合智慧养老的发展现状,进一步探索实现智慧养老的有效路径。

植物源杀虫剂在蝗虫防治中的研究进展

蝗虫是一种重要的农业害虫,蝗灾给农牧业生产和生态环境带来了巨大损害。目前,化学杀虫剂作为防治蝗虫的主要手段,在蝗虫防治过程中引起的抗药性和环境污染等问题受到了人们的广泛关注。植物源杀虫剂是生态环境友好型杀虫剂,在蝗虫防治中具有广阔的应用前景。对国内外防治蝗虫的植物资源进行整理,综述其作用机理、相关研究进展及存在的问题,并提出相应建议,以期为植物源杀虫剂在蝗虫防治中的应用提供参考。

型变过程中亚洲小车蝗体内保幼激素滴度及其代谢相关基因表达量的变化

【目的】本研究旨在明确亚洲小车蝗Oedaleus asiaticus在不同发育阶段和型变过程中的保幼激素(juvenile hormone,JH)JHⅢ滴度及其代谢相关基因表达量的变化情况,为阐明保幼激素调控亚洲小车蝗型变中的生理功能奠定基础。【方法】采用高效液相色谱法测定散居型和群居型亚洲小车蝗不同发育阶段(4和5龄若虫及1,4,7,10,13和20日龄成虫)和3龄若虫群居化处理1,3,5和7 d时亚洲小车蝗血淋巴中的保幼激素JHⅢ的滴度变化;用qRT-PCR检测在群居化处理亚洲小车蝗3龄若虫1,3,5和7 d时保幼激素代谢相关的3种基因保幼激素酯酶(juvenile hormone esterase,JHE)基因、保幼激素甲基转移酶(juvenile hormone methyltransferase,JHAMT)基因和保幼激素环氧水解酶(juvenile hormone epoxide hydrolase,JHEH)基因的表达量;利用JHⅢ浸液处理散居型亚洲小车蝗3龄若虫后进行群居化处理,测定亚洲小车蝗型变率。【结果】JHⅢ在亚洲小车蝗血淋巴中的滴度甚微,在4和5龄两型若虫中最大滴度低于50 ng/mL,在两型成虫中最大滴度低于100 ng/mL;JHⅢ滴度随成虫日龄增加而升高,13日龄时达到高峰,然后随日龄增加而缓慢下降,两型雌成虫和雄成虫呈类似的趋势;除1日龄成虫外,其他日龄散居型亚洲小车蝗成虫血淋巴中JHⅢ滴度均显著高于群居型的;与散居型对照比较,群居化处理3龄若虫1-7 d亚洲小车蝗血淋巴中JHⅢ滴度均显著降低。JHE,JHAMT和JHEH基因的表达量在型变过程中发生显著变化,呈现先增后减的趋势。JHⅢ浓度增加可有效抑制散居型亚洲小车蝗向群居型转变。【结论】保幼激素JHⅢ在亚洲小车蝗两型转变中具有重要作用,JHE,JHAMT和JHEH基因在亚洲小车蝗两型转变过程中可发挥不同的功能。

一起猪繁殖与呼吸综合征与猪瘟混合感染的紧急流行病学调查

为探寻山东省某猪场暴发的仔猪腹泻、高热、呼吸困难等病症的原因,以及时控制并消除疫情,开展了紧急流行病学调查。对发病猪场进行现场调查、查看相关记录并进行临床诊断;采集病变组织样品,进行实验室检测;用Excel软件整理调查结果,并进行病因分析。结果表明,本次暴发系猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪瘟病毒混合感染所致,引种、购猪车带毒、断奶应激均可能是诱发此次疫情暴发的原因。针对调查结果提出的一系列防控措施建议,促使疫情最终得到控制。

结合项目类别和动态时间加权的协同过滤算法

基于项目的协同过滤算法仅通过计算项目相似性产生推荐结果,忽略了项目类别信息对项目相似性的影响,且未考虑时间因素对推荐结果产生的影响。针对上述问题,引入项目类别相似性、用户兴趣度时间加权函数和项目流行度时间加权函数,提出结合项目类别相似性和动态时间加权的协同过滤推荐算法,包括将项目类别相似性引入到传统项目相似性计算中。分析用户兴趣度和项目受欢迎程度随时间动态变化对推荐结果产生的影响,构造基于时间的用户兴趣度加权函数和基于时间的项目流行度加权函数。实验结果表明,该算法的项目类别特征能够进一步提高项目相似性的精度,动态时间加权函数能够及时反映用户兴趣度和项目受欢迎程度的变化,提高推荐的准确度。

猪圆环病毒3型半巢式PCR方法的建立和应用

为建立快速检测猪圆环病毒3型(PCV-3)的方法,以Gen Bank上登陆的我国PCV-3全基因组为参考毒株,设计3条引物,建立了PCV-3半巢式PCR诊断方法。本方法可以扩增出大小为249 bp的特异性条带,与预期大小一致,而猪圆环病毒1型和2型、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒等对照样品均未扩增出特异性条带。将PCV-3的阳性DNA稀释后作为模板,发现半巢式PCR的检测极限可以达到5×10^(-3)μg/m L。对临床80份样品进行检测,发现半巢式PCR的阳性检出率可以达到27.5%(22/80),而常规PCR的检出率仅为6.25%(5/80)。检测结果表明,本文建立的半巢式PCR方法较为准确、特异和敏感,适用于PCV-3的快速检测和流行病学调查。

基于熵权法的海洋平台压力容器风险因素敏感性分析

为了准确判断海洋平台压力容器风险因素对其安全的影响程度,利用熵权法、TOPSIS逼近理想解排序法结合正交试验思想的方法建立了其敏感性分析模型.结合实例,通过分析平台容器所处的环境构建了风险评价指标体系并进行了敏感性分析.结果表明,大气腐蚀、介质腐蚀和定期检验敏感性较高.针对这一结果,提出了相应的预防管理措施,验证了这一方法的可行性.

三标度AHP在海洋平台原油储罐安全评价中的应用

针对海洋平台原油储罐风险因素具有复杂性和模糊性,且各因素权重难以分配的问题,提出采用三标度AHP法对其进行安全评价.简述三标度AHP的优点和方法步骤.以渤海某固定式海洋平台上的原油储罐为例,建立安全评价指标体系,采用三标度AHP法确定各因素权重.运用二级模糊综合评价模型进行安全评价,确定安全等级为"良",并根据评价结果提出预防管理重点.

某发病猪场链球菌的分离鉴定及药敏试验

猪链球菌是一种能感染人和动物的常见病原菌。本实验从山东省某猪场病死猪中分离出两株细菌;通过培养特性观察,革兰染色镜检,特异性基因扩增等一系列分析,确定其为链球菌;进一步进行PCR分型检测,确定其中一株属马链球菌兽疫亚种,另一株为猪链球菌7型。通过药敏试验发现,这两株菌对约95%的常用药物表现出耐药性,仅对链霉素、氯霉素、万古霉素和呋喃妥因较为敏感。

华东部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查

为了解华东部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株变异情况,本研究以RT-PCR技术对山东、福建发病猪场的41份组织样品进行PRRSV检测和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)相关毒株(HP-PRRSVLike)检测,对阳性样品进行PRRSV分离、ORF5基因测序及变异分析。结果显示,福建、山东样品的阳性率分别为56%、74%;共分离到16个美洲型毒株(福建10株、山东6株),分属于Lineage 8、Lineage 5、Lineage 3、Lineage 1四个谱系,其中以Lineage 8为主。这表明PRRSV流行毒株多样化,跨谱系毒株重组值得警惕。

基于三角模糊数和AHP的海洋平台风险评价方法

采用三角模糊数和AHP综合的评价方法对海洋平台风险进行评估。首先简述了三角模糊数理论和运用AHP方法确定权重的步骤,并建立了基于三角模糊数和AHP的综合评价模型。然后以渤海某海洋平台为实例,建立了风险评价指标体系,采用AHP法确定了各因素权重。最后进行了三角模糊综合评价,结果为GB=2.815,确定了风险等级为"一般",并针对评价结果提出了相应的预防管理措施,从而验证了该方法的可行性。

海洋平台原油储罐多缺陷影响安全分析

对含多个缺陷的海洋方形一体化原油储罐进行应力强度因子随参数变化的分析,考虑平台复杂载荷的影响,裂纹不同尺寸的变化和多裂纹间不同的结合规划方法.采用ANSYS有限元软件的热力耦合模块,对裂纹受力情况进行模拟.参考GB/T 19624《在用含缺陷压力容器》中相关计算方法,基于评价结果得出裂纹缺陷扩展规律,提出在安全评价中多裂纹结合方法的建议.结果生产实际相符,证明利用有限元软件对含多缺陷的海洋平台方形一体化原油储罐进行分析是可行的.

PRRSV流行毒株遗传变异分析

自2006年5月开始在我国爆发一种猪高热综合症,主要引起母猪流产、死胎、木乃胎伊等繁殖障碍,以及各种日龄猪的呼吸道疫病。为了进一步了解我国PRRSV的分子遗传进化情况,对2014年36株PRRSV分离毒株以及8株疫苗毒株的GP5进行分析比较。结果表明,2014年所选PRRSV的分离毒株均属于北美洲型第四亚群。同源性对比显示,与欧洲毒株LV的同源性为62.8%~65.5%,与VR2332的同源性85.9%~89.4%,与经典毒株CH1A的同源性91.7%~94.4%,与高致病性蓝耳病TJM-F92、JXA1及HUN4毒株的同源性为95.5%~99.2%。氨基酸分析结果表明,与第一亚群毒株对比,2014年分离株在中和表达位点、毒力位点以及N-糖基化位点均存在一定变异。可见,PRRSV野毒在不断的发生变异。

2012—2013年我国部分地区猪伪狂犬病流行病学调查

[目的]了解我国主要生猪养殖地区猪群中猪伪狂犬病毒感染情况。[方法]分别采用PCR和gEELISA检测方法,对2012-2013年采集/送检的1127份发病猪群组织样品、14801份猪血清样品进行了病原学、血清学检测。[结果]检出PRV野毒感染病原学样品98份,总体检出率8.69%,猪场的PCR检出率为22.49%;共检测14801份血清样品,野毒感染抗体阳性样品2388份,总体阳性率为16.13%,场的阳性率为44.02%。对检测数据进行分类统计,发现华东、华中等生猪主产区猪群中均存在不同程度的PRV野毒感染,感染率呈逐年上升趋势;分析不同日龄猪群的野毒感染抗体检测数据,发现种猪的感染率较高,其次是哺乳仔猪、育肥猪。[结论]猪伪狂犬病在我国主要生猪养殖地区仍不同程度存在,提示应进一步提升猪伪狂犬病的免疫预防水平,定期进行病原学、血清学检测,做好综合防治工作。

2017年上半年我国4种常见猪病流行特点分析

为了解我国2017年上半年猪场疾病流行情况,试验采用ELISA法、聚合酶链式反应（PCR）和反转录PCR（RT-PCR）法对8 091份血清进行猪瘟病毒（CSFV）、蓝耳病病毒（PRRSV）、圆环病毒2型（PCV-2）、伪狂犬病毒野毒（PRV-g E）抗体检测,对415份病料进行抗原检测。结果表明：CSFV、PRRSV、PCV-2、PRV-g E抗体阳性率分别为75.91%、85.04%、89.03%和33.51%;病原检测阳性率分别为12.68%、27.56%、31.25%和7.16%,且混合感染较为严重,以蓝耳病与其他疾病混感最多。说明这4种病毒性疾病给猪场造成的威胁依然很大,猪场应重点加强这4种疾病的免疫防控,以减少猪场损失。

我国部分省(区)猪圆环病毒3型的分子流行病学研究

2016年美国报道了一种可引起猪皮炎肾病综合征、母猪繁殖障碍、呼吸道及高热等多系统炎症的新型病毒猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV-3)。为了解我国PCV-3的感染情况,针对PCV-3保守区设计一对特异性引物,对10个省106份样品进行PCR检测并测序分析。结果表明,10个省(区)中6个省(区)为阳性,地区阳性率60%;66个猪场中感染PCV-3的猪场为12个,猪场阳性率为18.2%;106个样品中检测PCV-3阳性的样品为19例,样品阳性率为18.0%。研究结果为更多了解PCV-3在我国感染情况提供了数据基础。

2015—2017年我国猪繁殖与呼吸综合征流行毒株遗传变异分析

为进一步了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在国内的分子遗传进化情况,从而对我国猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)防控提供依据,对2015—2017年国内分离的58株PRRSV野毒株与疫苗毒株的GP5基因进行分析比较。结果显示:我国现有PRRSV毒株主要集中于第一亚群、第四亚群、第五亚群及新亚群;同一亚群和不同亚群毒株间的中和表达位点、毒力位点以及N-糖基化位点均存在一定的变异。结果表明:我国PRRSV毒株存在易变异和多样性等特点,这为该病防疫带来较大压力;PRRS防控必须进行田间的毒株检测和基因分析,然后选择相应基因型毒株疫苗进行免疫。

2015年我国部分地区猪伪狂犬病血清学调查

本研究采用伪狂犬g E抗体ELISA检测试剂盒,对2015年我国部分地区规模化猪场采集的7 383份猪血清样品进行抗体检测,分析不同地区及不同日龄猪的伪狂犬病野毒感染情况及该病的流行趋势。结果显示,调查的139个猪场中有68个场发病,场阳性率达48.92%;7 383份猪血清的阳性率为16.48%。结果表明,猪伪狂犬病在我国部分地区猪群中的流行范围仍然很广。其中种猪和哺乳仔猪的野毒感染情况最明显,检出率较高,阳性率分别为21.86%和18.20%。本研究为我国伪狂犬病的净化工作提供了方法,为实施该病的根除计划提供了思路。

猪细小病毒PCR检测方法的建立与应用

参考Gen Bank中发表的猪细小病毒(PPV)VP2基因序列,应用Primer5.0软件设计了一对引物,预期目的条带约591 bp。对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了试验,建立了PPV的PCR检测方法。符合性实验结果表明,该PCR方法优于HA、VI以及IHA。使用该方法对215份病料进行了检测,检出阳性样品25份,检出率为11.63%。结果表明,该方法可用于PPV的诊断及流行病学监测。